大鼠胶原诱导关节炎应用来氟米特的时间治疗学研究

目的探讨来氟米特(LEF)不同给药时间对大鼠胶原诱导关节炎的治疗效果和对炎性细胞因子的影响。方法取6只大鼠作为空白组,其余造模后第15天加强免疫后关节炎指数5的24只成模大鼠随机分为模型组、LEF7时组、LEF19时组,每组8只。LEF7时组于7:00、LEF19时组于19:00分别灌胃LEF 5 mg/(kg·d),模型组及空白组分别给予等量生理盐水,均灌胃28 d。对比观察各组胶原诱导关节炎模型炎症评分、外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平及骨质破坏情况。结果给药后LEF7时组、LEF19时组关节炎指数、关节肿胀度均明显低于给药前及模型组(P均0.05),LEF19时组有高于LEF7时组趋势,但2组比较差异无统计学意义(P0.05)。LEF7时组、LEF19时组外周血TNF-α、IL-6水平均低于模型组(P均0.05);LEF19时组TNF-α和IL-6水平有高于LEF7时组的趋势,但2组比较差异无统计学意义(P均0.05)。各组胶原诱导关节炎大鼠关节均出现明显的骨质破坏,且模型组骨质破坏更明显。结论 LEF不同时间给药对大鼠胶原诱导关节炎及其炎性细胞因子的影响可能存在差异,且可能延缓骨质破坏。     

脊痛宁胶囊对风寒湿痹型类风湿关节炎大鼠的治疗作用

目的:探讨脊痛宁胶囊(JTN)对风寒湿痹型类风湿关节炎大鼠的治疗作用,为祛风通络活血法治疗风寒湿痹关节炎临床应用提供实验依据。方法:选取90只雄性Wistar大鼠,除正常组外,其余各组分2次在大鼠背部、尾根部多点皮内注射牛Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂,制备胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,在此基础上采用"风、寒、湿"环境因素连续刺激14 d复制类风湿关节炎风寒湿痹大鼠模型。设模型组、雷公藤多苷组(0.02 g·kg~(-1))和脊痛宁低、中、高剂量组(0.2,0.4,0.8 g·kg~(-1)),ig给药,连续28 d。观察各组大鼠体重、关节肿胀和多发关节炎指数的影响,检测血清中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,苏木素伊红(HE)染色观察大鼠踝关节病理变化情况,并对病理损伤程度进行评分。结果:与正常组比较,模型组体重增长较慢,关节炎指数明显升高,后肢关节严重肿胀,血清IL-6和TNF-α的水平明显升高(P0.05),踝关节可见严重滑膜炎症、软骨侵蚀及骨破坏。与模型组大鼠比较,各治疗组可改善风寒湿痹型类风湿关节炎大鼠体重,降低关节肿胀率、关节炎指数(P0.05,P0.01),明显降低血清中IL-6和TNF-α水平(P0.05)。病理结果显示,脊痛宁和雷公藤组较模型组踝关节炎症细胞浸润减轻,软骨及骨破坏减弱,病理评分降低(P0.05,P0.01)。结论:脊痛宁胶囊可明显减轻风寒湿痹大鼠关节炎症和病理损伤,降低血清中炎性因子水平,提示脊痛宁胶囊对风寒湿痹型类风湿关节炎大鼠有积极的治疗作用。     

艾灸对类风湿关节炎大鼠踝关节肿瘤坏死因子-α和核转录因子kappa B的影响（英文）

目的:通过观察艾灸对类风湿关节炎(RA)大鼠踝关节组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和核转录因子kappa B(NF-κB)蛋白表达的影响,探讨艾灸治疗类风湿关节炎的抗炎机制。方法:以佐剂性关节炎(AA)作为类风湿关节炎大鼠模型,复制RA大鼠模型。将大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和盐水组。正常组和模型组不做治疗;艾灸组造模后予以艾灸足三里、肾俞治疗;盐水组予左后足趾底部注入生理盐水0.15 m L,不做其他处理。应用苏木精-伊红(HE)染色,光镜下观察大鼠踝关节组织病理学变化;采用免疫组化法观察大鼠踝关节组织TNF-α和NF-κB蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠踝关节组织结构破坏,关节表面有缺损,TNF-α和NF-κB平均光密度(MOD)明显增高(均P0.05);艾灸组大鼠经艾灸治疗后,踝关节组织修复,关节表面光滑未见缺损,TNF-α和NF-κB的MOD较模型组降低(均P0.05);盐水组大鼠踝关节组织正常无损害,TNF-α和NF-κB与模型组比较有显著性差异(P0.05)。结论:艾灸能够下调RA大鼠踝关节组织NF-κB和TNF-α蛋白表达,以发挥抗炎作用,促进组织修复。     

