基于粪便代谢组学技术的逍遥散抗抑郁作用机制研究

目的应用核磁共振氢谱(1H-NMR)代谢组学技术研究慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁大鼠粪便中内源性代谢物及代谢通路的变化,并评价逍遥散的改善作用,探讨其抗抑郁作用机制。方法使用CUMS造模程序建立抑郁模型,采用1H-NMR技术结合多变量统计分析方法,研究CUMS抑郁大鼠粪便代谢物谱的变化、鉴定相关代谢标志物并构建代谢通路。结果在抑郁大鼠粪便样本中共筛选10种与抑郁相关的潜在生物标志物。与对照组比较,模型组天冬酰胺、天冬氨酸、乳酸和丙酸水平显著升高(P0.05、0.01),而苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸和脯氨酸水平显著降低(P0.05、0.01)。与模型组相比,逍遥散能显著升高苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺和脯氨酸的水平,能显著降低天冬酰胺、乳酸和丙酸的水平。与对照组比较,CUMS抑郁大鼠粪便中6条代谢通路发生了显著变化:包括(1)氨基酰t RNA生物合成,(2)丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,(3)精氨酸和脯氨酸代谢,(4)谷氨酸和谷氨酰胺代谢,(5)苯丙氨酸代谢以及(6)丙酮酸代谢。而逍遥散可显著回调(2)、(3)、(4)、(5)和(6)条代谢通路。结论逍遥散可能通过调控氨基酸代谢、糖代谢和肠道微生物的代谢等途径发挥抗抑郁作用。     

百合地黄汤干预抑郁症大鼠的代谢组学研究

目的：探究百合地黄汤对抑郁症大鼠血清及粪便代谢组学的影响,筛选差异代谢物和代谢通路。方法：60只大鼠适应性饲养7 d后,随机分为正常组(10只)和应激组(50只),采用孤养和慢性不可预知性温和应激刺激制备大鼠抑郁症模型,造模成功的大鼠随机分为模型组,阳性对照组,百合地黄汤高、中、低剂量组,每组10只。给予百合地黄汤后,采用糖水偏好试验和旷场试验进行药效学评价;收集大鼠粪便和血清,应用LC-MS方法对大鼠血清和粪便进行非靶向代谢组学分析后,采用偏最小二乘方判别分析(OPLS-DA)和主成分分析(PCA),并联合t-test和变量投影重要性(VIP)筛选差异代谢物,应用KEGG数据库以及Metaboanalyst 5.0软件对差异代谢物进行通路富集。结果：与正常组大鼠比较,模型组大鼠体质量、糖水偏爱度和自主活动明显减少,给予百合地黄汤后,大鼠的抑郁样行为明显减少,抑郁大鼠的糖水偏爱度和在旷场中的自主活动明显增加。在代谢组学分析中,血清中共筛选出苯丙氨酰苯丙氨酸、5,6-二氢尿苷、L-谷氨酰胺等13个差异代谢物和丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢以及类固醇激素生物合成等10条代谢通路,粪便中共筛选...     

基于血清~1H-NMR代谢组学的地榆升白片治疗白细胞减少症作用机制研究

目的:明确地榆升白片治疗白细胞减少症的药理作用,并采用核磁(~1H-NMR)代谢组学的方法探讨其对内源性代谢物的调节作用,阐释其作用机制。方法:构建4T1乳腺癌荷瘤小鼠,采用腹腔注射80 mg/kg环磷酰胺进行造模,建立肿瘤化疗后白细胞减少症模型。将小鼠随机分为正常对照组、模型对照组和地榆升白片0.14 g/kg组,连续灌胃给药一周。利用传统药效学指标(血常规和脏器指数)评价地榆升白片药效。采用~1H-NMR技术对血清样本进行分析,寻找与地榆升白片疗效相关的差异代谢物,并对其关键代谢通路进行分析,阐释其作用机制。结果:与正常对照组比较,模型对照组小鼠白细胞含量显著降低(P<0.01),脾脏和胸腺指数显著下降(P<0.01),肝脏指数明显升高(P<0.05)。与模型对照组相比,地榆升白片0.14 g/kg组可显著升高白细胞的含量(P<0.01),并明显改善脏器指数(P<0.05或P<0.01)。代谢组学结果表明地榆升白片可明显回调8种差异代谢物的水平(P<0.05或P<0.01),并通过调节谷氨酰胺和谷氨酸代谢、氮代谢、精氨酸生物合成、丙氨酸,天冬氨酸和谷氨酸代谢等代谢途径发挥作用。结论:地榆升白片改善白细胞减少症的主要效应机制与调节谷氨酰胺和谷氨酸代谢、氮代谢、精氨酸生物合成、丙氨酸,天冬氨酸和谷氨酸代谢等有关。     

