滋阴清热方对缺乏淋巴增殖基因狼疮鼠CD4~＋CD25~＋T细胞亚群及Foxp3表达的影响

目的：探讨滋阴清热方对缺乏淋巴增殖基因狼疮鼠CD4＋CD25＋T细胞亚群及Foxp3表达的影响。方法：选用自发性系统性红斑狼疮（SLE）模型MRL/lpr小鼠40只,随机平均分为4组,即模型组、滋阴狼疮方治疗组（中药组）、强的松治疗组（西药组）、滋阴清热复方＋强的松治疗组（中西药组）。另选用昆明小鼠10只作为对照组。连续用药10周后,流式细胞仪分析外周血CD4＋CD25＋T细胞亚群的百分比及CD4＋CD25highT细胞与CD4＋CD25intT细胞的比率,RT-PCR检测T细胞Foxp3 mRNA的表达。结果：各组外周血CD4＋CD25＋T细胞、CD4＋CD25highT细胞和CD4＋CD25intT细胞占CD4＋T细胞的百分比组间比较,无统计学差异（P〉0.05）,而CD4＋CD25highT细胞与CD4＋CD25intT细胞的比率和T细胞Foxp3 mRNA表达水平,模型组与对照组比较,明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,各治疗组均高于模型组（P〈0.05）,尤其是中西医结合组（P〈0.01）。结论：中药滋阴狼疮方可上调MRL/lpr狼疮鼠Foxp3 mRNA表达水平,从而调节CD4＋CD25＋T细胞亚群比率,发挥对SLE的免疫治疗作用。     

狼疮方对体外扩增小鼠CD4^＋CD（25）^＋调节性T细胞的影响

目的：狼疮方对体外扩增小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞数量的影响。方法：免疫磁珠法分离狼疮方治疗组与未治疗组小鼠CD4＋CD2＋5T细胞;通过流式细胞仪检测CD4＋CD25＋T细胞Foxp3表达情况;用抗CD3和抗CD28包被的微珠来进行刺激,体外扩增小鼠的CD4＋CD25＋调节性T细胞;用CFSE法检测CD4＋CD25＋调节性T细胞体外抑制CD4＋CD2-5T细胞的增殖情况。结果：经抗CD3和抗CD28包被的微珠刺激后,在TGF-β1和IL-2存在的环境中CD4＋CD25＋T细胞数量明显升高,扩增后的CD4＋CD25＋T细胞高表达Foxp3。与此同时,经狼疮方处理后的小鼠CD4＋CD25＋T细胞扩增后数量增加133.3±18.9倍,未经狼疮方处理的对照细胞数量增加104.7±10.8倍,两者比较有显著性差异（P〈0.05）。狼疮方治疗组与未治疗组中分离的CD4＋CD2＋5T细胞和扩增的CD4＋CD25＋T细胞对CD4＋CD2-5T细胞的增殖皆有明显抑制作用,荧光强度分别为32.1±4.8,33.1±4.9,30.1±3.8,32.9±4.2。结论：狼疮方有助于提高小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞的扩增效率,扩增的CD4＋CD25＋调节性T细胞表达Foxp3,具有体外免疫抑制功能。     

胃肠道癌肿患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞的表达及临床意义

目的：研究胃肠道癌肿患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T（Treg）细胞的表达，并探讨其临床意义。方法：通过免疫荧光术及流式细胞仪检测20例胃癌患者及20例结肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg细胞、CD4^＋CD25^＋high Treg细胞、CD4^＋T细胞及CD4^＋ CTLA-4^＋T细胞。结果：胃癌组、结肠癌组与健康献血者比较外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋ Treg细胞、CD4^＋CD25^＋high Treg细胞及CD4^＋CTLA-4^＋T细胞显著增多，CD4^＋T细胞显著减少；胃癌、结肠癌患者之间其外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg细胞、CD4^＋CD25^＋high Treg细胞、CD4^＋T细胞及CD4^＋CTLA-4^＋T细胞无显著差异。结论：胃肠道癌肿患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg细胞显著高于健康献血者，这可能与胃肠道癌肿患者的免疫抑制和肿瘤的进展相关。     

两种中药复方对MRL/lpr小鼠中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞增殖能力影响的实验研究

