中成药非法添加化学成分检测方法研究进展

综述了近年来中成药非法添加化学成分的现状以及中成药非法添加化学成分几种常用的检测方法:化学法、薄层色谱法、高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱联用技术、超高效液相色谱法、高效毛细管电泳技术、红外光谱法、拉曼光谱法,为药品技术监督工作提供了参考.     

3种补肾壮阳类中药制剂中违法添加枸橼酸西地那非的含量测定方法研究

目的:探讨补肾壮阳类中药制剂中违法添加枸橼酸西地那非的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱条件:kromasilC18(250×4.6mm,5μm)为固定相,乙腈水冰醋酸三乙胺(35∶65∶0.8∶0.4v/v)为流动相,流速0.8ml/min,紫外检测波长290nm。结果:枸橼酸西地那非的浓度在10～800μg/ml范围内呈良好的线性关系。结论:本法可作为补肾壮阳类中药制剂中违法添加枸橼酸西地那非的含量测定方法。     

UPLC/Q-TOF-MS法检测2种中成药中土霉素、马来酸氯苯那敏和醋酸泼尼松

目的建立UPLC/Q-TOF-MS法检测2种止咳平喘类中成药中非法添加的土霉素,马来酸氯苯那敏和醋酸泼尼松。方法咳喘王胶囊和清肺胶囊以甲醇提取;Agilent SB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相为甲醇-10 mmol/L醋酸铵溶液(含0.1%甲酸);离子源为ESI;正离子检测方式;利用保留时间、DAD紫外光谱图、一级质谱、二级质谱碎片信息等4方面信息并结合数据库进行定性、定量测定。结果 2批胶囊中均检测出以上3种非法添加成分。结论本方法专属性强、灵敏度高、操作简便,可用作止咳平喘类中成药的常规检测。     

某药酒中非法添加PDE5抑制剂的HPLC检测

目的建立快速、准确的检测中药保健品中非法添加磷酸二酯酶5(PDE5)抑制剂的方法。方法采用高效液相色谱法(HPLC)检测,DiamonsilC18色谱柱;流动相:乙腈-0.05mol·L-1三乙胺(用磷酸调PH至6.0)=40:60,流速1.0mL·min-1,检测波长290nm。结果该保健酒中未检出PDE5抑制剂:枸橼酸西地那非、盐酸伐地那非、他达拉非。结论该方法灵敏度高,重复性好,可用于PDE5抑制剂的定性检查。     

UPLC-MS定性定量检测中成药中非法添加的盐酸克仑特罗

目的:建立UPLC-MS方法,快速定性定量检测中成药中非法添加的盐酸克仑特罗.方法:采用超高效液相色谱串联三重四极杆质谱仪.色谱条件:Agela Venusil MP-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3μm),柱温35℃,流动相甲醇-0.2％甲酸水溶液(50:50),流速0.3 mL·min-1.质谱条件:ESI源,多反应检测(MRM).以保留时间及定性离子对之间的相对丰度定性,以定量离子对峰面积定量.结果:盐酸克仑特罗在1.092～27.300 μg·L-1呈现良好的线性关系(r＞0.9998);平均加样回收率97.26％;定量限为0.19 pg.结论:本方法定性可靠、定量准确,且快速简便,可用于中成药非法添加盐酸克仑特罗化学药品的检测.     

平喘镇咳类中成药中非法添加4种化学药品检验方法的研究

目的:探讨检测平喘镇咳类中成药中非法添加4种化学药品方法.方法:对中成药中常见添加的盐酸麻黄碱、醋酸泼尼松、磷酸可待因、醋酸地塞米松等4种化学药品进行检测,建立HPLC方法对样品进行分离测定.结果:在不同的色谱条件下,4种化学药品均可被检出.结论:本方法简便、实用、专属性强,可用于检验平喘镇咳类中成药中非法添加的化学药品.     

