综合放血法所致血虚证小鼠模型及 四物汤反证的代谢组学研究

目的:通过检测综合放血法所致血虚证及用四物汤干预治疗后小鼠内源性代谢物的变化,确定综合放血法所致血虚证小鼠的血清及组织相关的生物标记物,从代谢组学角度研究血虚证证本质及四物汤的作用机制.方法:C57小鼠30只,按体重随机分为3组:正常对照组、综合放血模型组、四物汤反证组,每组10只.造模10 d后于小鼠股动脉取血,同时取脾脏、胸腺及股骨骨髓,并分别提取血清及组织的脂溶性和水溶性代谢物.用600 MHz超导傅立叶变换核磁共振波谱仪检测,对所得到的氢谱按每段0.01进行分段积分并归一化,用SIMCA-P10.0软件进行主成分分析.结果:与对照组相比,模型组的血清及各组织的内源性代谢物中乳酸、胆碱、牛磺酸、丙氨酸、低密度脂肪酸、甘油、不饱和脂肪酸、肌醉、乙酞乙酸盐、丙氨酸及庄β-羟基丁酸的含量有明显变化,这些变化在四物汤治疗组中有不同程度的回调.上述代谢物可以作为潜在的生物标记物进行相关机制的研究.结论:综合放血法制作的血虚证小鼠的糖有氧氧化受到抑制,无氧酵解减弱,脂肪动员加强,淋巴细胞增殖受到抑制及机体免疫功能受损.四物汤能够对上述血虚证病理结果进行逆转.     

辐射损伤所致血虚证小鼠模型及四物汤反证的代谢组学研究

[目的]通过检测辐射损伤所致血虚证及用四物汤干预治疗后小鼠内源性代谢物的变化,确定辐射损伤所致血虚证小鼠的血清及组织相关的生物标记物,基于代谢组学的方法考察血虚证证本质及四物汤的作用机制。[方法]C57小鼠按体质量随机分为正常组、辐射造模组、四物汤反证组。造模7d后于小鼠股动脉取血,同时取脾脏、胸腺及股骨骨髓,并分别提取血清及组织的脂溶性和水溶性代谢物。[结果]主成分分析结果显示正常组、血虚证模型组以及四物汤反证组能够明显的区分。[结论]四物汤治疗血虚证的机制可能与稳定细胞膜,维持细胞内外渗透压平衡;调节糖酵解,促进机体正常能量代谢以及增强机体抗氧化能力、免疫力有关。     

四物汤对辐射致血虚证小鼠作用的代谢组学研究

目的:基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用(UPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术进行辐射损伤致血虚证以及四物汤的方证结合研究,发现辐射致血虚证及用四物汤干预后小鼠内源性代谢物的变化,基于代谢组学的方法考察血虚证的发生及四物汤的作用机制。方法:选用C57小鼠36只,按体重随机分为对照组、模型组及四物汤组。造模方法采用3.5Gy60Coγ射线全身照射制作模型,造模7 d后股动脉取血并摘取脾脏和胸腺,进行处理后用UPLC-ESI-Q-TOF-MS检测,应用Mark-erLynx XS软件对总离子流图进行色谱峰识别,利用主成分分析法对数据进行处理,采用正交偏最小二乘法进行组间数据分析。通过模式识别分析,快速确认标志物。结果:辐射损伤所致的血虚证小鼠血清中溶血磷脂、葡糖苷酸、单酰甘油酯、三羟基丁酸、神经酰胺、天冬氨酸磷酸酯、甘油磷脂等代谢物的含量变化明显;脾脏中变化明显的代谢物有单酰甘油酯、神经酰胺、溶血磷脂、羟基丁酸、棕榈酸、3-羟基硬脂酸、二甲基精氨酸、苯丙氨酸、磷脂酰丝氨酸;胸腺中有甲基腺苷、谷甾醇、肉毒碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺、甘油二酯、二甲基精氨酸、神经酰胺、溶血磷脂、羟基丁酸、胆固醇等。结论:通过对这些生物标志物的生理功能分析,推测辐射损伤使小鼠机体的脂类代谢、糖类代谢及部分氨基酸的合成代谢发生紊乱,经典补血方剂四物汤治疗可以使之逆转并调整平衡。     

