不同品种灵芝中三萜类化合物的比较研究

本研究利用HPLC对同一灵芝菌种不同生长阶段及不同品种灵芝子实体中三萜类化合物的含量和图谱进行了分析.结果表明在液体发酵7天左右的灵芝菌丝体中灵芝三萜类化合物的含量极低,而不同生长阶段的灵芝子实体中的三萜类化合物的变化较小,孢子粉中三萜类化合物的含量较子实体中低.不同品种的灵芝子实体中三萜类化合物的种类和含量存在差异,黑芝中几乎不含三萜类化合物.     

灵芝三萜类成分超声提取工艺的研究

目的 研究超声提取灵芝中三萜类成分的最佳工艺条件.方法 采用正交试验设计,用分光光度法测定灵芝中三萜类成分的含量.结果 最佳提取工艺为加40倍量甲醇,超声提取3次,每次30 min.结论 优选得到的提取工艺稳定、可行、提取率高,可用于灵芝中三萜类成分的提取.     

超临界CO_2萃取法和醇回流法提取灵芝中三萜类成分的比较

目的:比较超临界CO2流体萃取法(CO2-SFE)和醇回流提取法提取灵芝中三萜类成分的优劣。方法:通过HPLC图谱、RP-HPLC法测定的灵芝酸B含量、可见分光光度法测定的灵芝三萜含量、固形物含量等4个指标综合评价这两种提取方法。结果:超临界CO2流体萃取法和醇回流提取法这两种方法得到的三萜类成分的色谱图具有相似的峰形,灵芝三萜和灵芝酸B含量相近,固形物含量以醇回流法较高。结论:超临界CO2流体萃取法与传统的醇回流提取法提取效果相似,可以取代醇回流提取法提取灵芝子实体中三萜类成分。     

女贞子中三萜类化合物的提取纯化工艺研究进展

木犀科植物女贞子是传统中药材,药理作用十分广泛,有很高的药用价值。三萜类化合物是其发挥抗炎、降血糖、降血脂、保肝等功效的主要药效成分。查阅相关文献、资料,结合已有的女贞子三萜类化合物的研究报道,现将女贞子中三萜类化合物的提取纯化工艺的研究进展做一综述。     

灵芝三萜药理学作用研究进展

主要介绍了近5年来灵芝三萜的药理学作用的研究进展,包括抗肿瘤、抗微生物、降血脂、抗炎症反应,免疫调节等作用.使灵芝三萜的药理学作用逐渐明确,但灵芝三萜类化合物的成分和药理作用的研究仍需进一步深入.     

灵芝及其提取成分抗肿瘤研究概况

灵芝是最常用的肿瘤辅助治疗中药之一,主要配合放化疗,起到减毒增效,改善临床症状,提高患者耐受力和整体生活质量的作用,灵芝主要提取成分为灵芝多糖类和三萜类化合物,在临床应用上起到与多糖及三萜类化合物类似作用;灵芝及其主要提取成分治疗肿瘤的主要作用机理以调节细胞免疫和抑制肿瘤增殖分化为主。     

超声循环提取灵芝中三萜类化合物的研究

目的 研究超声循环技术在灵芝中三萜类化合物提取中的应用。方法 在常规提取方法的基础上，增加超声循环的处理步骤。结果 通过试验对比，超声循环提取所需各种溶剂用量减少，提取时间缩短，目的产物提取率提高了40%。与常规方法提取得到的目的产物之间存在着良好的相关性。结论 超声循环技术用于灵芝中三萜类化合物的提取具有良好的应用前景。     

灵芝三萜类化合物研究进展

灵芝Ganoderma lucidum(Lesyss ex Fr.)Karst在我国已有悠久的药用历史。灵芝化学成分种类丰富,三萜酸是灵芝体内次生代谢产物,同时也是其主要活性成分之一,具有广泛的药理活性。简要介绍了近年来灵芝三萜类化合物的研究进展,主要包括灵芝三萜种类、药理作用,生物合成途径及影响灵芝三萜类化合物积累的因素。以期为今后的灵芝三萜类化合物的开发和利用提供参考。     

