加味桃核承气汤不同提取方法大鼠含药血清对糖尿病VSMC细胞周期及细胞凋亡的影响

目的:探讨不同提取方法加味桃核承气汤含药血清对胰岛素(Regular insulin,RI)诱导兔血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)的细胞周期及细胞凋亡的影响.并探讨其可能的作用机制,寻找本方抗糖尿病动脉粥样硬化的最佳提取方法.方法:采用兔主动脉平滑肌细胞株,以RI诱导VSMC增殖,以不同提取方法制备桃核承气汤含药血清,采用碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)单染色法,以流式细胞仪检测VSMC的凋亡率及细胞周期.结果:各组在各细周期的DNA含量比较,总体差异显著(P<0.01);模型组、美迪康组细胞凋亡最少;罗格列酮组、乙酸乙酯组细胞凋亡较多.罗格列酮组、乙酸乙酯组促进凋亡作用(Sub-G0期)较加味桃核承气汤全方组显著(P<0.01).结论:促进糖尿病VSMC凋亡的药物有效成分,更大的可能存在于罗格列酮组、乙酸乙酯组当中.在促进糖尿病VSCM凋亡的机制方面,罗格列酮组、乙酸乙酯组均可能与G0/G1、G2M期阻滞有关.     

三七对高脂血清刺激的大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的:考察三七对高脂血清刺激的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖的影响,为评价三七的降血脂作用及其机制研究提供依据。方法:大鼠高脂血症模型给予不同剂量三七处理,2周后分离血清,分别以未处理组血清、各处理组血清刺激VSMC增殖,并采用MTT的测定A值,研究三七对高脂血清刺激的大鼠VSMC增殖的抑制作用。结果:与正常血清相比,高脂血清能显著促进VSMC的增殖(P<0.05),而含三七的高脂血清对VSMC增殖的促进作用与高脂血清相比其作用明显减弱(P<0.05)。结论:三七对高脂血清刺激的大鼠血管平滑肌细胞增殖有明显的抑制作用,该法可为降脂药物体外研究提供借鉴。     

加味桃核承气汤对肥胖型糖尿病患者胰岛素抵抗的影响

目的 观察加味桃核承气汤治疗肥胖型2型糖尿病(T2DM)患者的效果及对胰岛素抵抗的影响。方法 选择2018年7月—2021年6月秦皇岛市中医医院收治的80例肥胖型T2DM患者,随机分为2组各40例,对照组给予二甲双胍片、格列美脲分散片治疗,观察组在对照组用药基础上结合加味桃核承气汤治疗,2组均治疗3个月,比较2组空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、体质指数(BMI)及临床疗效。结果 治疗后2组FPG、2hPG、HbA1c、HOMA-IR、BMI均明显低于治疗前(P均<0.05),且观察组均显著低于同期对照组(P均<0.05);治疗后2组HOMA-β均较治疗前明显升高(P均<0.05),且观察组显著高于同期对照组(P<0.05);观察组和对照组总有效率分别为95.0%(38/40)、77.5%(31/40),观察组显著高于对照组(P<0.05)。结论 加味桃核承气汤治疗肥胖型T2DM患者更有助于改善糖代谢,降低BMI,调节胰岛功能,改善胰岛素抵抗。     

加味桃核承气汤对Ⅱ型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响

观察加桃核承气汤对Ⅱ型糖尿病的影响。采用链脲佐菌素和高热量饲料的方法模拟ＮＩＤＤＭ大鼠模型，研究加味桃核承气汤对ＮＩＤＤＭ大鼠肝细胞膜胰岛素介体释放，脂肪细胞葡萄糖氧化和胰岛素敏感性指数的影响。加味桃核承气汤可明显降低空腹血糖、胰岛素、摄食量和饮水量（Ｐ〈０．０５￣０．０１），提高胰岛素敏感性（Ｐ〈０．０５），增加肝细胞膜释放的抑制腺苷酸环化酶活力的胰岛素介体量（Ｐ〈０．０５），提高基础的和胰岛素     

