电针对SAMP8小鼠海马线粒体呼吸链功能的影响

目的:从线粒体角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:选取8月龄SAMP8小鼠12只,随机分为模型组6只,电针组6只,另选取6只8月龄的SAMR1小鼠为对照组。电针组电针"百会""大椎""肾俞""太溪"穴,每日1次,每次20min,10次为一疗程,共治疗3个疗程;其他两组不做治疗干预,只进行相同方式、相同时间和相同程度的抓取和小鼠固定器固定。疗程结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,分光光度法检测海马线粒体呼吸链酶复合物的活性,反相高效液相色谱法检测细胞三磷酸腺苷(ATP)水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠平均逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间缩短,海马线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性降低,细胞ATP含量减少;模型组比较,电针组平均逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,海马线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性升高,细胞ATP含量增加。结论:电针能够提高小鼠海马线粒体呼吸链酶复合物活性及细胞ATP含量,改善线粒体功能,可能是治疗AD的机制之一。     

电针对SAMP8小鼠海马线粒体呼吸链酶复合体活性的影响

目的观察电针对SAMP8小鼠海马线粒体呼吸链酶复合体活性的影响,从线粒体角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法选取8月龄SAMP8小鼠16只,随机分为模型组8只,电针组8只,另选取8只8月龄的SAMR1小鼠为对照组,疗程结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,分光光度法检测海马线粒体呼吸链酶复合体的活性。结果模型组与对照组相比,模型组鼠平均逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间缩短,海马线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性降低(P<0.01,P<0.05);电针组与模型组比较,电针组平均逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,海马线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论电针治疗AD的可能机制是提高海马线粒体呼吸链酶复合体活性,改善线粒体功能。     

电针对SAMP8小鼠海马神经元线粒体超微结构的影响

目的 观察电针对SAMP8小鼠海马神经元线粒体超微结构及相关凋亡蛋白的影响,从保护线粒体、抑制细胞凋亡的角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的部分作用机制.方法 以SAMP8小鼠为研究对象,依据"补肾通督,醒神益智"的治疗原则,电针"百会"、"涌泉",每日1次,共治疗21天.用Morris水迷宫测试小鼠学习记忆能力的变化,评价电针对AD的治疗效应.用透射电镜观察海马神经元线粒体的超微结构.结果 模型组与空白组相比较,模型组小鼠平均逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间明显缩短,海马神经元线粒体超微结构不完整,线粒体面密度和体密度减少;模针组与模型组相比较,模针组小鼠治疗后平均逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,学习记忆能力有所提高,海马神经元线粒体超微结构基本正常,线粒体面密度和体密度增加.结论 电针对AD治疗效应的发挥可能与减轻线粒体超微结构损伤,改善线粒体功能,进而改善能量代谢和脑功能有关.     

电针对SAMP8小鼠海马线粒体作用的研究

目的:观察电针对8月龄快速老化小鼠亚系(SAMP8)海马神经元线粒体超微结构及线粒体酶活性的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的部分作用机制。方法:采用计算机随机的方法,将SAMP8小鼠24只分为模型组、电针组,每组各12只;8月龄抗快速老化小鼠亚系(SAMR1)12只作为空白组。电针"百会"涌泉"对电针组小鼠进行治疗,施以疏密波,频率2～100Hz,电压2～4V,强度以小鼠下肢轻微抖动为度,留针20min。每日1次,7d为1个疗程,共治疗3个疗程。治疗结束后,用Morris水迷宫测试各组小鼠空间学习记忆能力的变化,评价电针的治疗效应;用透射电镜观察海马神经元线粒体的超微结构;用分光光度法检测海马线粒体细胞色素C氧化酶(COX)的活性。结果:与模型组相比,电针组小鼠治疗后平均逃避潜伏期缩短,线粒体结构大致正常,嵴排列整齐,仅见部分轻度肿胀,线粒体体密度、面密度大于模型组,COX活性明显高于模型组(P<0.05,0.01)。结论:电针对AD学习记忆能力的改善可能与其减轻海马神经元线粒体超微结构损伤、提高线粒体COX活性、保护线粒体结构和功能、改善能量代谢有关。     

