葛根和粉葛高效液相色谱指纹图谱及化学模式识别

目的:建立并比较葛根和粉葛的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为其质量控制提供依据。方法:采用HPLC法,色谱柱为Kromasil C_(18)(4.6 mm×200 mm),流动相为乙腈-0.03 mol/L醋酸铵溶液(梯度洗脱),流速为0.9m L/min,柱温为40℃,检测波长为250 nm,进样量为20μL。收集16批次的葛根和粉葛样品进行测定,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版》软件进行相似度评价,采用聚类分析和主成分分析对指纹图谱进行化学模式识别研究。结果:16批葛根和粉葛药材的指纹图谱有6个共有峰,经对照指认出葛根素、大豆苷、大豆苷元和染料木素的色谱峰。相似度分析结果显示葛根和粉葛的相似度较高,均在0.910以上;聚类分析将葛根和粉葛样品分别归为两类;主成分分析提取得到8个主成分,累计方差贡献率达到93.548%,前3个主成分得分投影结果与聚类分析基本一致。结论:葛根和粉葛所含化学成分既有一定的相似性,也存在一定差异,该方法可作为葛根和粉葛的质量控制及临床应用的依据。     

不同产地葛根与粉葛的HPLC指纹图谱及其多成分化学模式识别分析

目的:建立葛根与粉葛的HPLC特征图谱,结合化学模式识别方法对不同产区的葛根与粉葛进行区分,并鉴别葛根产区,为科学评价和有效控制二者的质量提供参考。方法:利用HPLC检测23批葛根或粉葛药材,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004A版)软件进行相似度评价,建立共有模式。以其色谱峰信息为数据来源,利用3种化学模式识别方法综合分析葛根和粉葛药材的质量。结果:除了样品S22(陕西产地)之外,不同产区的葛根和粉葛的相似度均 0.9;说明葛根与粉葛药材的相似度良好,采用特征图谱相似度评价方法无法区分葛根与粉葛药材。利用主成分分析只能鉴别葛根与粉葛;偏最小二乘法-判别分析其模型解释度96.4%,预测度74.6%,能够区分葛根与粉葛,并能区分葛根的产区;系统聚类分析与偏最小二乘法-判别分析结果较为一致。结论:利用化学模式识别方法可快速区分葛根与粉葛,鉴别葛根产区,适用于葛根与粉葛的药材质量评价。     

葛根药材HPLC指纹图谱与6种成分含量测定研究

目的 建立葛根Pueraria lobate药材HPLC指纹图谱，并测定不同产地葛根中6种成分(3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、葛根素芹菜糖苷、大豆苷、大豆苷元)的含量，为葛根优质药材产地与质量控制提供参考。方法 采用HPLC法，葛根药材30%乙醇提取液的分析采用Hypersil BDS C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);0.1%甲酸水-乙腈为流动相，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；检测波长250 nm；柱温25℃。建立32批葛根药材指纹图谱，并测定不同产地葛根药材6种成分的含量。结果 建立了葛根药材HPLC指纹图谱，共提取出10个共有峰，指认6个共有峰；建立了含量测定方法，并对不同产地来源的32批葛根药材中6种成分含量测定，不同产地葛根质量对比综合评分结果显示河南最高，其次为陕西。结论 建立了葛根HPLC指纹图谱方法，通过对比，各样品与对照图谱相似度均大于0.9，为葛根道地药材质量标准提供整体质量控制依据。结合产地调研信息，可将葛根优质原料药材产地优选为陕西、河南秦岭山脉。     

葛根芩连胶囊HPLC特征图谱研究

目的:建立葛根芩连胶囊的特征图谱,为其质量控制提供参考。方法:采用高效液相法建立10批葛根芩连胶囊的特征谱图,采用相似度计算、聚类分析对葛根芩连胶囊质量进行判别分析。结果:建立了葛根芩连胶囊HPLC指纹图谱,并获得了10批样品的相似度(相似度均0.9);确定共有峰11个,通过和对照品谱图比对分析,确定1号峰为3′-羟基葛根素,2号峰为葛根素,3号峰为3′-甲氧基葛根素,4号峰为葛根素木糖苷,5号峰为大豆苷,8号峰为盐酸小檗碱,9号峰为盐酸巴马汀,10号峰为黄芩苷。通过聚类分析,10批葛根芩连胶囊可以分为2类。结论:所建立的特征图谱分析方法灵敏度高、结果准确、专属性强,为葛根芩连胶囊的质量控制提供了有效的技术方法,可用于葛根芩连胶囊的质量控制。     

