丹酚酸B干预EPCs对BMSCs移植的AMI大鼠心肌VEGF、bFGF蛋白表达的影响

[目的]探讨中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植后,急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌血管新生的影响.(方法]密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;免疫细胞化学法(CD34/CD133/CD44)分别鉴定两种细胞.结扎大鼠左冠状动脉,制作大鼠急性心肌梗死模型;丹酚酸B最佳药物浓度干预的EPCs,与BMSCs混合,在大鼠心肌梗死区周边分5点注射.免疫组织化学法检测心肌蛋白的表达.[结果]细胞移植4周后,EPCs与BMSCs共移植组血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的积分光密度(IOD)分别13.179±3.053、23.634±4.705,与对照组差异具有统计学意义.[结论]丹酚酸干预EPCs提高BMSCs移植后大鼠心肌VEGF、bFGF蛋白表达,有效改善了BMSCs向心肌分化的血管微环境.     

丹酚酸B对内皮祖细胞与骨髓间充质干细胞联合心脏移植后增殖状况的影响

目的通过丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)与骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)混合后对心肌梗死大鼠进行心脏移植,观察移植细胞的增殖情况。方法密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;免疫细胞化学法(CD34、CD133、CD44)分别鉴定2种细胞。采用左冠状动脉结扎法制作大鼠急性心肌梗死模型。丹酚酸B最佳药物浓度(8μg/mL)预处理EPCs,并以不同比例与BMSCs混合(EPCs/BMSCs分别为1∶1、2∶1、4∶1和8∶1),手术移植至心肌梗死区。HE和N-BT染色法检测心肌梗死面积;免疫组化法检测Ki-67的表达情况。结果与模型组(19.60%±3.23%)比较,各细胞移植组心肌梗死面积均明显下降(P<0.05),其中4∶1组(11.37%±2.18%)和8∶1组(9.23%±2.35%)效果最明显(P<0.05)。与模型组[(5.17±2.31)个/高倍视野]比较,各细胞移植组Ki-67阳性细胞数均显著增多(P<0.05),其中8∶1组阳性细胞数[(15.00±3.16)个/高倍视野]明显高于其他细胞移植组(P<0.05)。结论丹酚酸B预处理的EPCs联合BMSCs进行心脏移植,能够减少大鼠心肌梗死面积,提高BMSCs在梗死周边和缺血局部的增殖。并且随着EPCs移植比例的增加,梗死面积逐渐减少,增殖表达逐渐增强。     

丹酚酸B预处理EPCs联合BMSc移植对AMI大鼠心功能的影响

[目的]通过建立大鼠急性心肌梗死模型,将中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)按不同比例与骨髓基质细胞(BMsc)进行混合后注射至缺血局部,观察细胞移植后大鼠急性心肌梗死模型心功能的改善情况.[方法]应用密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;采用结扎大鼠左冠状动脉前降支,制作大鼠急性心肌梗死模型.丹酚酸B最佳药物浓度处理的EPCs,以不同比例(1:1,2:1,4:1,8:1)与BMSc混合,在大鼠心肌梗死区周边分5点注射.[结果]各细胞移植组均能不同程度的改善心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能.超声心动图结果:同-时间细胞移植组均能不同程度的改善心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能,与模型组相比,4:1组、8:1组左室射血分数及心输出量明显升高(P<0.05).[结论]丹酚酸B预处理的EPCs联合BMSc的移植促进了AMI大鼠左室功能的恢复.     

丹酚酸B干预内皮祖细胞对骨髓间充质干细胞心脏移植后存活的影响

目的:观察丹酚酸B(SalB)预处理的内皮祖细胞(EPCs)不同比例与骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合心脏移植后BMSCs的存活状况。方法:通过结扎左冠状动脉复制大鼠急性心肌梗死模型;密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs,免疫细胞化学法鉴定细胞;丹酚酸B最佳药物浓度处理的EPCs以不同比例与5-溴脱氧尿核苷(Brdu)标记的BMSCs混合,移植至心肌梗死区。4周后,硝基四氮唑蓝(N-BT)染色法测算心梗面积;免疫组化法检测Brdu的表达情况。结果:8:1组和模型组心肌梗死面积分别为(9.23±2.35)%和(19.60±3.23)%,8:1组与其他各组比较心梗面积显著缩小(P0.05)。4:1组和8:1组BMSCs阳性细胞数与其他治疗组比较,存活细胞显著增多(P0.05)。结论:丹酚酸B预处理的EPCs联合BMSCs的移植,能够提高BMSCs在梗死周边和缺血局部的存活。随着EPCs移植比例的增加,BMSCs的存活数量增多。     