UPLC-MS-MS快速检测中成药及保健食品中非法添加的38种糖皮质激素

目的:建立一种快速、准确检测中成药及保健食品中非法添加38种糖皮质激素的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS-MS),Acquity BEH-C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相0.1%乙酸乙腈溶液(A)-0.1%乙酸水溶液(B)梯度洗脱,流速0.3 m L·min~(-1),柱温25℃,电喷雾电离(ESI),正离子扫描,多反应监测(MRM)模式测定38种糖皮质激素,通过比较MRM模式下各通道样品峰与对照品峰的分子离子峰、二级碎片离子峰、色谱保留时间等信息确定添加的化学药物,并根据外标法以质谱峰面积计算添加药物的准确量。结果:在上述色谱及质谱条件下,38种糖皮质激素分离度良好,方法检测限(LOD)0.3~1.6μg·L~(-1),定量限(LOQ)1.0~5.4μg·L~(-1),加样回收率在80.9%~119.4%。结论:该方法简便、准确,灵敏度高,可用于中成药及保健品中非法添加糖皮质激素的检测。     

UPLC-Q-TOF检测止咳平喘类中成药中非法添加的8种化学药品

目的:建立止咳平喘类中成药中非法添加的8种化学药品的检测方法。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF),MS模式进行检测。采用Waters Acquity BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相甲醇-0.1%甲酸的10 mmol·L-1甲酸铵溶液梯度洗脱,流速0.4 m L·min-1;离子源ESI源,正离子检测,扫描范围m/z 100~600。对茶碱、磺胺甲噁唑、氯苯那敏、苯海拉明、喷托维林、苯丙哌林、醋酸泼尼松、地西泮进行定量检测。结果:8种化学药品的线性范围分别为1.251~62.55,1.043~52.15,1.057~52.85,1.002~50.10,1.147~57.35,1.069~53.45,0.991~49.55,1.111~55.55 mg·L-1,8种化学药品平均回收率在97.8%~103.2%。结论:该方法快速、简便、准确,可用于止咳平喘类中成药中非法添加8种化学药品的快速检测。     

壮阳作用药酒中枸橼酸西地那非非标研究

目的研究并建立高效液相色谱法及薄层色谱法测定壮阳作用药酒中枸橼酸西地那非非法添加方法。方法高效液相色谱法及薄层色谱法。结果薄层色谱法:GF254薄层板,以正己烷-乙醇-氨水(30∶70∶1)为展开剂,在碘蒸汽中熏5分钟后,置254nm紫外灯下检视。高效液相色谱法:C18柱,流动相为0.05mol/L磷酸三乙胺(取7ml三乙胺用水稀释至1000ml,用磷酸调至3.0)-甲醇-乙腈(58∶25∶17),检测波长290nm。结论此高效液相色谱法及薄层色谱法测定壮阳作用药酒中枸橼酸西地那非可靠有效。     

液质联用检测中成药和保健食品中非法添加的48种抗生素类成分

目的建立了液相色谱-离子阱质谱联用定性测定48种磺胺类、喹诺酮类,四环素类、氯霉素类、大环内酯类和抗真菌类的方法,并用于中成药和保健食品非法添加的检测。方法样品通过甲醇超声振荡提取,其液相色谱分离采用Agilent Eclipse Plus C18柱,流动相A为0.2%甲酸,流动相B为甲醇,梯度洗脱;使用Ion-trap LC/MS分析模式,电喷雾离子源、正离子模式检测。通过与标准谱库中保留时间和多级质谱图的数据进行比对,定性确定样品中添加的抗生素种类。结果 10批中成药中有1批检出氧氟沙星,25批保健食品中有7批检出磺胺甲噁唑。结论本方法解决了5对同分异构体的分离和质谱鉴定问题,并实现同一液质系统内分析多种结构类型的化合物,特别适合中成药和保健食品中违禁抗生素类化学药品的测定。     

HPLC/UV/MS鉴别中药制剂中糖皮质激素的方法研究

目的建立鉴别中药制剂中可能添加的糖皮质激素的分析方法。方法采用高效液相色谱、质谱法。SUPELCO Discovery C18（250 mm×4.6 mm,5μm）分析柱;乙腈-水为流动相进行梯度洗脱;检测波长为243 nm;流速1.0 mL/min;电喷雾离子源,采用质谱多重反应监测（MRM）扫描方式。结果在该液相条件下,能同时有效分离6种糖皮质激素。应用该法鉴定了中药制剂中的糖皮质激素,通过液相色谱保留时间、相对分子质量、二级质谱碎片信息等方面信息,可确定样品中含有氢化可的松、醋酸泼尼松龙。结论本测定方法简便、灵敏,专属性强,可为中药制剂中糖皮质激素的检测提供快捷有效的分析方法。     