基于聚类分析和主成分分析的叶下珠多酚部位HPLC指纹图谱研究

目的：建立基于聚类分析和主成分分析的不同产地叶下珠多酚部位高效液相色谱（HPLC）指纹图谱分析方法。方法：采用HPLC法测定9个不同产地叶下珠多酚部位指纹图谱,对其进行相似度分析、聚类分析和主成分分析,高效液相色谱-质谱（HPLC-MS）指认主要成分。结果：叶下珠多酚部位指纹图谱检出7个共有峰,指认了其中5个共有峰,9个不同产地叶下珠多酚部位相似度达到0.972-0.998,聚类分析和主成分分析从化学成分上说明了9批样品的相似性及差异性。结论：以指纹图谱数据为基础,将聚类分析与主成分分析结合起来进行识别,为叶下珠药材的资源利用提供依据。     

葛根高效液相色谱法指纹图谱及模式识别研究

目的建立葛根药材高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱,为葛根质量评价提供依据。方法采用Waters Acquity HPLC SunFire C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.2%乙酸水溶液梯度洗脱,流速0.8 mL/min,柱温30℃,检测波长为250 nm,建立葛根药材指纹图谱共有模式。将相似度评价与模式识别相结合,并构造质量评价函数对不同批次葛根药材进行质量评价。结果采用建立的葛根药材HPLC指纹图谱方法确定了24个共有峰,并对其中5个共有峰进行了指认,分别为3′-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆苷元。12批葛根药材相似度相似度均大于0.950,聚类分析与主成分分析结果一致,均将药材分为4类。构造的质量评价函数表明聚为同类的药材函数值相近,并据此对所划分的4类葛根药材进行了质量评价,S5、S7、S11质量较好,S2、S3、S4质量较差,其余药材接近平均水平。结论葛根HPLC指纹图谱重复性好,稳定可靠,可为葛根的质量控制和评价提供依据。     

补肾活血方与其组方药材指纹图谱的相关性

目的建立补肾活血方(地黄、丹参、葛根、人参)的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱,研究该方与其组方药材指纹图谱的相关性。方法通过HPLC-DAD-ELSD法建立复方及各单味药材指纹图谱,以色谱峰保留时间和紫外光谱信息为考察指标。结果补肾活血方HPLC-DAD-ELSD指纹图谱中标定了35个共有峰,其中有10个色谱峰来自丹参,9个来自葛根,9个来自人参,地黄对共有峰的贡献不明显。另外,1个色谱峰为丹参和葛根共有,6个色谱峰不能明确其来源。结论 HPLC-DAD建立的指纹图谱反映丹参和葛根中化学成分的相似度较高(均大于0.8),而HPLCELSD建立的指纹图谱反映人参中化学成分的相似度相对偏低。     

不同产地佛手指纹图谱及模式识别研究

目的：建立不同产地佛手指纹图谱,利用模式识别方法比较不同产地佛手的差异。方法：本文采用高效液相色谱法对4个产地25批佛手建立高效液相指纹图谱,利用相似度评价技术、聚类分析、主成分分析进行分析研究。结果：从已建立的佛手指纹图谱中确定26个共有峰,指认出4个共有峰,利用聚类分析、主成分分析可区分佛手产地。结论：研究结果表明,不同地理位置佛手药材相似度存在一定差异,地理位置相近的佛手药材相似度较高。     

蜂胶提取物红外指纹图谱研究

目的 考察不同产地蜂胶提取物样品的红外指纹图谱差异,构建蜂胶提取物的红外指纹图谱。方法 采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)建立不同产地蜂胶提取物红外指纹图谱,应用OMNIC软件对数据进行预处理,Matlab7.0比较各样品的相似度,SPSS17.0统计软件进行聚类分析。结果 FTIR图谱在690~1760 cm-1波数范围内吸收峰差异较大,可作为蜂胶提取物的指纹特征,红外指纹图谱结合聚类分析的方法,可作为蜂胶快速鉴别的方法。结论 该方法简便、稳定,可用于蜂胶的鉴别和质量评价。     