电针对SAMP8小鼠海马神经元线粒体超微结构及相关凋亡蛋白的影响

目的:观察电针对SAMP8小鼠海马神经元线粒体超微结构及相关凋亡蛋白的影响,从保护线粒体、抑制细胞凋亡的角度探讨电针治疗老年性痴呆(AD)的部分作用机制。方法:以SAMP8小鼠为研究对象,依据"补肾通督,醒神益智"的治疗原则,电针"百会"、"涌泉",每日1次,共治疗21天。用Morris水迷宫测试小鼠学习记忆能力的变化,评价电针对AD的治疗效应。用透射电镜观察海马神经元线粒体的超微结构,用免疫组化法检测海马神经元中凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达。结果:与空白组小鼠相比较,模型组小鼠平均逃避潜伏期明显延长、原平台象限停留时间明显缩短,海马神经元线粒体超微结构不完整,海马神经元中Caspase-3、Caspase-9表达增高;与模型组小鼠相比较,模针组小鼠治疗后平均逃避潜伏期缩短、原平台象限停留时间延长,学习记忆能力有所提高,海马神经元线粒体超微结构基本正常,海马神经元中Caspase-3、Caspase-9表达减少。结论:电针对AD治疗效应的发挥可能与减轻线粒体超微结构损伤、降低Caspase-3、Caspase-9表达,抑制细胞凋亡线粒体途径的级联反应,减少细胞凋亡有关。     

电针对SAMP8小鼠海马区补体及小胶质细胞吞噬能力的作用机制

目的:观察电针对SAMP8小鼠海马区离子钙结合衔接分子1(Iba-1)、补体C1q、分化簇68(CD68)表达水平的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的作用机制。方法:SAMP8小鼠随机分为模型组与电针组,每组12只,并以12只同月龄SAMR1小鼠作为对照组。电针组予“百会”“大椎”“肾俞”电针治疗,20 min/次,1次/d, 8 d为1个疗程,共干预3个疗程,疗程之间间隔2 d。采用Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆能力,免疫组织化学法检测海马CA1区Iba-1、CD68蛋白阳性表达水平,Western blot法和实时荧光定量PCR法检测海马组织Iba-1、C1q、CD68蛋白和mRNA的表达水平。结果:与对照组比较,模型组平均逃避潜伏期延长(P<0.01),原平台象限停留时间缩短、跨越原平台的次数减少(P<0.01);与模型组比较,电针组平均逃避潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01),原平台象限停留时间延长、跨越原平台次数增加(P<0.01)。与对照组比较,模型组海马CA1区Iba-1、CD68蛋白阳性表达及海马组织Iba-1、C1q、CD68蛋...     

早期电针干预对SAMP8小鼠学习记忆能力和海马磷酸化Tau蛋白水平的影响

目的:探讨早期电针"百会""大椎""肾俞"穴对快速老化小鼠(SAMP8小鼠)学习记忆能力和海马磷酸化Tau蛋白表达的影响,为临床电针治疗阿尔茨海默病(AD)时间点的选择提供参考。方法:将36只3月龄SAMP8小鼠随机分为模型组、3月龄电针组、9月龄电针组,每组12只;以12只同龄正常老化SAMR1小鼠作为空白对照组。3月龄电针组及9月龄电针组分别于小鼠3月龄及9月龄时予电针"百会""大椎""肾俞"穴治疗(连续波,2 Hz,1.5～2 mA),20 min/次,每日1次,8 d为一疗程,疗程间隔2 d,共治疗3个疗程。每组小鼠在水迷宫检测学习记忆能力结束后统一于10月龄取材;免疫组织化学法、免疫蛋白印迹法(Western blot)检测小鼠海马磷酸化Tau蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测小鼠海马Tau mRNA表达。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),原平台象限停留时间较短,跨越平台次数减少(P<0.01),海马磷酸化Tau蛋白及Tau mRNA表达较高(P<0.01);与模型组比较,3月龄电针组及9月龄电针组小鼠逃避潜伏期缩短(P...     

