六味地黄汤对实验性骨关节炎兔软骨细胞凋亡与增殖的体内实验

目的：探讨六味地黄汤对实验性膝骨关节炎兔软骨细胞增殖、凋亡的影响。方法：20只新西兰兔用Hulth法造骨关节炎动物模型，随机分成空白对照组、实验组；实验组用六味地黄汤灌胃，空白对照组用生理盐水，治疗第4、8、12、2，4周后每组各取2只动物，用亚硝酸盐还原酶法测定关节滑液NO水平，关节软骨组织HE染色，光镜观察形态学变化、电镜观察软骨细胞内结构变化及原位末端标记（TUN-EL）法观察软骨细胞凋亡病理改变，进行组织病理学评估。结果：空白对照组NO活性在不同时期均高于实验组（8周，P〈0．05；12、24周，P〈0．01），两组间比较有显著性差异（P〈0．05，0．01）；实验组的关节软骨病理变化总积分、软骨细胞病理改变积分和软骨表层病理改变积分均明显低于空白对照组（P〈0．05）；实验组的软骨细胞凋亡指数与对照组的软骨细胞凋亡有显著性差异（P〈0．05），与关节液中NO含量显著相关。结论：六味地黄汤对兔膝关节实验性骨关节炎软骨退变具有保护作用，通过NO诱导途径减少软骨细胞的凋亡，可能是其作用机制之一。     

六味地黄汤对实验性骨关节炎兔软骨细胞凋亡与增殖的体内实验

目的:探讨六味地黄汤对实验性膝骨关节炎兔软骨细胞增殖、凋亡的影响。方法:20只新西兰兔用Hu lth法造骨关节炎动物模型,随机分成空白对照组、实验组;实验组用六味地黄汤灌胃,空白对照组用生理盐水,治疗第4、8、12、24周后每组各取2只动物,用亚硝酸盐还原酶法测定关节滑液NO水平,关节软骨组织HE染色,光镜观察形态学变化、电镜观察软骨细胞内结构变化及原位末端标记(TUNEL)法观察软骨细胞凋亡病理改变,进行组织病理学评估。结果:空白对照组NO活性在不同时期均高于实验组(8周,P<0.05;12、24周,P<0.01),两组间比较有显著性差异(P<0.05,0.01);实验组的关节软骨病理变化总积分、软骨细胞病理改变积分和软骨表层病理改变积分均明显低于空白对照组(P<0.05);实验组的软骨细胞凋亡指数与对照组的软骨细胞凋亡有显著性差异(P<0.05),与关节液中NO含量显著相关。结论:六味地黄汤对兔膝关节实验性骨关节炎软骨退变具有保护作用,通过NO诱导途径减少软骨细胞的凋亡,可能是其作用机制之一。     

海桐皮汤熏蒸对兔实验性膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的:探讨海桐皮汤熏蒸对实验性兔膝关节骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法:取45只新西兰大白兔,随机取10只作为正常对照组(A组),其余35只采用Hulth方法造模,1周后取30只元膝关节感染实验兔,随机分为3组(每组10只):并随机分为模型组(B组)、水蒸气熏蒸组(C组)和海桐皮汤熏蒸组(D组)。分别采取相应的处理方法4周后处死取材,采用流式细胞术检测软骨细胞凋亡状况。结果:正常组兔关节软骨细胞凋亡率为18.57%,模型组29.41%,水治疗组和药物治疗组分别为28.26%、21.09%。与正常组相比,模型组、水蒸气熏蒸组、海桐皮汤熏蒸组有显著差异(P<0.05);与模型组相比水蒸气熏蒸组、海桐皮汤熏蒸组有显著差异(P<0.05);与水蒸气熏蒸组相比海桐皮汤熏蒸组有显著差异(P<0.05)。结论:海桐皮汤熏蒸可显著减少实验性兔膝关节骨性关节炎软骨细胞凋亡,从而延缓关节软骨的退变,促进软骨修复的作用。     

