铁皮石斛总生物碱含量变异规律

目的:全面了解不同种质、不同采收年限铁皮石斛药材总生物碱含量及其变异规律,为铁皮石斛真伪鉴别与优质药材培育提供依据。方法:采集铁皮石斛人工栽培骨干基地一至三年生铁皮石斛17个种质41个样品,以及市售不同价位枫斗药材11个样品;采用酸性染料比色法测定总生物碱含量。结果:人工栽培的铁皮石斛与市场购买的铁皮枫斗药材总生物碱在0.019 0%～0.043 0%;浙江省11个铁皮石斛种质一年生、二年生、三年生样品平均总生物碱为0.025 3%,0.027 0%,0.032 6%,云南产一年生铁皮石斛平均总生物碱为0.034 3%。结论:不同种质、年龄的铁皮石斛总生物碱含量差异很大,并且总生物碱含量随着生长年限的增加而增加,云南产铁皮石斛总生物碱明显高于浙江产铁皮石斛,但正宗的铁皮石斛总生物碱含量具有明显限量范围,总生物碱含量明显偏离限量范围的样品可以基本确定为非铁皮石斛,总生物碱含量在此范围的样品必须结合多糖含量与其他活性化学组分才能真正辨别铁皮石斛药材的真伪与优劣。     

人工栽培铁皮石斛多糖含量变异规律

目的:全面了解人工栽培铁皮石斛药材多糖质量分数,以及种质、采收年限等因素与多糖质量分数的关系,为优质铁皮石斛药材培育提供依据.方法:采集浙江铁皮石斛人工设施栽培骨干基地(产量占全国90%以上)11个种质一至三年生(生理年龄)的33个样品,并分别记载其形态特征;采用苯酚-硫酸比色法测定铁皮石斛多糖质量分数.结果:全国铁皮石斛骨干企业生产的二年生铁皮石斛其多糖平均质量分数达34.47%(25.63%～41.65%);不同种质、生理年龄的铁皮石斛多糖质量分数存在显著差异,5号种质多糖质量分数最低,一年生、二年生、三年生多糖质量分数分别为19.77%,25.63%,11.83%,10号种质最高,一年生、二年生、三年生多糖质量分数分别为33.31%,41.35%,28.39%.结论:全国人工栽培骨干基地生产的铁皮石斛,其多糖质量分数普遍高于野生药材,种质与生长年限显著影响多糖质量分数;铁皮石斛品种选育与采收年限的控制可提高多糖质量分数,浙江产区铁皮石斛最佳采收时间为两年生冬季至三年生开花前.     

不同LED光质对陕产重楼生理特性和成分积累的影响

目的:探究发光二极管(LED)不同光质对陕产重楼生理特性和成分积累的影响,初步揭示陕产重楼生长和次生代谢物积累所需最佳光质配比,为合理指导重楼人工种植提供理论依据。方法:以基质栽培的陕产重楼为试验材料,分别设置红光、蓝光、红光/蓝光4∶1、红光/蓝光2∶1、白光5种光质,考察不同光质处理对重楼生物量、叶绿素含量、蛋白质含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、总多糖和总皂苷含量的影响,初步揭示陕产重楼响应不同LED光质的生理机制。结果:与白光相比,红光/蓝光2∶1(2R1B)能够显著提高重楼叶片中叶绿素a、b含量,促进叶片蛋白质积累。2R1B处理30 d,叶片SOD酶活性相比对照组降低55.40%;2R1B处理20 d的重楼根茎中总多糖含量最高,为对照组的2.165倍。蓝光处理30 d的重楼根茎中总皂苷含量最高,为对照组的1.595倍。结论:综合多项指标,红光/蓝光2∶1对陕产重楼叶片中叶绿素含量、蛋白质含量和根茎中总多糖的积累具有显著的促进作用,重楼总皂苷的积累则以蓝光处理的效果为好。实际生产中应根据获取目标成分的不同合理选择最适LED光质处理。     