灵芝三萜化合物的抗肿瘤靶点预测与活性验证

研究发现灵芝三萜类化合物具有抗肿瘤活性,但其作用靶点尚不清楚,该试验主要研究灵芝三萜类化合物的抗肿瘤活性并对其可能的作用靶点进行预测。采用Discovery Studio软件的Lib Dock模块,以灵芝子实体中的26种三萜类化合物作为配体,分别与抗肿瘤作用明确的11个靶点蛋白进行分子对接,获得对接的打分结果,评判配体与靶点蛋白受体结合的亲和力,从而进行灵芝三萜类化合物抗肿瘤的虚拟筛选,探讨可能的作用靶点。同时,MTT实验检测26种灵芝三萜类化合物对5种肿瘤细胞的抑制能力,计算IC_(50),以此反映化合物的抗肿瘤活性。对接结果表明,对接位置数目大于5,且对接得分高于100,可以作为判断化合物是否具有活性的阈值,据此筛选出8种灵芝三萜类化合物可能具有抗肿瘤活性,其中5个具有多靶点作用的三萜成分。MTT细胞实验显示,灵芝酸Y对肺癌细胞H460显示了一定的抑制活性,IC_(50)为22.4μmol·L~(-1),其次是7-oxo-ganoderic acid Z2,IC_(50)为43.1μmol·L~(-1)。其他三萜类化合物对被测肿瘤细胞株未显示活性或活性很弱。该研究建立的分子对接虚拟筛选方法可用于灵芝抗肿瘤活性成分的初步筛选,通过该方法的筛选,结合MTT细胞毒活性实验结果,发现灵芝酸Y具有抗肿瘤,尤其抗肺癌开发的潜在可能性,7-oxo-ganoderic acid Z2和ganoderon B具有一定的抑制活性,其抗肿瘤作用有待于进一步深入研究,该研究结果可为抗肿瘤药物的研制提供参考。     

微波连续抽提用于灵芝三萜类成分的分析

结合索氏提取的原理,自制了微波连续抽提装置,通过与传统方法的比较,研究了微波连续抽提法的特点和萃取效率,并将其用于灵芝三萜类成分的分析.该法的萃取条件为:以95％乙醇为萃取溶剂,微波功率200 W,微波时间14.5 min(5个循环).将上述条件下的萃取结果与传统的回流提取、索氏提取、超声提取和微波萃取法进行比较.结果,微波连续抽提和常规的微波萃取分别需要14.5,10 min即可将灵芝三萜类成分的提取量达到最高,而其他非微波提取的方法则需要几十分钟甚至上百分钟.微波萃取10 min与回流提取120 min所得灵芝三萜的量基本一致,明显高于索氏提取和超声提取法,同时又远低于微波连续抽提法.更为重要的是,由三萜提取量所占粗提物的比例可知,微波连续抽提所得提取物的纯度远远优于其他方法.微波连续抽提有效结合了微波萃取和索氏提取的优点,因此比常规的微波萃取更能将药材中的目标成分提取完全,使分析结果更为准确,为中药的成分分析提供了一种新颖的、高效、快速、可靠的样品前处理技术.同时,由于该方法提高了药材利用率,并且所得提取物具有杂质含量低,有效成分含量高的特点,也可将其用于中药成分的制备和提取工艺的研究.     

灵芝孢子粉化学成分和药理作用的研究进展及其质量标志物（Q-Marker）预测分析

灵芝孢子粉是灵芝的生殖细胞，包含灵芝所有的化学成分，主要含有灵芝三萜类、多糖类、甾体类、脂肪酸类和蛋白质类等多种化合物。灵芝孢子粉具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、保护心血管、保肝护肝等药理作用。《中国药典》2020年版对灵芝孢子粉的质量控制标准尚未明确规定，就灵芝孢子粉化学成分和药理作用研究进展进行综述，并基于质量标志物（quality marker，Q-Marker）理论，从植物亲缘性与特有性、有效性、可测性、临床应用、可入血成分等方面进行Q-Marker预测分析，初步推测多糖类、灵芝酸、甾醇类（麦角甾醇）、不饱和脂肪酸（油酸）等成分为其Q-Marker，为规范灵芝孢子粉质量研究和建立、完善灵芝孢子粉质量标准提供参考。     

女贞子中红景天苷的提取纯化工艺优选

目的:优选女贞子中红景天苷的提取、纯化工艺.方法:采用HPLC测定红景天苷含量,以红景天菅含量及浸膏得率的综合评分为指标,通过正交试验考察溶剂、料液比、时间及次数对红景天苷提取工艺的影响;通过单因素试验筛选大孔树脂型号,并优选其纯化工艺条件.结果:优选的提取工艺为加6倍量水回流提取3次,每次1h;D4020型大孔树脂纯化女贞子中红景天苷的工艺条件为上样液质量浓度0.5 g·mL-1,吸附流速1 BV·h-1,用5 BV的20％乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,减压回收,即得红景天苷粗品,其纯度达16.34％.结论:按优选的工艺条件提取、纯化后,女贞子中红景天苷含量提高了2.12倍.     