复元胶囊对实验性骨关节炎软骨细胞凋亡和P53、caspase-3 mRNA表达的影响

目的:观察复元胶囊对大鼠膝骨关节炎模型软骨细胞凋亡及P53、caspase-3 mRNA表达的影响,探讨其治疗骨关节炎的作用机制。方法:采用Hulth法建立大鼠膝骨关节炎动物模型,4 w后给与壮骨关节丸、复元胶囊灌胃。8 w后取大鼠膝关节软骨作透射电镜观察细胞超微结构,原位末端标记法(TUNEL法)检测软骨细胞凋亡,逆转录/聚合酶链反应(RT-PCR)法检测P53、caspase-3 mRNA的表达。结果:复元胶囊能抑制骨关节炎软骨细胞过度凋亡,减少凋亡基因P53和凋亡执行因子caspase-3 mRNA的表达。结论:复元胶囊通过减少凋亡基因P53和凋亡执行因子caspase-3 mRNA的表达而抑制骨关节炎软骨细胞的凋亡。     

川芎嗪对骨关节炎兔软骨细胞增殖与凋亡的影响及其机制研究

目的探讨川芎嗪对骨关节炎兔软骨细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法选取12只兔建立骨关节炎动物模型,体外分离培养软骨细胞,并分为模型组、川芎嗪低剂量组、川芎嗪中剂量组、川芎嗪高剂量组,另选取3只正常兔体外分离培养软骨细胞作为正常对照组。模型组和正常对照组给予10%DMEM培养液进行培养,而川芎嗪低、中、高剂量组分别给予含10μg/m L、20μg/m L、30μg/m L川芎嗪注射液的培养液进行培养。采用流式细胞仪测定兔软骨细胞周期及增殖指数,采用TUNEL法检测细胞凋亡情况,采用MTT法检测软骨细胞活性,采用Western-blot法检测软骨细胞中bax、bcl-2、Caspase-3蛋白表达情况。结果模型组G0/G1期细胞所占比例及PI均明显低于正常对照组(P均<0.05),S期及G2/M期细胞所占比例均明显高于正常对照组(P均<0.05);川芎嗪中、高剂量组G0/G1期细胞所占比例、PI均显著高于模型组和川芎嗪低剂量组(P均<0.05),而S期及G2/M期细胞所占比例均显著低于模型组和川芎嗪低剂量组(P均<0.05)。川芎嗪中、高剂量组软骨细胞凋亡率均明显低于模型组(P均<0.05),川芎嗪高剂量组显著低于低剂量组(P<0.05),而川芎嗪高剂量组与正常对照组比较差异无统计学意义;川芎嗪中、高剂量组软骨细胞活性均显著高于模型组(P均<0.05),川芎嗪高剂量组显著高于低剂量组(P<0.05),而川芎嗪高剂量组仍然低于正常对照组(P<0.05)。模型组软骨细胞中bax及Caspase-3表达量均明显高于正常对照组(P均<0.05),bcl-2表达量显著低于正常对照组(P<0.05);而川芎嗪各剂量组软骨细胞中bax及Caspase-3表达量均明显低于模型组(P均<0.05),bcl-2表达量均明显高于模型组(P均<0.05),且川芎嗪高剂量组各指标改善情况均显著优于低剂量组(P均<0.05)。结论川芎嗪能够促进软骨细胞的增殖,同时还能通过上调抗凋亡因子bcl-2表达,下调软骨细胞促凋亡因子bax以及Caspase-3表达而抑制软骨细胞的凋亡。     

骨舒汤对实验性膝骨关节炎家兔软骨细胞凋亡的影响

目的观察骨舒汤对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响,探讨其治疗膝骨关节炎的机制。方法将48只家兔随机分为4组,每组12只,分别为空白组、模型组、壮骨关节丸组、骨舒汤组,造模成功后,术后第4、6、8 W每组各处死4只兔,进行关节软骨细胞凋亡率观察。结果骨舒汤组软骨细胞凋亡指数明显低于OA模型组。结论骨舒汤可以明显抑制骨关节炎中软骨细胞的凋亡率,达到保护软骨细胞,延缓发病的目的。     