电针对SAMP8小鼠海马神经元葡萄糖调节蛋白75的影响研究

目的:观察电针对SAMP8小鼠海马神经元grp75的影响,从改善能量代谢障碍的角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的部分作用机制。方法:采用计算机随机的方法,将SAMP8小鼠分为模型组、模针组;SAMR1小鼠作为空白组。电针"百会"、"涌泉"对模针组进行治疗,施以疏密波,频率2~100Hz,电压2~4 V。治疗结束后,用Morris水迷宫测试空间学习记忆能力的变化,评价电针对AD的治疗效应;用免疫组化方法检测grp75表达。结果:与模型组相比,模针组小鼠治疗后平均逃避潜伏期缩短,在原平台所在象限停留的时间延长(P0.05);模针组小鼠海马神经元grp75较模型组表达增高(P0.01)。结论:电针对SAMP8小鼠学习记忆能力的改善,可能与提高海马神经元grp75的表达、调节线粒体功能、改善能量代谢障碍有关。     

电针对SAMP8小鼠皮质及海马突触素和突触后致密物-95表达的影响

目的 观察电针对SAMP8小鼠皮质及海马突触素(SYN)和突触后致密物-95(PSD-95)表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的介入时机.方法 SAMP8小鼠48只随机分为模型组、3月龄电针组、6月龄电针组和9月龄电针组,每组12只,选取同龄正常老化SAMR1小鼠12只为对照组.电针组电针"百会""大椎""肾俞",频...     

基于SAMP8小鼠开展针刺干预阿尔茨海默病的实验研究进展

本文对近年来以快速老化模型P系小鼠(SAMP8小鼠)开展的针刺干预阿尔茨海默病的实验研究进行归纳整理。研究显示,针刺能够通过干预β-淀粉样蛋白生成和清除、Tau蛋白磷酸化过程,改善线粒体和突触结构,增强自噬活性,提高脑血流量,提高雌激素含量等多途径、多靶点地干预阿尔茨海默病的病理过程,改善SAMP8模型小鼠的学习记忆能力。     

淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP10学习记忆能力 以及胆碱能系统活性的影响

目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对快速老化小鼠SAMP10的学习记忆能力以及胆碱能系统的影响.方法:采取8月龄快速老化小鼠SAMP10为实验对象,随机分为模型SAMP10组,阳性药多奈哌齐组(1 mg· kg-1),ICA低、中、高剂量(50,100,200 mg·kg-1)组,每组12只,以12只同月龄抗快速老化小鼠SAMR1为正常对照.灌胃给药30 d,通过Morris水迷宫、SMG-2迷宫、小鼠跳台仪检测ICA对SAMP10学习记忆能力的影响,通过比色法测定皮层中乙酰胆碱酯酶(AChE)的活力,采用酶联免疫吸附测定法检测乙酰胆碱(ACh)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)以及M-胆碱能受体结合力(MCBC)来探讨ICA对SAMP10小鼠胆碱能系统的作用.结果:ICA可以改善SAMP10小鼠的空间探索能力以及定位航行能力,缩短SAMP10小鼠在SMG-2迷宫的潜伏期,提高其在跳台实验中的被动反应能力,增加SAMP10小鼠大脑皮层ACh的含量,提高SAMP10小鼠皮层中MCBC以及ChAT的活性,但对SAMP10小鼠皮层中的AChE活性作用不明显.结论:不同剂量的淫羊藿苷可不同程度的改善SAMP10小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与对胆碱能系统的影响有关.     

不同中药复方对拟老年痴呆症小鼠的治疗比较

目的:比较两种不同功效中药复方对SAM小鼠的治疗差异,为中药复方评价体系提供依据。方法:选用8月龄SAMP8小鼠,分为模型(P)组、六味地黄颗粒(PL组)和通络救脑滴丸(PT组)治疗组。同月龄SAMR1小鼠为对照(N)组。通过水迷宫、避暗实验检测小鼠行为学改变,IH染色观察组织病理学变化,WB检测脑组织APP表达差异。结果:与N组比较,P组及PT组行为学、IH、WB检测指标均出现统计学差异。与P组相比,PL组水迷宫潜伏期缩短,避暗潜伏期延长,海马APP表达减少。结论:六味地黄颗粒可以减少SAMP8小鼠海马APP表达,改善其学习记忆障碍,起到治疗痴呆症的作用,但通络救脑滴丸的疗效不佳。此外,不同中药复方的作用特点有差异,应选择适合的动物模型进行药效评价研究。     