HPLC-MS/MS 检测中药制剂及保健食品中添加 6 种减肥药物的研究

 目的 建立专属、灵敏的 HPLC-MS/MS 方法甄别中药制剂及保健食品中可能添加的氯噻嗪、盐酸西布曲明、酚酞、吲哒帕胺、布美他尼、吉非罗齐等 6 种化学减肥药物。 方法 样品经甲醇提取， 采用液相色谱 - 离子阱质谱联用法测定。色谱条件： Inertsil ODS-3 色谱柱 (4.6 mm × 250 mm ， 5 m m) ，梯度洗脱： 流动相 A 为 0.1% 醋酸溶液；流动相 B 为乙腈， 质谱条件：离子源 ESI ， 选择正负离子全扫描、选择离子监测 (SIM) 、多反应监测 (MRM) 方式检测临床常用的 6 种化学减肥药物，研究了这 6 种药物的质谱裂 解规律。 通过比较样品峰与对照品峰的相对分子质量、二级质谱碎片信息和液相色谱保留时间，确定样品中是否违法添加了化学药物 。 结果 应用本法 检测了 12 批市售减肥类中药制剂及保健食品 ， 其中 1 种减肥保健食品中检出西布曲明及酚酞， 1 种减肥保健食品中检出西布曲明，另外 2 种减肥保健食品检出酚酞 。 结论 该法 简便、快捷，灵敏度高、 专属性强，可作为 检测中药制剂及保健食品中非法掺入减肥类化学药的有效手段 。     

UPLC-MS/PDA检测中药制剂中醋酸泼尼松和醋酸地塞米松的研究

 目的建立快速、准确、高灵敏度的测定中药平喘制剂中醋酸泼尼松和醋酸地塞米松检测的方法。方法采用UPLC-MS/PDA法,以甲醇-0.01mol·L^-1醋酸铵(0.1%甲酸)缓冲溶液梯度洗脱,流速0.2mL·min^-1,离子源为ESI源,正离子检测,对中药制剂中非法添加醋酸泼尼松和醋酸地塞米松进行定性定量分析,并对其裂解途径进行解析。结果6批受试制剂中有2批分别检测到有醋酸泼尼松和醋酸地塞米松。结论此方法选择性强、灵敏度高,可作为分析中药制剂中醋酸泼尼松和醋酸地塞米松的有效检测方法。     

中成药和保健食品中非法添加肾上腺皮质激素类药物的检测方法研究

目的:建立准确、灵敏的HPLC-MS/MS方法,检查中药制剂及保健食品中非法添加的6种肾上腺皮质激素类药物.方法:样品经甲醇提取,采用液相色谱/电喷雾离子化质谱法测定.色谱条件:Agilent ZORBAX SB-C18(2.1 mm×150mm,3.5 μm),柱温35℃,流动相以乙腈-0.1%甲酸溶液进行梯度洗脱,流速:0.25mL/min;质谱条件:以电喷雾电离源正离子模式进行质谱数据采集.结果:6种肾上腺皮质激素药物HPLC图谱分离度良好,质谱分辨率符合鉴别要求.HPLC-MS/MS方法测定上述化学物质的最小检出量为2-14ng.结论:该方法简便,快捷,灵敏度、准确性、重复性均可满足定性检查的要求.     

