不同倍性盾叶薯蓣的生理指标和薯蓣皂苷元量的比较研究

目的通过比较盾叶薯蓣Dioscoreazingiberensis人工四倍体植株和普通二倍体植株在抗性相关指标及薯蓣皂苷元量方面的差异,探索药用盾叶薯蓣倍性育种的应用前景。方法以秋水仙素诱导加倍的、经鉴定确认的3个不同株系四倍体盾叶薯蓣为材料,以二倍体原种为对照,采用分光光度法测定叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(PPO)活性以及可溶性糖的量;高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶(CAT)活性;采用HPLC法测定根状茎薯蓣皂苷元的量。结果四倍体植株SOD、PPO、CAT的活性以及可溶性糖的量明显高于二倍体;四倍体植株薯蓣皂苷元的量显著高于二倍体,增加幅度最大为二倍体原种的27%。结论人工四倍体植株薯蓣皂苷元量高,其生理指标也显示较强的抗性基础,可望直接利用或作为进一步培育高产、高薯蓣皂苷元量薯蓣新品种的良好育种材料。     

不同盾叶薯蓣诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量分析

目的 探讨离体培养中诱导材料对盾叶薯蓣再生植株中薯蓣皂苷元含量的影响.方法 采用高效液相色谱(HPLC)法对不同材料诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量进行分析.结果 薯蓣皂苷元含量高的材料诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量一般也较高;相同材料诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量差异不明显.结论 盾叶薯蓣具有一定的遗传稳定性,要获得薯蓣皂苷元含量不低于2%的皂苷工业原料,选择薯蓣皂苷元含量高的种质引种和培育优良品种是十分重要的.     

盾叶薯蓣航天诱变种子实生苗的生物学特性和有效成分测定

目的:筛选优质盾叶薯蓣种质资源,探讨卫星搭载对盾叶薯蓣变异效应.方法:利用返回式卫星搭载盾叶薯蓣种子进行空间诱变处理,对空间诱变后的2个居群盾叶薯蓣的种子活力、植株生长、染色体以及薯蓣皂苷元含量进行研究.结果:空间诱变后种子表现为萌发提前,但对种子发芽率影响不明显,出现非整倍体和染色体加倍现象,二年生根状茎鲜重和薯蓣皂苷元含量显著高于对照,但三年生根状茎增重变缓,同时薯蓣皂苷元含量均有不同程度下降.结论:卫星搭载对盾叶薯蓣的种子活力有一定的促进作用,同时改变了染色体结构,二年生根状茎鲜重和薯蓣皂苷元含量显著高于对照,提供了良好的选育材料,但三年生的根状茎鲜重增长变缓,薯蓣皂苷元有下降趋势,有待进一步研究.     

盾叶薯蓣离体培养体系的建立及薯蓣皂苷元含量分析

以盾叶薯蓣叶片为外植体,研究不同浓度激素组合对盾叶薯蓣愈伤组织、不定芽及再生植株的影响,并对不同材料诱导获得的再生植株中薯蓣皂苷元含量进行了分析。结果表明,诱导愈伤组织的最适培养基为MS+BA2.0mg·L-1+2,4D0.1mg·L-1;诱导不定芽及芽生长的培养基的最适培养基为MS+BA0.1mg·L-1(0.05mg·L-1)+病毒唑5mg·L-1;诱导试管苗生根的最适培养基为MS/2+IAA0.2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1。相同外植体诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量差异不明显;不同盾叶薯蓣诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量差异明显。     

盾叶薯蓣中薯蓣皂苷提取及检测条件的优化

目的:准确、快速测定盾叶薯蓣中薯蓣皂苷的含量。方法:以薯蓣皂苷含量为评价指标,采用高效液相色谱法对薯蓣皂苷的检测条件进行了优化;同时,运用3因素3水平的正交实验,对薯蓣皂苷的提取条件进行了研究。结果:优化后的检测条件为:C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温30℃,乙腈-水(45∶55),进样量20μL,流速1.0mL.min-1,检测波长210nm。最优提取条件为药材称取量2g,用80%乙醇超声提取40min。结论:优化后的提取及检测条件能快速准确测定盾叶薯蓣中薯蓣皂苷的含量。     