快速老化小鼠SAMP8模型粪便代谢物和肠道菌群改变的研究

目的研究快速老化小鼠SAMP8模型老化过程中粪便代谢物和肠道菌群的变化。方法采用1H-NMR代谢组学和宏基因组学技术,探索衰老相关的代谢标志物和肠道菌群,并对代谢物与肠道菌群进行Pearson关联分析。结果 SAMP8小鼠粪便中指认出31种内源性代谢物,与SAMR1小鼠相比,13种代谢物发生显著改变。差异代谢物主要富集在4条代谢途径:苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢,组氨酸代谢。肠道菌群分析发现10月龄快速老化小鼠SAMP8肠道菌群多样性明显改变,10种菌群的相对丰度显著改变。相关性分析结果表明,Christensenellaceae菌科与苯丙氨酸、组氨酸、缬氨酸、异亮氨酸和尿苷酸均呈正相关;Dehalobacterium菌属与酪氨酸,Planococcaceae动球菌科与缬氨酸均呈负相关。结论通过研究快速老化小鼠SAMP8模型粪便代谢物和菌群的变化规律,为衰老机制及抗衰老药物研究提供实验依据。     

肉苁蓉总苷对SAMP8小鼠学习记忆能力及突触可塑性的影响

目的明确不同剂量肉苁蓉总苷(glycosides of cistanche, GCs)灌胃对SAMP8小鼠学习认知功能和突触可塑性的影响。方法 SAMP8小鼠给予不同剂量肉苁蓉总苷[5、10、25、50、100 mg/(kg·d)]连续灌胃30 d。Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力;尼氏染色观察海马CA1区细胞形态及完整锥体细胞数目;免疫组化、Western Blot检测小鼠海马突触素(synaptophysin, SYN)、突触后致密物蛋白(post-synaptic density protein 95, PSD-95)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)表达情况。ELISA检测血清睾酮(testosterone, T)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)含量。结果水迷宫实验结果显示,相较模型组,50 mg/(kg·d)组逃避潜伏期显著缩短(P<0.05);50 mg/(kg·d)组10...     

比较含红芪和含黄芪的补中益气汤含药血清对SAMP8鼠脾淋巴细胞抗免疫老化的作用

比较研究含红芪和黄芪补中益气汤对快速老化小鼠8(SAMP8)脾淋巴细胞免疫功能的影响。通过MTT法检测Con A诱导SAMP8鼠脾脏淋巴细胞增殖能力的影响。流式细胞术检测含药血清对T淋巴细胞亚群分化百分比的影响。ELISA法检测培养上清液中IL-2和IFN-γ的表达。qRT-PCR法检测含药血清对T淋巴细胞CD28 mRNA表达的影响,蛋白印迹法检测SAMP8鼠脾脏CD28蛋白的表达含量。含红芪和含黄芪的补中益气汤含药血清均能提高SAMP8鼠T淋巴细胞的增殖能力;对SAMP8小鼠T淋巴细胞亚群的分化作用不明显,没有统计学差异;均可促进培养上清液中IL-2和INF-γ的分泌,且分泌IL-2水平,补红组优于补黄组(P0.05);均能增加T淋巴细胞中CD28 mRNA的表达量,且红芪组优于黄芪组(P0.05);均能提高SAMP8鼠脾脏CD28蛋白的表达,且红芪组与黄芪组无明显差异。含红芪和黄芪的补中益气汤含药血清可以通过提高脾淋巴细胞的增殖和增加CD28分子百分比的表达发挥抗免疫老化的作用,在抗免疫衰老方面红芪补中益气汤和黄芪补中益气汤作用相似。     