丹酚酸B干预对移植骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化相关基因表达的影响

目的探讨中药单体丹酚酸B预处理对急性心肌梗塞（AMI）大鼠移植骨髓间充质干细胞（MSCs）向心肌细胞分化相关基因表达的影响。方法体外分离、培养和纯化大鼠MSCs，含0.3μg／mL丹酚酸B的低糖DMEM培养液培养MSCs24h后，结扎大鼠左冠状动脉，制作大鼠AMI模型，40只大鼠随机分为假手术组，模型组，丹酚酸B预处理细胞移植组，细胞移植组。PT-PCR检测心肌分化相关基因NKX2．5和GATA-4mRNA的表达。结果丹酚酸B预处理细胞移植4w后，NKX2．5和GATA-4mRNA表达量分别为2．256、0．524、1．567、0．287，与模型组比较差异显著。结论丹酚酸B预处理骨髓间充质干细胞移植上调了心肌分化基因NKX2．5和GATA-4mRNA的表达，有可能改善心功能。     

丹酚酸B对大鼠缺血心肌血管再生的促进作用

目的研究丹酚酸B促进缺血心肌血管生成的分子作用机制。方法制备心肌梗死大鼠模型,50只大鼠随机分为假手术组、模型组及丹酚酸B低、中、高(20、40、60mg/kg)剂量组,尾iv给药1周后,测定大鼠心肌梗死面积;免疫组化法检测大鼠心肌梗死边缘区微血管密度;试剂盒检测大鼠血清中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cTnI)和乳酸脱氢酶(LDH)的量;Western blotting法检测大鼠心肌梗死边缘区核转录因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶(HO-1)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达水平。结果与模型组比较,丹酚酸B中、高剂量组大鼠心肌梗死面积显著减少(P0.05);丹酚酸B低、中、高剂量组大鼠微血管密度显著增加(P0.05);丹酚酸B中、高剂量组大鼠血清CK-MB、LDH和cTnI水平显著下降(P0.05);丹酚酸B低、中、高剂量均可增加大鼠心肌梗死边缘区VEGF、Nrf2和HO-1蛋白水平的表达(P0.05),其中以丹酚酸B高剂量组效果最佳。结论丹酚酸B可促进大鼠缺血心肌血管再生,该作用与其增加心肌组织VEGF、Nrf2和HO-1的表达有关。     

丹酚酸B预处理内皮祖细胞在大鼠骨髓间充质干细胞分化过程中对心肌早期基因表达的影响

目的 探讨丹酚酸B预处理内皮祖细胞(EPCs)联合大鼠骨髓间充质干细胞（BMSc）移植于梗死心肌对BMSc分化过程中早期基因Nkx2-5、GATA-4 mRNA表达的影响, 从而找出能够使两种细胞达到最佳协同作用的移植方法。     