Antihepatoma Activity of the Acid and Neutral Components from Ganoderma lucidum

Ganoderma lucidum extracts or isolated components have been shown previously to acquire many potential biochemical and pharmacological activities, including cancer preventive or antitumor effects. The supercritical fluid extracts of Ganoderma lucidum (total component, TC) and its acid component (AC) and neutral component (NC), were evaluated in vitro and in vivo for their antihepatoma activities. The NC showed a conspicuous inhibitory effect on tumor growth of Heps‐bearing mice, whereas AC was less effective. The TC, NC and AC all inhibited the proliferation of BEL‐7402 cells through apoptosis pathway and cell cycle arrest. Additionally, the NC and TC induced cell cycle arrest at the G2/M phase, but the AC resulted in a marked increase in the percentage of cells at G1 phase by flow cytometry. It is suggested that NC is an indispensable effective component in terms of antihepatoma activity and its constituents need to be investigated in detail. It was found that the NC, which was detected by GC‐MS, contained fatty acids and steroids; hence, it is proposed that some compounds such as long‐chain fatty acids and steroids in the NC might also contribute to the antihepatoma activity, although the anticancer activities of G. lucidum traditionally have been considered to be associated with triterpenoids. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

光质对灵芝生长与灵芝多糖含量的影响

目的:研究不同光质对灵芝生长发育和灵芝多糖含量的影响,为灵芝优质高产栽培提供理论依据。方法:栽培灵芝时进行不同光质处理,在灵芝不同生长发育时期观测其形态变化并测量多糖含量。结果:不同光质处理形态上弹孢前期灵芝菌盖厚度与菌盖表面环纹的数目与对照差异显著,灵芝多糖含量出现最高值时期不同。蓝色光质处理在现蕾期、开伞期、弹孢后期多糖含量均高于对照,且差异显著。绿色光质处理有助于生长末期多糖积累。不同光质处理对灵芝子实体产量与灵芝孢子粉产量均有影响。结论:对照处理灵芝子实体产量高,性状好;蓝色光质处理可以提高灵芝多糖含量。     

复方灵芝孢子精油软胶囊抗疲劳耐缺氧能力研究

目的： 研究复方灵芝孢子精油软胶囊抗疲劳、耐缺氧的药理作用。 方法： 昆明种小鼠随机分为5组,分别为复方灵芝孢子精油软胶囊低、中、高（385,770,1 540 mg·kg^-1·d^-1）3个剂量组、对照药红参醇提物400 mg·kg^-1·d^-1组、空白对照组,灌胃给药30 d后分别考察各组小鼠负重游泳、常压耐缺氧条件下的生存时间及负重游泳后小鼠血清尿素氮、乳酸脱氢酶、甘油三酯含量。 结果： 复方灵芝孢子精油软胶囊低、中、高剂量组能不同程度的加快运动小鼠血清尿素氮的清除、提高血清乳酸脱氢酶含量、减少运动后小鼠体内血清游离甘油三酯含量,显著的延长小鼠负重游泳时间（P<0.05,P<0.05,P<0.01）;中、高剂量组能显著延长小鼠缺氧条件下的生存时间（均P<0.05）。 结论： 复方灵芝孢子精油软胶囊具有抗疲劳、耐缺氧作用,是一种有效的抗疲劳中药复方制剂。     