四物汤对环磷酰胺所致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤治疗环磷酰胺所致小鼠血虚证的作用机理。腹腔注射环磷酰胺制成小鼠血虚证模型;测定小鼠外周血象;骨髓细胞集落形成;CD34^ 细胞在骨髓有核细胞中的比例;小鼠胸腺指数。结果表明四物汤具有明显促进骨髓造血和增强免疫的作用,并可升高血虚证小鼠的外周血象。四物汤增强免疫、促进造血可能是四物汤治疗小鼠血虚证的机理之一。     

四物汤对血虚证小鼠骨髓细胞CD 34抗原表达的影响

目的：探讨四物汤对^60Coγ射线或环磷酰胺诱导的血虚证小鼠骨髓细胞CD34抗原分子表达的影响。方法：用^60Coγ射线全身照射小鼠升腹腔注射环磷酰胺造成小鼠血虚证模型，实验分正常组、模型组、小剂量组、中剂量组、大剂量组，荧光标记小鼠骨髓细胞并用流式细胞仪 测定CD34＋细胞在骨髓有核细胞中的比例，同时做小鼠骨髓细胞 落培养。结果与结论：四物汤可促进血虚小鼠骨髓中干祖细胞增生，增加CD34抗原分子的表达，为四物汤治疗血虚证提供了依据。     

四物汤对环磷酰胺致血虚证小鼠骨髓蛋白质组的影响

目的：研究四物汤对环磷酰胺（CTX）损伤致血虚证小鼠骨髓蛋白质组的影响,旨在分子水平上探讨四物汤促进骨髓造血的作用机制。方法：采用CTX 250 mg·kg^-1腹腔注射制成化学损伤型血虚证小鼠模型,利用蛋白质组学技术研究四物汤治疗后的差异蛋白质组。结果：研究发现CTX使小鼠骨髓中12个蛋白表达上调、3个蛋白表达下调,四物汤可使CTX造模后这些表达改变的蛋白有不同程度恢复。结论：四物汤可能通过影响与细胞凋亡、造血干祖细胞增殖分化有关的蛋白质而促进骨髓造血。     

基于~1H-NMR的人参煎治疗2型糖尿病的血清和尿液代谢组学研究

该研究基于核磁共振氢谱(~1H-NMR)探讨人参煎对高糖高脂饲料加小剂量链脲佐菌素(STZ)联合诱发的胰岛素抵抗(IR)的2型糖尿病模型大鼠血清和尿液代谢组的影响。2型糖尿病的胰岛素抵抗模型造模成功后,给药35 d,取大鼠血清和尿液,处理后采集~1H-NMR谱,并用主成分分析、OPLS-DA的方法对其进行分析。结果显示:与空白组比较,模型组大鼠血清中的蛋氨酸、牛磺酸、α-葡萄糖、β-葡萄糖含量极显著升高(P0.001),3-羟基丁酸、乳酸、不饱和脂肪酸含量极显著降低(P0.01);模型组大鼠尿液中的氧化三甲胺、甘氨酸、α-葡萄糖、β-葡萄糖、牛磺酸、磷酸胆碱的含量显著升高(P0.05),肌酸、乳酸、乙酸、柠檬酸的含量显著下降(P0.05)。与模型组比较,给药组大鼠血清中的3-羟基丁酸、不饱和脂肪酸含量显著上升(P0.05),牛磺酸、α-葡萄糖、β-葡萄糖含量极显著下降(P0.01);给药组大鼠尿液中的乳酸、牛磺酸、肌酸的含量显著上升(P0.05),氧化三甲胺、甘氨酸、α-葡萄糖、β-葡萄糖、磷酸胆碱的含量极显著下降(P0.01)。结果表明人参煎可以调节代谢紊乱,促进新陈代谢表型回归到正常范围,对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠具有治疗作用,为人参煎改善糖尿病胰岛素抵抗的生物学基础研究提供了一定的科学依据。     