盾叶薯蓣四倍体的鉴定和薯蓣皂苷元的定量分析

目的 提高盾叶薯蓣药材的品质.方法 采用高效液相色谱法,对组织培养条件下诱导获得的盾叶薯蓣四倍体株系试管苗薯蓣皂苷元的量和部分株系一年生田间苗薯蓣皂苷元的量进行了分析,并对部分株系一年生田间苗农艺性状进行了鉴定.结果 经诱导获得的四倍体株系试管苗与对照相比薯蓣皂苷元的量有较大差异;而且四倍体株系试管苗与一年生苗薯蓣皂苷元的量有较强的相关性,大部分四倍体株系表现出典型的多倍体性状.结论 在组织培养的基础上,利用多倍体育种来改善盾叶薯蓣的品质是可行的.     

铁、锰、锌肥对盾叶薯蓣根茎产量及薯蓣皂苷元的影响

目的大田条件下,研究铁、锰、锌肥对盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元量及根茎产量的影响。方法采用单因素施肥法,HPLC法测定薯蓣皂苷元的量,数据采用SPSS13.0软件包分析。结果 3种微肥使盾叶薯蓣根茎产量与薯蓣皂苷元量均有不同程度的增加,对薯蓣皂苷元量的影响为锰肥>锌肥>铁肥,对根茎产量的影响为铁肥>锰肥>锌肥。结论施用适当浓度的锰肥,对盾叶薯蓣的优质、高产栽培,具有重要的实践意义。     

盾叶薯蓣转录组分析及其皂苷元生物合成关键酶基因的挖掘

目的分析比较盾叶薯蓣根茎与叶片的转录组,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因。方法利用Illumina Hi Seq2000高通量测序技术对盾叶薯蓣根茎与叶片进行转录组测序,对测序结果进行注释分析;并结合根茎与叶片中皂苷元的含量测定结果,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因;最后利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术对部分候选基因的表达模式进行分析。结果共获得了81 660个Unigene,有64.33%在NT、NR、Swiss-Prot、KOG、GO、KEGG数据库中得到注释;根据其表达量与代谢通路分析筛选出29种共227个可能参与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径的催化酶基因,部分催化酶基因的表达模式与皂苷元含量具有一定相关性;并发现5个盾叶薯蓣内生菌基因。结论研究初步获得了盾叶薯蓣中参与皂苷元生物合成的候选关键酶基因,部分候选酶基因可能参与盾叶薯蓣中皂苷类成分的后修饰过程,并发现盾叶薯蓣根茎中内生菌可能参与其皂苷元的生物合成,为进一步阐明盾叶薯蓣中皂苷元生物合成的分子机制奠定基础。     

盾叶薯蓣根状茎不同部位和不同生长期薯蓣皂苷元含量的差异性研究

目的 揭示盾叶薯蓣根状茎不同部位和不同生长期中皂苷的积累与分布以及薯蓣皂苷元含量的差异。方法组织化学和高效液相色谱法(HPLC)。结果 皂苷主要分布在基本组织内，有小维管束分布的区域皂苷积累最丰富，薯蓣皂苷元的含量也最高；其次是无维管束分布的区域：有大维管束分布的区域皂苷积累最少，薯蓣皂苷元的含量最低。结论 雄株3个区域的皂苷元含量均明显的高于雌株，雌雄同株其含量界于雄株和雌株之间。     

