白芷挥发油对伤害性疼痛模型大鼠基因表达的影响

目的 研究白芷辉发油（EOAD）对甲醛所致的伤害性疼痛模型大鼠基因表达的影响。方法 采用免疫组化与原位杂交相结合的方法研究了EOAD对即早基因（c-fos)和前阿黑皮素（POMC）信使核糖核酸（mRNA)基因表达的影响。结果 EOAD对甲醛所致的伤害性疼痛模型大鼠造模后2h脑干，下丘脑c-fos表达无明显影响，但可促进β-内啡肽的前体物质POMCmRNA的表达而发挥镇痛作用。结论 免疫组化与原位杂交技术可应用于镇痛药的研究。但须在不同的时间点进行实验。     

下丘脑β-EP及POMC mRNA的表达在针刺镇痛后效应中的作用

目的 :探讨下丘脑β EP及POMCmRNA的表达在针刺镇痛后效应中的作用。方法 :以急性佐剂性关节炎 (AA)大鼠作为炎症痛模型 ,针刺“昆仑”穴 ,观察即时及后效应 ;采用放免、原位杂交等方法检测下丘脑 β 内啡肽 ( β EP)含量及 β EP前体前阿黑皮素POMCmRNA的表达。结果 :针刺能提高AA大鼠痛阈并能持续 1hr以上 ,提高下丘脑 β EP含量并能持续 3 0min以上 ,促进下丘脑β EP前体POMCmRNA的表达并能持续 1hr以上。结论 :针刺镇痛有即时效应 ,也存在较为显著的后效应 ,下丘脑β EP及POMCmRNA的表达可能参与了这一过程。     

不同针法对佐剂性关节炎大鼠下丘脑镇痛效应比较

目的对电针、毫针、刺血和穴位注射的镇痛效应及下丘脑镇痛机制进行比较研究。方法以佐剂性关节炎大鼠为炎症痛模型，以“昆仑”为穴位，采用电针、毫针、刺血、穴位注射，以放免、原位杂交等为检测方法，观察了痛阈、炎症局部肿胀度、下丘脑β-内啡肽(β—EP)和促肾上腺皮质激素(ACTH)含量、下丘脑前阿黑皮素(DOMC)mRNA表达等指标。结果4种针法均可使痛阈升高，尤以电针、穴注升高明显；均可使炎症局部肿胀减轻，各组间疗效无明显差异；电针、毫针可提高下丘脑β-EP含量，以电针作用最强；穴注可提高下丘脑ACTH含量；电针、毫针可增强下丘脑POMCmRNA表达。结论电针、毫针、刺血、穴注对炎症痛均有镇痛作用，以电针、穴注疗效较好。在下丘脑水平，电针、毫针可能通过提高下丘脑β—EP含量、增强下丘脑POMCmRNA表达达到镇痛作用；穴注可能通过提高下丘脑ACTH含量达到镇痛作用。刺血可能通过下丘脑β—EP、ACTH以外的途径实现其镇痛效应。     

针刀松解法对第3腰椎横突综合征大鼠下丘脑前阿黑皮素mRNA、前脑啡肽原mRNA表达的影响

目的:探讨针刀松解法治疗第3腰椎横突综合征的部分中枢镇痛机制。方法:SD雄性大鼠24只,随机分为正常组、模型组、针刀组及电针组。采用左侧第3腰椎横突尖部埋置明胶海绵法建立第3腰椎横突综合征模型,针刀组和电针组分别给予针刀松解和电针左侧"肾俞""腰阳关"治疗。应用原位杂交方法检测大鼠下丘脑前阿黑皮素(POMC)mRNA、前脑啡肽原(PPE)mRNA阳性细胞的表达。结果:造模后大鼠下丘脑POMC mRNA、PPE mRNA的阳性细胞表达较正常组增多(P0.01),针刀组和电针组大鼠下丘脑POMC mRNA、PPE mRNA阳性细胞表达较模型组进一步增多(P0.01)。结论:针刀松解法与电针可能通过促进下丘脑POMC mRNA、PPE mRNA的表达,参与其镇痛过程。     