补血益母丸对气血双虚模型小鼠的药效作用研究

目的:探讨补血益母丸对气血双虚模型小鼠的作用。方法:以放血和环磷酰胺并用建立气血双虚小鼠模型,模型建立后,连续给予补血益母丸1.82、7.28 g/kg 10 d进行干预。末次给药后,检测小鼠负重游泳时间和全血乳酸含量;动物处死前,检测小鼠游泳后血尿素氮的含量;采用摘眼球法取血行血常规检测;摘取小鼠胸腺和脾脏并称重,计算脏器指数;部分脾脏在4%多聚甲醛中固定后行HE染色观察脾脏形态;部分脾脏用于Western blot实验检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素2(IL-2)蛋白表达情况;取小鼠右腿骨髓,检测骨髓有核细胞。结果:与正常对照组相比,模型对照组出现活动减少,耳发白,呼吸短促等症状,小鼠负重游泳时间显著缩短(P<0.01),脾指数和胸腺指数均明显降低(P<0.05或P<0.01),且血乳酸和血尿素氮含量明显升高(P<0.05或P<0.01);骨髓有核细胞显著减少(P<0.01),血中红细胞数、白细胞数和血红蛋白含量均显著降低(P<0.01);脾脏结节和淋巴细胞数显著减少(P<0.01),红、白髓界线不明,淋巴结和红髓中有广泛的局灶性纤维化;脾脏中IL-2蛋白表达明显下调(P<0.01),TNF-α蛋白表达明显上调(P<0.05)。与模型对照组相比,乳酸亚铁10 ml/kg组、四物汤12 g/kg组、补血益母丸1.82 g/kg、7.28 g/kg组小鼠负重游泳时间均显著延长(P<0.01),脾指数和胸腺指数均明显升高(P<0.01);血乳酸含量均明显降低(P<0.01),骨髓有核细胞显著增多(P<0.01),血中红细胞数、白细胞数和血红蛋白含量均明显升高(P<0.01);脾脏结节和淋巴细胞数明显增多(P<0.01),红、白髓较清晰;小鼠脾脏中IL-2蛋白表达上调(P<0.05或P<0.01),补血益母丸7.28 g/kg组血尿素氮含量明显降低(P<0.01),小鼠脾脏中TNF-α蛋白表达下调(P<0.05)。结论:补血益母丸能有效地抗气血双虚证候。这可能与其改善骨髓造血功能,提高气血双虚模型小鼠外周血细胞数和提高免疫功能有关。     

五指毛桃与黄芪提取物对免疫抑制小鼠细胞免疫的影响

目的:探讨五指毛桃与黄芪提取物对免疫抑制小鼠细胞免疫的影响。方法:取100只小鼠进行研究,随机分为正常对照组、阳性对照组(20mg/kg左旋咪唑)、五指毛桃提取物组、黄芪提取物组、环磷酰胺模型组,每组20只,经腹部注射环磷酰胺制备免疫功能低下小鼠模型,经连续灌胃给药2周后,对各组小鼠的T淋巴细胞亚群变化、脾脏指数、胸腺指数、IL-1及INF-y进行观察。结果:黄芪提取物组与五指毛桃组的胸腺指数及脾脏指数明显高于环磷酰胺组,差异有统计学意义(P0.05);黄芪提取物组与五指毛桃组的T细胞亚群数量及IL-1与INF-y含量显著较环磷酰胺组高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:五指毛桃与黄其提取物均能提高免疫抑制小鼠细胞免疫功能。     

四物汤及其活性单体对血虚证小鼠的补血作用

目的:研究四物汤及其活性单体芍药苷和川芎嗪对辐射致血虚证小鼠的补血作用。方法:采用3.5Gy60Coγ射线全身1次性照射制备小鼠血虚证模型,外周血白细胞计数,骨髓集落细胞培养,计数CFU-GM、BFU-E、CFU-E、CFU-mix,测定胸腺指数和脾指数。结果:四物汤10g/kg、芍药苷26.5 mg/kg和川芎嗪11.0 mg/kg均显著升高血虚证小鼠外周血白细胞数量和骨髓集落细胞数量,四物汤显著提高胸腺指数;四物汤和川芎嗪显著提高脾指数。结论:四物汤、芍药苷和川芎嗪均具有补血作用,其中四物汤作用最显著,川芎嗪对脾指数的恢复作用最显著。     

