痹痛灵颗粒对肺痹类风湿性关节炎肺组织IL-17 mRNA表达的影响

目的：观察痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠肺组织微血管密度及IL-17mRNA表达的影响。方法：建立胶原诱导大鼠类风湿性关节炎模型,通过免疫组化测量微血管密度,实时荧光PCR法测量肺组织IL-17mRNA表达量,评价痹痛灵颗粒治疗类风湿关节炎肺组织血管新生的作用机理。结果：痹痛灵颗粒可降低造模大鼠肺组织微血管密度,下调IL-17mRNA过量表达。结论：痹痛灵颗粒对胶原诱导大鼠类风湿性关节炎肺组织血管新生有一定的治疗作用,其作用机理可能与下调IL-17mRNA高表达有关。     

痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠关节滑膜组织中VEGF mRNA表达的影响

目的：观察痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠治疗作用及对关节滑膜组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）mRNA表达的影响。方法：建立Ⅱ型胶原诱导大鼠类风湿性关节炎模型，通过测量其足踝体积和关节肿胀评分，并以实时荧光PCR法检测关节滑膜组织VEGFmRNA表达量，评价痹痛灵颗粒的治疗作用。结果：痹痛灵颗粒可明显降低造模大鼠关节肿胀度和关节评分，抑制关节滑膜组织VEGFmRNA过量表达。结论：痹痛灵颗粒对胶原诱导大鼠类风湿性关节炎有一定的治疗作用，其作用机理可能是抑制关节滑膜VEGFmRNA过量表达。     

痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠原代滑膜细胞的影响

[目的]观察痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎(CIA)大鼠关节原代滑膜细胞的影响。[方法]通过测量Ⅱ型胶原诱导大鼠类风湿性关节炎模型的足踝体积和关节肿胀评分,并对CIA大鼠原代滑膜细胞增殖能力的检测及滑膜细胞培养上清液IL-1β、TNF-α含量的测定,观察痹痛灵颗粒对滑膜细胞及滑膜细胞培养上清液IL-1β、TNF-α含量的影响。[结果]痹痛灵颗粒高、中剂量组大鼠滑膜细胞增殖小于模型组,与模型组相比有显著性差异;痹痛灵颗粒高、中、低剂量组与雷公藤多苷片组的细胞培养液中IL-1β、TNF-α水平明显低于模型组,有显著差异。[结论]痹痛灵颗粒通过抑制CIA大鼠滑膜细胞病理性增生,降低滑膜细胞培养液中IL-1β、TNF-α水平,对胶原诱导大鼠类风湿性关节炎产生一定的治疗作用。     

新痹痛灵对胶原诱导性关节炎大鼠及其滑膜组织中HMGB1 mRNA表达的影响

目的:观察新痹痛灵对胶原诱导性关节炎大鼠及其滑膜组织中HMGB1 mRNA的影响。方法:新痹痛灵方中饮片经相关工艺提取后制为浸膏;将SD大鼠72只随机分出12只为正常组,其余进行胶原诱导性关节炎(CIA)造模,再将造模大鼠随机分为模型组,新痹痛灵高、中、低剂量组(3.2,1.6,0.8 g·kg-1·d-1)以及雷公藤多苷片组(0.008 g·kg-1·d-1),各组大鼠于二次免疫后当天开始ig给药,连续给药21 d。容积法测量大鼠关节体积,病理切片观察,RT-q PCR检测滑膜组织HMGB1mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠关节肿胀明显(P0.01),滑膜组织HMGB1 mRNA的表达明显增加(P0.01);与模型组比较,新痹痛灵高剂量组的关节肿胀于14,21 d明显减轻(P0.05,P0.01),且滑膜组织HMGB1 mRNA的表达明显降低(P0.01)。关节病理切片显示新痹痛灵各剂量组及雷公藤多苷片组病变较模型组均有不同程度减轻。结论:新痹痛灵可减轻CIA大鼠关节肿胀、降低滑膜组织中HMGB1 mRNA的表达,通过抑制HMGB1而减少相关炎症通路的激活可能是新痹痛灵治疗类风湿关节炎的机制之一。     

痹痛灵颗粒对胶原诱导性关节炎大鼠血清及滑膜组织匀浆中IL-2的影响

目的:探索痹痛灵颗粒对胶原蛋白诱导性关节炎大鼠的治疗机理.方法:以牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂对大鼠进行胶原蛋白诱导性关节炎造模,测定大鼠血清及组织匀浆中IL-2的含量.结果:痹痛灵颗粒具有良好的抑制胶原蛋白诱导性关节炎大鼠血清及组织中IL-2含量的作用,且高剂量组最为明显.结论:痹痛灵、颗粒对类风湿关节炎有较好的抑制作用...     