不同间隔时间电针对炎症痛大鼠下丘脑阿片肽基因表达的影响

目的:观察累加电针对炎症痛大鼠模型不同间隔时间的镇痛效果,从而探讨针刺镇痛的最佳治疗间隔时间。方法:96只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,以佐剂性关节炎大鼠作为炎症痛模型,分别以3、6、12、24h作为电针治疗间隔时间。选用“昆仑”和“悬钟”穴,电针频率15~100Hz,疏密波,电压2~4V,留针20min,连续治疗6d后观测大鼠疼痛级别、痛阈、下丘脑前阿黑皮素和前脑啡肽原mRNA的表达。结果:电针组的疼痛级别明显低于模型组(P<0·05),24h电针组的痛阈高于模型组(P<0·01),各电针组下丘脑前阿黑皮素和前脑啡肽原mRNA表达的细胞数均明显高于模型组。在不同间隔时间电针治疗中,以间隔24h治疗更能明显降低炎症痛大鼠的疼痛级别并提高其痛阈,促进下丘脑前阿黑皮素和前脑啡肽原mRNA表达(P<0·05或0·01)。结论:电针对炎症痛大鼠模型具有非常明显的镇痛作用,间隔24h重复治疗可显著提高其镇痛效果。     

不同电针频率刺激对胃扩张疼痛大鼠下丘脑内P物质、β-内啡肽表达的影响

目的:通过比较不同电针频率刺激"足三里"对胃扩张疼痛大鼠的拟痛行为学评分和下丘脑内疼痛信息物质P物质(SP)、β-内啡肽(β-EP)的影响,阐明电针防治胃扩张疼痛可能的物质基础,探讨不同电针频率的效应差异。方法:50只大鼠完全随机分成空白组、假手术组、模型组、低频电针组和高频电针组,除空白组外采用胃内植入气囊并充气40mmHg压力造成胃扩张疼痛模型,低频(2Hz)和高频(100Hz)电针刺激"足三里"为施治因素,观察大鼠拟痛行为学评分,用免疫组化法检测下丘脑组织中SP、β-EP的表达。结果:低、高频电针均能明显降低胃扩张疼痛大鼠的拟疼痛行为学评分,与针前比较差异有统计学意义(P<0.01);且高频电针组优于低频电针组(P<0.01)。与空白组和假手术组比较,模型组下丘脑组织中SP、β-EP阳性细胞数明显增加(P<0.01),低、高频电针可使下丘脑组织中SP、β-EP阳性细胞数继续增加(P<0.01),且低频电针组的SP、β-EP阳性细胞数增加更明显(P<0.01)。结论:不同电针频率刺激"足三里"均可减轻胃扩张疼痛大鼠的应激反应,这可能是通过促进了下丘脑内疼痛信息物质SP、β-EP的合成与释放,从而发挥镇痛作用,且高频电针的镇痛效应优于低频针。     

中药天癸方对雄激素致不孕大鼠下丘脑前阿黑皮原mRNA的影响

目的 :探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠 (ASR)的作用机理。方法 :取新生SD雌性大鼠随机分为 3组 ,于 9日龄时注射丙酸睾丸酮 ,制成ASR模型 ,用中药天癸方治疗 14天 ,于 10 6日龄左右 (动情前期 )处死 ,并取血清 ,用放免法测定总睾酮 (TT)、游离睾酮 (FT) ,下丘脑前阿黑皮原mRNA(POMCmR NA)。结果 :模型组大鼠均无排卵 ,对照组 (未造模 )大鼠均排卵 ,中药组大鼠排卵率为 58%。TT和FT模型组均明显高于对照组和中药组 (P <0 0 1)。 3组大鼠在下丘脑弓状核神经元雄激素受体 (AR)和 β 内啡肽( β EP)共存。下丘脑POMCmRNA水平模型组高于对照组 (P <0 0 1) ,中药组降至基本正常。 结论 :ASR模型的血清雄激素水平升高 ,有可能通过下丘脑β EP神经元上的AR引起POMCmRNA表达增加 ,中药天癸方可使血清雄激素水平和下丘脑POMCmRNA下降     

白芷总挥发油对疼痛模型大鼠的神经递质的影响

目的 :探讨白芷总挥发油 (EssentialoilofRadixAngelicaedahuricae ,EOAD)对疼痛模型大鼠神经递质的影响。 方法 :采用多种工具药探讨EOAD的镇痛作用与中枢神经递质的关系 ,并用化学荧光法测定单胺类神经递质含量。结果 :EOAD与烯丙吗啡、氟哌啶醇有协同作用 ,其镇痛作用能被纳洛酮和利血平对抗 ;EOAD在外周能显著降低血中单胺类神经递质的含量 ,在中枢能显著升高多巴胺、5 羟色胺含量 ,降低去甲肾上腺素和 5 羟吲哚乙酸含量。结论 :EOAD调整体内单胺类神经递质含量是其镇痛的机理之一。     

