红景I号方对低氧大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响

目的：观察红景I方对低氧状态下大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响。方法：将120只SD大鼠随机分为常氧组、低氧模型组、前列腺E1组、红景I号方低剂量组、红景l号方中剂量纽、红景I号方高剂量组,每组20只,分别测定各组大鼠勃起情况、RT—PCR测定α—actin、OPN的相对表达量。结果：造模6周后,与常氧组比较,模型组勃起次数明显降低（P〈0．01）,低氧实验动物模型建立成功。与常氧组比较,低氧模型组的α—actin含量显著降低（P〈0．01）,OPN含量明显升高（P〈0．01）。与低氧模型组比较,高中低剂量的红景I号组Ot—actin含量上升（P〈0．05）,其中高中剂量组含量上升明显（P〈0．01）;OPN含量降低（P〈0．05）,其中高中剂量组含量下降明显（P〈0．01）。结论：红景I号方有抑制海绵体平滑肌细胞表型转化的作用。     

红景Ⅰ号方对低氧大鼠阴茎海绵体平滑肌纤维化的保护作用

目的:观察红景方对低氧状态下大鼠阴茎海绵体平滑肌纤维化的影响;方法:将120只SD大鼠随机分为常氧组、低氧模型组、前列腺E1组、红景Ⅰ号方低剂量组、红景Ⅰ号方中剂量组、红景Ⅰ号方高剂量组,每组20只,分别测定各组大鼠勃起情况、RT-PCR测定TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的相对表达量;结果造模6周后,与常氧组比较,模型组勃起次数明显降低(P<0.01),低氧实验动物模型建立成功;与常氧组比较,低氧模型组的TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原含量均升高(P<0.05);与低氧模型组比较,高中低剂量的红景方组TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原含量均降低(P<0.01)。结论红景Ⅰ号方有抗阴茎海绵体平滑肌细胞纤维化的作用效果,此作用可能与影响Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及TGF-β1表达有关。     

糖尿病性勃起功能障碍与阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的相关研究进展

糖尿病性勃起功能障碍（Diabetic Erectile Dysfunction,DMED）与阴茎海绵体平滑肌细胞（Corporal Cavernous Smooth Muscle Cells,CCSMC）表型转化关系密切。CCSMC表型转化是一种CCSMC由“收缩型”向“合成型”或“增殖型”转化的趋势。阴茎的勃起是神经-内分泌调节下的海绵体血流动力学变化过程,其中CCSMC的舒张在此过程中起着关键作用。CCSMC表型转化的标志性蛋白包括收缩型和合成型,前者包括α-平滑肌肌动蛋白（α-Smooth Muscle Actin,α-SMA）、平滑肌肌球蛋白重链（Smooth Muscle Myosin Heavy Chain,SMMHC）等;后者包括骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）、波形蛋白等蛋白。若收缩型蛋白表达下调或合成型蛋白表达上调,则提示CCSMC发生表型转化,反之称为逆表型转化。研究表明,DMED大鼠CCSMC中α-SMA等收缩型标志物表达下降,而OPN等合成型（增殖型）标志物上升,显示DMED可以促使CCSMC发生表型转化。DMED的发病机制包括血管病变、神经病变、阴...     

地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞 表型转化及其勃起功能的影响

目的 探讨地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化及其勃起功能的影响。方法 将60只勃起功能正常的雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、西地拉非组(5 mg·kg^-1)及地龙蛋白低、中、高剂量组(45、90、180 mg·kg^-1),每组10只。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50 mg·kg^-1)结合高脂饲料喂养建立糖尿病大鼠模型;8周后,颈部注射阿朴吗啡(APO,100μg·kg^-1),制备DMED大鼠模型。造模成功后,按剂量灌胃给药,每日1次,连续4周。测定各组大鼠造模前、造模第3天、给药4周后的血糖水平及体质量。采用多导生理记录仪测定大鼠阴茎海绵体内压(ICP)、颈动脉内压(MAP),计算ICP/MAP比值;免疫组织化学法检测阴茎海绵体中收缩型标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)和合成型标志物Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、骨桥蛋白(OPN)表达情况;RT-PCR法检测阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC、C...     