羌活地黄汤对佐剂性类风湿性关节炎大鼠滑膜组织VEGF的影响

目的:观察羌活地黄汤对氟氏完全佐剂诱导的类风湿性关节炎大鼠治疗作用及对关节滑膜组织血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响。方法:建立大鼠佐剂性类风湿性关节炎动物模型,通过测定关节肿胀率及关节炎评分,评价羌活地黄汤的治疗作用,并以免疫组织化学法检测关节滑膜组织VEGF表达变化,进一步探讨其作用机制。结果:羌活地黄汤可明显降低造模大鼠关节肿胀度和关节炎评分,抑制关节滑膜组织VEGF过量表达。结论:羌活地黄汤对氟氏完全佐剂诱导的大鼠类风湿性关节炎有一定的治疗作用,其作用机理可能与抑制关节滑膜VEGF过量表达有关。     

金藤清痹颗粒对胶原诱导性类风湿关节炎大鼠滑膜血管新生的影响

目的：观察金藤清痹颗粒对胶原诱导性类风湿关节炎（CIA）大鼠滑膜血管新生的治疗作用并探讨其作用机制。方法：取60只SD大鼠随机分为空白组，模型组，甲氨蝶呤组，金藤清痹颗粒低、中、高剂量组等6组。以免疫诱导方法建立CIA大鼠模型，每天灌胃1次，空白组和模型组予以等量生理盐水灌胃，共28 d。采用小动物超声影像系统检测各组大鼠右下肢膝关节滑膜增生程度评分与增生面积；酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中白细胞介素-6（IL-6）、IL-17、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平；苏木精-伊红染色法观察大鼠关节滑膜病理改变；免疫组织化学法检测大鼠关节滑膜组织血小板-内皮细胞黏附分子31（CD31）与血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）表达水平。结果：与空白组比较，模型组CIA大鼠右膝关节滑膜区域面积和滑膜增生评分显著增加（P<0.01）；大鼠关节滑膜组织也出现显著病理性改变；血清炎症介质水平升高，同时CD31、VEGFR2表达也显著升高（P<0.01）。与模型组比较，金藤清痹颗粒各剂量组均能明显减小CIA大鼠滑膜增生面积（P<0.01），金藤清痹颗粒高剂量组大鼠超声滑膜评分显著降低（P<0.01）；金藤清痹颗粒中、高剂量可明显改善大鼠关节滑膜组织病理变化，显著降低IL-6、IL-17、TNF-α水平（P<0.01），关节滑膜组织CD31、VEGFR2表达也出现一定程度下降（P<0.01）。结论：金藤清痹颗粒能够通过改善CIA大鼠关节滑膜血管新生抑制类风湿关节炎病理进展，达到减轻关节损伤的作用，其机制可能与抑制炎症介质分泌，降低CD31、VEGFR2表达有关。     

益气通痹合剂抗胶原诱导的关节炎大鼠关节滑膜血管新生作用的研究

目的:探讨益气通痹合剂抗风湿的作用及其机制。方法:以Ⅱ型胶原加完全弗氏佐剂诱导的关节炎(CIA)大鼠为类风湿性关节炎模型,通过对关节滑膜病理改变、大鼠右后足关节影像学评估及对血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-1、2、3、9(MMPs)在不同处理大鼠血清中的表达,探讨该制剂的治疗效果。结果:益气通痹合剂组的滑膜组织新生血管明显减少,与模型组比较差异显著(P<0.05),关节影像学有改善;模型组大鼠血清VEGF、MMPs活性表达明显升高,益气通痹合剂组起下调作用。结论:益气通痹合剂能改善模型大鼠的病理学及影像学改变,并通过下调大鼠血清中VEGF、MMPs的表达而抑制CIA大鼠关节滑膜的血管新生功能。     