基于黄酮类成分HPLC指纹图谱的鸡骨草叶及饮片品质评价

目的 建立鸡骨草叶黄酮类HPLC指纹图谱,开展鸡骨草叶及饮片品质分析,为鸡骨草质控提供依据。方法 采用 RP-HPLC法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18 （250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-0.2%乙酸,梯度洗脱;波长：330 nm;流速1.0 mL·min-1。开展鸡骨草叶黄酮类HPLC指纹图谱、相似度和聚类分析,开展鸡骨草饮片黄酮类指纹图谱和品质分析。结果 建立了15批鸡骨草叶黄酮类HPLC指纹图谱,标记出10个特征共有峰,峰面积总和>95%,不同样品相似度存在一定差异,第Ⅰ类鸡骨草叶,产地较近,相似度>96;第Ⅱ类鸡骨草叶,产地较远,相似度0.32~0.84;第Ⅲ类为毛鸡骨草叶,产地接近第Ⅰ类,相似度0.85~1.00;20批饮片样品HPLC指纹图谱相似度在0.58~0.96之间。结论 产地、基源和部位等均影响着鸡骨草品质;所建黄酮类HPLC 指纹图谱法符合指纹图谱的要求,可用于鸡骨草叶及饮片的品质评价。     

A comparative study on aqueous root extracts of Pueraria thomsonii and Pueraria lobata by antioxidant assay and HPLC fingerprint analysis

The roots of Pueraria thomsonii and Pueraria lobata are officially recorded in Chinese Pharmacopoeia under the same name Radix Puerariae. However, the aqueous root extract of Pueraria lobata showed more potent antioxidant activity than that of Pueraria thomsonii. A qualitative HPLC method was developed to compare the chemical profiles of Pueraria thomsonii and Pueraria lobata, which revealed four major common peaks (daidzein 1, daidzin 2, puerarin 3 and 5-hydroxypuerarin 4) and two major different peaks (3-hydroxypuerarin 5 and 3'-methoxypuerarin 6) in their chromatograms. Semi-quantitative analysis showed that the contents of 1-3 in Pueraria lobata are about three, three, and five times higher than those of Pueraria thomsonii, respectively. The higher contents of isoflavonoids in Pueraria lobata were inferred to be responsible for its more potent antioxidant activity as compared with that of Pueraria thomsonii. The HPLC method developed in this study and chemical markers 1-6 can be used for the rapid identification and evaluation of Radix Puerariae herbs and their aqueous supplements, and the results of this investigation support the use of Pueraria lobata and Pueraria thomsonii in the clinic application and as dietary supplement, respectively.     

粉葛提取物的制备工艺

目的:研究粉葛提取物的制备工艺.方法:以葛根素含量为考察指标,采用单因素及正交试验法筛选粉葛的提取工艺;以葛根素含量及特征图谱主要特征峰面积的转移率为考察指标,评价粉葛提取物的各工艺步骤.结果:优选的提取工艺为采用8倍量30％乙醇,加热回流3次,每次2h,葛根素提取率达97％以上;主要制备工艺步骤为饮片→醇提液→浓缩液→醇沉液→浸膏→提取物,各工艺步骤的葛根素转移率分别为97.89％±2.17％,81.70％±2.12％,74.92％±1.92％,72.15％±1.06％,50.64％±2.57％(n=3),表明葛根素在干燥步骤中损失较大;特征图谱结果显示,各工艺步骤均能保留粉葛的7个特征峰,其中峰1及峰6的转移率较高,峰2,3,4,5,7的转移率均较低;粉葛提取物的得率5.09％±0.06％,葛根素质量分数( 29.262±1.500) mg·g -1.结论:工艺合理、稳定、可行,为含粉葛的中药复方制剂工艺提供了参考.     

论古今药用葛根的品种

对历代本草学的整理研究认为，最早药用的葛根应为汉唐时期记载的豆科植物食物食用葛根ＰｕｅｒａｒｉａｅｄｕｌｉｓＰａｍｐ．的根，宋代本草新增了豆科甘葛藤Ｐ．ｔｈｏｍｓｏｎｉＢｅｎｔｈ．及三根叶葛藤Ｐ．ｐｈａｓｅｏｌｏｉｄｅｓ（Ｒｏｘｂ．）Ｂｅｎｔｈ．的根，而豆科葛Ｐ．ｌｏｂａｔａ（Ｗｉｌｄ．）Ｏｈｗｉ的根为近现代的新兴品种，《本草纲目》记载有野生和家种二种，故认为古今药用葛根的品种有别。     