玉郎伞多糖对快速老化小鼠额叶和 海马神经元Caspase-3表达及活性的影响

目的:考察玉郎伞多糖(YLSP)对快速老化(SAMP8)小鼠额叶、海马神经细胞半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)表达及活性的影响.方法:选择6月龄SAMP8小鼠,随机分为模型组,石杉碱甲组(0.02 mg·kg-1),YLSP低、高剂量组(45,180mg·kg-1),选择6月龄正常老化小鼠(SAMR1)作为对照组,以上各组每日上午ig给药1次,连续40 d,于末次给药的次日应用免疫组织化学方法检测额叶和海马Caspase-3的表达变化及神经细胞凋亡情况,测定Caspase-3活性.结果:SAMP8小鼠额叶和海马Caspase-3阳性细胞数分别为(46.00±5.30),(51.36±3.28)个,Caspase-3活性分别为2 380±193,2 473±241,均较对照组显著升高(4.90±0.60),(6.14 ±0.53);(437±76),(521±79) (P ＜0.01);与模型组相比,石杉碱甲组、YLSP低、高剂量组额叶和海马Caspase-3阳性细胞数(23.48±3.46,27.86 ±4.04;24.54±3.55,30.60±2.62;17.98±2.97,23.90±2.58)及Caspase-3活性(1323±126,1 456±130;1 397±133,1 483±147;987±79,1 091±95)明显低于模型组(P＜0.01);与石杉碱甲组、YLSP低剂量组比较,YLSP高剂量组的额叶和海马Caspase-3阳性细胞数及Caspase-3活性显著降低(P＜0.05).结论:表明YLSP降低Caspase-3表达及活性,减少SAMP8小鼠脑部神经细胞凋亡.     

含红芪、黄芪的益气养血汤对SAMP8小鼠免疫衰老及p38MAPK表达的影响

目的:比较含红芪和含黄芪的益气养血汤对快速老化小鼠P8(SAMP8)小鼠免疫功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:取昆明种青龄小鼠10只为青龄鼠组,SAMP8小鼠40只随机分为4组,分别为胸腺肽组、生理盐水组、益气养血红芪组和益气养血黄芪组。分别以生理盐水,胸腺肽每日4.6 mg·kg-1,含红芪、黄芪的益气养血汤每日6 g·kg-1剂量ig小鼠,每日1次,连续ig 15次,末次ig后2 h眼球摘除取血及脾脏。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测其血清白细胞介素-2(IL-2),γ干扰素(IFN-γ)含量,流式细胞术检测脾脏淋巴细胞表面CD3,CD4,CD8,CD28及CD152分子的表达情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测p38 MAPK mRNA的表达情况,蛋白质免疫印迹(Western blot)及免疫组化法检测其p38MAPK蛋白表达。结果:与青龄小鼠比较,生理盐水组SAMP8小鼠IL-2,IFN-γ含量降低,CD8,CD28分子表达降低,CD4分子表达及CD28CD152分子双阳性表达增高,p38 MAPK mRNA及蛋白表达降低(P0.05)。与生理盐水组比较,胸腺肽组及中药组均能提高SAMP8小鼠血清中IL-2,IFN-γ含量,胸腺肽组含量高于中药组,红芪组IL-2含量高于黄芪组;胸腺肽组及中药组均能提高CD28分子表达,降低CD28CD152双阳性分子表达,胸腺肽组及黄芪组双阳性表达率低于红芪组;中药组能提高SAMP8小鼠脾淋巴细胞表面CD8分子表达,且黄芪组CD8表达高于红芪组;胸腺肽组及黄芪组能降低CD4分子表达;胸腺肽组及中药组均能提高p38 MAPK mRNA表达,且胸腺肽组mRNA表达高于中药组,黄芪组高于红芪组;胸腺肽组及中药组均能提高p38MAPK蛋白含量及蛋白阳性率,且胸腺肽组优于中药组(P0.05)。结论:含红芪、黄芪的益气养血汤均能改善SAMP8小鼠的免疫衰老现象,增加p38MAPK的表达。     

地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8定位导航学习记忆影响的研究

目的:探讨地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8的定位导航学习记忆的影响。方法:运用Morris水迷宫实验检测地黄饮子对SAMP8小鼠的定位导航学习记忆的改善情况。结果:地黄饮子能够显著缩短SAMP8小鼠在定位导航实验中的逃避潜伏期,提高SAMP8小鼠的学习记忆能力,地黄饮子治疗组与模型组比较差异具有显著性意义。结论:地黄饮子对SAMP8小鼠的定位导航学习记忆能力有一定的改善作用。