基于~1H-NMR代谢组学的驴胶补血颗粒补血作用机制研究

目的采用1H-NMR代谢组学技术结合多元统计分析方法,探讨乙酰苯肼诱导的溶血性贫血大鼠血清中内源性代谢产物的变化以及驴胶补血颗粒的干预作用。方法采用乙酰苯肼制备大鼠溶血性贫血模型,造模1周后,给药组ig驴胶补血颗粒水溶液(8 g/kg),对照组和模型组分别ig等量蒸馏水,每天1次,持续2周。采集大鼠血清进行1H-NMR检测,利用代谢组学技术分析血清中内源性代谢产物的变化。结果与对照组比较,模型组血清中脂质、乳酸以及丙酮水平升高,丙氨酸、缬氨酸、肌酐、磷酸胆碱、甘油磷酸胆碱、氧化三甲胺、甘氨酸以及精氨酸水平下降。给予驴胶补血颗粒后大鼠血清中上述11种内源性差异代谢产物均出现了不同程度的回调,接近对照组水平。结论驴胶补血颗粒的作用机制主要涉及能量代谢、脂质代谢、肠菌代谢等代谢途径的调节。     

复方阿胶浆改善溶血性贫血的代谢调控机制

目的探讨复方阿胶浆改善溶血性贫血的代谢调控机制。方法乙酰苯肼建立大鼠溶血性贫血模型,1周后给予复方阿胶浆(6 mL/kg),1次/d,持续2周。血液分析仪测定血液学常规指标,核磁共振代谢组学技术及多元统计分析方法分析大鼠血清内源性代谢产物变化及其规律,结合MetPA通路分析探索其作用机制。结果与模型组比较,给药组大鼠体质量、红细胞总数、血红蛋白、血小板数显著升高(P<0.05,P<0.01);与空白对照组比较,模型组大鼠乳酸、脂质、N-乙酰糖蛋白、谷氨酸含有量升高,谷氨酰胺、甘磷酸胆碱、β-葡萄糖、甘氨酸、精氨酸、α-葡萄糖含有量降低。给药后,乳酸、脂质、N-乙酰糖蛋白、谷氨酸、谷氨酰胺含有量回调,差异代谢产物主要通过调控脂质、蛋白质、氨基酸代谢。结论复方阿胶浆可改善溶血性贫血,其机制可能与调节脂质、蛋白质、氨基酸代谢等途径有关。     

GC-MS代谢组学分析逍遥散干预抑郁模型大鼠盲肠代谢物组的变化规律

目的采用GC-MS代谢组学方法分析逍遥散干预抑郁模型大鼠盲肠组织代谢物组的变化规律。方法采用慢性温和不可预知应激(CUMS)程序对大鼠进行造模,以逍遥散及盐酸氟西汀(氟西汀)为干预药物,采用GC-MS方法分析大鼠盲肠组织代谢物组及其变化规律。化合物的结构通过NIST 05数据库检索及对照品指认确定,将数据预处理后导入SIMCA-P 13.0软件进行多元统计分析。结果 CUMS抑郁大鼠模型复制成功,代谢组学研究结果表明氟西汀及逍遥散干预后大鼠盲肠组织中丙氨酸、丝氨酸、谷氨酸等减少,氟西汀组棕榈酸、硬脂酸升高,且与模型组比较具有显著性差异(P0.05、0.01)。结论逍遥散干预后CUMS大鼠盲肠组织的代谢物组发生明显变化,该研究可为逍遥散抗抑郁作用机制研究提供依据。     