鹿瓜多肽注射液对CⅡ诱导的免疫性关节炎大鼠关节滑膜组织MMP3和TIMP-1 mRNA表达的影响

目的:探讨鹿瓜多肽注射液治疗类风湿性关节炎(RA)的机理.方法:以Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的免疫性关节炎(CIA)大鼠为RA动物模型,通过测量其关节肿胀程度及制作病理切片并在光镜下计分,观察鹿瓜多肽注射液对其的治疗效果,并取膝关节滑膜切片进行原位杂交,用图像分析系统检测MMP3和TIMP-1 mRNA表达水平.结果:与模型组比较,鹿瓜多肽组大鼠踝关节肿胀程度和病理损伤计分均明显减轻.模型组大鼠滑膜组织MMP3 mRNA表达阳性密度明显高于正常对照组,而TIMP-1 mRNA表达阳性密度明显低于正常对照组.鹿瓜多肽组大鼠滑膜组织MMP3表达降低,TIMP-1表达增高.结论:鹿瓜多肽注射液对CⅡ诱导的免疫性关节炎有治疗作用,其机理可能与抑制滑膜组织MMP3 mRNA表达并促进TIMP-1 mRNA表达有关.     

昆仙胶囊对胶原诱导关节炎大鼠滑膜组织IL-8及γIP-10mRNA表达的影响

目的：研究昆仙胶囊对胶原诱导关节炎大鼠滑膜组织白细胞介素-8（IL-8）及干扰素-γ诱导蛋白10（γIP-10）mRNA表达的影响。方法：将54只SPF级Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、甲氨喋呤（MTX）组和昆仙胶囊低、中、高剂量组各9只。采用尾根部皮下注射胶原蛋白建立胶原诱导关节炎大鼠模型,检测各组关节滑膜细胞与软骨的病理变化,R T-PCR法检测各组滑膜组织IL-8及γIP-10 mRNA的表达水平。结果：MTX组和昆仙胶囊各剂量组大鼠关节滑膜损伤较模型组明显改善（P〈0.05,P〈0.01）。与模型组比较,MTX组、昆仙胶囊各剂量组大鼠的IL-8 mRNA、γIP-10 mRNA的表达明显降低（P〈0.05,P〈0.01）;随着昆仙胶囊剂量的增加,关节滑膜组织IL-8 mRNA、γIP-10 mRNA的表达有下降的趋势;与MTX组、昆仙胶囊低、中剂量组大鼠比较,昆仙胶囊高剂量组大鼠的IL-8 mRNA、γIP-10 mRNA的表达明显降低（P〈0.05）。结论：昆仙胶囊可能通过抑制大鼠滑膜组织IL-8及γIP-10 mRNA基因表达,减轻大鼠滑膜细胞增生及软骨破坏来实现其治疗滑膜炎的目的。     

麝香乌龙丸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织形态及MIF ICAM-1表达的影响

目的:观察麝香乌龙丸对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜组织形态及巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨麝香乌龙丸的抗炎作用是否与调节以上两种因子的表达有关。方法:建立AA大鼠模型,分正常组、模型组、麝香乌龙丸低剂量组、麝香乌龙丸高剂量组进行研究,HE染色观察关节滑膜组织形态学变化,免疫组织化学方法检测MIF、ICAM-1的表达。结果:麝香乌龙丸低剂量组、高剂量组均能减轻关节滑膜病理积分,均能降低MIF、ICAM-1在AA大鼠滑膜组织的表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),麝香乌龙丸低剂量组和高剂量组比较差异无统计学意义。结论:麝香乌龙丸抑制AA大鼠炎症进展的作用机制与调节MIF、ICAM-1的表达有关。     

青藤碱对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖及基质金属蛋白酶-3表达的影响

目的观察青藤碱对体外培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖以及基质金属蛋白酶-3（MMP-3）mRNA含量的影响。方法培养人成纤维样滑膜细胞，分为青藤碱高、中、低剂量组和空白对照组，经青藤碱干预后，用四甲基偶氮唑蓝法测定细胞增殖情况，用半定量RT-PCR方法检测成纤维细胞中MMP-3mRNA的表达。结果经青藤碱干预后的人成纤维样滑膜细胞的增殖率受到显著抑制（P〈0．05），其中高剂量组的改变差异尤为显著（P〈0．01）。MMP-3的mRNA表达水平较之空白对照组有显著下降（P〈0．05），且高剂量纽的差异尤为显著（P〈0．01）。结论青藤碱可以抑制类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞的增殖并下调MMP-3的表达，推断这可能是青藤碱治疗类风湿关节炎的一种机理。     