丹参通络解毒汤对骨髓干细胞移植急性心肌梗死模型大鼠NF-κB介导的炎症反应影响

目的:探讨丹参通络解毒汤对骨髓干细胞(BMSCs)移植急性心肌梗死(AMI)模型大鼠核因子-κB(NF-κB)介导炎症反应的影响。方法:80只大鼠按随机数字表法分为SH组(假手术组)、AMI组(模型组)、BMSCs组(BMSCs移植组)、DSTLJD组(丹参通络解毒汤组)、DSTLJD+BMSCs组(丹参通络解毒汤+BMSCs移植)各10只,BMSCs细胞悬液直接注入梗死区边缘心肌组织,给予中药或生理盐水灌胃,4周后采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量,免疫组化法观察心肌核因子-κB(NF-κB)蛋白表达,并用HE染色观察心肌组织形态病理变化。结果:与AMI组比较,BMSCs组、DSTLJD组、DSTLJD+BMSCs组大鼠心肌NF-κB蛋白表达明显降低,且血清炎症因子TNF-α和IL-6水平明显下降,差异有统计学意义,心肌损伤程度明显改善;DSTLJD+BMSCs组优于单纯BMSCs组、单纯DSTLJD组,差异有统计学意义。结论:BMSCs移植联合丹参通络解毒汤能够改善AMI模型大鼠的心肌损伤,减轻炎症反应,修复缺血心肌,其机制可能与调节NF-κB介导的炎症反应有关。     

黄芪多糖对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

[目的]探讨黄芪多糖对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其可能的机制。[方法]48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪多糖低剂量组(300 mg/kg)和黄芪多糖高剂量组(600 mg/kg)。采用冠状动脉结扎法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。观察心肌形态学变化,测定心肌梗死面积,血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量,和心肌组织中p65,IκB表达。[结果]黄芪多糖预处理可改善缺血再灌注损伤引起心肌组织的形态学变化,降低心肌梗死面积,降低p65表达,增加IκB表达。[结论]黄芪多糖对缺血心肌再灌注损伤具有一定的保护作用,其机制可能通过下调核因子-κB(NF-κB)通路,降低炎症反应有关。     

丹酚酸B对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响

[目的]研究丹酚酸B(Sal B)对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及分子机制.[方法]结扎冠脉左前降支复制大鼠心肌梗死模型,假手术组作对照,连续灌胃给药7 d.采用流式细胞术磷脂结合蛋白5(Annexin V)-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(FTTC/PI)法检测心肌细胞凋亡情况,并用实时荧光定量反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)技术检测凋亡相关调控通路的基因表达.[结果]丹酚酸B(Sal B)可以显著降低心肌细胞凋亡率.Sal B可以显著降低Bax、信号转导和转录活化因子(STAT-3)的表达,有降低白细胞介素-6(IL-6)表达的趋势.[结论]Sal B可以有效抑制心肌细胞凋亡,改善心肌梗死后的心脏状况.     

卫气营血证遣针选穴规律探索

《内经》为针刺治疗温病奠定了基础，明清时期，温病学建立了以卫气营血辨证和三焦辨证为指导，中药治疗为主要手段的新体系，而针法治疗温病无重大发展，完整的学说理论有待形成。依据《内经》及古代医家对针刺治疗温病的论述，结合现代临床应用，初步概括温病卫气营血各阶段的针法施治规律。     

基于“阳气者，精则养神”运用柴胡加龙骨牡蛎汤治疗心理睡眠疾病初思

《黄帝内经》曰：“阳气者，精则养神。”阳气失调是心理睡眠疾病发病的重要中医病机。经方柴胡加龙骨牡蛎汤可疏解三焦气机，条达一身之阳气，临床中广泛应用于各类精神心理睡眠障碍。基于《黄帝内经》重视阳气的角度，对柴胡加龙骨牡蛎汤治疗心理睡眠疾病的中医机制进行探讨，并附医案3则，以验证其临床疗效。并对痰湿及血瘀的主要兼夹证治法进行论述。     

浅谈肝气虚与失眠

伴随生活、工作、学习压力的增加,失眠的发病率逐年上升,并且情志、心理因素成为导致失眠最主要的诱因之一。而包括《黄帝内经》在内的许多古代文献都记载肝气虚可以导致情志疾病或失眠。文章就肝气虚与失眠的关系进行探讨,进而丰富肝气虚理论,为中医药治疗失眠提供理论基础。     