基于代谢组学研究川牛膝对高脂血症慢性血瘀大鼠的保护作用及机制

目的 应用代谢组学方法探讨川牛膝治疗高脂血症慢性血瘀大鼠的生物学机制。方法 选取健康SD雄性大鼠70只,随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(0.571 g/kg复方丹参片)、川牛膝高剂量组(8 g/kg)、川牛膝低剂量组(2 g/kg),每组14只。采用灌胃脂肪乳(8 m L/kg)结合皮下注射0.01%肾上腺素的方法建立大鼠高脂血症慢性血瘀模型。28 d给药后,处死大鼠,检测全血的血流变参数和血浆中的血脂水平。基于气质联用(gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)的代谢组学技术分析大鼠血浆代谢物,通过数据分析筛选差异代谢物及重要代谢通路。结果 川牛膝高剂量组的全血低、中、高切黏度,血液屈服应力,血浆黏度,总胆固醇以及甘油三酯等水平与模型组比较显著降低(P<0.05或P<0.01)。建立的GC-MS代谢组学方法的线性、精密度及重复性等均符合生物样本分析要求。大鼠血浆中7个代谢物的含量(丙酸、L-丝氨酸、肌酸酐、L-苏氨酸、L-谷氨酰胺、半乳糖酸、核糖醇)在川牛膝干预后趋于正常组,这些代谢物主要富集在丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸...     

塞络通胶囊治疗急性脑缺血模型大鼠的代谢组学分析

目的:从代谢组学角度研究塞络通胶囊治疗急性多发性脑梗死大鼠模型的作用机制。方法:24只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和塞络通组(33 mg·kg~(-1)),通过大鼠颈内动脉注射荧光微球的方法建立急性多发性脑梗死大鼠模型。手术成功后,塞络通组大鼠通过十二指肠注射给药,给药体积2 m L·kg~(-1)。基于UPLC-Q-TOF-MS分析各组大鼠脑组织中内源性代谢物,应用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)进行模式识别及生物标志物的鉴定。结果:通过模式识别发现假手术组与模型组的代谢轮廓有明显差异,并鉴定了10个与急性脑缺血相关的生物标志物。与假手术组相比,模型组中N-乙酰天门冬氨酸(NAA),延胡索酸,谷胱甘肽,脱氢抗坏血酸,天门冬氨酸以及S-腺苷同型半胱氨酸含量下降,精氨酸、瓜氨酸、酵母氨酸、乙内酰脲-5-丙酸含量升高;而塞络通胶囊则可使上述10个异常变化的生物标志物水平显著回调。结论:塞络通胶囊主要调节的代谢途径有NAA代谢、精氨酸代谢、能量代谢及氧化应激等。     

卡托普利对心梗后心衰大鼠尿液代谢组学的影响

目的 研究卡托普利对心肌梗死后心衰大鼠尿液代谢组学的影响.方法 采用结扎左冠状动脉前降支致心肌梗死后心力衰竭大鼠模型,术后随机分为模型组、卡托普利组,给药8周后,利用核磁共振氢谱（1H-NMR）技术检测大鼠尿液小分子及大分子代谢物,建立大鼠尿液的代谢图谱,并采用主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）对代谢图谱进行主成分分析及模式判别,以观察卡托普利对心衰大鼠尿液代谢组学的影响.结果 模型组与卡托普利组尿液小分子及大分子代谢物均能明显区分.与模型组相比,卡托普利组谷氨酰胺、肌肝、牛磺酸、柠檬酸、苹果酸、苯基丙氨酸含量升高;3-羟基丁酸、乙酸、丙酮、磷脂酰胆碱、三甲胺、马尿酸含量下降.结论 心梗后心衰大鼠尿液代谢组学出现变化,卡托普利能有效调控紊乱的代谢产物,促使代谢表型向正常范围回归.     

基于代谢通路调控的沙棘籽油抗抑郁作用机制研究

目的采用1H-NMR代谢组学技术结合KEGG数据库,分析沙棘籽油干预慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁大鼠血清和尿液中代谢物及其代谢通路的变化,探讨沙棘籽油抗抑郁的作用机制。方法复制CUMS模型,同步给予沙棘籽油干预,连续4周。采集大鼠血清和尿液进行1H-NMR检测,利用代谢组学技术分析血清和尿液中代谢物的变化,搜索KEGG数据库分析代谢通路。结果在血清和尿液中共寻找出17个与抑郁症相关的潜在生物标志物,其中血清中有9个,包括与对照组比较升高的脂质、β-羟基丁酸、乳酸、N-乙酰糖蛋白和降低的丙氨酸、甜菜碱、氧化三甲胺、α-葡萄糖、β-葡萄糖;尿液中有8个,包括与对照组比较升高的琥珀酸酯、天冬氨酸盐和降低的醋酸、2-酮戊二酸、柠檬酸、三甲胺、甜菜碱、苯丙氨酸。沙棘籽油干预后上述差异代谢物均出现了不同程度的回调,接近对照组水平。结论沙棘籽油主要是通过调节体内的能量代谢、脂质代谢、氨基酸代谢、甲胺代谢和神经递质的合成等代谢通路发挥抗抑郁作用。     