分离性上肢运动障碍型颈椎病中西医结合治疗

目的:探讨分离性上肢运动障碍型颈椎病的诊断、治疗。方法:综合分析2例病人的临床症状、体征、影像学资料和诊治过程及预后。结果:经综合的中西医结合治疗后,2例均恢复良好。结论:该型颈椎病比较特殊,少见,因易与运动神经元病相混淆而导致误诊,提高对这种少见的非典型颈椎病的认识,尽早明确诊断和针对影像学而采取的治疗方案对该病的预后有重要意义。     

欧洲刺柏（Juniper）

活性成分与药理作用欧洲刺柏药用部位是其浆果，具有促水排泄、防腐、抗胃肠胀气和抗风湿作用，还可改善胃功能。用作促水排泄药可增加尿量（水丢失），但不增加钠排泄。成分萜品烯-4-醇可增加肾小球滤过率，但刺激肾。欧洲刺柏浆果对单纯疱疹病毒体外显示抗病毒活性，并具抗真菌活性。动物实验显示，欧洲刺柏浆果提取物具有堕胎、抗生育、抗炎、抗胚胎植入、降血压、升血压和降血糖作用。欧洲刺柏浆果油具有兴奋子宫的活性，以及利尿、胃肠道抗菌和刺激作用，该油对平滑肌有阻止解痉作用。     

鼻敏感颗粒调控变应性鼻炎Treg细胞诱导免疫耐受的研究

目的：探讨鼻敏感颗粒通过诱导Treg细胞变化,使变应性鼻炎的机体产生免疫耐受,达到治疗目的。方法：本研究以SD大鼠为实验动物,分为空白组、模型组和鼻敏感颗粒组,建立变应性鼻炎大鼠模型,并予以鼻敏感颗粒灌胃,借助流式细胞仪和ELISA法检测标本的 CD4+CD25+Foxp3+Treg和IL-4、IL-10、TGF-β1、IL-13的数值。结果：流式细胞仪检测结果表明,CD4+CD25+Foxp3+Treg在造模成功后下降（P<0.05）,但在鼻敏感颗粒治疗后上升（P<0.05）,达到正常空白组水平（P>0.05）。细胞因子ELISA法的结果表明,在造模成功后IL-10 和TGF-β1浓度明显下降（P<0.0001）,IL-4和IL-13浓度明显上升（P<0.0001）,而在鼻敏感颗粒治疗后IL-10和TGF-β1的血中浓度回升但未达到正常空白组水平,IL-4和IL-13血中浓度下降但未达到正常空白组水平。结论：鼻敏感颗粒可以上调变应性鼻炎大鼠的Treg细胞数量,使其分泌的IL-10 和TGF-β1量上升,抑制Th2细胞活性,使IL-4和IL-13分泌量下降,从而改善变应性鼻炎症状。     

巴西可可（Guarana）

活性成分与药理作用巴西可可的药用部位是其种子，含2．5％～7％咖啡因（相当于咖啡中的1％～2％），为一种中枢神经系统刺激剂，增强心率和收缩力，抑制血小板凝集，促进胃酸分泌，引起多尿，松弛脑外血管和支气管平滑肌，促进儿茶酚胺释放，间接抑制组胺释放。巴西可可还含作用类似于咖啡因的茶碱和可可碱，以及可致癌和肝毒性的鞣质。此外，还含有微量鱼毒药替包宁（timbonine）。     

丹参药材中铅、镉、砷、汞、铜的含量测定

[目的]对不同产地的丹参药材中铅、镉、砷、汞、铜的含量进行测定,为高品质丹参药材的筛选提供某种依据,并为中药材质量标准的建立提供一定的参考价值.[方法]样品经湿法消解后,用原子吸收分光光度法进行检测.[结果]超标率为:铅6.25%;镉100%;砷0;汞0;铜31.25%.[结论]不同产地的丹参药材中砷、汞含量较低,铅和铜的含量个别超标,镉含量严重超标.     

