清营解表合剂对流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠肺组织炎性细胞因子IL-6,IL-10,TNF-β动态表达的影响

目的 动态观察清营解表合剂对流感病毒感染小鼠Th类细胞因子表达的影响,探讨该方抗流感病毒感染的免疫机制.方法 以流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(A/PR/8/H1N1)感染小鼠为模型,采用SABC免疫组织化学法动态观察清营解表合剂干预治疗后肺组织细胞因子白介素-6(IL-6),白介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子-β(TNF-β)表达水平的变化.结果 流感病毒感染小鼠后,感染模型组IL-6,IL-10及TNF-β表达各时间点均高于正常空白组,在第6天IL-6,TNF-β表达均达峰值,在第3,6天升高差异显著有统计学意义.药物干预后,清营解表合剂组IL-10表达逐渐升高,第6,9天较感染模型组升高差异显著.清营解表合剂组IL-6,TNF-β表达水平各时间点较感染模型组均下降,第6天下降差异有统计学意义.结论 清营解表合剂通过调节流感病毒感染小鼠Th类细胞因子的表达水平而提高机体免疫功能,恢复机体的抗感染免疫平衡.     

清营解表合剂对流感病毒感染小鼠外周血Th1, Th2型细胞因子动态表达的影响

目的: 探讨清营解表合剂对流感病毒感染小鼠免疫功能的影响。 方法: 以流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(A/PR/8/H1N1)感染小鼠为模型,灌服清营解表合剂16 g·kg^-1(0.8 g·mL^-1,0.4 mL/只),1次/d,连续ig给药12 d,应用流式细胞仪分析药后3,6,9,12 d特异性细胞因子γ-干扰素,肿瘤坏死因子-α,白细胞介素3,4,6,10的动态表达水平及Th1(IFN-γ)/Th2(IL-4)值。 结果: 流感病毒感染小鼠后3 d,细胞因子IFN-γ升高显著(P<0.05),6,9,12 d无显著改变,6,9 d较3 d均降低显著(P<0.05);3,6,9,12 d 细胞因子TNF-α均升高显著(P<0.01,P<0.05);3,6,9,12 d细胞因子IL-3均升高,3,6 d差异显著(P<0.05);3,6,9,12 d细胞因子IL-4,IL-6,IL-10 均显著升高(P<0.01),在早期3 d达到峰值;3,6,9,12 d外周血Th1(IFN-γ)/Th2(IL-4)明显降低(P<0.01,P<0.05),且6 d降到最低点,12 d较6 d升高显著(P<0.05)。经清营解表合剂治疗后,3 d细胞因子IFN-γ水平升高,较模型组无显著差异,6,9,12 d较模型组升高显著(P<0.01,P<0.05);3,6,9,12 d细胞因子 TNF-α水平表达较模型组均明显下降(P<0.01,P<0.05);3,6,9,12 d细胞因子IL-3 较模型组均有所下降,但差异无统计学意义;3,6,9,12 d细胞因子IL-4,IL-6,IL-10 水平较模型组均显著降低;3,6,9,12 d 外周血Th1(IFN-γ)/Th2(IL-4)均升高,差异显著(P<0.01),12 d清营解表组较3 d升高显著(P<0.01)。 结论: 清营解表合剂通过调节流感病毒感染小鼠外周血Th型细胞因子的表达水平,恢复机体的抗感染免疫平衡,提高机体免疫功能,以防治流感病毒感染。     

千佛菌对老龄小鼠Th_1/Th_2漂移的影响

目的:通过研究千佛菌对D-半乳糖致衰老模型小鼠外周血Th1、Th2型细胞因子(IFN-γI、L-4)水平及I FN-γ/I L-4比值的影响,探讨千佛菌对衰老机体的免疫调节作用。方法:将小鼠随机分为正常对照组、衰老模型组、千佛菌大、小剂量组。除正常组外,其余均腹腔注射D-半乳糖制备衰老模型。千佛菌大、小剂量组分别以100%和50%药液每只每日0.4 mL灌胃,其余等量生理盐水灌胃。测定血清中IFN-γI、L-4含量并计算IFN-γ/IL-4比值,测定脾脏及胸腺指数。结果:模型组小鼠血清IFN-γI、L-4水平I、FN-γ/IL-4比值、脾脏及胸腺指数均明显降低,与正常组比较P0.001;与模型组比较,千佛菌大、小剂量组IFN-γI、L-4水平、脾脏及胸腺指数均明显升高P0.001I,FNγ/IL-4比值恢复;千佛菌大、小剂量组间IFN-γI、L-4比较P0.001。结论:千佛菌对D-半乳糖致衰老模型小鼠Th1、Th2型细胞因子水平及IFN-γ/IL-4比值具有升高作用,并能够显著增加小鼠的脾脏及胸腺指数,对D-半乳糖导致衰老的Th1/Th2免疫失衡具有一定的调节作用,能使之趋向恢复正常。     

