灯盏细辛的研究进展

灯盏细辛含有黄酮、内酯等１０余种化学成分，其主要有效成分为４＇－羟基黄芩素，具有抗凝血、扩张脑血管、改善微循环、抗心肌梗塞及脑缺氧、防止肾功能衰竭等药理作用。临床用于治疗脑血栓及其瘫痪、冠心病及口疮等疾病。     

灯盏细辛实验研究进展

灯盏细辛又名灯盏花、东菊，盛产于云南，是菊科植物短葶飞蓬[Erigeron brevistapus（Vant）Hand-Mazz．]的干燥全草，《中国药典》1977年版曾予以收载，其性寒、微苦、甘辛，具有散寒解表、祛风除湿、活血化瘀、通经活络、止痛功效，其有效成分为灯盏花总黄酮。现将其制剂实验研究进展综述如下。     

灯盏细辛注射液的临床应用

灯盏细辛注射液是从菊科植物灯盏花中提取精制而成的灭菌水溶液,属纯中药制剂,其有效成分是总黄酮,药理研究证实该药有较强的活血化瘀作用。近年来其临床应用范围日益扩大,可适用于多种疾病的治疗,现综述如下。1不稳定型心绞痛陈丰等[1]将64例不稳定型心绞痛患者随机分为中西药     

贵州产灯盏细辛药材超高效液相指纹图谱研究

目的 建立灯盏细辛药材的超高效液相(UPLC)指纹图谱,为其质量控制提供快速、科学的方法.方法 采用BEHC<,18>色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7 μm),以乙腈-0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,流速为0.35 ml·min<'-1>,进样量1μl,柱温40℃,检测波长290 nm.结果 在16 min内得到灯盏细辛药材的指纹图谱,对其中8个色谱峰进行了初步归属,并对贵州不同产地的12批药材样品进行了分析,其相似度达到0.97以上.结论 相对于HPLC指纹图谱,UPLC指纹图谱方法具有更好的分离效率、灵敏度,并大大缩短了分析时间,适合于灯盏细辛药材的质量控制.     

灯盏细辛治疗2型糖尿病多发性末梢神经病变

目的：探讨灯盏细辛对型糖尿病多发性末梢神经病变的治疗效果。方法：对2型糖尿病患者在常规治疗的基础上加用灯盏细辛治疗,疗程16天。结果：治疗组总有效率为91．2％,对照组总有效率48％,两组相比差异有显著性（P〈0．01）。结论：灯盏细辛是治疗2型糖尿病多发性末梢神经病变的有效药物。     

灯盏细辛注射液不良反应个案文献计量学分析

目的:探讨灯盏细辛注射液所致不良反应的一般规律及特点,指导临床合理用药。方法:通过检索1979—2012年国内公开发表的医学期刊报道应用灯盏细辛注射液致不良反应案例,并进行文献计量学分析。结果:共检索到灯盏细辛注射液不良反应个案报道15篇涉及25例,其不良反应与性别、年龄、溶媒、剂量、联合用药有相关性,临床主要表现为过敏反应,严重者可出现过敏性休克及多器官功能损害。结论:临床医师及药师应了解灯盏细辛注射液所致不良反应的规律和特点,规范合理用药,加强应用监测,减少不良反应的发生。     

灯盏细辛化学成分及药理作用研究进展

灯盏细辛为菊科飞蓬属植物,已从中分离得到黄酮及其苷、咖啡酸酯、挥发油等化学成分。现代药理研究表明,其具有神经保护、心脑血管保护、抗氧化、抗癌、抗炎等药理作用。本研究通过检索国内外文献及资料,对其化学成分及药理作用进行综述,以期为该植物的深入开发研究提供参考。     

灯盏细辛注射液治疗脑梗死30例

我们近年采用灯盏细辛注射液治疗脑梗死 30例,收效良好.现报告如下.     

灯盏细辛注射液治疗脑梗死疗效观察

目的观察灯盏细辛注射液治疗脑梗死的临床疗效.方法将患者 61例随机分为治疗组与对照组.两组均予西医常规治疗,治疗组加用灯盏细辛注射液静滴.结果治疗组疗效优于对照组.结论灯盏细辛注射液对脑梗死有较好疗效.     