中医药干预骨关节炎软骨细胞凋亡研究进展

通过查阅和整理文献,总结近10年来中医药治疗骨关节炎干预软骨细胞凋亡的研究进展。     

补肾活血方对膝骨关节炎大鼠MMP-3、MMP-13及OPG/RANKL轴的影响

目的:检测不同质量分数的补肾活血方对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠模型膝关节软骨组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体活化受体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)轴相关因子mRNA表达的影响,探讨补肾活血方对KOA大鼠模型骨重建及治疗作用的机制。方法:采用随机数字表法将48只Wistar大鼠分为正常对照组,模型对照组,依托考昔片组,补肾活血方中药小、中、大剂量组6组,每组8只。采用木瓜蛋白酶膝关节腔内注射法制备KOA大鼠模型。确认造模成功后,依托考昔片组给予依托考昔3.125μg/g混悬液灌胃,补肾活血方小、中、大剂量组分别给予补肾活血方0.52,1.04,2.08 g/kg混悬液灌胃,正常对照组和模型对照组给予同体积蒸馏水灌胃,1d1次,连续4周。给药结束后,对KOA模型鼠进行关节软骨退行性改变组织学分级评分(Mankin′s评分),采用实时荧光定量核酸扩增检测系统检测关节软骨内MMP-3、MMP-...     

兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡调控基因的研究

目的:观察凋亡调控基因bcl-2在骨关节炎(OA)关节软骨中的表达,试图探讨bcl-2在OA发病中的作用机制。方法:参照Hulth的造模方法于无菌条件下,以健康青紫兰家兔左侧膝关节制作OA动物模型,并以右侧膝关节作为正常对照,应用免疫组织化学方法对第8周兔膝关节软骨中bcl-2进行检测。结果:OA组关节软骨bcl-2的阳性表达强度显著高于正常组,主要分布于关节软骨的浅层和中层,但OA组关节软骨深层胶原化区中bcl-2表达无明显变化。结论:OA组关节软骨细胞凋亡调控基因bcl-2表达较正常对照组明显增强,因此bcl-2的调节作用可能是OA病理过程进展缓慢的一个重要原因。     

膝痹康含药血清对兔软骨细胞中MMP-3的影响

目的：探讨膝痹康对IL-1诱导的兔软骨细胞中MMP-3蛋白含量及MMP-3mRNA表达的影响。方法：把软骨细胞随机分为空白组（A组）;模型组（B组）及低、中、高剂量组（C、D、E组）并加以培养、干预。用酶联接免疫吸附剂测定（ELISA）法检测细胞MMP-3蛋白含量,再用两步法RT-PCR法检测MMP-3mRNA的表达水平。结果：空白对照组正常关节软骨细胞MMP-3蛋白含量及MMP-3mRNA表达量低于模型对照组,低、中、高剂量组组MMP-3蛋白含量及MMP-3mRNA表达量相对于模型组明显降低（P〈0.01）。其中中剂量组MMP-3mRNA表达量最低（P〈0.01）。结论：膝痹康含药血清可以抑制MMP-3的蛋白含量和MMP-3mRNA的表达水平,这可能是膝痹康中药延缓膝OA软骨退变,防止骨性关节炎的重要作用机制之一。     

中风病急性期痰热证与MMP-1和MMP-3表达的影响＊

目的 研究缺血性中风病急性期痰热证与MMP-1和MMP-3表达的相关性，其相关性研究能否形成微观辨证的依据。方法 筛选发病7天内就诊于中国中医科学院西苑医院的缺血性中风痰热证患者45名，非痰热证44名，对每例患者分别作出痰湿证、气虚证、血瘀证、内风证、阴虚证和内火证的量化诊断，并用ELISA法检测血清中MMP1和MMP-3的含量。结果 痰热证组和非痰热证组MMP-1和MMP-3的表达均无明显差异。结论 MMP-1和MMP-3不能作为痰热证的微观指标，需进一步寻找微观指标对中风病痰热证证候诊断及疗效评价提供更加客观支持。     