siRNA沉默兔bFGF基因表达对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的：探讨利用RNAi技术沉默bFGF基因抑制兔血管平滑肌细胞增殖的作用。方法：针对兔bFGF基因的mRNA序列合成siRNA,然后构建携带bFGF—siRNA的质粒载体,将其转染体外培养的VSMC,分别用MTT法、流式细胞术分析细胞增殖率和凋亡率的变化,免疫细胞化学染色观察细胞PCNA的表达变化,同时用RT—PCR检测细胞转染前后bFGF基因表达量的变化。结果：表达bFGF—siRNA的质粒载体转染后VSMC增殖能力减弱,凋亡增加,bFGF的mRNA表达量明显减弱。结论：利用bFGF—siRNA质粒表达载体沉默bFGF基因mRNA能抑制VSMC的增殖。     

中药对血管平滑肌细胞增殖抑制的研究进展

血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣ)增殖是动脉粥样硬化、高血压和各种血管成形术后再狭窄等心血管疾病的核心病理过程。寻找平滑肌细胞增殖的刺激因子和抑制因子将有助于对其发病机理和防治工作的研究 ,故该研究已成为近年文献报道中的热点。本文作者就近年来中药对平滑肌细胞增殖抑制的研究进展概述如下 :1　单味中药及提取物实验研究1.1　水蛭及其提取物　周小明等[1] 在实验中发现 ,水蛭素可显著抑制兔动脉平滑肌细胞的增殖及其氚 -脱氧胸腺嘧啶 (3Ｈ -ＴｄＲ)的摄取 ,且呈剂量依赖性。张涛等[2 ] 探讨水蛭对腔内血管成形术(ｔｒａｎｓｌｕｍｉ…     

三七总皂苷含药血清对溶血磷脂酸诱导血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制研究

目的:观察三七总皂苷含药血清对溶血磷脂酸(LPA)诱导的血管平滑肌细胞增殖效应的影响,分析该作用与细胞外信号调节激酶ERK信号通路的关系。方法:采用贴块法培养大鼠主动脉平滑肌细胞;以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察不同分组对细胞增殖的影响;采用流式细胞仪分析细胞周期和DNA含量。结果:空白血清+LPA组较空白血清组OD值升高(P<0.05),S期指数升高(P<0.01);三七总皂苷含药血清+LPA组与卡托普利含药血清+LPA组比较OD值降低(P<0.05),S期指数无差异;三七总皂苷含药血清+LPA+PD98059组较空白血清组OD值降低(P<0.05),S期指数无差异。结论:三七总皂苷对LPA诱导的VSMC增殖有拮抗作用,且作用强于卡托普利,其作用机制可能与抑制LPA对ERK信号通路的激活,从而抑制DNA合成,阻止细胞进入S期有关。     

活血潜阳胶囊对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察活血潜阳胶囊对血管紧张素Ⅱ（ATⅡ）诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响。方法：贴块法行SD大鼠胸主动脉VSMC分离培养。倒置相差显微镜，透射电镜，α-SM-actin鉴定，以血清药理学方法进行实验。采用通法采集药物血清，10^-6mol/LATⅡ为刺激因子，卡托普利（Captopril)为对照，活血潜阳胶囊药物血清分为10%，7.5%,5%,2.5%共4个浓度，采用结晶紫染色法观察细胞生长曲线，测定氚标-胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR)掺入量了解DNA合成的变化。并用透射电镜观察细胞超微结构的改变。结果：（1）经活血潜阳胶囊处理后。细胞增殖速度明显下降，生长曲线下移，^3H-TdR掺入量减少，DNA合成明显受到抑制，其作用与Captopril相当，且在一定范围内有剂量依赖性。（2）活血潜阳胶囊可以改善ATⅡ引起的细胞超微结构改变，使VSMC仍保持收缩型的特征，与Captopril的作用相似。结论：活血潜阳胶囊能抑制ATⅡ引起的VSMC增生和结构改变，从细胞水平初步探讨了活血潜阳胶囊改善高血压血管重构的机理。     