浅析从“瘀水”论治糖尿病肾脏病

糖尿病肾脏病是糖尿病最严重的慢性并发症之一，积极治疗糖尿病肾脏病对延长患者进入透析前时间，改善患者生活质量有重要意义。“瘀水”理论来源于《黄帝内经》，而“瘀水同病”“痰瘀互结”等系列方药见于《金匮要略》。通过古今文献阅读，文章梳理总结了“瘀水”的理论来源和发展，将《金匮要略》条文中的方药按“瘀水”症状的轻重程度分类，并拓展其临床应用，提出从“瘀水”角度论治糖尿病肾脏病，在不同病变阶段治以“活血、化瘀、通络”。     

Galen’s place in Avicenna’s The Canon of Medicine: Respect,confirmation and criticism

Galen (129–199 A.D.), an ancient Greek scholar, is one of the most influential and recognized physicians and surgeons in the history of medicine. He is one of the most influential Greek scholar in Persian medicine, who has been repeatedly cited by Iranian scholars. The purpose of this article is to describe the exact position of Galen in Avicenna’s The Canon of Medicine, the most important work of Persian medicine. In The Canon of Medicine, Galen is cited about 300 times, and Avicenna always admired and praised Galen repeatedly. Galen’s ideas were important to Avicenna, but there are also many elements of Galen’s views that Avicenna challenged or criticized. For example, Avicenna diverged from Galen’s philosophical view in medicine and rejected some of Galen’s pharmaceutical opinions and Galen’s views on the physiology of pain, the physiology of pulse, the same nature of the tendons and nerves and separation of the mind and body. Although the views of Greek scholars, especially Galen, in The Canon of Medicine have been quoted abundantly, Avicenna revised the knowledge of the ancient scholars through critical thinking and relying on observation and testing, systematized the science of medicine and introduced many ideas and innovations. As such, Europeans considered Avicenna as the most prominent physician of the Islamic Golden Age.     

从足阳明经脉与脏腑配属不同学说的探究谈对中医经典教学的启示

由足阳明与神志病症的联系出发，探究足阳明经脉与心的配属关系，探讨足阳明经脉与脏腑配属的不同学说。由此研究过程对以《内经》为代表的中医经典教学引发几点启示：①注重对中医学独特的思维方式、理论体系和理论原则的教学；②注重对中医理论形成演变过程及产生原因的阐发；③注重对《内经》中不同学说的理解和阐发。     

《医宗必读》与脏腑辨证

主要就《医宗必读》所述的病证、医论部分内容作了研究探讨，认为在内伤病证的病名确立、病因病机、脉证表现及立法用药等方面，皆重视脏腑，突出脏腑辨证，为本书的特点。《医宗必读》继承并发展了脏腑辨证理论。充实了临床应用，并为后世《中医内科学》病名的确立及证型划分奠定了基础。     

《内经》经脉二元论初探

<内经>中"经脉"实际包含两套完全不同的脉道系统,即行气之脉--十二经脉和行血之脉--血脉.气血是分离的,气即卫气,血即营血,两者各自运行于这两套不同的脉道之中.古人误将"内视"所见的行气之脉与解剖所见的行血之脉及各自脉中的气血视为一体,导致了气脉与血脉、气与血相互混淆的错误.     

基于“间者并行，甚者独行”再论吕仁和教授治疗糖尿病肾脏病经验

吕仁和教授强调临床实践应与经典学习相结合,在糖尿病及其并发症的治疗方面提倡"源于《黄帝内经》,本于临床"。糖尿病肾脏病病机复杂,病情多变,在临床治疗糖尿病肾脏病时,吕仁和教授注重常症与变症的分辨,主张在病情稳定时,应整体把握病情,治疗应标本兼顾、虚实结合;而在病情变化时,应着眼于变症,治疗应标重治标,本重治本。这种根据标本缓急灵活确定治则治法的临证经验颇合《黄帝内经》"间者并行,甚者独行"之意。文章试对吕仁和教授治疗糖尿病肾脏病的经验加以阐述,以飨同道。     

论《黄帝内经》对睛志的认识

从情志的内涵、情志病的特点、情志病的防治等方面对《黄帝内经》中有关情志理论的论述进行了总结。认为情志理论是中医学理论体系的重要组成部分,《黄帝内经》汲取了先贤有关情志认识的科学内涵,对中医情志理论形成了系统认识。