红景天苷对低氧阴茎海绵体平滑肌细胞TGF-β_1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的影响

目的:对阴茎海绵体平滑肌细胞纤维化模型进行不同浓度红景天苷干预以找出最适的抗纤维化浓度;方法:低氧(1%O2浓度)48h诱导阴茎海绵体平滑肌细胞纤维化;分别加入前列腺素E1(PGE1)0.4μg/L、红景天苷1、3、5 mg/L,未加药物组作为对照,RT-PCR分别测定各组TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的相对表达量。结果:RT-PCR结果提示红景天苷和前列腺素E1都能起到不同程度的抗纤维化作用,其中红景天苷3 mg/L与前列腺素E1的抗纤维化作用无显著差异(P>0.05),增加红景天苷的浓度不能增强其作用效果。结论:红景天苷3mg/L在体外抗阴茎海绵体平滑肌细胞纤维化的作用效果与经典药物前列腺素E1相当,可为进一步临床研究阴茎海绵体纤维化提供理论支持。     

肾病Ⅰ号方对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的影响

目的:观察肾病Ⅰ号方对肾纤维化大鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、UUO模型组、洛丁新组和肾病Ⅰ号方组,每组6只。采用单侧输尿管结扎的方法制备大鼠肾纤维化模型。假手术组和UUO模型组每日予2 m L生理盐水灌胃,洛丁新组按洛丁新片1.67 mg·kg~(-1)·d~(-1)给药,肾病Ⅰ号方组按18.75 g·kg~(-1)·d~(-1)给药。灌胃14 d后处死大鼠,采集血清检测尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血肌酐(serum creatinine,SCr);取肾组织行HE染色评价肾小管间质纤维化损伤程度;采用免疫组织化学染色方法检测α-SMA、COL-Ⅳ、TGF-β1在肾组织中的表达情况;免疫印迹试验(Western blot)检测α-SMA相对蛋白表达量。结果:与模型组比较,洛丁新组、肾病Ⅰ号方组大鼠的SCr,BUN明显下降(P<0.05),肾组织α-SMA、COL-Ⅳ、TGF-β1表达量下降显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:肾病Ⅰ号方对肾纤维化具有一定改善作用,其作用机制可能是通过下调α-SMA、COL-Ⅳ、TGF-β1的表达,从而达到肾脏保护的作用。     

绞股蓝总苷逆转胆固醇诱导的血管平滑肌细胞表型转化

目的：研究绞股蓝总苷（Gypenosides,GP）对胆固醇所致人血管平滑肌细胞（Human Vascular Smooth Muscle Cells,HVSMCs）表型转化的影响。方法：体外培养人VSMCs株,分别用1.0、10.0、100.0μg?mL^-1的GP预处理1h后,再加入50.0mg?L^-1的胆固醇处理48h。透射电镜观察细胞超微结构改变;Western blot法检测VSMCs中α-平滑肌肌动蛋白（Smooth Muscle alpha-Actin,α-SMA）、平滑肌22α（Smooth Muscle 22 alpha,SM22α）及表皮调节素（Epiregulin）蛋白表达;实时定量PCR检测VSMCs中生长抑制同源基因（Growth arrest-specific homeobox,Gax）基因的表达。结果：与正常对照组比较,胆固醇组各指标差异均有统计学意义（P<0.01）;与胆固醇组比较,10.0、100.0μg?mL^-1GP可逆转胆固醇所致细胞超微结构的改变,增加细胞收缩表型标志蛋白α-SMA、SM22α的表达及减少合成表型标志蛋白Epiregulin的表达（P<0.05）,并能减少胆固醇所致的细胞增殖（P<0.05）。GP可逆转胆固醇所致的转录因子Gax的减少（P<0.05）。结论：GP可逆转胆固醇所致的VSMCs表型转化,并可能与增加转录因子Gax的表达有关。     

大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞的原代培养

目的:探讨SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞体外培养的方法。方法:采用组织块培养法进行培养,观察其形态。结果:大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞为梭形,呈长轴平行排列,体外贴壁快,时间约需4～5天,能够在合适的条件下生存。结论:大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞原代培养简单可行,对研究阴茎勃起及ED机制有重要意义。     

