丹参骨髓腔内注射对兔股骨头坏死破骨细胞数量的影响

目的:复制激素性股骨头坏死动物模型,观察兔破骨细胞数量,从分子水平探讨丹参注射液骨髓腔内注射预防激素性股骨头缺血性坏死的可行性及机制。方法:选用家兔30只,随机分为对照组、模型组、丹参注射液预防组,每组10只。糖皮质激素诱导兔激素性股骨头坏死动物模型,造模同时预防组行骨髓腔内注射丹参注射液,每侧0.4 mg.kg-1,每周2次,连续8周。8周后观察3组家兔破骨细胞数量及组织病理学的改变。结果:预防组能有效的降低破骨细胞数量及股骨头空骨陷窝率。结论:丹参骨髓腔内注射可抑制破骨细胞生成,对早期激素性股骨头缺血性坏死有预防作用。     

丹参注射液骨髓腔内注射对兔血液生化的影响

目的:探讨丹参注射液骨髓腔内注射预防激素性股骨头缺血性坏死的可行性和机制。方法:选用家兔30只,随机分为三组:对照组、模型组、预防组,每组10只。糖皮质激素诱导激素性股骨头坏死动物模型,造模同时预防组行骨髓腔内注射丹参注射液。第8周观察三组家兔血脂、血钙磷及组织病理学等指标的改变。结果:预防组能有效的降低血脂、股骨头空骨陷窝率,升高血清钙、血清钙磷乘积。结论:大剂量激素能够成功诱导兔股骨头坏死动物模型,脂肪代谢紊乱和骨质疏松可能是股骨头缺血性坏死的重要发病机制。丹参骨髓腔内注射给药对早期激素性股骨头缺血性坏死有较好的预防作用。     

不同引经药对股骨头坏死模型兔骨髓干细胞归巢的影响

目的:观察比较活骨Ⅱ方配伍不同引经药对液氮冷冻性股骨头坏死(ONFH)兔股骨头内骨髓干细胞归巢的影响,探讨其防治ONFH的作用机制。方法:84只兔经液氮冷冻法建立股骨头坏死模型后,随机分为模型、活骨Ⅱ方及活骨Ⅱ方分别加牛膝、细辛、独活和桔梗(简称活骨、牛膝、细辛、独活和桔梗)等6组,另14只设为假手术组。在造模同时所有动物均皮下注射rhG-CSF(30μg.kg-1.d-1,连续7 d),并分别灌胃生理盐水和相应中药。于注射rhG-CSF前后分别进行外周血WBC计数。分别于给药2周和4周后,股骨头经HE染色观察组织病理学改变,血管墨汁灌注观察血管形态,免疫组织化学法检测BrdU及SDF-1的表达。结果:与假手术组相比,模型组股骨头空骨陷窝率明显升高,血管面积和SDF-1蛋白表达水平显著降低;与模型组相比,活骨Ⅱ方组股骨头空骨陷窝率降低,血管面积增大、BrdU阳性细胞数和SDF-1表达升高;与活骨Ⅱ方组比较,牛膝组给药4周时股骨头内空骨陷窝率降低、血管面积增大,2周时SDF-1表达增高;桔梗组股骨头内空骨陷窝率有增高趋势,4周时BrdU阳性细胞数明显减少;细辛和独活组无明显变化。结论:活骨Ⅱ方能通过促进动员起来的骨髓干细胞定向归巢从而防治股骨头坏死;引经药牛膝可进一步提高活骨Ⅱ方的上述作用。     