通痹胶囊对膝骨关节炎患者关节功能及关节滑液基质金属蛋白酶-3、-9水平的影响

目的：探讨通痹胶囊对膝骨关节炎患者关节功能及关节滑液基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-3与MMP-9水平的影响。方法将76例膝骨关节炎患者按随机数字表法分为2组各38例。对照组口服盐酸氨基葡萄糖胶囊,观察组在对照组基础上加服通痹胶囊。2组均治疗12周。采用西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数评价关节功能,酶联免疫吸附测定法检测关节滑液中MMP-3、MMP-9水平。治疗前后分别检测关节滑液中MMP-3、MMP-9水平,评价关节功能。结果观察组总有效率为94.74%(36/38),对照组为78.95%(30/38),2组比较差异有统计学意义(χ2＝4.146,P＜0.05)。治疗后,观察组关节滑液中 MMP-3[(67.58±22.35)ng/ml 比(93.51±27.84)ng/ml,t＝4.477]和MMP-9[(36.24±10.56)ng/ml 比(51.87±12.35)ng/ml,t＝5.930]水平均较对照组显著降低(P 均＜0.01)。结论通痹胶囊可改善膝骨关节炎患者关节功能,其机制可能与降低关节滑液MMP-3、MMP-9水平有关。     

中西医结合对脑梗死血清CRP、MMP-3及MMP-9水平影响研究

目的：探讨中西医结合对脑梗死患者血清CRP、MMP-3及MMP。9水平影响。方法：选取2009年9月～2010年10月于南方医科大学附属珠江医院神经内科进行治疗的60例脑梗死患者为研究对象,将其随机分为对照组（西医组）30例和观察组（中西医结合组）30例,后将两组患者治疗前后的血清CRP、MMP-3及MMP．9水平进行检测及比较。结果：经研究发现,治疗前两组患者血清CRP、MMP-3及MMP-9水平无显著性差异（P均〉0．05）,而治疗后观察组的血清CRP、MMP-3及MMP-9水平均低于对照组,经比较,P均〈0．05,均有显著性差异。结论：中西医结合对脑梗死患者血清CRP、MMP-3及MMP-9水平影响较大,对于改善患者的病情有着积极的意义,值得临床推广应用。     

电针干预佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜细胞凋亡的MMP-3、MMP-9分子调节机制

目的观察电针干预对佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜细胞凋亡和相关蛋白基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法32只雄性SD大鼠被随机分为生理盐水组、模型组、电针干预组和假电针干预组,每组8只。生理盐水组大鼠在双侧足垫部注射模拟造模,其余大鼠用弗氏完全佐剂在双侧足垫部注射造模。电针干预组大鼠予以电针干预。假电针干预组予以假电针刺激处理。HE染色观察模型大鼠踝关节炎症进展情况,Tunnel法检测模型大鼠踝关节滑膜细胞凋亡情况,RT-PCR检测踝关节滑膜的MMP-3、MMP-9的mRNA表达,Western blot检测踝关节滑膜的MMP-3、MMP-9的蛋白表达。结果HE染色显示,电针干预组大鼠的关节炎症显著轻于模型组。Tunnel法检测,电针干预可以促进关节炎大鼠的滑膜细胞凋亡。RT-PCR和Western blot检测结果显示,电针干预可以显著降低关节炎大鼠踝关节滑膜组织中的MMP-3、MMP-9 mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论电针干预可以显著减轻佐剂性关节炎大鼠的关节炎症和增殖的滑膜细胞数量,其分子机制可能和电针降低局部的MMP-3、MMP-9蛋白的表达有关。     

腹针疗法对膝关节骨性关节炎患者关节液成分的影响

目的:观察腹针疗法对膝关节骨性关炎患者关节液中MMP-3和IL-1β含量的影响及相关机制.方法:选择符合纳入标准的膝关节骨性关节炎患者51例,予以腹针规范化治疗4周,分别于治疗前、治疗后及随访4周抽取患者患膝的关节液,采用ELISA定量试剂盒测定关节液中MMP-3和IL-1β的含量.结果:腹针治疗后、随访4周时患者膝关...     