类风湿关节炎湿热痹阻型患者血清和滑膜液IL-17与ESR、CRP的相关性研究

目的通过检测类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）湿热痹阻型患者血清和滑膜液中白细胞介素-17（IL-17）表达水平,及炎性活动指标血沉（ESR）、C反应蛋白（CRP）的相关性分析,探讨IL-17在RA发病中的作用。方法选择2011年1月—2013年1月成都军区总医院中西医结合风湿科住院的RA湿热痹阻型患者90例（28例伴有膝关节积液）作为研究对象,以30名健康体检者作为健康对照组,以30例膝关节积液的骨性关节炎（OA）患者作为滑膜液对照组,采用ELISA法检测血清和滑膜液中IL-17表达水平,及RA患者ESR、CRP含量,将IL-17水平与ESR、CRP进行相关性分析。结果RA湿热痹阻型患者血清中IL-17表达水平较健康对照组明显升高,差异均有统计学意义（P〈0．05）;RA滑膜液较RA血清和OA滑膜液中IL-17表达水平明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;RA血清IL-17表达与炎性活动指标ESR、CRP无相关性（r=0．092,-0．082;P〉0．05）;RA滑膜液IL-17表达与炎性活动指标ESR、CRP亦无相关性（r=0．113,-0．034;P〉0．05）。结论IL-17作为Th17细胞的主要效应性细胞因子,RA湿热痹阻型患者不同病程中血清和滑膜液中IL-17的表达水平皆明显升高,但与ESR、CRP无相关性,说明IL-17参与了RA的发生发展,但具体作用机制还需更多大样本研究证实。     

马钱子配伍苏木对佐剂关节炎大鼠滑膜组织IL-1β、IL-62及IL-10的影响

目的：通过观察马钱子配伍苏木（简称马苏）对佐剂关节炎（AA）大鼠滑膜中IL-1β、IL-6、IL-10含量的影响,探讨马苏配伍后的抗炎机制并寻求最佳配比。方法：按随机数字表法将91只Wistar大鼠分为空白组,模型组,马钱子单煎剂组,马苏1：6、1：12、1：18、1：24煎剂组。除空白组外于大鼠右后足跖垫部皮内注射完全弗氏佐剂（CFA）0．1mL,复制AA大鼠模型,测定AA大鼠滑膜中IL-1β、IL-6、IL-10含量的变化。结果：马苏1：18煎剂组能显著降低AA大鼠滑膜中IL-1β、IL-6的含量（P〈0．05）,且能升高AA大鼠滑膜中IL-10的含量（P〈0．05）。推测马苏是通过降低AA大鼠滑膜中IL-1β含量、减少炎性因子IL-6的分泌,升高保护性因子IL-10含量发挥其抗炎作用。结论：马苏对AA具明显的抗炎作用,其最佳配比为马苏1：18煎剂。     

热痹康汤对实验性关节炎大鼠血清IL-2及IL-10的影响

目的:观察热痹康汤对实验性关节炎大鼠血清白介素-2(IL-2)及白介素-10(IL-10)的影响。方法:采用牛Ⅱ型胶原蛋白诱导实验性关节炎大鼠模型,以甲氨蝶呤作对照,观察不同剂量热痹康汤对模型大鼠的关节肿胀指数以及血清IL-2、IL-10水平的影响。结果:不同剂量热痹康汤均能降低大鼠的关节肿胀指数及升高IL-10的水平(P0.01),其中在改善IL-10水平方面热痹康汤高剂量组优于甲氨蝶呤组(P0.01)、热痹康汤中剂量组作用与甲氨蝶呤组相当(P0.05)。高剂量热痹康汤能显著降低模型大鼠的IL-2水平(P0.01),作用优于甲氨蝶呤(P0.01)。结论:热痹康汤能下调实验性关节炎大鼠血清IL-2水平,提高IL-10的水平,提示可能是其治疗类风湿关节炎的作用机理之一。     