消斑通脉合剂对PDGF-BB诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

[目的]观察中药复方消斑通脉合剂药物血清对体外培养的VSMCs细胞周期的作用。[方法]体外培养VSMCs,取对数生长期细胞用作实验,MTT法检测不同浓度药物血清对体外培养的VSMCs增殖活力;应用流式细胞仪分析各组细胞周期分布。[结果] MTT法显示药物血清呈剂量依赖性抑制VSMCs增值,高剂量与低剂量比较有统计学差异(P<0.05),流式细胞仪显示药物血清可明显阻滞VSMCs细胞进程,高剂量与低剂量比较有统计学差异(P<0.01)。[结论]中药复方消斑通脉合剂药物血清可以阻滞VSMCs的细胞周期进程,达到抑制VSMCs增殖的作用。     

冠心舒通胶囊含药血清对AGEs诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨冠心舒通胶囊含药血清对晚期糖基化终产物(AGEs)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响及其可能机制。方法:分别以0.5g/kg、1g/kg、2g/kg剂量冠心舒通胶囊内容物对大鼠灌胃给药28d制备冠心舒通胶囊含药血清;以各剂量含药血清单独或联合体外制备的AGE-牛血清白蛋白(AGE-BSA)处理原代培养大鼠VSMCs,MTT法检测各处理组细胞增殖水平、RT-PCR检测细胞血小板源性生长因子-B(PDGF-B)mRNA表达水平、酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清PDGF-B浓度。结果:40mg/L终浓度AGE-BSA显著增强VSMCs增殖水平(P<0.05),0.5g/kg、1g/kg、2g/kg剂量冠心舒通胶囊含药血清对正常VSMCs生长未见显著影响(P>0.05),但显著抑制AGE-BSA诱导的VSMCs增殖(P<0.05),作用具有明显的剂量依赖性。AGE-BSA诱导VSMCs PDGF-B表达与分泌显著增强(P<0.05),1g/kg、2g/kg剂量冠心舒通胶囊含药血清可有效抑制AGE-BSA这一作用(P<0.05),0.5g/kg剂量血清对AGE-BSA这一作用则未见明显影响(P>0.05)。结论:冠心舒通胶囊可剂量依赖性抑制AGEs诱导的VSMCs增殖,作用机制与抑制AGE诱导的PDGF-B表达与分泌有关。     

桃核承气汤及其拆方组对蓄血症大鼠模型“瘀热”相关指标的影响

目的:观察桃核承气汤及其拆方组对蓄血症大鼠模型"瘀热"相关指标的影响。方法:间隔24 h两次大鼠尾静脉注射内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)50μg.kg-1造模。第1次尾静脉注射后0.5,12 h,第2次尾静脉注射后0.5 h灌胃给药。给药组剂量全方组10 g.kg-1,调胃组5.7 g.kg-1,调桃组8.6 g.kg-1,调桂组7.1 g.kg-1,桃桂组4.3 g.kg-1。模型对照组,空白对照组给相应剂量生理盐水。末次注射后2 h取血,检测血清中组织纤溶酶原激活物(tissue type plasminogenactivator,t-PA),纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor,PAI-1),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),丙二醛(malondialdehyde,MDA),一氧化氮(nitric oxide,NO)及血浆中内皮素-1(endothelin-1,ET-1),6-酮-前列腺素-1α(6-keto-prostaglandin F1α,6-keto-F1α),血栓烷素B2(thromboxane B2,TXB2)。结果:全方组,调胃组,调桂组,调桃组能上调SOD(P<0.01),下调MDA(P<0.01)。全方组,调胃组,调桂组能下调PAI-1及t-PA/PAI-1(P<0.01)。调胃组,调桂组还能上调t-PA(P<0.01)。桃桂组对SOD,MDA及PAI-1干预作用小,与全方组比较有差异(P<0.01)。各给药组均能升高大鼠血浆中TXB2,降低6-Keto-PGF1α/TXB2,降低NO。结论:桃核承气汤对"瘀热"指标均有积极的干预作用。各拆方组中,调胃组处于核心地位,对"瘀热"指标作用均比较好。调桂组对反映"瘀"的指标干预作用好于全方组。桃桂组在调解"瘀热"指标中表现均最差。     

桃核承气汤方证探微

诸多医家认为《伤寒论》中桃核承气汤证为“膀胱蓄血”之证,但通过研究各注家的观点,结合临床分析此方虽可治“膀胱蓄血”之证,但其使用不能拘于膀胱.故临床遣方用药,当方证对应.     