加味四逆散对慢性心理应激大鼠血浆及中枢β-内啡肽、ACTH含量的影响

目的观察慢性心理应激反应大鼠中枢及血浆β-内啡肽(β-endorphine,β-EP)和促肾上腺皮质激素(Adrenocorticotrophin,ACTH)含量的变化及调肝治法方药-加味四逆散的影响。方法采用限制大鼠活动空间的方法,建立慢性心理应激反应模型。放射免疫法检测β-EP和ACTH。结果模型大鼠下丘脑、垂体内β-EP水平明显降低,血浆含量明显升高;下丘脑、血浆ACTH水平均明显升高。调肝方药可以明显升高下丘脑、垂体内β-EP水平,降低血浆β-EP含量以及下丘脑和血浆ACTH水平。结论加味四逆散对慢性心理应激反应具有良好的调控作用,其机制与其调控中枢阿片促黑皮质激素原(Proopiome-lanocortin,POMC)细胞分泌产物有关。     

缪刺法对佐剂性关节炎大鼠的镇痛效应及机制研究

目的:研究缪刺法对佐剂性关节炎大鼠的镇痛效应及部分中枢镇痛机制。方法:以佐剂性关节炎大鼠为炎症痛模型,以局部痛阈、下丘脑内β-内啡肽(β-EP)及促肾上腺皮质激素(ACTH)、脊髓中强啡肽(Dynal)为指标,观察不同缪刺法与正常取穴法的镇痛效果。结果:正常取穴法与缪刺法对疼痛模型大鼠均有良好的镇痛效应,缪刺法以左右缪刺为优。正常针刺组与左右缪刺组中模型大鼠β-EP、ACTH、Dynal含量下降,上下缪刺法组β-EP、ACTH含量下降而Dynal含量未明显下降。结论:正常针刺、左右缪刺及上下缪刺均对佐剂性关节炎大鼠有较好的镇痛效应,以左右缪刺为优,其部分起效机制可能为激发了中枢神经系统中镇痛物质的调节功能。     

褪黑素合用电针时大鼠脑内β-内啡肽的变化

目的：观察褪黑素合用电针对大鼠下丘脑弓状核中β－内啡肽样免疫阳性反应强度及其前体－－前阿黑皮原（POMC）mRNA表达的影响，以探讨褪黑素加强电针镇的机理。方法：采用ABC免疫组织化学和原痊杂交组织化学技术，结合计算机图像处理，测定其积分光密度（IOD）值。结果：腹腔注射褪黑素60mg/kg,30min时合用电针30min后，脑内β－内啡肽样免疫阳性物质积分IOD值明显降低；10h后脑内POMCm RNA阳性物质积分IOD值明显增高。结论：褪黑素加强电针镇痛效应的机制可能与促进脑内β－内啡肽的释放和合成有关。     

益气止血中药复方对脾不统血证大鼠脑组织POMC mRNA表达的影响

目的：观察益气止血中药对脾不统血证模型大鼠前阿黑皮素(POMC)基因表达的影响。方法：以原位杂交结合图像分析的方法检测大脑皮层、海马、下丘脑前阿黑皮素信使核糖核酸(POMC mRNA)的积分光密度和面积。结果：脾不统血证模型大鼠脑组织POMC mRNA的积分光密度和面积均较正常显著增强，益气止血中药复方对各部位POMC的基因表达均有下调作用。结论：益气止血中药复方对各部位POMC的基因表达均有较好的调节作用，表现出单纯用药的协同作用，且其作用也略强于阳性对照药归脾丸。     

肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭营养不良大鼠下丘脑神经肽Y mRNA及原阿片黑皮素mRNA表达的影响

目的 观察肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭(CRF)营养不良大鼠下丘脑神经肽Y(NPY)mRNA及原阿片黑皮素(POMC)mRNA的表达及其营养状态的影响.方法 采用含0.5%腺嘌呤及4%酪蛋白饲料联合喂养的方法制作CRF营养不良大鼠模型,观察其营养不良发生时间,符合CRF营养不良模型的随机分为模型组、肾衰养真胶囊组和开同组.治疗4周后,检测下丘脑NPY mRNA和POMC mRNA表达水平.结果 肾衰养真胶囊组大鼠营养状况明显改善,下丘脑的NPY mRNA表达上调及POMC mRNA表达下调.结论 肾衰养真胶囊可改善CRF营养不良大鼠的营养状况,其机制可能是通过上调下丘脑NPY mRNA表达,下调下丘脑POMC mRNA表达,从而促进大鼠摄食.     