基于代谢组学的阿霉素肾病大鼠模型损伤程度评价

目的以代谢组学技术对阿霉素肾病大鼠模型损伤程度进行量化分析。方法采用1H-NMR代谢组学技术,结合数理统计方法对不同给药剂量、给药次数的阿霉素肾病大鼠血清样本进行分析,鉴定反映肾病进程的进展性标志物,并依据相关标志物的变化率对肾脏损伤程度进行评价。结果最终得到9个潜在的病理标志物,分别为含氧异己酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、丙酮酸、3-羟基丁酸、柠檬酸、肌酐和肉毒碱;其中含氧异己酸和肉毒碱存在一定的剂量依赖性,即阿霉素造模剂量越大,这些内源性代谢物的变异越大,表明肾脏损伤越严重,可作为反映肾病进程的进展性标志物。结论这一研究为肾病提供了诊断标志物,为研究其他进展性疾病的发病进程及早期诊断标志物的发现提供研究方法和思路。     

基于代谢组学和生物信息学的益胃饮干预胃癌前病变机制研究

目的 通过非靶向代谢组学技术结合生物通路分析（ingenuity pathway analysis，IPA）探讨益胃饮干预胃癌前病变的潜在作用机制。方法 采用N-甲基-N''-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）建立胃癌前病变大鼠模型，采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）检测并表征大鼠血清代谢物，筛选模型组和益胃饮组大鼠血清中具有显著变化的代谢物，并通过IPA软件预测其潜在作用靶点与机制。结果 益胃饮可有效干预大鼠胃癌前病变进程；胃癌前病变模型大鼠血清中有23个代谢物有显著变化（P<0.05），益胃饮可显著回调其中13个代谢物趋于正常水平（P<0.05），主要涉及不饱和脂肪酸的生物合成，缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸的生物合成，鞘脂代谢，花生四烯酸代谢，类固醇激素合成等代谢途径；益胃饮干预胃癌前病变与抑制体内皮素-1（ET-1）和白介素-8（IL-8）信号途径密切相关。结论 益胃饮可通过回调花生四烯酸代谢等代谢途径和抑制ET-1、IL-8信号传导途径改善炎性环境，从而抑制胃癌前病变进程。     

柴归颗粒对抑郁症伴发症状的改善作用研究

目的探讨柴归颗粒(复方柴归方的制剂)对抑郁症伴发症状的改善作用,研究该药物的药效特点。方法采用慢性温和不可预知应激(CUMS)模型模拟轻、中度抑郁症,考察柴归颗粒对CUMS大鼠在Morris水迷宫实验、高架十字迷宫实验、胃肠功能测试实验中的影响。结果柴归颗粒各剂量均能显著降低Morris实验中大鼠平台探索潜伏期(P0.05),增加进入平台次数(P0.05);能够显著增加高架十字迷宫实验中进入开臂时间比例和进入开臂次数比例(P0.05、0.01);柴归颗粒低、中剂量(生药4.2、8.3 g/kg)能够显著降低大鼠胃内残留率(P0.05),柴归颗粒高、中、低剂量(生药16.6、8.3、4.2 g/kg)均能显著增加小肠推进率(P0.05、0.01)。结论柴归颗粒能够明显改善CUMS模型引起的大鼠学习记忆能力下降、焦虑样情绪、胃肠功能障碍,表明其不仅能够明显改善抑郁症状,而且对其伴发症状具有显著的改善或缓解作用。     

基于NMR代谢组学技术的当归不同部位化学成分比较

目的拟对当归Angelica sinensis不同部位的化学成分进行比较。方法运用核磁代谢组学技术对当归的不同部位进行了代谢组学化学成分比较。并采用主成分分析、正交偏最小二乘法、单变量分析等统计方法对当归不同部位的代谢产物进行了比较分析。结果通过核磁图谱共指认出包括初级和次级代谢产物共36种。多种统计分析发现,当归头部量较高的成分包括缬氨酸、异亮氨酸等;主要分布于尾部的成分包括Z-丁烯基苯肽、cis-Z,Z′-3α,7α′,7α,3α′-dihydroxyligustilide等;主要分布于身部的成分包括色氨酸、阿魏酸松柏酯;在头部和尾部量均较高的成分包括天冬氨酸、Z-藁本内酯等;在3个部分无明显差异的成分包括丙氨酸、精氨酸等。结论采用的核磁共振指纹可同时表征当归中的初级和次级代谢产物,研究结果可为进一步揭示当归不同部位功效与化学成分的相关性奠定基础。     