盾叶薯蓣中有效成分含量的影响因素研究

目的:探讨影响盾叶薯蓣中有效成分含量的因素,更好地控制其质量。方法:参照2010年版《中国药典》(一部)测定水分,高效液相色谱法测定薯蓣皂苷元的含量,对含水量、生长年限、产地及土壤类型与薯蓣皂苷元含量的相关性进行研究。结果:生长在沙土地上的盾叶薯蓣中薯蓣皂苷元含量相对较高,一般生长3~5年薯蓣皂苷元含量达到最大值,而且薯蓣皂苷元含量与盾叶薯蓣根茎中含水量呈正相关,但3个产区的盾叶薯蓣薯蓣皂苷元的含量差别不大。结论:本实验以薯蓣皂苷元为评价盾叶薯蓣质量的指标,分析了生长年限、水分含量、土质、产地等对其质量的影响,为指导工业生产和药农规范化种植,获得更高的经济效益,建立和完善盾叶薯蓣药材的质量标准体系提供参考。     

光强和光质对灯盏花生长与总黄酮量影响的研究

目的光强和光质对灯盏花生长与总黄酮量的影响。方法用遮阳网形成的不同光强以及不同颜色塑料膜下形成的不同光质的光照条件生境下,种植灯盏花试管苗至开花,取样测定生物量和黄酮的量。结果全光照和遮光20%生境中的植物生物量和黄酮的量明显高于遮光50%生境的植株;与无色塑料膜相比,黄、红、紫和蓝色塑料膜下平均植株的生物量均下降;无色和有色塑料膜下,蓝色膜下植株的黄酮量最高,而无色塑料膜下植株的黄酮产量最高。结论光强和光质影响灯盏花生长与总黄酮量,灯盏花在全阳光照射下植株有最高的生物量积累和黄酮产量。     

不同光照强度对虎杖愈伤组织的影响

目的：研究光照强度对虎杖愈伤组织的诱导形成及其白藜芦醇含量的影响。方法：分别以虎杖茎段、叶片为外植体,在不同光照强度下诱导和培养愈伤组织,对愈伤组织生长状况进行观察统计,HPLC测定其中白藜芦醇的含量。结果：光强为1 340～1 560 lx条件下诱导的茎段愈伤组织诱导形成较早,生长速度适宜,维持时间长,且其白藜芦醇质量分数最高,鲜茎中为18.350 μg·g^-1,干茎中为140.074 μg·g^-1,高于同期野生品。结论：不同光照强度下,虎杖愈伤组织的诱导和形态有差别,适当的光照强度能促进虎杖愈伤组织中白藜芦醇的合成。     

霍山县3种石斛叶片光合特性及其对光强的响应

目的研究石斛的光合特性,了解其适宜栽种的光强。方法测定霍山县3种石斛(霍山石斛Dendrobiumhuoshanens,铁皮石斛D.candium,铜皮石斛D.moniliforme)的光合速率对光强响应曲线,不同光强处理时叶绿素荧光参数的变化及3.0×104lx瞬时光强下叶片荧光猝灭诱导。结果霍山县3种石斛属于阴生植物对光强的响应,光饱和点、光补偿点较低,净光合速率和表观量子效率都较低;大于4.0×104lx强光下石斛叶片受光抑制严重。结论霍山县3种石斛生长光强,一般为(0.2～2.0)×104lx;可以在(2.5～3.0)×104lx光强的环境中生长;不适宜在大于4.0×104lx光强的环境中生长。     

光强对野菊生理生化特性的影响

通过分析光强对野菊生长及生理生化特性的影响,揭示适于野菊生长的光照强度,为野菊种植提供参考依据。分别在100%,80%,60%,40%,20%全自然光强水平下种植野菊,生长旺盛期测定野菊相关生长,光合色素含量、光合参数、荧光参数等光合生理及保护酶系统指标,采取透射电镜技术观察叶绿体超微结构。结果表明:野菊叶片在80%以上全自然光强下出现不同程度发黄现象,株高和茎粗在60%全自然光强达到最大值,60%以上全自然光强下野菊分枝数显著增加;光合色素含量和净光合速率均与光强负相关,光合参数与叶绿素荧光参数则随光强下降呈先上升后下降趋势,60%全自然光强下野菊气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率、水分利用效率及PSⅡ实际光化学量子产量等生理指标均处于最高水平;60%~80%全自然光强下野菊叶绿体结构无明显异常,全自然光强下基质片层破碎,20%~40%全自然光强下叶绿体数量、淀粉粒数量与体积均明显降低;随光强下降,SOD与CAT活性呈下降趋势,POD活性呈先上升后下降趋势,MDA含量呈上升趋势。综上,野菊在20%~100%全自然光强下均能生长,但在60%全自然光强下生长最佳。     