桃核承气汤对热瘀证大鼠SOD、MDA的影响

目的：观察桃核承气汤对热瘀证大鼠SOD、MDA的影响，探讨其对血管内皮细胞损伤的保护作用。方法：采用大肠杆菌内毒素复制大鼠内毒素性热瘀证模型，于首次注入内毒素前1h、注入后12h、第2次注入内毒素前1h分别灌胃桃核承气汤浓缩液，检测桃核承气汤对SOD、MDA的影响。结果：桃核承气汤能增强热瘀证大鼠模型SOD的活性，抑制热瘀证大鼠MDA含量的增加。     

雷公藤红素对培养的动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的:动脉血管平滑肌细胞(VSMC)过度增殖是动脉粥样硬化及冠脉成形术(PTCA)后再狭窄形成的主要原因,为了探讨雷公藤红素预防再狭窄形成的可能,本研究观察了雷公藤红素对培养的大鼠胸主动脉 VSMC 增殖的影响。方法:采用大鼠传代培养的 VSMC(4～7代),将雷公藤红素(0.05～0.40mg/L)加入细胞培养基中,24h 和48h 后用中性红细胞染色法测定细胞总蛋白的方法做细胞计数并测定氚-胸腺嘧啶脱氧核苷(~3H-TdR)掺入的放射性强度每分计数(cpm)值,求各组均值及标准差,采用 q 检验做统计学处理。结果:各药物剂量组的雷公藤均可抑制 VSMC 增殖及对~3H-TdR 的掺入并呈药物剂量依赖性关系,与对照组比较P<0.05或 P<0.01。结论:雷公藤红素能够抑制大鼠 VSMC 的增殖,为该药物可能用于以VSMC 增殖为主的冠心病和再狭窄的形成提供了实验依据。     

赤芍对家兔血管内膜平滑肌细胞增生的影响

目的观察赤芍对兔颈动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原 (PCNA)表达作用,以了解赤芍对动脉损伤后内膜增生的影响.方法新西兰大白兔随机分为对照组、高脂饲料组、赤芍高剂量组及赤芍低剂量组,高脂喂养 8周后行兔颈总动脉球囊损伤术, 10周取材,用免疫组化法检测平滑肌细胞中 PCNA表达.结果各组内皮增生成分主要为平滑肌细胞.与高脂饲料组比较,赤芍高剂量组内膜、中膜、外膜 PCNA阳性着色及内膜增生面积均显著减少.结论赤芍有抑制平滑肌细胞增殖的作用.     

痰瘀同治对大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的观察痰瘀同治代表药物丹蒌片药物血清对血小板衍生因子BB型（PDGF—BB）诱导下体外培养的血管平滑肌（VSMC）增殖的影响,并探讨其可能的机制。方法SD大鼠喂饲丹蒌片药物溶液收集药物血清。组织块贴壁法培养SD大鼠原代胸主动脉平滑肌细胞,取第3代细胞进行免疫荧光法鉴定,取4～7代细胞进行实验。MTT比色法观察正常血清培养及丹蒌片药物血清（低、中、高浓度）对PDGF—BB（25μg／L）所致的VSMC增殖的影响。结果MTT法显示与对照组相比,药物血清组对PDGF—BB诱导的VSMC增殖呈剂量依赖性抑制,高浓度与低浓度比较有明显差异（P＜0．05）。结论丹蒌片可有效抑制PDGF—BB诱导的VSMC增殖,提示其控制AS的过程可能与抑制平滑肌增殖并向内皮下迁移有关。     