灯盏细辛注射液和灯盏花素的HPLC-DAD对比分析

目的:比较灯盏细辛注射液和灯盏花素的成分异同.方法:高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD):Hyper-sil ODS2(250×4.6mm,5μm)色谱柱,乙腈-水-磷酸(18:82:0.2)为流动相,流速0.8ml/min,检测波长286nm,柱温40℃.结果:灯盏细辛注射液色谱图中有10个峰的紫外光谱与咖啡酸的吸收带和谱线轮廓相似、野黄芩苷的峰极低;灯盏花素片色谱图的主要峰为野黄芩苷峰.结论:临床用途相同的灯盏细辛注射液与灯盏花素片在主要化学成分类型上截然不同.     

灯盏花快速繁殖体系的建立

目的为加速灯盏花的人工种植与品种改良,利用组织培养技术建立灯盏花快速繁殖体系。方法利用种子直接萌发的无菌苗在培养基培养加速种苗繁殖,通过在消毒前对种子进行预处理,采用合适时间消毒种子来减少消毒剂对种子伤害从而提高发芽率;采用不同激素配比从叶片与叶柄诱导愈伤组织,并进一步分化获得再生植株。结果种子去除冠毛后0.1%HgCl2消毒6min可获得最佳发芽率,MS0上培养一个月后即可获得生长健壮的幼苗用于移栽;利用无菌苗的叶柄在MS 6-BA2.0mg/L NAA1.0mg/L培养基上获得了大量分化能力强的愈伤组织,愈伤分割后在该培养基上可继续分化出苗,分化苗转接到MS0上可形成正常植株。结论利用种子灭菌处理获得无菌苗用于组织培养可实现灯盏花快速繁殖和缩短人工育苗时间。     

光强和光质对灯盏花生长与总黄酮量影响的研究

目的光强和光质对灯盏花生长与总黄酮量的影响。方法用遮阳网形成的不同光强以及不同颜色塑料膜下形成的不同光质的光照条件生境下,种植灯盏花试管苗至开花,取样测定生物量和黄酮的量。结果全光照和遮光20%生境中的植物生物量和黄酮的量明显高于遮光50%生境的植株;与无色塑料膜相比,黄、红、紫和蓝色塑料膜下平均植株的生物量均下降;无色和有色塑料膜下,蓝色膜下植株的黄酮量最高,而无色塑料膜下植株的黄酮产量最高。结论光强和光质影响灯盏花生长与总黄酮量,灯盏花在全阳光照射下植株有最高的生物量积累和黄酮产量。     

灯盏细辛中1个新咖啡酰酯类化合物的分离鉴定及抗肿瘤活性研究

目的 研究灯盏细辛Erigeron breviscapus的化学成分及其体外抗胶质母细胞瘤和结肠癌活性。方法 采用大孔树脂柱色谱、中压制备色谱、高压制备色谱等多种方法进行分离和纯化,利用1D-NMR、2D-NMR、HR-ESI-MS、UV、IR等波谱技术对分离得到的化合物进行结构鉴定,采用CCK-8法对新化合物的活性进行筛选。结果 从灯盏细辛80%甲醇提取物中分离得到4个化合物,分别鉴定为反式-4-咖啡酰氧基-3-羟基-6-咖啡酰氧甲基-7,8-二氧杂环[3.2.1]辛烷-1-羧酸（1）、异绿原酸A（2）、绿原酸（3）和新绿原酸（4）;其中化合物1对人胶质瘤U87细胞和人结肠癌HT29细胞的半数抑制浓度（half inhibitory concentration,IC₅₀）分别为（13.31±0.77）、（14.83±0.92）μmol/L。结论 化合物1为新化合物,命名为新飞蓬酯乙;化合物1对肿瘤细胞的增殖具有一定的抑制作用。     