RAPD技术在葛属药用植物分类和鉴定中的应用

为探讨葛属植物间的亲缘关系,并为分类和鉴定提供依据,采用ＲＡＰＤ技术对葛属６种植物进行分析,利用ＲＡＰＤ（Ｖｅｒｓｉｏｎ４．０）及ＰＨＹＬＩＰ（Ｖｅｒｓｉｏｎ３．５Ｃ）软件包进行数据处理,ＵＰＧＭＡ法聚类分析得到系统树。结果发现,峨嵋葛与野葛间的遗传距离小,应归并为野葛,野葛与粉葛、山葛间的遗传距离大,粉葛、山葛应独立成种。ＤＮＡ指纹图谱可用于葛属植物间的鉴别。     

野葛块根及藤茎采收年限研究

目的确定野葛块根和藤茎的最佳采收年限，为野葛的野生资源保护和规范化种植供理论依据。方法采用HPLC法测定不同生长年限的野葛块根及藤茎葛根素含量。结果一年生块根和藤茎葛根素含量均最低，分别为1．82％和1．25％；而五年生葛根和二年以上藤茎含量最高，分别为7．86％和3．02％。结论采收五年生的野葛块根入药和二年生以上藤茎较好。     

野葛葛根素积累动态的研究

目的：研究野葛块根中葛根素积累的动态规律,为确定野葛药材的最佳采收期以及野葛藤蔓的综合利用提供理论依据。方法：采用HPLC测定不同生长年限、不同采收时期的野葛块根及藤蔓葛根素含量。结果：野葛块根中葛根素动态积累有一定规律,葛根素含量以4～5年生块根最高,6年生块根含量降低;每年的11～12月块根中葛根素含量达到全年最高值;当年生藤蔓含葛根素约1．4％。结论：野葛的最佳采收期为11月下旬至翌年3月中旬,采挖4年生块根为宜;此时藤蔓葛根素含量不低,值得作为提取葛根素的另一重要原料综合利用。     

HPLC法测定两种葛根中葛根素含量

目的：采用HPLc测定野葛和粉葛两种葛根中葛根素的含量。方法：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇一水（25：75）为流动相，检测波长为250nm。结果：通过方法学考察，取样量在0．16～0．80μg（r=0．9999）围内呈良好线性关系，加样回收率为97．88％（n=6）RSD为2．4％．结论：方法系统，操作简单，数据准确，重现性好，可作为葛根配方及加工原料选择依据及质量标准的含量测定方法。另外，野葛葛根素含量较粉葛高     

高效液相色谱法测定不同地区葛根中葛根素含量

目的：研究测定不同地区葛根中葛根互的含量差异。方法：以山东、陕西、湖南等不同地区的葛根为原料,用高效液相色谱法测定其葛根素的含量。结果：不同地区１２个品种的葛根素含量分别为２．８１％,４．６１％,２．０２％,６．５７％,０．５５％,３．７９％,２．２２％,３．４４％,２．８１％,４．２８％,７．７８％,６．４８％。结论：不同产地葛根中葛根素含量差异较大,葛根药材收购及葛根素生产单位应予注意。     

中药葛根及其近缘种的rDNA-ITS序列分析

 目的探讨中药葛根及其近缘种的分类地位及系统发育关系，同时为葛根的指纹图谱鉴别提供分子标记。方法测定并分析葛属3种植物的内转录间隔区(ITS)序列及5.8S-rRNA基因序列。结果测得该属3种植物的片段包括ITS1，5.8S和ITS2全长序列以及18S，26S部分序列。野葛与粉葛的ITS1，ITS2的差异性分别在2.10%和2.09%以内,而山葛与野葛、粉葛在ITS1，ITS2的差异性则分别达到8.14%和12.82%以上。根据ITS序列特征构建的系统树，不同产地的野葛首先聚类，然后与粉葛聚在一起，山葛最后聚类。结论根据分子性状特征，粉葛作为野葛的变种，山葛独立成种较为合理。ITS序列特征是中药葛根鉴别的有效分子标记。     

HPLC测定葛根饮片中5个成分的含量

目的:建立HPLC测定葛根饮片中3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、大豆苷元-8-C-芹菜糖-(1→6)葡萄糖苷和大豆苷5个成分含量的方法.方法:采用Zorbax C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5 μm),以甲醇-0.02％磷酸(25∶75)为流动相,检测波长250 nm.结果:方法学考察合格,并测定了12批葛根饮片中5个成分的含量.结论:该方法简便、快速、准确度高,可作为葛根饮片的质量标准.