痹胶囊对实验性骨关节炎大鼠MMP-3和TIMP-1的影响

[目的]观察痹褀胶囊对实验性骨关节炎(OA)大鼠软骨、关节液及血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白抑制酶-1(TIMP-1)的影响,探讨痹褀胶囊保护关节软骨的作用机制。[方法]选Wistar大鼠,木瓜蛋白酶膝关节注射造模,痹祺胶囊灌胃治疗8周,酶联免疫吸附(ELISA)法检测软骨、关节液及血清MMP-3、TIMP-1的活性。[结果]痹祺胶囊能提高模鼠软骨TIMP-1的活性(P<0.01),降低关节液MMP-3的活性,使软骨、关节液MMP-3/TIMP-1的比值均降低(P<0.01);对血清MMP-3、TIMP-1及MMP-3/TIMP-1比值无明显影响(P>0.05)。[结论]痹褀胶囊保护关节软骨的作用可能是通过提高软骨TIMP-1的活性,降低关节液MMP-3的活性,使软骨、关节液MMP-3/TIMP-1的比值减小,从而抑制MMP-3对关节软骨基质蛋白多糖的裂解活性而起保护作用的。     

中药洗剂对兔膝骨性关节炎模型组织形态学及关节液中MMP-3的影响

目的:探讨中药洗剂对兔膝骨性关节炎(OA)模型组织形态学及关节液中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的影响。方法:将新西兰大白兔40只,雌雄不限,体质量(2.50±0.10)kg,随机分为4组:A组(正常对照组)、B组(模型对照组)、C组(中药洗剂组)、D组(扶他林软膏组),每组10只。适应性喂养7天后,B、C、D组兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成OA及滑膜炎病变模型。术中注意不刺激关节软骨及滑膜;A、B组造模成功后每天用热水袋热敷膝关节,早晚各1次,C组造模成功后用中药洗剂热敷膝关节,早晚各1次,D组造模成功后用扶他林软膏涂抹后每天用热水袋热敷膝关节,早晚各1次,以上各组均外敷右膝关节表面,每次均为40分钟,治疗8周后,测关节液中MMP-3的含量。结果:1)中药洗剂、扶他林软膏都能明显改善兔膝关节功能活动;2)模型对照组血清MMP-3含量高于正常对照组(P0.05),中药洗剂可降低关节液MMP-3水平;中药洗剂组、扶他林软膏组与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05),但中药洗剂组与扶他林软膏组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:1)中药洗剂外敷与扶他林软膏外擦对兔膝骨性关节炎均有治疗作用;2)中药洗剂可降低关节滑液中MMP-3含量,对骨性关节炎具有治疗作用。     

活血化瘀膏对早中期膝骨性关节炎关节液NO和MMP-13的影响研究

[目的]观察活血化瘀膏对早中期膝关节骨性关节炎的一氧化氮(NO)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)含量的影响及临床疗效,并与扶他林乳胶剂组做对照。[方法]将60例患者分成治疗组和对照组,活血化瘀膏为治疗组,用扶他林乳胶剂作对照,治疗1周及2周后,分别观察患者的美国特种外科医院膝关节评分(HSS)总分、疼痛积分,并进行计分对比研究,同时测定治疗组治疗前后关节液中NO和MMP-13含量,评价其临床疗效进行疗效观察。[结果]通过统计学分析,治疗组治疗1周及治疗2周后与治疗前进行HSS量表中HSS总分、疼痛积分,P0.05;治疗组按疗程治疗前后关节液中NO含量经配对T检验,P0.05。[结论]活血化瘀膏对早中期膝关节骨性关节炎有较好的治疗作用。     

中药熏洗对膝骨性关节炎患者关节滑液中MMP-3和MMP-13的影响

目的:观察中药熏洗治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效和对关节滑液中MMP-3和MMP-13的影响。方法:膝关节骨性关节炎90例,分成治疗组和对照组。分别采用补肾活血汤熏洗和热开水熏洗加双氯芬酸钠乳膏外搽治疗,观察两组患者的临床症状、体征、Lysholm's膝关节评分以及关节滑液中MMP-3和MMP-13变化。结果:两组治疗后Lysholm's膝关节评分较治疗前明显升高(P<0.01),治疗组的评分值高于对照组(P<0.01),治疗组总体优良率为93.33%,对照组总体优良率为82.22%,治疗组疗效优于对照组(P<0.01),两组治疗后关节滑液MMP-3、MMP-13水平明显下降(P<0.01),治疗组MMP-3、MMP-13下降较对照组更为明显(P<0.01)。结论:补肾活血汤熏洗治疗膝骨性关节炎疗效显著,其作用机制可能通过降低MMP-3、MMP-13的水平,减轻滑膜炎症和关节软骨的破坏,从而发挥对骨性关节炎的治疗作用。