柿叶中总三萜的提取以及熊果酸分离、纯化研究

 目的研究了柿叶中总三萜的提取以及熊果酸的分离、纯化,并确定了提取、分离及纯化的适宜工艺条件,以利于柿叶资源的开发利用。方法以总三萜得率为指标,采用溶剂提取法筛选出总三萜提取的合适工艺,以及经脱脂、除杂、结晶得到熊果酸的合适条件。熊果酸晶体用EI-MS,ESI-MS,1H-NMR和13C-NMR等方法进行了表征。结果优化的总三萜的提取精制工艺条件为:柿叶粉用石油醚(沸点60～90℃)在60℃和液固比为6的条件下,脱色除杂3次,每次2h;脱色除杂后柿叶用乙酸乙酯作为提取溶剂,在70℃和液固比为6的条件下,提取3次,每次2h,合并乙酸乙酯提取液减压蒸干得到总三萜,总三萜得率约为4.1%,纯度约为63.1%。熊果酸的分离、纯化工艺条件为:乙酸乙酯粗提物用石油醚,60℃和液固比为30的条件下,脱色除杂3次,每次30min;然后,每0.4g经石油醚脱色除杂后的乙酸乙酯提取物用40mL乙醇溶解,加入0.4g左右活性炭,30℃下脱色2次,每次20min;最后,经活性炭脱色后的乙酸乙酯提取物用乙醇结晶两次就得到熊果酸晶体。经现代谱学方法研究证明,所得晶体为熊果酸,HPLC测定熊果酸含量超过98%,总产率在0.4%左右(以干柿叶计)。结论该工艺简单易行、快捷,成本较低、产品纯度高、环境污染小,适合工业规模化提取总三萜及生产熊果酸。     

LED光源的不同光质对灵芝菌丝体生长及抗氧化酶活性的影响

目的:研究不同光质对灵芝菌丝体生长及抗氧化酶活性的影响,为灵芝菌丝体培养提供科学的理论依据.方法:采用新型半导体发光二极管(LED)光源设置不同光质处理,动态观测灵芝菌丝体生长、多糖含量及抗氧化酶活性变化.结果:蓝光处理及黑暗对照条件下灵芝菌丝体生长较快,黑暗对照条件下菌丝体形态纤细、菌落淡薄,蓝光、白光处理菌丝体粗壮、菌落浓密.白光处理菌丝体生物量积累最高,蓝光次之.绿光处理灵芝菌丝体POD酶活性波动变化较大,生长中后期显著高于其他处理.白光处理菌丝体CAT酶在生长过程中始终保持较高活性.生长前期黄光处理菌丝体SOD酶活性最高,后期黑暗对照SOD酶活性较高.前期绿光处理菌丝体多糖含量较高,生长后期蓝光处理菌丝体多糖含量显著高于其他处理.结论:光质影响灵芝菌丝体生长代谢,蓝光利于灵芝菌丝体生长代谢.     

光质对灵芝菌丝体生长及内源IAA代谢调控的研究

采用新型LED冷光源设置不同光质条件,动态观测灵芝菌丝体生长、内源IAA含量和其相关酶活性变化及多糖积累情况,研究光质对灵芝菌丝体生长、内源IAA水平及活性成分积累的影响,揭示光质作用于灵芝的效应及机制,为灵芝菌丝体培养提供科学的理论依据.研究发现,蓝光处理菌丝体生长稳定,多糖含量明显高于其他处理,综合优势明显;红光处理在灵芝菌丝体生长前期能显著提高其内源IAA水平,加快其生长;绿光处理菌丝体生长缓慢,鲜重少,但其折干率大.不同光质对灵芝菌丝体IAA代谢相关酶活性有显著影响:蓝光处理灵芝菌丝体IAA含量始终处于较低水平,其吲哚乙酸氧化酶(IAAO)、过氧化物酶(POD)以及色氨酸合成酶活性变化均为前期高而中后期低;黄光处理菌丝体IAA含量居中,但其IAAO、色氨酸合成酶活性最大.结果表明不同光质影响灵芝菌丝体生长,同时对其内源IAA水平也有显著影响.     

不同产地赤芝药材的质量分析

目的 对不同产地批次赤芝Ganoderma lucidum进行全面的质量评价，为灵芝药材质量标准的完善及优质赤芝原料药的筛选提供依据。方法 收集15批次各GAP基地的灵芝药材，参照《中国药典》2020年版方法及行业通用方法，考察其水分、灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物，分别采用比色法、柱前衍生高效液相色谱法（PMP-HPLC）、高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定多糖含量并进行比较；采用比色法测定三萜甾醇含量，HPLC法进行灵芝酸A一测多评；同时对15批赤芝的HPLC指纹图谱进行差异比较。结果 15批赤芝药材均符合《中国药典》2020年版的质量标准要求，指纹图谱聚类分析和主成分分析（principal component analysis，PCA）结果表明山东聊城产赤芝能明显区别于其他批次样品。结论 15批赤芝药材均符合《中国药典》质量标准，说明国内赤芝GAP基地种植质量良好；同时山东聊城产赤芝能显著区别于其他产地批次赤芝样品，主要体现在三萜甾醇等有效成分的含量更高。