移栽与摘除首花对灯盏细辛种子生产的影响

目的 探讨移栽与摘除首花对灯盏细辛种子生产的影响.方法 采用移栽和摘除首花的正交试验设计,每3天采种1次,测定每批种子的产量、千粒质量和发芽率.采种后测定植株地上部分产量和药用成分量.结果 移栽处理的种子成熟期延长了12 d,种子产量、千粒质量、发芽率比直播分别提高了2.33倍、26.2%和2.03倍,二者存在显著性差异(P＜0.05).与不摘除首花植株相比,摘除首花处理的种子的产量、千粒质量、发芽率分别提高了19.4%、8.4%和58.8%,同样存在显著性差异(P＜0.05).移栽与摘除首花具有交互作用,但无统计学意义的显著性.采种后,"直播×摘除首花"处理的植株地上部分有较高产量和药用成分.结论 移栽和摘除首花能有效地提高灯盏细辛种子产量和质量.     

灯盏花MYB基因克隆及其荧光表达载体的构建

目的克隆灯盏花MYB基因的全长序列,为解析灯盏花MYB基因的功能奠定基础。方法根据灯盏花转录组的相关信息,利用RACE方法从灯盏花中克隆到一个可能参与灯盏花乙素合成的MYB基因,在对其cDNA序列、核苷酸序列的相似性、理化性质、疏水性、跨膜结构、二级结构及三级结构进行分析预测的基础上,对其进行多序列比对并构建系统树。同时,还构建了该基因与绿色荧光蛋白的融合表达载体,并进行了初步转化研究。结果克隆获得灯盏花MYB基因,命名为ebMYB06,其开放阅读框为783 bp,编码260个氨基酸残基,相对分子质量为63 800,理论等电点(p I)为5.18,属稳定蛋白。其蛋白二级结构主要由无规卷曲、α-螺旋和β-折叠构成。根据灯盏花MYB与拟南芥MYB(AtMYB)的系统树比对分析结果,发现ebMYB基因与拟南芥中的AtMYB4、7、32、6、8和AtMYB11、12、111 2亚群的基因聚类,推测所克隆基因在结构或功能上,可能与这两组具有共同性。实验还表明所构建的表达可用于灯盏花的高效转化。结论首次从灯盏花中克隆到可能参与其苯丙烷代谢或环境响应调控的MYB基因。     

HPLC指纹图谱结合化学计量学的不同产地灯盏花药材和近缘种样品的质量评价

目的建立灯盏花药材HPLC指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供依据。方法采用Zorbax SB-C18柱(150mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,体积流量为1 mL/min,检测波长335 nm,柱温30℃,对19批灯盏花药材和3批近缘种进行检测。通过相似度评价,结合聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),对不同产地的灯盏花药材及近缘种进行质量评价。结果通过建立灯盏花药材HPLC指纹图谱的共有模式,确定了11个色谱峰作为指纹图谱的共有峰,并根据对照品指认了5个共有峰,19批灯盏花药材的相似度为0.873～0.978,3批近缘种中一年蓬和多舌飞蓬的相似度较高;HCA和PCA均可将19批灯盏花药材分为3类,且分类结果一致。PCA将19批灯盏花药材和近缘种中相似度结果较高的一年蓬和多舌飞蓬进行综合评价,综合得分结果显示其中澄江梁王山野生的灯盏花药材质量最优,多舌飞蓬质量尚可,多舌飞蓬有代替灯盏花药材的可能性。结论灯盏花的HPLC指纹图谱的构建和化学模式识别可为药材质量控制提供全面的参考。     

基因枪介导灯盏花遗传转化及几个影响因素的研究

目的获得具有较强抗虫抗真菌的转基因灯盏花植株。方法通过PCR聚合酶链式反应得到目的基因RBB I2-3,通过中间载体PBS及植物载体YY 46,得到带有目的基因的质粒,用基因枪轰击法进行遗传转化。对基因枪轰击受体、轰击压力、抗生素庆大霉素(G en t.)的敏感性进行对照实验。结果用灯盏花的真叶作为基因枪轰击受体效果最好,其次为型愈伤组织,灯盏花的根、茎,型愈伤组织作为基因枪轰击受体效果较差;8.96×106Pa的轰击压力诱导灯盏花的真叶形成转基因不定芽效果最好,型愈伤组织效果次于真叶;使用50μg/mL Gent.作选择压力筛选Gent.标记的阳性转基因灯盏花植株效果最好。结论用基因枪轰击法将水稻RBBI2-3基因转移到灯盏花中具有较好效果,成功获得转基因灯盏花植株。     