清热益气化瘀通络方对糖尿病肾病大鼠足细胞表型转化的作用

目的探讨清热益气化瘀通络方对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞表型转化即上皮-间质细胞转分化的作用。方法将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组、糖尿病肾病组、清热益气化瘀通络组、厄贝沙坦组,每组10只。除正常组大鼠外,其余组大鼠均采用腹腔注射链脲佐菌素方法制作DN模型。造模成功后,清热益气化瘀通络组和厄贝沙坦组给予相应药物灌胃,正常组和糖尿病肾病组给予等量生理盐水灌胃,均连续12周。灌胃结束后,检测各组大鼠血糖、血肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白定量,应用实时定量RT-PCR法检测肾皮质中Wilms肿瘤抑制因子(WT1)、钙黏蛋白(P-Cadherin)、结蛋白(desmin)mRNA表达情况。结果实验结束时,各造模组的血糖水平均明显高于正常组(P均0.05),但各造模组间血糖水平比较差异均无统计学意义(P均0.05);各造模组的24 h尿蛋白定量也均明显高于正常组(P均0.05),但厄贝沙坦组和清热益气化瘀通络组24 h尿蛋白定量均明显低于糖尿病肾病组(P均0.05),且清热益气化瘀通络组明显低于厄贝沙坦组(P均0.05)。WT1 mRNA表达(2-△Ct)及相对定量(2-△△Ct)结果显示从高到低依次为正常组、厄贝沙坦组、清热益气化瘀通络组、糖尿病肾病组,但4组间比较差异均无统计学意义(P均0.05);正常组、厄贝沙坦组、清热益气化瘀通络组P-Cadherin mRNA表达(2-△Ct)及相对定量(2-△△Ct)均明显高于糖尿病肾病组(P均0.05),desmin mRNA表达(2-△Ct)及相对定量(2-△△Ct)均明显低于糖尿病肾病组(P均0.05),但3组间比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论清热益气化瘀通络方可增加足细胞P-Cadherin表达而降低desmin表达,具有拮抗糖尿病肾病大鼠足细胞表型转化的作用。     

2-甲氧基肉桂醛对PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞表型转化的影响

目的：研究2-甲氧基肉桂醛（2-MCA）对大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖、迁移及表型转化的影响。方法：从大鼠主动脉中提取原代VSMCs体外培养，用10 ng/mL的血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)和不同浓度2-MCA处理细胞24 h，将其分为对照组、PDGF-BB组和PDGF-BB+2-MCA组。采用CCK8法检测药物毒性及细胞增殖情况，划痕实验及Transwell小室检测细胞迁移情况，Western blot法检测SMMHC、SMTN、OPN蛋白表达情况。结果：与对照组比较，PDGF-BB能够明显促进VSMCs增殖（P <0.000 1）和迁移（P <0.01），并且使OPN表达增多，SMMHC和SMTN表达减少（P <0.05）;2-MCA干预后，VSMCs增殖和迁移均减少（P <0.05）,SMMHC和SMTN表达增多，OPN表达减少（P <0.05）。结论：2-MCA能够抑制PDGF-BB诱导的VSMCs表型转化，进而抑制其增殖和迁移。     

银杏叶提取物(EGb761)通过调控AMPK/KLF4途径抑制血管平滑肌细胞表型转化

目的探讨银杏叶提取物(EGb761)对血小板源生长因子(PDGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的影响及其机制。方法体外培养原代VSMCs,使用20 ng·mL^-1的PDGF诱导VSMCs表型转化,采用MTT法和划痕实验检测不同浓度(1、10、100μg·mL^-1)EGb761对VSMCs增殖和迁移的作用;采用免疫荧光和Western blot分别检测VSMCs肌丝排列情况和表型转化相关蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、calopnin、骨桥蛋白(OPN)以及AMPK/KLF4通路蛋白表达的改变。结果与对照组相比,PDGF诱导VSMCs增殖和迁移明显增强,而EGb761呈浓度依赖性抑制PDGF诱导的VSMCs增殖和迁移;与对照组相比,PDGF组细胞肌丝F-actin排列紊乱、荧光减弱;α-SMA、calponin表达减弱,而OPN表达增强;PDGF+EGb761组细胞肌丝F-actin排列较整齐、荧光较强;α-SMA、calponin表达增强,OPN表达减弱,且呈浓度依赖性。此外,与对照组相比,PDGF能明显诱导AMPK磷酸化水平增加和KLF4表达上调,EGb761呈浓度依赖性抑制AMPK/KLF4通路的激活。使用AMPK通路抑制剂compound C抑制AMPK/KLF4通路后,EGb761对PDGF介导的VSMCs表型转化的抑制作用得到加强;反之,使用AMPK通路激活剂AICAR激活AMPK/KLF4通路后,EGb761对介导的VSMCs表型转化的抑制作用得到逆转。结论EGb761通过抑制APMK/KLF4通路拮抗PDGF诱导的VSMCs表型转化。     