骨复活汤配合介入对兔SANFH股骨头局部VEGF表达的影响

目的：观察骨复活汤配合股动脉药物灌注治疗实验性SANFH股骨头局部VEGF的表达。方法：用Shw-artzman反应和大剂量甲基强的松龙造成兔股骨头坏死模型,造模后第2周随机分为3组,介入组经左侧股动脉注射尿激酶和丹参注射液;骨复活汤配合介入组在介入组基础上,同时骨复活汤灌胃给药;对照组经股动脉注射生理盐水。在治疗后4周,对股骨头标本进行VEGF免疫组化染色。计数VEGF阳性成骨细胞率、阳性软骨细胞率和阳性血管率,并进行统计学分析。结果：骨复活汤配合介入组比介入组能提高VEGF阳性成骨细胞率、阳性软骨细胞率和阳性血管率,改善骨坏死。结论：骨复活汤配合介入能改善骨坏死,其机理在于促进VEGF等细胞因子的分泌从而加速股骨头的再血管化和再骨化进程。     

介入配合骨复活汤对激素性股骨头缺血性坏死股骨头局部血管内皮生长因子表达的影响

目的：观察股动脉药物灌注配合骨复活汤治疗实验性激素性股骨头缺血性坏死（SANFH）股骨头局部血管内皮生长因子（VEGF）的表达。探讨介入配合骨复活汤对骨坏死再血管化和再骨化的机理。方法：新西兰兔24只,利用大肠杆菌内毒素和大剂量甲基强的松龙造成兔股骨头坏死模型,造模后第2周随机分为3组：介入组：经左侧股动脉注射尿激酶3万U和丹参注射液2mL;介入配合骨复活汤组：给药同介入组,同时每天给予骨复活汤灌胃给药;对照组：经股动脉注射生理盐水4mL。在治疗后4周,对股骨头标本进行VEGF免疫组化染色。计数VEGF阳性成骨细胞率、阳性软骨细胞率和阳性血管率,并进行统计学分析。结果：介入配合骨复活汤组比介入组能提高VEGF阳性成骨细胞率、阳性软骨细胞率和阳性血管率（P〈0．05）,改善骨坏死。结论：介入配合骨复活汤能改善骨坏死,其机理在于促进VEGF等细胞因子的分泌从而加速股骨头的再血管化和再骨化进程。     

激素性股骨头坏死介入治疗过程中VEGF表达的实验研究

目的：观察股动脉药物灌注治疗实验性激素性股骨头坏死过程中血管内皮细胞生长因子(Vas-cular endothelial growth factor VEGF)的表达，进一步探讨VEGF对骨坏死再血管化和再骨化的机理。方法：新西兰兔48只，耳缘静脉注射50ug/kg大肠杆菌内毒素（LPS），24小时后重复，在第二次注射LPS后，臀肌注射甲基强的松龙（MP）20mg/kg，3次，每次间隔24小时，造模后第四周随机分为三组；动脉治疗组；经左侧股动脉注射尿激酶3万u和丹参注射液2ml；静脉治疗组；经耳缘静脉注射尿激酶3万u和丹参注射液2ml；对照组；经股动脉注射生理盐水4ml。在治疗后的1周，2周，3周和4周，对股骨头标本进行HE，苏丹Ⅲ染色，纤维蛋白血栓染色和VEGF免疫组化染色，观察股骨头软骨下骨的脂栓栓塞，血栓栓塞和骨坏死情况，计数VEGF阳性成骨细胞率，阳性软骨细胞率和阳性血管率，并进行统计学分析。结果：动脉治疗比静脉治疗能更快，更有效的降低脂栓栓塞和血栓栓塞，提高VEGF阳性成骨细胞率，阳性软骨细胞率和阳性血管率，改善骨坏死，结论：股动脉灌注治疗股骨头坏死比静脉治疗更快速有效。其机理在于溶解血栓和脂栓再通已经阻塞的血管，促进VEGF等细胞因子的分泌从而加速股骨头的再血管化和再骨化进程。     