目的：比较两种中药复方对MRL/lpr小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg细胞）增殖能力的影响。方法：分别以两种中药方剂对SD大鼠灌胃7日,采集大鼠血清;采用磁珠分离法分选出MRL/lpr小鼠脾脏中Treg细胞,分别于普通SD大鼠血清及两种中药方剂SD大鼠血清中进行培养,观察Treg细胞增殖情况。结果：中药方剂组1组大鼠血清培养的Treg细胞数量显著高于中药方剂组2组及对照组,中药方剂组2组与对照组间无统计学差异。结论：中药方剂1组能显著提高MRL/lpr小鼠中Treg细胞的增殖能力,从而达到对SLE的治疗效果。     

健脾护齿方对伴放线放线杆菌超声提取物作用下CD4^＋CD25^＋调节性T细胞免疫抑制功能的影响

目的：探讨健脾护齿方对伴放线放线杆菌（actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa）超声提取物作用下CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory Tcells,Tregs）免疫抑制功能的影响。方法：免疫磁珠法分离正常BALB/c小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Tregs并进行体外培养,将300μg/mlAα超声提取物和不同剂量健脾护齿方药液加入培养液中,72h后收集细胞及上清液,Real-Time PCR法测定培养细胞Foxp3 mRNA的表达,ELISA法分别测定细胞上清液中IL-10,TGF-β水平。结果：Aa超声提取物能够显著上调CD4^＋CD25^＋Tregs Foxp3 mRNA的表达,增强其免疫抑制作用,但不影响CD4^＋CD25^＋Tregs分泌IL-10和TGF-β;健脾护齿方抑制Aa超声提取物上调CD4^＋CD25^＋Tregs Foxp3mRNA表达的作用,并且Foxp3 mRNA表达的抑制作用与健脾护齿方剂量之间呈剂量—效应关系。结论：健脾护齿方有抑制Aa超声提取物上调CD4^＋CD25^＋Tregs免疫抑制功能的作用,这种抑制效应可能与Foxp3基因表达的下调有关,并且不具有抑制性细胞因子依赖性。     

扶正中药复方对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠免疫器官和肠黏膜CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋的影响

目的：研究扶正中药复方对环磷酰胺所致免疫功能低下模型小鼠肠黏膜CD3^＋、CD4‘及CD8^＋的影响。方法：小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、香菇多糖片对照组及扶正中药复方大、中、小剂量组，混悬液灌胃给药，免疫组化法测定肠黏膜中的T淋巴细胞（CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋）表达水平。结果：模型对照组小鼠肠黏膜中的T淋巴细胞（CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋）水平出现低表达，与正常对照组比较，差别有统计学意义（P〈0．01）；中药复方可以显著提高环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠模型肠黏膜固有层中CD3^＋、CD4^＋及CD8^＋细胞数量，与模型对照组相比，差别有统计学意义（P〈0．01）。结论：环磷酰胺造成的免疫功能低下不仅抑制全身免疫系统，而且对肠黏膜免疫功能有较强的抑制作用，中药复方通过恢复或者增强环磷酰胺所致免疫功能低下模型小鼠肠黏膜免疫功能。     

乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠CD4^＋／CD8^及Fas、FasL蛋白表达的实验研究

目的：观察乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠CD4^＋／CD8^及Fas、FasL蛋白表达的影响。方法：采用雌性BALB／c小鼠皮下多点注射小鼠透明带多肽,建立免疫性卵巢早衰模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、己烯雌酚组、六味地黄丸组、乌鳖颗粒大、中、小剂量组。另设正常组和佐剂组,共灌胃给药4周。实验末应用免疫组化法测定脾脏CD4^＋、CD8^,计算CD4^＋／CD8^的比值。应用免疫组化法测定卵巢Fas、FasL蛋白的表达。结果：模型组小鼠脾脏CD4^＋／CD8^比值明显高于正常组和佐剂组（P〈0．05）。乌鳖颗粒各剂量组小鼠脾脏CD4^＋／CD8^比值明显低于模型组（P〈0．05,P〈0．01）。模型组小鼠卵巢Fas蛋白表达低于正常组,Fas—L蛋白表达明显高于正常组,卵巢Fas、Fas—L蛋白表达和Fas／Fas—L比值与正常组比较具有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）。乌鳖颗粒大剂量组和中剂量组小鼠Fas蛋白表达明显高于模型组,（P〈0．05,P〈0．01）。乌鳖颗粒各剂量组Fas—L蛋白表达明显低于模型组（P〈0．05,P〈0．01）。乌鳖颗粒大剂量组、中剂量组小鼠Fas／Fas—L比值与模型组比较具有显著性差异（P〈0．01）。结论：乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠具有调节CD4^＋／CD8^比值和Fas／FasL系统的作用。     