真武汤合桃核承气汤加减治疗糖尿病肾病(肾阳虚并瘀血型)32例

[目的]观察真武汤合桃核承气汤加减治疗糖尿病肾病(肾阳虚并瘀血型)疗效。[方法]真武汤合桃核承气汤加减每日1剂,每月为1疗程,治疗1~3个疗程。[结果]治疗前后尿蛋白、肾功、Hb、血糖、血脂等各项指标都有不同程度改善(P<0.05)。[结论]真武汤合桃核承气汤加减治疗糖尿病肾病(肾阳虚并瘀血型)疗效满意,具有改善肾功能、提高Hb、降低血糖、血脂的功效,越早治疗疗效越显著。     

藿酮胶囊诱导人体血管平滑肌细胞凋亡的实验研究

目的：从细胞凋亡水平研究藿酮胶囊抗动脉样硬化的作用机理。方法：实验培养人胚胎胸主动脉平滑肌细胞,用白细胞介素－１（ＩＬ－１）刺激平滑肌细胞建立血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ,ＶＳＭＣ）增生模型,从细胞形态学,ＤＮＡ凝胶电泳,流式细胞术３个方面观察用藿酮胶囊诱导增生的ＶＳＭＣ凋亡现象。结果：透射电镜观察发现：藿酮胶囊处理的ＶＳＭＣ出现细胞皱缩,染色质凝集后细胞     

淫羊藿苷对大鼠颈动脉损伤后新生内膜增生和平滑肌细胞凋亡的影响

目的:研究淫羊藿苷对大鼠颈动脉损伤后新生内膜增生和平滑肌细胞凋亡的影响。方法:大鼠44只随机分为正常对照组8只,淫羊藿苷60 mg.kg-1组、淫羊藿苷120 mg.kg-1组和模型组各12只。后3组建立鼠颈动脉球囊损伤术后狭窄模型,淫羊藿苷组术前6 d开始ig至实验结束;模型组以等体积生理盐水ig。术后14 d和28 d分批处死动物。取各组动物颈动脉损伤段,常规制片,HE染色,采用计算机图像分析系统测量内膜面积和中膜面积,并计算新生内膜/中膜面积比(I/M);采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法(TUNEL)检测平滑肌细胞凋亡。结果:给药两组术后14,28 d,损伤部位血管内膜、中膜面积明显小于模型组,差异非常显著(P0.01);球囊损伤后14,28 d,各手术组新生内膜区均出现明显的凋亡细胞,其中淫羊藿苷组较模型组细胞凋亡率显著增高(P0.01),结论:淫羊藿苷可能通过促进平滑肌细胞的凋亡而减轻球囊损伤后新生内膜的增生。     

益肺通络方对低氧性肺血管重建大鼠肌型肺小动脉中膜增殖的影响

目的:观察益肺通络方对低氧性肺血管构型重建(PVR)大鼠肌型肺小动脉中膜增殖的影响。方法:60只Wistar大鼠随机分成空白、模型、益肺通络方高、中、低剂量5组,每组12只,采用气管注入0.2 m L脂多糖(1 g·L-1)联合烟熏(每次5支,30 min/次)4周建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,叠加每天吸入18%低氧2周建立肺血管构型重建(PVR)大鼠模型。空白、模型组生理盐水5 m L·d-1天灌胃,实验组按生药浓度分高剂量(30 g·kg-1),中剂量(20 g·kg-1),低剂量(10 g·kg-1)益肺通络方煎剂浓缩液5 m L·d-1灌胃。4,5,6周3个时点取材,测量中膜厚度、血管管径和中膜面积、血管面积,计算相对中膜厚度/面积。结果:相对中膜厚度/面积比较,4周时,模型组>实验低剂量组>实验中剂量组>实验高剂量>空白组,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。5周时,模型组>实验低剂量组>实验中剂量组>实验高剂量>空白组,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。6周时,模型组>实验低剂量组>实验中剂量组>实验高剂量>空白组,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益肺通络方能抑制慢性低氧PVR大鼠肌型肺小动脉中膜增殖,且存在量效关系。