富血小板血浆联合骨髓间充质干细胞对兔股骨头坏死的影响

目的:研究富血小板血浆(PRP)联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)对兔股骨头坏死的治疗效果.方法:随机将50只新西兰兔随机分为空白对照组、模型组、PRP(3％)组、BMSCs(1×106/mL)组、PRP与BMSCs联合组.无菌环境下,建立兔股骨头坏死模型,术后4周PRP组1次性注射植入RPR 12 mg,BMSCs组单纯1次性注射植入BMSCs 1 mL,PRP与BMSCs联合组股骨头内髓芯减压后1次性注射植入BMSCs 1 mL与PRP12 mg复合物,空白对照组与模型组不植入任何物质作为对照.造模后第12周,取材.采用HE染色,光镜下观察骨髓腔内骨小梁结构和骨细胞、脂肪细胞的变化情况;蛋白质印迹法(Western blot法)检测损伤的兔股骨髓中血小板衍生因子(PDGF)蛋白的表达水平.结果:与空白对照组比较,模型组骨髓腔内骨小梁变细或坏死,骨细胞减少,骨头疏松,脂肪细胞增多.骨陷窝空缺率高(P＜0.05).与模型组比较,各治疗组骨髓腔内骨小梁变粗,排列整齐,骨细胞增多,脂肪细胞减少.骨陷窝空缺率降低,差异有显著性意义(P＜0.05).PRP组、BMSCs 组、PRP与BMSCs联合组骨髓组织PDGF蛋白表达水平与模型组相比均有明显的提高,其中PRP与BMSCs联合组PDGF蛋白表达水平最高(P＜0.05).结论:PRP,BMSCs在一定程度上可使骨细胞增殖,减少骨陷窝空缺率,抑制骨髓腔内脂肪细胞,增加损伤股骨头中骨髓组织PDGF蛋白表达,促进股骨头再生.     

右归饮对家兔激素性股骨头坏死骨髓脂肪化的影响

为观察右归饮对激素性股骨头坏死骨髓脂肪化的影响,探讨其防治作用机理。采用醋酸氢化泼尼松臀肌注射造模,设模型组、治疗组和正常组,应用PAS-8000病理图象分析系统分别测定各组髓腔内脂肪细胞面积,并观察股骨头局部病理形态改变、计数骨陷窝空虚率。结果显示,与正常组比较,模型组髓腔内脂肪细胞面积显著增大(P<0.01),骨陷窝空虚率显著增高(P<0.01)。与模型组比较,治疗组髓腔内脂肪细胞面积明显减少(P<0.01),骨陷窝空虚率明显降低(P<0.01)。表明右归饮可抑制股骨头髓腔内骨髓脂肪化,认为这可能是右归饮通过拮抗激素诱导骨髓基质细胞成脂分化同时促进成骨修复达到防治激素性股骨头坏死作用的机理。     

髋关节脱位法联合液氮冷冻法建立兔早中期创伤性股骨头坏死动物模型观察

【目的】 观察髋关节脱位法联合液氮冷冻法建立兔股骨头坏死动物模型的效果。【方法】 选取健康成年雄性日本大耳白兔28只，在无菌条件下使用外科手术法暴露股骨头，采用髋关节脱位法联合液氮冷冻法建立股骨头坏死模型。分别于造模后4、8周观察兔股骨头形态，并给予X线及MRI检查。在术后4、8周分别处死12、13只兔子，取造模侧股骨头观察骨小梁和髓腔的组织形态学变化。【结果】 所有实验兔术后无明显感染迹象。造模后8周股骨头组织学结果发现空骨陷窝率增加，为8%~12%，超过正常兔股骨头软骨下区空骨陷窝率，符合股骨头坏死的判断标准，提示造模成功。【结论】 采用髋关节脱位联合液氮冷冻法建立兔创伤性股骨头坏死模型，操作简单，动物死亡率较低，稳定可靠，可重复性好。     