环境因子对铁皮石斛生长发育及药效成分含量的影响

目的:研究环境因子对铁皮石斛生长发育及药效成分含量的影响,探索其高产优质的人工栽培条件。方法:通过室内模拟正交试验,设置了不同光照、温度、湿度、营养水平的生长条件,培养4个月后,采用叶绿素荧光仪、比色法等方法测量了铁皮石斛的生物量、形态特征、叶绿素荧光参数及多糖、黄酮和生物碱的含量等指标。结果:在本次试验参数范围内,光照是影响生物量、多糖和叶绿素含量的首要因子,高光照(21 600 Lx)有利于生物量的积累,而低光照(2 400 Lx)则会增加叶绿素和多糖含量。空气湿度是影响茎粗、分蘖数、ETR_(max)、F_v/F_m和生物碱、黄酮含量的重要因子,中等水平湿度(昼/夜湿度80%/65%)有利于以上形态指标和叶绿素荧光参数,而低湿度(昼/夜湿度70%/55%)则有利于生物碱和黄酮的积累。温度是影响株高的主要因子,高温(昼/夜温度28℃/13℃)有利于株高的生长。此外,营养成分虽然显著影响了大部分的指标参数,但均不是最主要影响因子。结论:综合产量和品质分析,昼/夜温度28℃/13℃、昼/夜湿度80%/65%为铁皮石斛适宜的生长条件,但21 600 Lx高光照有利于其提高生物量,而2 400 Lx低光照则更有利于提高其多糖含量。该研究结果为人工规模化高效栽培铁皮石斛提供科学依据。     

光质对半夏生长及其药材品质的影响

以半夏为材料,采用蒽酮-浓硫酸法、考马斯亮蓝法、反相高效液相色谱法、反电位滴定法、酸性染料比色法等测量半夏在不同光质处理下的叶绿素含量、可溶性还原糖、可溶性蛋白、鸟苷、琥珀酸、生物碱等含量变化。得到结果为黄光可以促进半夏生长发育,促进块茎可溶性还原糖、总糖、生物碱及琥珀酸的合成,而蓝光促进块茎可溶性蛋白及鸟苷的合成;红、黄光提高叶绿素a,b含量,蓝光降低叶绿素a,b含量;白膜透过的光谱最均匀也最有利于叶绿素a 的合成;单光膜中,蓝膜与黄膜较有利于叶绿素a 的合成,而绿膜和红膜相对有利于叶绿素b的合成。红光下半夏的珠芽形成数最多,繁殖系数最大,说明在半夏的人工栽培中可以利用红光提高半夏的生产产量。     

不同光质对甘草苗期生长及活性成分含量的影响

目的 探究不同光质对甘草苗期生长及活性成分积累的影响特征。方法 采用白光（对照）、红光、蓝光、红蓝光（红光∶蓝光=2∶1）和蓝红光（蓝光∶红光=2∶1）5种光质处理甘草,分别在光质处理36、106 d测定甘草的生长指标,建立甘草根部12个活性成分含量的测定方法,结合聚类分析探析不同光质对甘草活性成分积累的影响特征。结果 红光促进甘草株高增长的作用较其他光质大,红光下甘草株高比对照高40.9%~45.1%;红蓝光促进甘草根部生长的作用明显,不同光质下甘草根长、根粗和根干质量增长量变化趋势一致,均为红蓝光>红光>白光>蓝红光>蓝光;不同光质处理106 d甘草的根冠比均大于处理36 d,红蓝光处理106 d甘草的根冠比最大,是对照的2.8倍。聚类分析结果表明,甘草的活性成分随不同光质处理时间的延长而增大,不同光质下甘草酸、芹糖异甘草苷、异甘草苷等9个活性成分含量随不同光质处理时间的增加呈升高趋势。红蓝光促进甘草中甘草酸、芹糖异甘草苷、异甘草苷、异甘草素、新异甘草苷、甘草素和甘草苷积累的作用较其他光质大,分别比对照高88.24%、17.39%、284.31%、156.95%、246.35%、89.06%和207.40%;蓝红光促进甘草中甘草苷、甘草素、甘草酸和异甘草素积累的作用较大,分别比对照高12.42%、3.00%、7.07%和5.41%;增加蓝光比例有利于甘草中甘草查耳酮A的积累,红光处理36 d促进山柰酚和刺甘草查耳酮的积累,处理106 d抑制以上2个成分的积累。结论 红光对甘草地上部生长有较强促进作用,红蓝光可以显著促进甘草根系的生长和生物量积累;红光和蓝光混合光质较红光或蓝光单色光质对甘草中多种活性成分积累的促进作用更大,以红蓝光处理更佳,红蓝光与甘草中异甘草素、甘草素和甘草苷的积累呈正相关。为光质在甘草次生代谢成分的定向培育应用提供参考。     