血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,CNTF,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP-43和NF-H表达的影响

目的:观察血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,CNTF,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP43和NF-H表达的影响,探讨其促进周围神经再生的可能机制.方法:SD大鼠随机分为血竭给药组(灌服血竭的香油溶液)和空白对照组(等体积香油),制备血竭含药血清和空白对照血清.选取出生3 dSD大鼠双侧坐骨神经制备雪旺氏细胞;将培养的雪旺氏细胞分为血竭组和空白对照组,分别用10％血竭含药血清和空白对照血清干预培养.48 h后应用RT-PCR法检测各组雪旺氏细胞NGF,BDNF等基因mRNA表达水平.结果:镜下观察到大部分雪旺氏细胞呈双极梭形,细胞呈肩对肩或端对端排列,免疫细胞化学鉴定均呈阳性;与空白组比较,血竭组NGF,LNGFR,GDNF和GAP43 mRNA表达上调(P＜0.01),BDNF mRNA表达下调(P＜0.05),CNTF和TrkA的mRNA均下调(P＜0.01),NF-H mRNA无显著差异.结论:中药血竭可能是通过上调NGF,LNGFR,GDNF,GAP-43的mRNA的表达,同时下调BDNF,CNTF,TrkA mRNA来发挥其促进神经修复作用.     

Taxol content in bark, wood, root, leaf, twig, and seedling from several Taxus species

Taxol content in various parts of several Taxus species have been determined. The weight percent ranged from 0.00003 to 0.069.     

一种热毒诱导的血栓形成动物模型的建立

目的：建立一种热毒诱导的血栓形成动物模型，为血栓性疾病的热毒病因病机研究、清热解毒法治疗血栓性疾病的作用及其作用机制研究以及清热解毒药的抗血栓活性筛选和临床前研究提供合适的动物模型。方法：将大鼠随机分成对照组和模型组。模型组动物先腹腔注射Ca 5 mg/鼠，16 h后再静脉注射LPS 50 μg·kg^-1。于造模后不同时间观察尾部血栓形成情况，测定外周血白细胞数量、血浆TXB₂，6-keto-PFG₁α,TNF-α和IL-6水平、白细胞黏附分子CD11b/CD18表达以及尾血管P-选择素表达。结果：造模后，可在大鼠尾部远端形成稳定的血栓，动物血液中的炎性因子TNFα和IL-6大量产生，白细胞黏附分子CD11b/CD18和血管内皮细胞P-选择素等表达明显增高，有较多的白细胞黏附于血管壁，外周血白细胞计数减少，提示本模型的血栓形成与炎症反应有关。结论：本模型由内毒素这种外源性热毒诱导，体内产生明显的炎症反应病理过程，提示热毒是本模型的重要病机。     

Sesterterpenoids, terretonins A-D, and an alkaloid, asterrelenin, from Aspergillus terreus

Four new sesterterpenoids, terretonins A-D (1-4), and a new alkaloid, asterrelenin (5), together with five known compounds, were isolated from the ethyl acetate extract of a solid-state fermented culture of Aspergillus terreus. Their structures were elucidated on the basis of spectroscopic analysis. The structures of 1, 2, and 5 were confirmed by X-ray crystallographic analysis.     

电感耦合等离子质谱法测定热毒宁注射液中有害元素铅砷镉汞铜的含量

目的: 建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS) 测定热毒宁注射液中铅(Pb),砷(As),镉(Cd),汞(Hg),铜(Cu)5 种元素同时的方法。 方法: 样品经微波消解后,以ICP-MS同时测定上述5种元素,其中Cu,As以铬(Ge)作为内标, Cd以铟(In)作为内标,Hg,Pb以铋(Bi)作为内标进行定量以改善基体效应和干扰。 结果: 各元素的检出限在0.009~0.113 μg ·L^-1; 各元素的线性关系良好,Pb,As,Cd,Cu,Hg线性范围分别为0~20,0~20,0~10,0~200,0~5 μg ·L^-1。r均≥ 0.999;精密度RSD<1.9%;重复性良好,回收率在97.8%~110.9%,RSD<4.3%。20批样品中5种元素的含量均符合规定。 结论: 该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,各项分析性能指标均达到要求,适用于热毒宁注射液中Pb,As,Cd,Hg,Cu元素的测定。