靛玉红对溃疡性结肠炎小鼠CD4CD25Treg细胞Foxp3表达的影响

目的观察青黛及其有效成分靛玉红对溃疡性结肠炎（UC）小鼠脾脏CD4CD25Treg细胞Foxp3表达的影响,探讨其治疗uc的作用机制和靶点。方法将50只BABL／c小鼠随机分为正常组、模型组、靛玉红组、青黛组和5-ASA组。除正常组外,其余小鼠采用自由饮用5％葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液5天,制备DSS诱导的UC小鼠模型。于造模后第5天开始,予各组小鼠给药治疗7天。观察各组小鼠一般状况及结肠组织病理学改变,同时检测脾脏CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达变化。结果与正常组比较,模型组小鼠CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达显著减少（P〈0．01）;各治疗组CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达较模型组升高（P〈0．01）。结论青黛及其有效成分靛玉红可通过上调CD4CD25Treg细胞Foxp3表达以防治UC。     

清热凉血养阴祛风法对佐剂性关节炎大鼠外周血CD4^＋CD25^＋Tregs影响

类风湿关节炎（RA）是常见的自身免疫性疾病,T细胞功能紊乱与其发病密切相关.研究发现,人体内有一群具有独特免疫调节功能的T细胞亚群：CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）;Treg数量减少或功能异常均可能导致自身免疫性疾病的发生.近年来,越来越多的研究表明,CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞在RA的发生与病情转归等过程中发挥至关重要的作用.本研究以大鼠佐剂性关节炎（adjuvant arhritis,AA）动物模型为基础,通过中药治疗后观察CD4^＋ CD25^＋Treg在AA发展过程中的变化,旨在探讨中药方治疗大鼠AA的可能作用机制,为RA的预防和治疗提供新的思路.     

抗痨合剂对初治肺结核患者CD4~＋ CD25~＋调节性T细胞及Foxp3的影响

目的：研究抗痨合剂对初治肺结核患者CD4＋CD25＋调节性T细胞及Foxp3的影响。方法：将64例初治肺结核患者随机分中药组和对照组,中药组采用2HRZE/4HR＋口服抗痨合剂方案抗结核治疗,对照组采用2HRZE/4HR＋口服中药安慰剂方案抗结核治疗,6个月后观察临床疗效,并采用流式细胞术检测各组患者外周血CD4＋CD25＋Treg细胞的含量,实时荧光定量PCR检测各组患者外周血Foxp3 mRNA的表达。结果：抗痨合剂可显著改善初治肺结核患者咳嗽、咳痰、潮热盗汗、恶心、乏力等临床症状。抗痨合剂可显著减少初治肺结核患者外周血中CD4＋CD25＋Treg细胞数量,并下调Foxp3 mRNA表达,与对照组比较有统计学意义（P〈0.05）。结论：抗痨合剂的作用机制可能是通过减少CD4＋CD25＋Treg细胞数量、下调Foxp3 mRNA表达,调节机体免疫功能,发挥临床疗效。     

2型糖尿病及大血管病变患者 CD4＋CD28-T细胞、CD4＋CD25＋T细胞亚群的变化及意义

目的：观察外周血CD4＋CD28-T细胞、CD4＋CD25＋T细胞亚群在2型糖尿病患者及大血管病变患者的变化,探讨其在2型糖尿病及大血管病变发病中的作用。方法：应用免疫荧光标记技术和流式细胞仪,检测36例初诊2型糖尿病（单纯DM组）患者和28例糖尿病并大血管病变患者、20例健康对照者的外周血T细胞亚群变化。结果：DM并大血管病变组、单纯DM 组 CD4＋CD28-T 细胞明显高于健康对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;而 CD4＋CD25＋T 细胞明显低于健康对照组（P〈0.05）;DM并大血管病变组CD4＋CD28-T细胞高于单纯DM组（P〈0.05）,CD4＋CD25＋T细胞低于单纯DM组。结论：机体细胞免疫异常在2型糖尿病及大血管病变的发生、发展中发挥着一定的作用。     