复智胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马神经元突触传递长时程增强的影响

目的:观察复智胶囊对血管性痴呆大鼠海马神经元突触传递长时程增强(long-term potentiation,LTP)的影响。方法:SPF级雄性SD大鼠采用双侧颈总动脉永久结扎法(2-VO)制备血管性痴呆大鼠模型。选取造模成功的大鼠,随机分为模型组、多奈哌齐(0.52×10-3g·kg-1·d-1,ig)组、复智胶囊高、低剂量(6.30,3.15 g·kg-1·d-1,ig)组。并设假手术对照组。连续ig 4周后,采用Morris水迷宫检测实验大鼠的学习记忆能力,同时采用LTP诱导法检测大鼠海马齿状回高频刺激诱发的群峰电位(population spike,PS)幅值变化,采用免疫组化检测海马N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)免疫阳性细胞的表达。结果:与假手术组相比,造模术后的大鼠学习记忆能力均有下降,逃避潜伏期和游泳路程明显延长,撤除平台后跨越原平台次数明显减少,高频电刺激后海马神经元齿状回PS增幅明显下降,海马NMDA免疫阳性细胞数明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05);而与模型组相比,复智胶囊高、低剂量组和多奈哌齐组大鼠学习记忆能力均有改善,逃避潜伏期和游泳路程均有缩短,跨越原平台次数明显增多,海马神经元齿状回PS增幅明显升高,海马NMDA免疫阳性细胞数明显增多,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:复智胶囊通过增加海马NMDA阳性细胞表达,提高海马神经元齿状回PS增幅,改善大鼠学习记忆能力,对血管性痴呆模型大鼠海马神经元突触传递长时程增强有明显的改善作用。     

基于~1H-NMR代谢组学复方柴归方干预抑郁模型大鼠血清代谢物规律分析

目的采用~1H-NMR代谢组学方法分析复方柴归方干预抑郁模型大鼠血清代谢物组的变化规律。方法采用慢性温和不可预知应激(CUMS)程序对大鼠进行造模,以复方柴归方及阳性药(文拉法辛)为干预药物,采用核磁共振方法对大鼠血清进行分析,数据预处理后导入SIMCA-P 14.1软件进行多元统计分析,从小分子代谢物角度对复方柴归方的抗抑郁药效进行验证,并寻找出潜在的疾病生物标志物和药物疗效标志物。结果 CUMS抑郁大鼠模型复制成功,代谢组学结果表明与模型组相比,CUMS抑郁大鼠经阳性药和复方柴归方干预后血清中异亮氨酸、氧化三甲胺和肌酸水平升高,N-乙酰糖蛋白、胆碱和葡萄糖水平降低,差异显著(P0.05、0.01)。结论复方柴归方干预后CUMS模型大鼠血清差异代谢物水平明显回调,该研究可为复方柴归方抗抑郁作用机制研究提供参考依据。     

安寐丹调控OXA/CREB/PER1信号通路改善SD模型大鼠昼夜节律紊乱＊

目的 观察中医经典名方安寐丹对睡眠剥夺（Sleep disruption，SD）模型大鼠食欲素（Orexin）及其介导的食欲素A（Orexin A，OXA）/cAMP反应元件结合蛋白（cAMP Response Element Binding Protein，CREB）/Period1（period circadian regulator 1， PER1）基因信号通路的作用。方法 40只雄性6月龄SD大鼠随机等分为空白组、模型组、艾司唑仑组、安寐丹组，空白组常规进食进水，其他三组采用对氯苯丙氨酸（PCPA）腹腔注射叠加多平台水环境剥夺法构建SD模型，自主活动仪监测昼夜活动节律。空白组、模型组给予等容的0.9%氯化钠灌胃，艾司唑仑组给予艾司唑仑0.09 mg·kg^-1、安寐丹组给予安寐丹水煎剂9.09 mg·kg^-1灌胃治疗，连续4周。4周后运用Morris水迷宫检测其学习记忆，免疫荧光检测下丘脑Orexin神经元表达，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠下丘脑组织OXA、食欲素B（Orexin B，OXB）含量，蛋白质免疫印迹（Western Blot，WB）和实时荧光定量（Quantitative Real-time PCR，RT-PCR）检测各组大鼠下丘脑组织OXA/CREB/PER1信号通路蛋白和mRNA表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠24 h自主活动时间和活动距离均高于空白组；活动时间、活动距离显著增加（P<0.01），上平台潜伏期与游泳总路程显著延长（P<0.01），穿越站台次数和站台活动时间均减少（P<0.01）；下丘脑组织OXA、OXB含量高于空白组（P<0.01）；且OXA、CREB 蛋白和mRNA表达均显著升高（P<0.01），PER1 蛋白和mRNA表达均显著下调（P<0.01）。与模型组比较，安寐丹组大鼠上平台潜伏期缩短（P<0.01）、游泳总路程减少（P<0.05）、穿越平台数量增加（P<0.05）；下丘脑组织OXA、OXB含量降低（P<0.05），OXA蛋白表达下调（P<0.05）、CREB蛋白表达下调（P<0.01）、PER1蛋白表达上调（P<0.01），OXA和CREB mRNA表达降低（P<0.05），PER1 mRNA表达升高（P<0.05）。结论 安寐丹改善SD模型大鼠昼夜节律紊乱可能与调节Orexin及其介导的OXA/CREB/PER1信号通路相关。     