含灯盏花中成药DNA提取及其分子鉴定

目的:优选适用于含灯盏花中成药的DNA提取方法和聚合酶链式反应(PCR)扩增引物,并通过测序和系统发育分析实现对其原料灯盏花的分子鉴定。方法:采用4种十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)改良方法对3种含灯盏花的中成药进行DNA提取,测定DNA的纯度和浓度。采用内转录间隔区(ITS)、matK、psbA-trnH、rbcL位点通用引物对提取的中成药DNA进行PCR扩增,并对PCR扩增最佳位点进行测序,通过构建系统发育树进行分子鉴定。结果:4种CTAB改良方法均能获得含灯盏花中成药DNA,其中CTAB改良方法一提取的DNA质量浓度显著高于其他改良方法;PCR扩增中以matK位点2对引物(matKXF/matK5R或matK3F/matK1R)最佳,可通过1次PCR成功获得具有单一条带且浓度较高的PCR产物,序列与灯盏花对照药材同源性为100%,系统发育树显示可与同属其他植物区分。结论:通过CTAB改良方法一可以有效提取含灯盏花中成药样品的DNA,采用matK位点引物matKXF/matK5R或matK3F/matK1R进行1次PCR扩增并对产物进行测序,通过序列比对可完成其原料灯盏花的鉴定。     

低氮胁迫灯盏花全植株的转录组文库构建及其测序

目的为探寻药用植物灯盏花Erigeron breviscapus的遗传背景,利用低氮胁迫的灯盏花全植株构建了转录组文库,并利用新一代测序技术进行测序。方法采用改良异硫氰酸胍-CTAB法,提取低氮胁迫灯盏花植株及其对照植株的总RNA,经富集m RNA、打断、构建测序用c DNA文库。结果通过测序,低氮和正常样本分别获得3 587万条和2 582万条测序读长(raw reads),总数据量超过6 G,碱基错误率低于1%(Q20)的数据分别为98.37%和98.67%。经de novo组装,总共得到101、156条Unigene,平均读长768 bp,N50为1 290 bp,其中44.39%长度超过500 bp。101、156条Unigene中,58.86%在公共数据库中比对到相似序列,89.08%Unigene在Nr数据库比对到相似序列。得到灯盏花黄酮类合成途径中包括苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酰-4-羟化酶(C4H)、查耳酮合成酶(CHS)、查耳酮异构酶(CHI)、黄烷酮3-羟化酶(F3H)、类黄酮3′-羟化酶(F3′H)、花色素还原酶(ANS)等序列。结论灯盏花的转录组信息得到较好的保存,为下一步灯盏花遗传环境互作研究及分子辅助育种奠定基础。     

灯盏细辛中咖啡酰奎宁酸防治缺血性脑卒中的研究进展

灯盏花制剂广泛地应用于脑卒中的治疗,以灯盏细辛提取物制备的药物中,咖啡酰奎宁酸类成分的数目、量都不容忽视。因此,对灯盏细辛中咖啡酰奎宁酸类成分的结构、含量、治疗缺血性脑卒中的临床报道以及对相关靶点的药理作用及其机制进行综述。灯盏细辛中已发现22个咖啡酰奎宁酸类化合物,占所有报道的灯盏细辛中化合物的29%;总多酚平均量为36.93%,灯盏细辛注射液中该类成分约占95%以上,高于灯盏乙素;临床研究证实灯盏细辛注射液能提高缺血性脑卒中急性期治疗的有效率,改善神经功能缺损,安全性好;药理研究显示咖啡酰奎宁酸类化合物具有抗氧化、抗自由基、抗凝血、抗炎和抗纤维化等作用,可以保护神经细胞、血管内皮细胞、神经胶质细胞、星形细胞等,抑制炎症因子白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等,提升超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,可以在缺血性脑卒中的不同治疗阶段发挥作用,是灯盏细辛中一类值得重视的化学成分。