滨蒿总黄酮对流感病毒PR8株感染小鼠的保护作用

目的:观察滨蒿总黄酮对流感病毒感染小鼠的保护作用并初步探讨其作用机制。方法:采用流感病毒鼠肺适应株A/PR/8/34(H1N1)滴鼻感染小鼠造成肺炎模型,观察滨蒿总黄酮对流感病毒PR8株感染小鼠的死亡率、死亡保护率、平均存活天数、生命延长率及血清中炎性细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的影响。结果:滨蒿总黄酮0.40g/kg可以明显降低流感病毒感染小鼠的死亡率,0.20、0.40g/kg可以明显延长流感病毒感染小鼠的平均存活天数;滨蒿总黄酮0.10、0.20、0.40g/kg可以显著降低流感病毒感染小鼠血清中IFN-γ、IL-6的含量,滨蒿总黄酮0.20、0.40g/kg可以显著降低小鼠血清中IL-8的含量。结论:滨蒿总黄酮对流感病毒PR8株感染小鼠具有一定的保护作用,其作用机制可能与抑制IFN-γ、IL-6和IL-8的分泌有关。     

脾胃虚实证大鼠局部与整体Th平衡的研究

目的探讨脾胃虚实证候大鼠模型胸腺、脾脏、外周血Th1/Th2平衡的相关性。方法将60只SPF级SD大鼠随机分为3组,其中一组为脾虚组,一组为湿热组,一组为正常组,每组20只,雌雄各半,采用酶联免疫吸附法(ELISA)技术对大鼠模型血浆、胸腺、脾脏组织Th1/Th2细胞因子水平进行检测。结果在胸腺方面,与正常组对比,脾虚组的IFN-γ表达下降,IL-4表达和IFN-γ/IL-4比值升高,但均无统计学意义(P0.05);湿热组的IFN-γ表达和IFN-γ/IL-4比值明显升高(P0.05),IL-4表达下降,但无统计学意义(P0.05)。在脾脏方面,与正常组对比,脾虚组的IFN-γ表达下降,但无统计学意义(P0.05),IL-4表达明显下降(P0.05),IFN-γ/IL-4比值明显升高(P0.05);湿热组的IFN-γ表达升高,但无统计学意义(P0.05),IL-4表达明显下降(P0.05),IFN-γ/IL-4比值明显上升(P0.05)。在外周血方面,与正常组对比,脾虚组的IFN-γ表达明显下降(P0.05),IL-4表达升高,IFN-γ/IL-4比值下降,但均无统计学意义(P0.05);湿热组的IFN-γ表达与IFN-γ/IL-4比值明显升高(P0.05),IL-4表达下降,但无统计学意义(P0.05)。结论脾虚组和湿热组在脾脏的IL-4表达均表现出下降趋势,IFN-γ/IL-4比值呈升高趋势,脾脏的Th1/Th2平衡在不同证型中可能均向Th1漂移。胸腺、脾脏、外周血等不同组织的IFN-γ/IL-4比值在脾胃虚实证候的呈现不同,提示不同部位的细胞因子表达差异性与不同证候的相关性,这可能是脾胃虚实证候的发病机制之一。     

羊蹄根对免疫性血小板减少性紫癜模型小鼠免疫功能的影响

目的通过建立免疫性血小板减少性紫癜(ITP)小鼠动物模型,观察羊蹄根对模型小鼠外周血细胞因子的影响,探讨羊蹄根的免疫调节机制。方法:50只Balb/c小鼠随机分为阴性对照组、模型组、阳性对照组、高剂量和低剂量羊蹄根组。除阴性对照组外,其余各组隔日注射豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS)建立ITP小鼠模型。注射GP-APS 24h后,阴性对照组和模型组灌服0.9%氯化钠溶液,阳性对照组醋酸泼尼松按5mg/kg灌胃,羊蹄根高剂量和低剂量组按其5、0.5g/kg灌胃。连续给药14d后处死小鼠检测脾脏和胸腺指数;分离血清检测干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平。结果:与阴性对照组比较,模型组脾脏、胸腺系数和IFN-γ水平显著升高(P0.05);IL-4水平显著下降(P0.05),IFN-γ/IL-4比值升高。与模型组比较,高剂量羊蹄根组脾脏、胸腺系数和IFN-γ水显著下降(P0.05);IL-4水平显著升高(P0.05),IFN-γ/IL-4比值降低具有显著差异。结论:高剂量羊蹄根可通过影响Th1/Th2细胞及因子水平而对ITP免疫功能起到调节作用。     