艾迪注射液联合高强度聚焦超声治疗原发性肝癌

目的观察艾迪注射液联合高强度聚焦超声治疗原发性肝癌的近期疗效及安全性。方法采用随机分组方法,将符合入选标准原发性肝癌患者分为2组,治疗组26例给予艾迪注射液＋高强度聚焦超声治疗,对照组24例行单纯高强度聚焦超声治疗。观察2组患者治疗前后瘤体大小、AFP、外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞水平、血常规、肝肾功能以及治疗前后临床症状的变化及毒副反应。结果治疗组有效率（CR＋PR）77%,对照组58%（P均〈0.05）。治疗后2组AFP均有显著下降（P〈0.01）,而治疗组下降程度较对照组更明显（P〈0.01）。治疗后治疗组患者的肝区疼痛、发热、腹胀、纳呆、黄疸等症状改善程度均优于对照组（P均〈0.05）,CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋及NK水平改善程度均显著优于对照组（P均〈0.01）。2组患者治疗中均无明显不良反应。结论艾迪注射液联合高强度聚焦超声可以有效地消灭肿瘤及残癌细胞,增强机体免疫功能,是失去手术治疗机会的中晚期肝癌患者有效治疗方法之一。     

艾迪注射液联合高强度聚焦超声治疗原发性肝癌

目的观察艾迪注射液联合高强度聚焦超声治疗原发性肝癌的近期疗效及安全性。方法采用随机分组方法,将符合入选标准原发性肝癌患者分为2组,治疗组26例给予艾迪注射液+高强度聚焦超声治疗,对照组24例行单纯高强度聚焦超声治疗。观察2组患者治疗前后瘤体大小、AFP、外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞水平、血常规、肝肾功能以及治疗前后临床症状的变化及毒副反应。结果治疗组有效率(CR+PR)77%,对照组58%(P均<0.05)。治疗后2组AFP均有显著下降(P<0.01),而治疗组下降程度较对照组更明显(P<0.01)。治疗后治疗组患者的肝区疼痛、发热、腹胀、纳呆、黄疸等症状改善程度均优于对照组(P均<0.05),CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK水平改善程度均显著优于对照组(P均<0.01)。2组患者治疗中均无明显不良反应。结论艾迪注射液联合高强度聚焦超声可以有效地消灭肿瘤及残癌细胞,增强机体免疫功能,是失去手术治疗机会的中晚期肝癌患者有效治疗方法之一。     

光照强度对北细辛生长发育及质量的影响

目的:对给予100%(Ⅰ),50%(Ⅱ),28%(Ⅲ),12%(Ⅳ)自然光照条件的五年生北细辛的展叶期,花期,果初期,果熟期,枯萎期,叶斑病发生程度及发生率,根折干率,挥发油含量及组分进行调查,分析和测试.方法:依照<中国药典>(2010年版)一部规定的挥发油提取方法-XD法对不同光照条件下北细辛根的挥发油进行提取,采用气相-质谱联用仪对不同光照条件下根挥发油组分进行分析.结果:不同光照条件,北细辛的展叶期,花期,结果初期等均随光照强度减弱而推迟2 d左右;Ⅰ～Ⅳ4种光照条件下的叶斑病发病率分别为88.46%,70.00%,0.23%,0.07%,折干率分别为25.14%,28.27%,30.23%,31.57%,挥发油分别为18.1,17.6,16.3,15.3 mL·kg-1,4个光照条件下的挥发油总离子流图存在差异;挥发油的组分类别及含量均存在差异,各组分的含量并未出现随光照强度的减弱呈现逐渐减少/增加的趋势,其中光照条件Ⅲ下,甲基丁香酚最高为46.75%,黄樟醚最低为11.42%.结论:光照条件对北细辛的展叶期,花期,结果初期均有影响,北细辛叶斑病发生率和发生程度均随光照强度减弱而减轻,根折干率随光照强度减弱而增大,挥发油含量随光照强度减弱而减小,同时,光照强度对挥发油的组分类别及含量亦有影响.     