不同光质对丹参生长及有效成分积累和 相关酶活性的影响

目的:以丹参幼苗为材料,研究不同光质(白光,蓝光,红光)对其生长,有效成分积累和相关酶活性的影响.方法:不同光质处理丹参幼苗,测定相关指标,结合方差统计方法进行分析比较.结果:丹参生长及有效成分积累受不同光色影响显著,与同等PAR的白光相比较,增加蓝光(WB)处理使植株株高显著降低;增加红光(WR)处理使丹参根长、根直径、根鲜重和干重分别显著增加.丹酚酸B含量在补充蓝光与补充红光后均显著提高,而丹参酮ⅡA含量未受补充光质显著影响;蓝光处理下氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、酪氨酸氨基转移酶(TAT)和多酚氧化酶(PPO)活性显著提高;红光处理下过氧化物酶(POD)、酪氨酸氨基转移酶(TAT)和多酚氧化酶(PPO)活性显著提高.同时实验证明,种子直播幼苗比根栽苗对光色反应敏感.结论:补充红光能够显著促进丹参根系的生长,其有效成分丹酚酸B含量在补充蓝光与补充红光后显著提高,补充蓝光与补充红光能够显著提高丹参TAT和PPO活性.     

植物生长物质在铁皮石斛生长中的作用

目的:探讨植物生长物质在铁皮石斛生长发育中的作用。结果:植物生长调节剂在铁皮石斛的组织培养快繁过程中起到极其重要的作用,主要调控途径有:1通过调节铁皮石斛内源激素的变化以促进铁皮石斛的生长发育;2调节叶绿素含量及蔗糖代谢相关酶的变化来影响铁皮石斛多糖含量的积累变化;3植物生长调节剂可以提高铁皮石斛抗氧化酶的活性,以增加铁皮石斛的抗逆性作用等。讨论:运用分子生物学技术并结合铁皮石斛植物激素的变化、植物激素合成关键酶及基因表达的分析来研究铁皮石斛有效成分含量的变化规律是一条切实可行的研究道路。     

红杆铁皮石斛与青杆铁皮石斛茎不同部位主要有效成分含量测定

目的:比较西双版纳地区红杆铁皮石斛与青杆铁皮石斛茎上、中、下3个部位的多糖含量、甘露糖含量、甘露糖与葡萄糖峰面积比的差异。方法:采用苯酚-浓硫酸法测定多糖含量,柱前衍生化HPLC法测定甘露糖含量及甘露糖与葡萄糖峰面积比。结果:多糖含量,红杆铁皮石斛茎上、中部明显高于青杆铁皮石斛茎上、中部,而红杆铁皮石斛茎下部明显低于青杆铁皮石斛茎下部;甘露糖含量,红杆铁皮石斛上、中、下3个部位均明显高于青杆铁皮石斛;甘露糖与葡萄糖峰面积比,红杆铁皮石斛上、中、下3个部位均明显低于青杆铁皮石斛。红杆铁皮石斛的多糖含量、甘露糖含量及甘露糖与葡萄糖峰面积比均达到2015版《中华人民共和国药典》标准,青杆铁皮石斛仅多糖含量达到2015版《中华人民共和国药典》标准。结论:同一地区的红杆铁皮石斛与青杆铁皮石斛茎上、中、下3个部位主要有效成分含量有明显的差异,建议在临床用药过程中将红杆铁皮石斛与青杆铁皮石斛分开使用,同时将铁皮石斛按其茎上、中、下3个部位进行分级,为铁皮石斛种质资源品质评价及临床用药提供实验基础。     