桑仙降压颗粒对自发性高血压大鼠心肌微血管密度及血管抑素蛋白密度的干预

目的通过桑仙降压颗粒对自发性高血压大鼠（SHR）心肌微血管密度（MVD）和内皮抑素（ES）的干预,探讨其对微血管数目及血管新生抑制因子的作用及机制。方法 SHR随机分为3组,蒸馏水空白对照组、吲哒帕胺西药对照组、桑仙降压颗粒组,以Wister大鼠为正常对照,4周及8周后观察SHR心肌MVD及ES蛋白的表达。结果相较空白对照组,4周及8周后桑仙降压颗粒组CD34表达均明显增多且心肌ES蛋白光密度值明显降低。结论桑仙降压颗粒能有效减轻SHR大鼠微血管损害,其机制之一可能与降低ES蛋白密度表达有关。     

姜酚对类风湿关节炎模型大鼠血清白细胞介素-17及白细胞介素-23的影响

目的观察中药活性成分姜酚对类风湿关节炎(RA)模型大鼠血清白细胞介素(IL)-17、IL-23的影响,探讨其作用机制。方法 40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、姜酚组和雷公藤组。采用胶原诱导制备RA模型,于造模第7日开始,姜酚组给予姜酚灌胃,雷公藤组给予雷公藤多苷灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃。治疗4周后采血并处死大鼠,镜下观察大鼠关节滑膜病理,ELISA检测大鼠血清IL-17、IL-23的表达。结果病理观察结果显示,与模型组比较,姜酚组关节滑膜组织血管新生及滑膜增生减轻,炎细胞浸润、水肿改善。模型组IL-17、IL-23表达明显高于正常组(P0.01);与模型组比较,姜酚组和雷公藤组均能下调IL-17、IL-23表达(P0.05,P0.01),姜酚组优于雷公藤组(P0.05)。结论姜酚通过下调RA大鼠血清IL-17、IL-23的表达起到一定的治疗作用。     

风湿宁胶囊对活性氧介导的T细胞活化和滑膜凋亡的影响

目的研究细胞内活性氧（reactiveoxygenspecies,ROS）水平对胶原诱导性关节炎（colla．geninducedarthritis,CIA）大鼠T细胞活化和滑膜细胞凋亡的影响,探讨风湿宁胶囊（FSN）在类风湿关节炎（rheumatoidarthritis,RA）治疗中的作用机制。方法将60只大鼠随机分为正常对照组,CIA模型组,雷公藤多苷片组,FSN低、中、高剂量组[剂量分别为0．33、0．66、1．32g,（kg·d）],每组10只。采用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群水平,ELISA法检测干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）、白细胞介素-4（inter．1eukin-4,IL-4）含量,紫外分光光度法检测羟自由基水平,Westernblot法检测滑膜天冬氨酸特异的半胱氨酸酶（cysteinylaspartatespecificproteinase,Caspase）-3、9蛋白表达。结果与模型组比较,FSN各给药组均可升高ROS水平（P〈0．01）,FSN中剂量组能够显著降低CD4＋／CD8＋水平（P〈0．01）,FSN各组的IFN-γ含量明显降低（P〈0．01）,FSN高剂量组的IL-4含量明显升高（P〈0．01）。同时,FSN各给药组的Caspase-9、Caspase-3表达亦显著上升,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;且FSN低、中剂量组Caspase-9蛋白平均灰度值显著高于雷公藤多苷组（P〈0．05,P〈0．01）。结论FSN调节CIA大鼠免疫功能亢进及抑制滑膜细胞增殖的机制可能与上调体内ROS水平有关。     

RANKL、OPG、LIGHT表达在CIA大鼠骨侵蚀中的意义

目的：研究RANKL、OPG、LIGHT表达在胶原诱导性关节炎（collagen—inducingarthritis,CIA）大鼠骨侵蚀中的意义。方法：选用健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为造模组、正常对照组（10只,简称正常组）,造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。在造模成功大鼠中随机选取10只作为模型组（10只）。30天后,观察各组大鼠足趾肿胀度,取各组大鼠膝关节滑膜及血清。运用westernblot、免疫组化法分别检测大鼠外周血、滑膜RANKL、OPG、LIGHT表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠足趾肿胀明显,差异有统计学意义（P〈0．01）;模型组大鼠外周血、滑膜RANKL、LIGHT表达显著增加,OPG表达显著减少,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：CIA大鼠外周血、滑膜RANKL、LIGHT表达水平升高,OPG表达减少。CIA大鼠骨侵蚀可能由于低表达的OPG不能竞争性抑制RANK和高表达的RANKL结合,加上高表达的LIGHT,促进破骨细胞生成和活化而致。