艾灸对胃荷瘤大鼠外周血中CD4+、CD4+CD25+T淋巴细胞的影响

目的:观察艾灸对胃荷瘤大鼠外周血中CD4~+、CD4~+CD25~+T淋巴细胞亚群的影响。方法:将50只健康SPF级SD大鼠,雌雄各半,随机分为空白组、假手术组、模型组、艾灸组和红外组5组,每组10只。利用Walker-256细胞来源的实体瘤组织移植胃部制备模型。模型成功后,艾灸组予以悬灸中脘、胃俞等穴位;红外组予以短波红外线照射腹部胃脘及背部胃脘投影区;其余组捆绑束缚。干预20 min/次,1次/d,持续21 d。干预结束后,眼眶采血,流式细胞技术测定外周血中CD4~+、CD4~+CD25~+T淋巴比例。处死动物,测算胸腺指数及肿瘤体积生长抑制率。结果:与空白组比较,模型组动物生存状态变差,胸腺指数增加,外周血中CD4~+CD25~+T淋巴细胞比例显著增加(P 0. 05);与模型组比较,艾灸组动物艾灸组动物生存状态改善,胸腺指数进一步增加,瘤体内坏死灶较多,血管较少,外周血中CD4~+T淋巴细胞比例显著增加(P 0. 01),CD4~+CD25~+T淋巴细胞比例减少(P 0. 01);与红外组比较,艾灸组瘤体内坏死灶更多,血管较少,外周血中CD4~+T淋巴细胞比例增加(P 0. 01)。结论:艾灸可一定程度改善荷瘤动物生存状态,减少肿瘤细胞转移、促进肿瘤细胞坏死,减少血管增生。这种影响可能与增加CD4~+T淋巴细胞,减少CD4~+CD25~+T淋巴细胞有关。     

再生障碍性贫血CD3+CD25+和CD3+HLA-DR+T细胞亚群的表达与中医辨证分型的相关性研究

目的:应用统计学判别分析方法,筛选53项免疫学指标,建立再生障碍性贫血(Aplastic Anemia, AA)的中医证型判别方程,对AA中医证型客观量化. 方法:采用流式细胞技术,对AA患者34例,健康对照人群34名外周血的免疫学指标进行检测,同时对AA患者进行辨证分型,以判别分析方法建立AA辨证分型的判别方程,对中医证型进行客观量化.结果:(1)筛选出CD45RA 绝对值、CD3 CD25 绝对值、CD3 CD25 (%)、CD3 HLA-DR 绝对值和CD4 γδT(%)等5个最有意义的免疫指标,其判别总正确率为76.5%;(2)与健康对照相比,CD3 CD25 (%)在AA中医证型各组均具有显著性差异(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05),CD3 HLA-DR (%)在肾阳虚组有显著性差异(P＜0.01);(3)CD3 CD25 /CD3 HLA-DR 在预后不良的肾阴虚组偏高(＞1),在预后较好的肾阳虚组偏低(＜1),而在肾阴阳两虚组居中. 结论:(1)AA中医证型判别方程中有3个值与T细胞的活化指标CD25和HLA-DR相关,说明中医辨证分型确有其客观物质基础,同时反映出辨证分型与AA免疫学发病机制的内在联系;(2)CD3 CD25 /CD3 HLA-DR 在AA辨证分型各组中变化具有一定规律,对辨证分型及预后判断有一定意义.     

重型再生障碍性贫血CD4+CD25+调节性T细胞的研究

目的:应用流式细胞术检测SAA患者外周血CD4 CD25 T细胞、CD4 CD25highT细胞的数量。结果:10例初治SAA患者外周血CD4 CD25 T细胞占CD4 T细胞的(6.23±1.82)%,明显低于正常对照组(9.20 2.95)%(P<0.01),CD4 CD25highT细胞比例为(1.02±0.11)%,亦明显低于正常对照组(1.43±0.41)%;10例造血恢复SAA患者CD4 CD25 T细胞和CD4CD25highT细胞比例分别为(8.92±1.22)%和(1.41±0.64)%,与正常对照组无明显差异(P>0.01)。认为 CD4 CD25 、CD4 CD25highT细胞水平与SAA密切相关。     

狼疮静颗粒对狼疮样小鼠外周血CD4+、CD8+及CD54表达的影响

目的 探讨狼疮静颗粒不同剂量对自发性狼疮小鼠部分免疫调节作用机制。方法 运用狼疮静颗粒3种不同剂量，对3月龄雌性NZB／NzW F1狼疮模型小鼠进行干预治疗6周，观察其对各组小鼠CD4^ 、CD8^ 细胞及CD54表达的影响。结果 中药狼疮静不同剂量有升高模型小鼠外周血CD4^ 、CD8^ 细胞的倾向，能降低血清CD54含量，抑制血浆淋巴细胞表面及单核细胞表面CD54的高表达，其作用以中、高剂量明显。结论 狼疮静颗粒能改善和调节自发性狼疮小鼠细胞免疫功能，抑制过亢的免疫反应。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞与妊娠期高血压病子痫前期发生关系的探讨