霍山石斛杂交种与其亲本生长生理指标及药效成分含量的比较

目的：对霍山石斛杂交种与其亲本进行生长、生理指标及主要药效成分含量的比较，为霍山石斛种质资源改良提供理论依据。方法：叶绿素含量用无水乙醇法，光合速率用CI-310便携式光合作用测定系统测定；多糖含量用浓硫酸-苯酚比色法，总生物碱含量用溴甲酚绿酸性染料比色法测定。结果：杂交种生长量积累表现为近铜皮石斛的特性，较霍山石斛有极大优势；一年生杂交种叶绿素含量及光合速率均极显著高于其亲本；杂交种二年茎与三年茎多糖含量和总生物碱含量均与霍山石斛接近。结论：杂交种在生长和药效成分积累方面结合了2个亲本之间的优势，具有很大的开发利用前景。     

铁皮石斛附生树种对多糖含量的影响

为了揭示附生树种对铁皮石斛多糖含量的影响,通过采集野外与设施地不同树种上附生的铁皮石斛,并用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛多糖含量。结果表明,不同附生树种铁皮石斛多糖含量差异极显著,但多糖含量与附生树种树皮形态、树皮中的营养相关性不显著,而与附生树种上铁皮石斛接受的光强有关。树种通过对光照调控的生物特性对其附生的铁皮石斛多糖含量产生的影响。     

铁皮石斛良种选育进展与对策

品种是中药材规范化栽培的源头,“十五”以来,随着铁皮石斛产业的快速发展,良种需求的增加,铁皮石斛品种选育开展了大量的研究,并取得了显著成效.文章系统地阐述了铁皮石斛种质资源收集与差异性评价、良种选育理论与实践、种苗组织培养与低碳高效生产、DNA分子标记与辅助育种等进展,分析了当前良种选育中存在的主要问题,提出进一步开展良种选育的重点与关键.     

光质对灵芝生长与灵芝多糖含量的影响

目的:研究不同光质对灵芝生长发育和灵芝多糖含量的影响,为灵芝优质高产栽培提供理论依据。方法:栽培灵芝时进行不同光质处理,在灵芝不同生长发育时期观测其形态变化并测量多糖含量。结果:不同光质处理形态上弹孢前期灵芝菌盖厚度与菌盖表面环纹的数目与对照差异显著,灵芝多糖含量出现最高值时期不同。蓝色光质处理在现蕾期、开伞期、弹孢后期多糖含量均高于对照,且差异显著。绿色光质处理有助于生长末期多糖积累。不同光质处理对灵芝子实体产量与灵芝孢子粉产量均有影响。结论:对照处理灵芝子实体产量高,性状好;蓝色光质处理可以提高灵芝多糖含量。     