仙鹿活骨丸对激素性股骨头坏死细胞凋亡影响的实验研究

目的 从微观结构变化考察仙鹿活骨丸对激素性股骨头坏死细胞凋亡影响,为临床应用提供参考.方法 给大鼠臀肌注射醋酸强的松龙造成激素型股骨头坏死模型,通过原位细胞凋亡检测、光镜和电镜考察仙鹿活骨丸对激素性股骨头坏死细胞凋亡影响.结果 原位细胞凋亡检测分析,发现模型大鼠给仙鹿活骨丸后细胞凋亡数量明显减少;光镜观察可以发现,仙鹿活骨丸可以减少空缺骨陷窝数,降低股骨头组织坏死程度.电镜观察可以发现,仙鹿活骨丸治疗后的骨细胞细胞核染色质和染色体相对均匀,线粒体、高尔基体、内质网等细胞器增多,而糖原溶解与脂肪空泡均较模型对照组减少,因而可提高成骨细胞骨形成的功能,有助于股骨头缺血性坏死修复过程.结论 仙鹿活骨丸可以减少激素性股骨头坏死细胞凋亡,改善坏死部位的组织形态学,治疗股骨头坏死.     

生脉成骨方与动脉灌注川芎嗪对兔股骨头坏死促成骨作用及DR评价

目的：探讨x线检查评价生脉成骨方与动脉灌注川芎嗪联合用药对兔股骨头坏死促成骨的疗效。方法：新西兰大白兔股骨头坏死模型经生脉成骨方灌胃给药与动脉灌注不同剂量川芎嗪联合用药，观察各组股骨头坏死修复程度的x线表现。结果：各实验组坏死股骨头DR均表现骨小梁增粗，增多，股骨头塌陷程度不同，以川芎嗪中、高剂量组坏死骨修复程度最佳。结论：生脉成骨方具有促成骨疗效，与动脉灌注川芎嗪联合用药疗效更佳。     

温阳补肾方对激素性股骨头坏死模型兔股骨头形态学的影响

目的:观察温阳补肾方对激素性股骨头坏死模型兔股骨头形态学的影响。方法:136只新西兰大白兔随机分为正常组、模型组、中药低、中、高剂量组。造模成功后,分别于给药后第4、8、12周取双侧股骨头行常规苏木精-伊红染色,计算空骨陷窝率。结果:第4、8、12周时,正常组、中药中、高剂量组空骨陷窝率均明显低于模型组(P0.01)。结论:大剂量激素使用可增加股骨头空骨陷窝率,使骨过度吸收从而破坏骨质导致股骨头坏死。温阳补肾方可以降低空骨陷窝率,抑制破骨细胞的活化,促进新骨的形成。     

活骨Ⅱ方加不同引经药对股骨头坏死兔股骨头内血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察比较活骨Ⅱ方配伍不同引经药对股骨头坏死(0NFH)兔股骨头内血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨其防治ONFH的作用机制.方法:84只兔经液氮冷冻法建立股骨头坏死模型后,随机分为以下6组:模型组活骨Ⅱ方组、活骨Ⅱ方加不同引经药组(牛膝、独活、细辛和桔梗),另14只设为伪手术组.造模后中药组立即分别给予活骨Ⅱ方(6 g·kg-1·d-1)、活骨Ⅱ方(6 g·kg-1·d-1)加引经药(牛膝0.75 g·kg-1·d-1,细辛0.15 g·kg-1·d-1,独活0.75 g·kg-1·d-1,桔梗0.75 g·kg-1·d-1,分别相当于临床等效量)灌胃,连续4周;模型和伪手术组给予生理盐水灌胃,所有动物均皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF) 30 μg· kg-1 ·d-1,连续7d.实验2周和4周时取左侧股骨头,分别行苏木精-伊红(HE)染色观察其组织病理学改变和墨汁灌注染色观察股骨头内血管形态变化,并经免疫组织化学法检测股骨头内VEGF的表达水平.结果:与伪手术组相比,模型组实验2周和4周时股骨头空骨陷窝率显著增多,血管面积及VEGF表达明显减少(P ＜0.01或P ＜0.05).活骨Ⅱ方能显著降低股骨头空骨陷窝率,并提高血管面积及VEGF的表达(P＜0.01或P＜0.05).与活骨Ⅱ组相比,牛膝组4周时空骨陷窝率显著减少,血管面积明显增多(P＜0.01或P＜0.05),2周和4周VEGF表达均明显增多(P＜0.01);桔梗组4周时VEGF表达显著降低;细辛和独活组无显著变化.结论:引经药牛膝具有进一步提高活骨Ⅱ方上调股骨头内VEGF表达的作用,这可能是其有效改善股骨头血循环、防止坏死的机制之一.     