番茄红素对牛胸主动脉平滑肌细胞增殖的作用及作用机制

目的：研究番茄红素对牛胸主动脉平滑肌细胞增殖的作用及作用机制。方法：采用组织块法体外培养牛胸主动脉平滑肌细胞,以含10%小牛血清的培养基制备牛胸主动脉平滑肌细胞增殖模型。细胞分为正常组、阴性对照组、模型组及1、0.1和0.01μmol·L^-1三个不同浓度的番茄红素实验组。实验采用MTT法测定牛胸主动脉平滑肌细胞的增殖活性,采用流式细胞术测定细胞周期分布,并测定了细胞内的SOD活性和MDA含量。结果：番茄红素在三个实验浓度下都能显著抑制血管平滑肌细胞的增殖。一方面,番茄红素抑制了G1期细胞进入S期;另一方面,番茄红素在1和0.1μmol·L^-1的浓度下,能明显增强细胞中的SOD活性,同时,在三个给药浓度下,细胞内的MDA含量都显著降低。这些作用都具有浓度依赖性,并且与模型组比较均有统计学差异。结论：番茄红素对牛胸主动脉平滑肌细胞的增殖有抑制作用,并且这种抑制作用可能与它能够抑制细胞进程和它的强抗氧化性能够抑制细胞中的脂质过氧化和氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）的形成有关。它有望成为防治动脉粥样硬化的一种新的药物。     

中药对血管平滑肌细胞的影响

整理和分析中药对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的影响。血管疾病对患者的危害较大,VSMC的表型转化、过度增殖和迁移是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)、血管成形术后再狭窄和高血压等血管疾病形成的主要环节,故研究中药对VSMC的调节作用对血管疾病的防治意义重大。对中药促使VSMC表型转化、抑制细胞异常增殖和迁移及其分子机制、基础动物实验等方面的研究文献报道进行总结,并对血管平滑肌细胞与内皮细胞、内皮祖细胞及巨噬细胞之间的关系进行分析。结果表明,中药在AS等血管疾病的防治中具有良好的效果,但由于其成分复杂,作用机制难以明确、质量难以控制及毒副作用限制了其在临床中的应用,故结合中药血清药理学等方法,加强中药活性单体化合物对VSMC调节作用的深入研究或将给血管疾病的防治带来新的希望。     

冠心舒通胶囊及其各单味药对心肌细胞和主动脉平滑肌细胞损伤的保护作用机制研究

目的:探讨冠心舒通胶囊及其各单味药对体外培养乳鼠心肌细胞和主动脉平滑肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤以及细胞增殖的影响.方法:用MTT比色法,考察广枣提取物、丹参提取物、天竺黄水提物、天竺黄醇提物、冰片和胶囊内容物(0.01,0.05,0.10,0.20 μg·L-1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞和主动脉平滑肌细胞增殖的影响.取原代培养的乳鼠心肌细胞和主动脉平滑肌细胞,建立H/R细胞损伤模型,实验分为正常细胞对照组(NC)、模型组(H/R)、以上各给药组(0.01,0.05,0.10 μg· L-1),给药24 h后测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)的水平.结果:与正常组比较,模型组细胞存活率明显降低,LDH漏出量增加、MDA含量增加、NO含量减少,NOS活性降低,SOD活性降低;与模型组比较,给药组可明显提高细胞存活率,提高细胞内SOD活性,增加NO含量,减少LDH漏出量和MDA含量,提高NOS活性.结论:冠心舒通胶囊及其各单味药对H/R损伤的心肌细胞和主动脉平滑肌细胞具有保护作用,其机制与抗脂质过氧化和舒张血管以及抑制细胞增殖有关.     

沙棘对高脂血清培养平滑肌细胞的保护作用

首次从亚细胞水平证实沙棘与维生素E相似,对高脂血清损伤的干滑肌细胞有如下的保护作用:1.降低细胞内脂质过氧化物含量;2.减轻细胞膜的损伤;3.保护细胞健康生长并促其增生。     

芎芍胶囊对动脉粥样硬化兔血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究芎芍胶囊对实验性兔动脉粥样硬化（AS）血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响,并探讨其可能的机制。     

当归散对正常和缩宫素处理大鼠离体子宫活动力的影响

目的:探索复方当归散对大鼠体外子宫平滑肌的作用及部分作用机制。方法:运用PowerLab10T生物信号记录系统,记录大鼠体外子宫平滑肌的活动,采用振幅、频率/周期、基线和活动力变化为观察指标,探讨当归散水提取物对子宫平滑肌自主收缩运动的影响,初步探索其治疗先兆流产的作用机制。结果:当归散水提取物能明显抑制子宫平滑肌的收缩振幅和基线,显著降低其活动力,均具有统计学意义。缩宫素能明显抬高大鼠离体子宫平滑肌收缩的基线并且缩短收缩周期/增加收缩频率,差异有显著性意义;中药当归散可使缩宫素引起的变化恢复至离体子宫正常收缩水平,使收缩波形的振幅、频率/周期和基线以及活动力与正常离体子宫平滑肌收缩各项指标无显著性差异。结论:当归散水提取物能抑制大鼠体外子宫平滑肌自主收缩,并拮抗缩宫素引起的兴奋性收缩,为探索当归散安胎作用机制提供了客观依据。