制备薄层色谱 联合 FTIR 检测中药制剂中添加化学药品方法的研究

 目的 建立中药制剂中非法添加化学药品的检测方法。 方法 采用制备薄层色谱将掺有非法添加化学药品的中药制剂进行分离、浓缩后，测定其红外光谱图，将可疑成分的红外光谱图与其在薄层色谱上对应对照品的红外光谱图进行比较，根据它们的峰位置、峰形状和相对峰强度来判定中药制剂中是否非法添加了化学药品。 结果 用该方法对 3 种镇静安神类和 1 种止喘类中药制剂进行检测，我们检测出解郁安神颗粒中有非法添加的地西泮，丹莲安神胶囊中有非法添加的氯硝西泮，消喘灵中有非法添加的醋酸泼尼松和地西泮。 结论 将制备薄层色谱与红外光谱法结合起来，可快速准确地判定中药制剂中是否含有非法添加的化学药品，为中药制剂中非法掺入化学药品的检测提供了一种新的方法和手段。     

高效液相色谱-串联质谱法测定中药制剂中西地那非的含量

 目的建立一种简单、快速、灵敏、准确地鉴定中药制剂中是否添加西地那非的高效液相色谱串联质谱(LC/MS/MS)的分析方法。方法样品经C₁₈(4.6mm×250mm,5μm),流速200μL·min^-1,乙腈-0.05mol·L^-1乙酸铵(1:1)流动相进行分离。在ESI正离子采集模式下,采用LC/MS/MS的多反应监测(MRM)对西地那非进行定量监测,采用外标法定量。结果本方法满足分析要求,并对12种市场上中药中西地那非进行定量测定。结论目前市场中药制剂中存在添加西地那非的现象。     

中药及保健食品中PDE5抑制剂检测方法研究及未知衍生物的发现

 目的为打击中药制剂及保健食品中非法添加化学药物现象,针对常见的5型磷酸二酯酶(PDE5)抑制剂,研究建立了快速理化鉴别方法和HPLC-MS/MS方法。方法采用Waters Sunfire C₁₈色谱柱,梯度洗脱:流动相A为20 mmol·L^-1醋酸铵溶液,流动相B为甲醇-乙腈(2∶1),检测波长为230 nm,流速为1 mL·min^-1(分流比为4∶1)。选择正负离子全扫描方式检测。结果在上述色谱及质谱条件下,对于常见的3种PDE5抑制剂进行了质谱裂解规律的分析总结,并用于未知衍生物的结构推测,成功检测出3个衍生物,其中一个结构未见报道,本所根据核磁共振图谱确定了结构。结论该方法简便,快捷、灵敏度、准确性、重现性均可满足定性检查的要求。     

中药制剂及保健品中违禁添加7种降糖药物的LC-MS/MS定性检测

 目的建立快速、准确的检测中药制剂及保健品中违禁添加降糖药物的分析方法。方法采用C₁₈柱分离,以甲醇-10mmol·L^-1醋酸铵缓冲溶液(0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速0.2mL·min^-1,离子源为ESI源,正离子检测,对中药中非法添加格列本脲、格列吡嗪、格列美脲、格列奇特、瑞格列奈、盐酸吡格列酮、盐酸二甲双胍进行定性检测。结果5批受试制剂中有1批检测到违禁添加格列本脲。结论此方法选择性强、灵敏度高,可作为分析中药制剂中违禁添加格列本脲、格列吡嗪、格列美脲、格列奇特、瑞格列奈、盐酸吡格列酮、盐酸二甲双胍的有效检测方法。     

液质联用检查15种降压类药物及数据检索库的建立

 目的为打击中药制剂及保健食品中非法添加化学药物现象,建立准确、灵敏的HPLC-MS/MS方法甄别中药制剂及保健食品中可能添加的15种化学降压药物。方法采用Waters Sunfire C₁₈色谱柱,梯度洗脱:流动相A为20 mmol·L^-1醋酸铵溶液,流动相B为甲醇-乙腈(2∶1),检测波长为230 nm,流速为1 mL·min^-1(分流比为4∶1)。选择正负离子全扫描方式检测临床常用的15种降压药,利用质谱解析软件研究了上述化合物的质谱裂解规律。通过比较样品峰与对照品峰的一级质谱、二级质谱质荷比,确定样品中是否掺杂了化学药物。结果在上述色谱及质谱条件下,15种降压药物HPLC图谱分离度良好,质谱分辨率符合鉴别要求。HPLC-MS/MS方法测定上述化学物质的最小检出量为1～80 ng。结论该方法灵敏度、准确性、重现性均可满足定性检查的要求,简便,快捷。