光强对药用白菊花生长发育及光合特性的影响

目的:探讨光强对药用白菊花生长发育及光合特性的影响,为生产栽培提供理论依据.方法:测定不同光强处理(透光率分别为100%,80%,60%,40%,20%)下药用白菊花生长发育指标及光合色素含量,并利用LI-6400型便携式光合作用测定仪及PAM-2100荧光仪测定叶片的光合指标及叶绿素荧光参数.结果:随相对光强的减弱,药用白菊花主茎直径减小,植株高度、叶长、叶宽及长宽比均呈增大趋势,同化产物含量降低;光合色素含量在光强为100%～40%均逐渐增加,20%处理下有所下降,叶绿素a/b值减小;光补偿点降低,表观量子效率(AQY)先升高后下降,净光合速率(P_n)、气孔导度(G_a)、胞间CO_2浓度(C_i)和蒸腾速率(T_r)均呈下降趋势,气孔限制值(L_s)增大;荧光参数PSⅡ最大光能转换效率(F_v/F_m)升高,作用光下实际的PSⅡ光化学效率(ΦPSⅡ)、PSⅡ有效光化学量子效率(F_v'/F_m')、电子传递速率(ETR)、光化学淬灭系数(q~p)在相对光强100%～60%处理下依次升高,非光化学淬灭系数(NPQ)依次下降,相对光强小于40%时,ΦPSⅡ等参数下降,NPQ升高.结论:中度以下弱光条件不利于药用白菊花的生长发育,栽培生产中应以相对光强80%～60%的遮荫度为宜.     

后程调强放疗治疗中晚期鼻咽癌效果分析

目的 探讨后程调强放疗(IMRT)对晚期鼻咽癌治疗的可行性、作用和疗效以及危险器官特别是脑、脊髓的剂量约束.方法 应用6～8 MV直线加速器治疗局部中晚期(Ⅲ～Ⅳ期)鼻咽癌60例,33例采用全程调强,27例采用后程适形调强放疗方式.全调强组GTVnx 72～74 Gy,GTVnd 66 Gy,CTV1 60 Gy,CTV2 54 Gy,30次分割；后调强组前程采用二维普放的面颈联合野+下颈部MLC适形放疗,鼻咽部剂量DT 30 Gy/15f,颈部DT 24 ～ 30 Gy/12～15 f,后程采用适形调强,鼻咽部剂量40 ～42 Gy/17 f,颈阳性淋巴结34～38 Gy/17 f.整个治疗过程均采用热塑膜头颈肩罩固定.2组放疗前均采用GP方案诱导化疗2个疗程.结果 后调强组脑干、脊髓均可在约束范围内,取得与全调强组一样的近期效果.全调强组在腮腺的保护上更有优势；后调强组保证了靶区的不遗漏,靶区的定位、勾画更为精确,同时在脑组织、小脑、口腔的剂量控制上更易.结论 只要前程二维适形与后程调强的剂量分配适当,后程调强治疗中晚鼻咽癌是可行的,且在靶区的定位及勾画上更有优势.同时降低了治疗费用,临床值得推广.     

基于桂枝汤证谈经方研究与临床实践

深入分析《伤寒论》原文,打破传统观点,认为桂枝汤证与太阳中风证是不完全相同的,桂枝汤不是止汗剂,其作用为调和营卫,芍药是不能敛的,第12条全面论述了伤寒初期的证侯,第7条论述了发病与体质的关系,第11条实为对伤寒证与中风证的鉴别。