金银花、连翘对大肠杆菌感染模型小鼠血清Th1/Th2细胞因子的调节作用

目的探讨金银花、连翘对大肠杆菌感染小鼠的保护作用机制。方法将雌性昆明种小白鼠随机分为金银花组和连翘组,每组再分为正常组、中药组、模型组和治疗组4个亚组进行处理,观察小鼠的临床状态,双抗体夹心法酶联免疫吸附实验(Elisa)检测血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果金银花(0.01 kg/L)、连翘(0.01 kg/L)水煎液对小鼠大肠杆菌的感染有保护作用。与正常组及中药组比较,模型组与治疗组小鼠血清IFN-γ、IL-4表达及IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10比值均显著升高(P均<0.01);金银花治疗组较模型组IL-10表达显著升高(P<0.05),IFN-γ表达与IFN-γ/IL-4比值有升高趋势,IL-4表达和IFN-γ/IL-10比值有下降趋势;连翘治疗组较模型组IFN-γ和IL-4表达以及IFN-γ/IL-10比值有下降趋势,IL-10表达和IFN-γ/IL-4比值有升高趋势,但均无显著性差异(P>0.05)。结论感染模型小鼠辅助性T淋巴细胞1型/2型(Th1/Th2)细胞因子分泌亢进,Th1/Th2平衡有向Th1型漂移的特点。金银花、连翘水煎液均能有效保护感染模型小鼠,其调节小鼠的免疫功能可能与调节Th1/Th2平衡相关。     

众生丸对H1N1流感小鼠的保护及免疫调节作用研究

目的研究众生丸对H1N1流感病毒感染小鼠的保护及免疫调节作用。方法以奥司他韦为阳性药,H1N1流感病毒滴鼻感染小鼠复制小鼠病毒性肺炎模型。比较小鼠病毒性肺炎模型的肺指数、肺组织形态学、死亡保护率、小鼠T淋巴细胞亚群和细胞因子干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的数量变化。结果与病毒对照组比较,众生丸可显著降低H1N1感染小鼠的肺指数,提高存活率,调节T细胞亚群含量,促进血清中IFN-γ和IL-10产生。结论众生丸可通过减轻炎症,调节免疫而减轻H1N1亚型流感病毒所致小鼠肺部病变,提高染毒小鼠存活率。     

仲景合法方对BCG/LPS所致小鼠免疫性肝损伤免疫功能的影响

目的:探讨仲景合法方抗卡介苗(BCG)/脂多糖(LPS)免疫性肝损伤小鼠的免疫保护机制。方法:实验第1天小鼠尾静脉注射BCG1mg,12天后再尾静脉注射LPS10μg以制造免疫性肝损伤模型。造模同时,用药组给以仲景合法方不同剂量连续灌胃,连续12天。通过测定转氨酶、摘取胸腺称重,计算胸腺指数;MTT比色法检测T、B淋巴细胞增殖能力、绵羊红细胞吞噬法测定腹腔巨噬细胞吞噬能力、亚硝酸盐测定法测定NO诱生能力。生物活性法检测脾细胞产生Th1型细胞因子IFN-γ的能力,同时分离血清,用ELISA法检测Th2型细胞因子IL-4的含量。结果:仲景合法方有不同程度对抗BCB/LPS对胸腺的抑制作用,其中剂量效果最佳,而阳性对照药物联苯双酯则无效果。仲景合法方中剂量组则能对抗BCB/LPS的T、B淋巴细胞增殖作用,能够不同程度抑制T、B淋巴细胞转化、成熟。从巨噬细胞吞噬能力指标的检测中也发现,仲景合法方既能对抗BCB/LPS抑制巨噬细胞吞噬的作用,又能提高正常组的巨噬细胞吞噬能力,并促进NO的表达。仲景合法方降低损伤肝脏IFN-γ(Th1细胞因子)含量,也降低IL-4(Th2细胞因子)含量,使Th1/Th2平衡向Th1漂移回至正常。结论:仲景合法方对免疫性肝损伤小鼠具有保护作用,并能调节免疫功能。     

急性化脓性扁桃体炎卫分证外周血Th1、Th2类细胞因子的表达及临床意义

目的:研究急性化脓性扁桃体炎患者卫分证外周血Th1/Th2漂移变化。方法:通过流式细胞检测技术,对急性化脓性扁桃体炎患者卫分证和正常人外周血Th1/Th2细胞进行检测,采用ELISA法测定血清细胞因子IL-4和IFN-γ水平,并比较IFN-γ/IL-4比值。结果:与正常对照组比较,急性化脓性扁桃体炎卫分证组Th1、IFN-γ、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:急性化脓性扁桃体炎卫分证与Th1/Th2漂移存在相关性。