驴胶补血颗粒对环磷酰胺致小鼠白细胞减少症的作用及代谢组学机制研究

目的观察驴胶补血颗粒对环磷酰胺致小鼠白细胞减少症的改善作用,并采用1H-NMR代谢组学方法探讨其作用机制。方法采用ip环磷酰胺的方法制备小鼠白细胞(WBC)减少症模型,测定WBC、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)和血小板(PLT)等血液常规指标。利用1H-NMR代谢组学技术分析小鼠血清中内源性代谢产物的变化,并对差异代谢产物进行通路分析,探讨驴胶补血颗粒对WBC减少症小鼠血清内源性代谢产物的调节作用及其代谢通路调控机制。结果与对照组比较,模型组小鼠WBC、RBC、HGB以及PLT水平显著降低(P0.01),而驴胶补血颗粒能显著升高小鼠WBC和PLT水平(P0.05),并回调潜在的差异代谢产物的水平。结论驴胶补血颗粒可能通过调节机体免疫功能、调控能量代谢和氨基酸代谢达到改善WBC减少症的作用。     

天麻粉预防痴呆小鼠模型发病及其对抗氧化作用的影响

目的:研究长期灌胃天麻粉是否可以改善APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习记忆能力以及延缓AD进程,这些作用是否与调控Kelch样环氧氯丙胺相关蛋白1(Keap1)-核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)抗氧化应激通路有关,进一步探讨天麻粉的神经保护作用机制以及对AD预防和治疗的作用。方法:APP/PS1双转基因小鼠模型,将实验小鼠分为5组,正常组,正常给药组,模型组,天麻粉预防组,天麻粉治疗组。正常给药组,天麻粉预防组在小鼠8周龄时每日灌胃同等剂量的天麻粉(1.5 g·kg^-1);正常组、模型组同时期给予等量的生理盐水,直至24周龄时行Morris水迷宫检测小鼠学习和记忆能力,天麻粉治疗组待小鼠22周龄时,连续2周每天灌胃同等剂量天麻粉(1.5 g·kg^-1),灌胃至24周龄时行Morris水迷宫检测小鼠穿越平台次数、逃避潜伏期及平台停留时间;提取小鼠海马组织RNA,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测Nrf2,HO-1,Keap1的mRNA水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠海马组织中Nrf2,HO-1,Keap1蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,水迷宫检测结果显示,模型组小鼠的学习记忆能力显著降低(P<0.01);与模型组比较,天麻粉预防组、天麻粉治疗组小鼠学习记忆能力显著提高(P<0.01);与正常组比较,模型组小鼠海马组织中Nrf2,HO-1的mRNA及蛋白水平均有不同程度的降低(P<0.05,P<0.01),与模型组比较,天麻粉预防组小鼠海马组织中Nrf2,HO-1的mRNA及蛋白水平均有不同程度的增高(P<0.05,P<0.01),天麻粉治疗组Nrf2,HO-1 mRNA水平显著增高(P<0.01),Nrf2,HO-1蛋白表达水平变化差异无统计学意义,各组间Keap1的mRNA及蛋白水平变化无统计学差异。结论:Morris水迷宫及其他结果显示天麻粉能够改善APP/PS1小鼠的学习和记忆能力,且其可能通过调控Keap1-Nrf2/HO-1通路,增强下游抗氧化基因的表达发挥抗氧化功能,进而改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力。