盐酸青藤碱治疗性给药对胶原诱导性关节炎小鼠的保护作用

目的探讨盐酸青藤碱治疗性给药对胶原诱导性关节炎（CIA）小鼠的保护作用。方法采用尾根部注射 鸡II 型胶原建立C57BL/6 小鼠关节炎模型。于第2 次免疫注射后第7 天,将造模成功小鼠随机分为模型组、 盐酸青藤碱组（100 mg·kg-1）、地塞米松组（2 mg·kg-1）,同时设置正常组。给药组小鼠分别腹腔注射相应治疗药 物,每天1 次,连续治疗33 d,正常组和模型组小鼠腹腔注射等体积无菌生理盐水。给药周期内,每3 d进行 1 次小鼠足趾关节炎指数评分;采用ELISA 法检测外周血中TNF-α、IL-6 炎症因子水平;采用HE 染色法观 察关节滑膜炎性细胞浸润情况;采用Micro-CT 扫描分析骨质破坏情况。结果与正常组相比,模型组小鼠足 趾关节炎指数评分显著升高,血清中TNF-α 和IL-6 炎症因子水平显著升高（P＜0.001）;关节滑膜部位炎性细 胞浸润明显增多、骨质破坏明显,膝、踝关节病理总评分均显著升高（P＜0.001）。与模型组相比,盐酸青藤碱 干预治疗后,能显著降低足趾关节炎指数评分及血清中TNF-α、IL-6 炎症因子水平（P＜0.05,P＜0.01）,并 能阻止关节滑膜部位炎性细胞浸润,减轻骨质破坏,降低膝、踝关节病理总评分（P＜0.01）。结论盐酸青藤 碱治疗性给药可阻止CIA 小鼠的关节骨质破坏,其作用机制与减轻关节滑膜炎症有关。     

加味四妙勇安汤对CIA大鼠关节炎性病理损伤的作用研究

[目的]探讨加味四妙勇安汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节炎指数(AI)、关节病理损伤的改善情况,对大鼠体内白介素(IL)-6,IL-17,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。[方法]建立CIA模型,将造模成功的SD大鼠随机分为模型组、阳性药(来氟米特)组、中药高、中、低剂量组,设正常对照组,每组6只,干预治疗12周。每周评价每只鼠的AI值。12周后麻醉处死,取各组大鼠右踝关节,光镜下观察病理学变化。采用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)法检测大鼠膝关节滑膜IL-6、IL-17、TNF-α的m RNA转录水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清IL-6、IL-17、TNF-α的蛋白表达水平。[结果]中药3种剂量组在6~12周时AI分值较模型组明显下降(P0.05或P0.01);而且在8~10周还分别表现出较阳性组显著的改善(P0.05或P0.01)。光镜检测结果显示:中药中剂量组明显改善了CIA模型大鼠关节滑膜增生、炎性细胞浸润情况。细胞因子检测结果显示各治疗组IL-6、IL-17、TNF-α的m RNA及蛋白表达显著降低(P0.05或P0.01)。[结论]加味四妙勇安汤对CIA模型大鼠关节炎改善作用的分子机制,可能与下调炎性细胞因子IL-6、IL-17、TNF-α的表达相关。     

维药野西瓜对佐剂性关节炎小鼠治疗效果及机制研究

目的观察维药野西瓜治疗佐剂性关节炎(AA)小鼠的效果及机制。方法将40只雄性昆明鼠随机分为空白对照组、模型组、雷公藤组(雷公藤多甙片0.01 mg/kg)及野西瓜组。除空白对照组外,其余均采用完全弗氏佐剂制作AA小鼠模型,空白对照组及模型组灌胃生理盐水,雷公藤组和野西瓜组分别灌胃相应药物,连续灌胃25 d后,观察各组小鼠足肿胀、足踝关节组织病理变化及血清中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达情况。结果药物干预25 d后,与模型组比较,雷公藤组及野西瓜组小鼠足趾肿胀程度均明显改善(P均0.05),血清IL-6、TNF-α水平均明显降低(P均0.05),组间比较差异无统计学意义。结论维药野西瓜对AA关节炎小鼠具有良好的抗炎作用,与其降低血清中IL-6及TNF-α的水平有关。     

基于HIF-1α/VEGF-α信号通路探讨南续益母颗粒抑制胶原诱导型关节炎小鼠滑膜血管翳生成的作用机制

目的 基于缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子α(VEGF-α)信号通路探讨南续益母颗粒(南蛇藤、续断、益母草、红景天等)抑制胶原诱导型关节炎(CIA)小鼠滑膜血管翳生成的作用机制。方法 将40只DBA/1雄性小鼠随机分为正常组、模型组、甲氨蝶呤组(1 mg·kg^-1)和南续益母颗粒组(12.33 g·kg^-1)，每组10只。除正常组外，其余小鼠采用二次免疫法复制CIA小鼠模型。二次免疫后，南续益母颗粒组灌胃给药，每日1次，连续30 d；甲氨蝶呤组每3 d灌胃1次，连续30 d。采用关节炎指数(AI)评分评估小鼠关节炎症程度；采用HE染色法观察小鼠踝关节滑膜病理变化；番红固绿染色法观察小鼠踝关节软骨及骨质结构变化；Micro-CT三维重建观察小鼠踝关节骨皮质表面变化；采用全自动生化分析仪检测小鼠血清C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(CR)水平；免疫组化法检测小鼠踝关节滑膜中血小板-内皮细胞黏附分子1(CD31)、HIF-1α、VEGF-α...     