柱前衍生HPLC分析铁皮石斛多糖中单糖组成的变异规律

通过采集铁皮石斛不同种质、年龄及近缘种的药材,采用柱前衍生HPLC法测定多糖中的单糖组成.结果表明,铁皮石斛与近缘种间,铁皮石斛种质与年龄间各种单糖的绝对量和相对量均存在显著的差异,其中甘露糖绝对峰面积,铁皮石斛近缘种间变幅为0.854×107～10.340×107,铁皮石斛种内为1.467×107～8.475×107,一至三年生样品分别为4.411×107 (2.577 × 107～6.516×107),5.528×107 (3.179×107～8.475×107),3.601×107(1.467×107～5.888×107);甘露糖与葡萄糖比值(相对峰面积),铁皮石斛近缘种间为0.976～16.599,种内为2.679～7.831,在供试样品中只有肿节石斛、报春石斛的相对峰面积与铁皮石斛重叠.研究结果揭示了铁皮石斛多糖中的单糖组成的变异规律,通过品种选育、采收期的控制可改变铁皮石斛中单糖的组分;利用铁皮石斛甘露糖与葡萄糖的相对峰面积可排除多数铁皮石斛混淆品,为铁皮石斛质量控制、资源培育提供依据.     

光质对灵芝菌丝体生长及内源IAA代谢调控的研究

采用新型LED冷光源设置不同光质条件,动态观测灵芝菌丝体生长、内源IAA含量和其相关酶活性变化及多糖积累情况,研究光质对灵芝菌丝体生长、内源IAA水平及活性成分积累的影响,揭示光质作用于灵芝的效应及机制,为灵芝菌丝体培养提供科学的理论依据.研究发现,蓝光处理菌丝体生长稳定,多糖含量明显高于其他处理,综合优势明显;红光处理在灵芝菌丝体生长前期能显著提高其内源IAA水平,加快其生长;绿光处理菌丝体生长缓慢,鲜重少,但其折干率大.不同光质对灵芝菌丝体IAA代谢相关酶活性有显著影响:蓝光处理灵芝菌丝体IAA含量始终处于较低水平,其吲哚乙酸氧化酶(IAAO)、过氧化物酶(POD)以及色氨酸合成酶活性变化均为前期高而中后期低;黄光处理菌丝体IAA含量居中,但其IAAO、色氨酸合成酶活性最大.结果表明不同光质影响灵芝菌丝体生长,同时对其内源IAA水平也有显著影响.     

LED光源的不同光质对灵芝菌丝体生长及抗氧化酶活性的影响

目的:研究不同光质对灵芝菌丝体生长及抗氧化酶活性的影响,为灵芝菌丝体培养提供科学的理论依据.方法:采用新型半导体发光二极管(LED)光源设置不同光质处理,动态观测灵芝菌丝体生长、多糖含量及抗氧化酶活性变化.结果:蓝光处理及黑暗对照条件下灵芝菌丝体生长较快,黑暗对照条件下菌丝体形态纤细、菌落淡薄,蓝光、白光处理菌丝体粗壮、菌落浓密.白光处理菌丝体生物量积累最高,蓝光次之.绿光处理灵芝菌丝体POD酶活性波动变化较大,生长中后期显著高于其他处理.白光处理菌丝体CAT酶在生长过程中始终保持较高活性.生长前期黄光处理菌丝体SOD酶活性最高,后期黑暗对照SOD酶活性较高.前期绿光处理菌丝体多糖含量较高,生长后期蓝光处理菌丝体多糖含量显著高于其他处理.结论:光质影响灵芝菌丝体生长代谢,蓝光利于灵芝菌丝体生长代谢.     

药用植物乌头净制机制研究

目的:研究药用植物乌头净制的机制。方法:以滴定法测定总生物碱的含量;分光光度法测定酯型生物碱的含量;高效液相色谱法测定3种双酯型生物碱的含量;苯酚-硫酸分光光度法测定多糖的含量。结果:母根、子根、须根总生物碱含量分别为11.20,11.70,18.40 mg.g-1;酯型生物碱含量分别为4.41,3.33,8.24 mg.g-1;3种双酯型生物碱含量之和分别为0.90,1.07,2.18 mg.g-1;多糖含量分别为60.60,98.20,61.80 mg.g-1。结论:母根、子根、须根主要化学成分类别没有明显区别,但含量有差异;须根的3种双酯型生物碱含量之和是母根的2倍多,《中国药典》规定除去须根具有一定的科学性。