目的:观察具有免疫抑制作用的CD4+CD25+T细胞的数量以及相关因素雌激素与妊娠期高血压病子痫前期发生的关系。方法:流式细胞技术分析,测定CD4+CD25+T细胞的数量,放射免疫测定血清雌激素。结果:妊娠期高血压病子痫前期患者,其CD4+CD25+T细胞的数量减少,且血雌三醇水平有不同程度的降低。结论:①CD4+CD25+T细胞数量的改变在妊娠期高血压病的发病机制中起重要的作用。②雌激素能帮助维持免疫耐受。     

CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞在儿童特发性血小板减少性紫癜患者中的表达及意义

目的探讨儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者CD4+CD25+调节性T细胞的表达及意义。方法用流式细胞术检测27例ITP患儿和21例健康儿童外周血T淋巴细胞亚群的比例,以及CD4+T淋巴细胞表面CD25、FasL和Fas的表达率。结果ITP患儿CD3、CD4、CD4/CD8比值与对照组比较显著降低,CD4+CD25+调节性T细胞明显减少,CD4+CD25-细胞无明显改变,CD4+FasL+增多,CD4+Fas+减少。结论儿童ITP患者CD4+CD25+调节性T细胞显著减少,破坏自身免疫耐受,在ITP的发病中起重要作用。     

穴位埋线对海洛因依赖大鼠戒断症状、CD4~+及CD8~+细胞的影响

目的:通过观察不同干预方法对海洛因依赖大鼠戒断症状及外周血CD4+CD8+、和CD4+/CD8+值的影响,为临床治疗方案的优选提供理论依据。方法:采用逐日递增法建立海洛因成瘾大鼠模型,随机分为自然戒断组、美沙酮组、针刺组和穴位埋线组,正常对照组注射等量生理盐水。于造模成功和干预结束后进行催促试验,比较戒断症状积分变化;采用免疫组化检查外周血CD4+和CD8+细胞百分数、CD4+/CD8+值。结果:干预后美沙酮组戒断症状积分明显低于其它各组(P0.01),而针刺组和埋线组与自然戒断组比较差异无显着性(P0.05);针刺和穴位埋线可以提高外周血CD4+细胞百分数和CD4+/CD8+值,降低CD8+细胞百分数。埋线组与针刺组比较也有差异(P0.05)。而美沙酮组与自然戒断组间比较则无差异(Pp0.05)。结论:美沙酮可以很好地缓解海洛因戒断症状;穴位埋线能改善其紊乱的T淋巴细胞免疫功能。     

益髓生血颗粒对AA大鼠CD4 + CD25 + Foxp3调节性T细胞的影响

目的：观察益髓生血颗粒对再生障碍性贫血（Aplastic Anemia,AA）大鼠CD4 + CD25 + 调节性T细胞（Regulatory T Cell,Treg细胞）的影响及其治疗AA的作用机制。方法：取雄性SD大鼠按体重随机分组。其中模型组连续7周隔天皮下注射苯（1 mL ? kg -1 ）、取材10天前开始腹腔注射环磷酰胺（25 mL ? kg -1 ）,连续3天,第4周将模型组大鼠按体重随机分为模型组、司坦唑醇组、益髓生血颗粒组,灌胃给药。正常组及模型对照组给予等体积生理盐水。实验结束时,检测外周血WBC、RBC、HGB、PLT;制备血涂片、骨髓涂片;免疫组织化学法检测脾组织Treg细胞Foxp3蛋白表达;RT-PCR法检测骨髓组织Foxp3 mRNA的表达。结果：与正常组比较,模型组WBC、RBC、HGB、PLT均显著减少（P<0.01）,血涂片示血细胞通透性差、白细胞减少、退化细胞增多,骨髓涂片示脂肪滴明显增加、造血细胞均明显降低、非造血细胞增多;经益髓生血颗粒组治疗后WBC、RBC、HGB、PLT均显著增加（P<0.01）,血涂片及骨髓涂片显示细胞通透性好转、形态趋于正常、脂肪滴明显减少,造血细胞均明显增加,脾组织Foxp3蛋白及骨髓组织Foxp3 mRNA表达明显升高（P<0.01）。结论：益髓生血颗粒可上调Foxp3的因及蛋白表达,调控AA免疫功能,进而改善AA免疫环境,促进骨髓造血功能的恢复,发挥治疗AA的重要作用。