桂枝温通经脉配伍对胶原诱导性关节炎大鼠的免疫调节作用

目的研究桂枝温通经脉配伍对胶原诱导性关节炎(CIA)模型大鼠的治疗作用,并探讨其作用机制。方法雄性Wistar大鼠110只,随机分为正常组10只,其余于大鼠尾根及背部每只0.5 mg皮内注射胶原乳剂制备关节炎大鼠模型,致炎后21天,将造模成功的大鼠(90只)随机分为模型组、甲氨喋呤组、桂枝组、桂枝牛膝组、桂枝川乌组、桂枝独活组、桂枝附子低、中、高剂量组,每组10只;分别灌胃给药,每天1次,连续21天。观察大鼠关节炎指数(AI)、后爪体积及踝关节病理变化情况,并检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)含量。结果与模型组比较,桂枝牛膝组、桂枝川乌组、桂枝独活组、桂枝附子高、中剂量组及甲氨喋呤组关节炎大鼠AI及后爪肿胀明显降低(P0.05);桂枝牛膝组、桂枝川乌组、桂枝独活组、桂枝附子中、高剂量组及甲氨喋呤组关节炎大鼠血清TNF-α的含量显著下调(P0.01),并对踝关节病理变化有改善;各给药组大鼠血清IL-6的含量均显著降低(P0.01)。结论桂枝温通经脉配伍对CIA大鼠关节炎症有一定的抑制作用,可能是治疗类风湿关节炎的有效配伍。     

活血化瘀合剂对膝骨性关节炎模型兔炎症因子及TLR4/NF-κB通路的影响

目的观察活血化瘀合剂对膝骨性关节炎模型兔炎症因子及TLR4/NF-κB通路的影响,探讨其关节保护作用机制。方法将新西兰兔分为正常组、假手术组、模型组、中药组和阳性药组,每组8只。采用改良的Hulth造模法建立兔膝骨性关节炎模型,成模后中药组给予活血化瘀合剂(2.6g/kg)灌胃,阳性药组给予硫酸氨基葡萄糖溶液(15 mg/kg)灌胃,正常组、假手术组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃,每日2次,连续28d。末次给药后,切除兔右后膝关节软骨用于组织病理分析,分离血清及关节液,检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量,Westernblot检测关节软骨Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达。结果模型组兔关节软骨存在浅表层纤维化,软骨细胞成簇、肥大、排列紊乱、部分坏死,滑膜增厚,基质染色丢失等病理现象,血清和关节液中TNF-α、IL-1β、IL-6含量较正常组和假手术组均显著升高(P0.05,P0.01),软骨TLR4、NF-κB蛋白表达显著升高(P0.01);与模型组比较,中药组兔关节软骨病理损伤得以缓解,炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量均不同程度下降(P0.05,P0.01),TLR4、NF-κB蛋白表达显著降低(P0.05,P0.01)。结论活血化瘀合剂能缓解膝骨性关节炎模型兔关节软骨的损伤,其机制与抑制TLR4/NF-κB通路、降低炎症因子水平有关。     

骨痹止痛液对兔膝骨性关节炎软骨中相关因子表达影响的研究

目的:研究骨痹止痛液对动物模型膝关节软骨中白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法:将30只新西兰大白兔随机分为骨痹止痛液组(A组)、盐酸氨基葡萄糖片组(B组)、模型组(C组)3组,每组10只。建立膝骨性关节炎模型后,分别给予骨痹止痛液、盐酸氨基葡萄糖片、生理盐水灌胃,连续8周。于8周后取样,采用肉眼观察形态学改变、HE染色、RT-PCR检测软骨中IL-1、TNF-α因子表达等指标。结果:肉眼观察:A组及B组较给药前无明显变化,C组关节软骨破坏较为严重,甚至出现糜烂。RT-PCR:A组、B组与C组比较,A组、B组兔软骨标本中IL-1m RNA、TNF-αm RNA表达量明显降低(P0.05)。兔软骨标本中IL-1m RNA、TNF-αm RNA表达量A组较B组减低(P0.05)。结论:骨痹止痛液通过减少促炎因子(IL-1、TNF-α)的表达来抑制炎症反应,从而减缓关节损伤。