中药天癸方对雄激素致不孕大鼠下丘脑前阿黑皮原mRNA的影响

目的探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)的作用机理。方法取新生SD雌性大鼠随机分为3组，于9日龄时注射丙酸睾丸酮，制成ASR模型，用中药天癸方治疗14天，于106日龄左右(动情前期)处死，并取血清，用放免法测定总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)，下丘脑前阿黑皮原mRNA(POMCmRNA)。结果模型组大鼠均无排卵，对照组(未造模)大鼠均排卵，中药组大鼠排卵率为58%。TT和FT模型组均明显高于对照组和中药组(P＜0.01)。3组大鼠在下丘脑弓状核神经元雄激素受体(AR)和β-内啡肽(β-EP)共存。下丘脑POMCmRNA水平模型组高于对照组(P＜0.01)，中药组降至基本正常。结论ASR模型的血清雄激素水平升高，有可能通过下丘脑β-EP神经元上的AR引起POMCmRNA表达增加，中药天癸方可使血清雄激素水平和下丘脑POMCmRNA下降。     

更年健上调老年雌性大鼠下丘脑雌激素受体mRNA表达对P物质和β-内啡肽的影响

目的：探讨中药复方更年健上调老年雌性大鼠下丘脑雌激素受体（ ＥＲ）和 ＥＲ信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）对Ｐ物质（ＳＰ）和β－内啡肽（β－ＥＰ）的影响。方法：建立自然衰老的雌性大鼠模型，用放射配体结合分析法检测 ＥＲ，用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析 ＥＲｍＲＮＡ的改变，用放射免疫分析法检测 ＳＰ和β－ＥＰ含量。结果：老年雌性大鼠性减退期下丘脑 ＥＲ和 ＥＲｍＲＮＡ水平随血清Ｅ_２水平的下降较性成熟期显著下降，而更年健则使下降了的ＥＲ和ＥＲｍＲＮＡ水平明显提高，并通过上调下丘脑ＥＲｍＲＮＡ使ＳＰ明显下降，而β－ＥＰ则显著提高，与提高体内雌激素水平具有同样的效果。结论：更年健可增加ＲＲ在下丘脑的表达以增强雌激素的生物学效应，同时降低下丘脑 ＳＰ水平而提高 β－ＥＰ的含量。     

肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭营养不良大鼠Leptin-下丘脑NPY、POMC轴的影响

目的观察肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)营养不良大鼠瘦素(leptin,LP)-下丘脑神经肽Y(neusropeptide Y,NPY)及阿片-促黑素细胞皮质素原(proopiomelanocortin,POMC)轴的影响。方法 42只SD雄性SPF级大鼠,随机选取正常组8只,其余大鼠采用5/6肾切除同时予4%酪蛋白饮食制作CRF营养不良大鼠模型,观察其营养不良发生时间,随机分为肾衰养真胶囊组(SSYZC组)11只、复方α-酮酸组(对照组)11只、模型组12只。治疗4周后,检测肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、24小时尿蛋白(24 hour urine protein,24 h Upr)、白蛋白(albumin,ALB)、血红蛋白(haemoglobin,Hb)、胰岛素样生长因子-1(type-1 insulin like growth factor,IGF-1)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三脂(triglyeride,TG),动态观察摄食量及体重变化,应用放射免疫法检测血浆瘦素(leptin,LP)、下丘脑神经肽Y(neusopeptide Y,NPY)和RT-PCR法检测下丘脑OB-Rb mRNA、NPYmRNA和POMCmRNA表达水平。结果 CRF大鼠在术后10周末出现营养不良,SSYZC组大鼠摄食量、体重显著增高(P0.05),肾功能及营养状况明显改善(P0.05),肾衰养真胶囊可降低血浆LP、NPY水平(P0.05);可上调下丘脑NPY mRNA表达(P0.01)及下调OB-Rb mRNA、POMC mRNA表达(P0.01)。结论肾衰养真胶囊可能通过上调下丘脑NPY mRNA表达及下调OB-Rb mRNA、POMC mRNA表达,从而促进大鼠摄食,改善CRF营养不良。     

体复康对运动性疲劳大鼠脑组织中阿黑皮素原基因表达？…

目的：从基因转录水平阐明运动性疲劳产生及药物调节的机理。方法：有用生物素标记阿黑皮素原（ＰＯＭＣ）ｃＲＮＡ探讨（Ｂｉｏ－ｃＲＮＡ）原位杂交法结合图像分析，观察中药复方体复康对运动性疲劳大鼠不同脑区ＰＯＭＣ ｍＲＮＡ表达。结果：对于慢性运动应激，体复康能增强ＰＯＭＣ在海马ＣＡ１区，下丘脑部位的基因表达，而能降低ＰＯＭＣ在额叶皮层的基因表达。长时期（共７周）大强度的跑台运动（速度由１５ｍ／ｍｉｎ递增至