仙花活骨丹颗粒对激素性股骨头缺血坏死血液流变学及血脂的影响

目的:探讨仙花活骨丹颗粒(丹参、骨碎补等)治疗激素性股骨头坏死的作用机理,为临床用药提供理论依据.方法:健康成年新西兰大白兔40只,分为正常组、模型组、马氏骨片组、仙花活骨丹颗粒组.除正常组外,其余3组用醋酸泼泥松龙注射液肌注造模.自第9周起正常组、模型组以生理盐水灌胃,仙花活骨丹颗粒组以仙花骨丹颗粒水溶液灌胃,马氏骨片组以马氏骨片水溶液灌胃.14周后一次处死动物并取材,制作H·E病理切片,测定血液黏度和血脂含量.结果:仙花活骨丹颗粒组与模型组比较,血液黏度和血脂含量显著下降,骨小梁较为饱满,骨细胞大部分正常,髓腔内虽然有部分脂肪细胞,但造血细胞较为丰富,空缺骨陷窝数为16.4%,显著好于模型组(P＜0.01).结论:仙花活骨丹颗粒能改善病变股骨头内微循环与促进成骨细胞的分化增值,从而加速骨坏死修复过程.     

桃红四物汤对激素性股骨头缺血坏死局部微血管密度的影响

目的：通过观察桃红四物汤对激素性股骨头缺血性坏死股骨头局部微血管密度的影响，进一步阐明活血化瘀法防治激素性股骨头缺血性坏死的机理。方法：60只健康成年新西兰大白兔，随机分正常组6只和实验组54只，采用贺氏造模法，6周后处死正常组6只和实验组6只，确定造模成功；将剩余实验动物随机分为治疗组和对照组：治疗组以桃红四物汤7ml／kg灌胃治疗，一日一次，对照组以生理盐水7ml／kg治疗，一日一次。并分别于治疗后第1、2、4周全部处死取材。分别进行股骨头组织病理学观察，并检测股骨头局部微血管密度的变化。结果：①对照组空缺骨陷窝数明显增多，骨小梁稀疏，髓腔脂肪细胞增大、增多；治疗组空缺骨陷窝数减少，骨小梁增多、增密；②治疗组股骨头局部微血管密度明显高于对照组股骨头局部微血管密度。结论：桃红四物汤能促进激素性股骨头缺血性坏死股骨头局部微血管的生长，改善股骨头局部血运，促进坏死股骨头的修复。     

丹仙康骨胶囊对激素性股骨头缺血坏死血运变化的影响

目的探讨经验方制剂丹仙康骨胶囊治疗激素性股骨头缺血坏死的作用机理,为临床用药提供理论依据.方法6月龄中国家兔46只,分为正常组、模型组、中药治疗组.模型组与治疗组用氢化醋酸泼尼松肌注造模,A组肌注生理盐水.实验四周后正常组、模型组以生理盐水、中药治疗组以丹仙康胶囊灌胃,分别于治疗后4、8、12周分批处死.测定血清总胆固醇,甘油三酯与高密度脂蛋白,观察股骨头血运变化,并以肝脏,睾丸,卵巢进行组织形态学观察.结果中药治疗组与模型组比较,其股骨头墨染增多,骨陷窝空虚数减少,骨髓纤维增生,坏死骨小梁周围可见到增生的成骨细胞,血清总胆固醇,甘油三酯均显著降低,而高密度脂蛋白则增高(P<0.05或0.01),肝细胞脂肪样变减轻,可见到肝索结构,睾丸卵巢纤维化好转.结论丹仙康骨胶囊能改善病变股骨头内微循环与促进成骨细胞的分化增殖,从而加速骨坏死修复过程.