滋阴泻火中药对雌性性早熟模型大鼠下丘脑生长激素释放肽及其受体GHSR1-α表达的影响

目的观察滋阴泻火中药对达那唑诱导的雌性性早熟模型大鼠青春期启动时下丘脑生长激素释放肽(Ghrelin)及其受体(growth hormone secretion peptide receptor 1α,GHSR1-α)表达的影响。方法将40只雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、生理盐水干预组及中药干预组,每组10只。模型组、生理盐水干预组及中药干预组于大鼠5日龄时一次性皮下注射达那唑300μg制备性早熟大鼠模型。15日龄起中药干预组、生理盐水干预组分别予滋阴泻火中药及生理盐水灌胃,给药干预7~10天,正常组不予处理。记录阴门开启情况,计算卵巢及子宫指数,检测外周血雌二醇(E2)、卵泡雌激素(FSH)、黄体生成素(LH)、下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)含量、下丘脑Ghrelin及其受体GHSR1-α基因表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠阴门开启时间提前,外周血E2、LH水平、子宫指数、下丘脑GnRH含量升高,外周血FSH、下丘脑Ghrelin及GHSR1-αmRNA水平降低(P0.05,P0.01);与模型组及生理盐水干预组比较,中药干预组大鼠阴门开启时间未提前,外周血E2、LH水平、子宫指数及下丘脑GnRH含量明显降低(P0.05,P0.01),而下丘脑Ghrelin及GHSR1-αmRNA水平升高(均P0.01);4组间下丘脑Ghrelin及受体个数及活性比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论在基因转录水平上滋阴泻火中药对性早熟大鼠下丘脑Ghrelin及其受体有一定的调节作用。     

补肾中药对雌性青春期大鼠垂体GnRH受体mRNA及其受体蛋白表达的影响

目的：观察补肾中药对垂体促性腺激素释放激素（GnRH)受体及其基因表达的影响,探讨补肾中药调整下丘脑－垂体－性腺轴功能的作用环节及作用机理。方法：将青春期大鼠分为对照组、滋阴泻火组和益肾填精组,采用免疫组织化学方法检测GnRH受体的蛋白表达水平,采用原位杂交组织化学方法检测GnRH受体mRNA表达水平。结果：给予滋阴泻火中药合剂后,大鼠垂体GnRH受体mRNA表达水平显著下调,GnRH受体蛋白合成减少;而给予益肾填精中药合剂后,大鼠垂体GnRH受体mRNA表达水平显著上调,GnRH受体蛋白合成增多。结论：不同补肾中药可通过改变垂体GnRH受体及其mRNA表达水平,调节下丘脑－垂体－性腺轴的功能。     

电针对去卵巢大鼠下丘脑GnRH系统影响的分子机制

目的：探索电针调整下丘脑垂体卵巢轴功能异常的中枢机制，观察切除卵巢后大鼠下丘脑GnRH及其受体改变，以及电针对它们的影响。方法：应用免疫组化和RT-PCR方法，观察大鼠切除卵巢4星期后，下丘脑GnRH免疫阳性神经元数量和分型、GnRH免疫阳性纤维的变化以及GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的改变，及电针对它们的影响。结果：电针后，大鼠下丘脑GnRH神经元数目较去卵巢4星期时明显增多，棘型细胞比例增加，纤维膨体密度增加，下丘脑组织GnRHmRNA表达增高，垂体GnRH受体mRNA表达升高。结论：电针可在分子水平调整去卵巢大鼠中枢GnRH的合成与释放，以及垂体GnRH受体的表达，这可能是电针调整下丘脑－垂体卵巢轴功能异常的中枢机制。     

滋阴疏肝方对雌性中枢性性早熟大鼠褪黑素和受体表达的影响

目的:研究滋阴疏肝方对雌性中枢性性性早熟(CPP)大鼠的治疗作用,并探讨其对褪黑素及受体表达的影响。方法:SD雌性大鼠32只出生后随机分为正常组、模型组、亮丙瑞林组、滋阴疏肝方组。除正常组外,其余各组大鼠5日龄皮下注射300μg达那唑建立中枢性性早熟模型。亮丙瑞林组、滋阴疏肝方组大鼠15日龄给予亮丙瑞林(100μg/kg)和滋阴疏肝方(48g/kg)进行干预。通过肉眼观察各组大鼠阴门开启情况;阴道涂片法观察第1个发情间期出现的时间;取卵巢、子宫称重计算脏器系数;制作常规组织病理切片观察子宫、卵巢的组织形态并计算子宫壁厚度和卵巢黄体个数;检测血清中的促黄体生成素(LH)和雌二醇(E2)水平;检测下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)mRNA的表达,对滋阴疏肝方对中枢性性早熟大鼠的治疗作用进行判定,并检测夜间血清褪黑素(MT),通过RT-PCR法检测下丘脑褪黑素受体MT1、MT2 mRNA的表达,探讨滋阴疏肝方对褪黑素及受体表达的影响。结果:滋阴疏肝方(48g/kg)能明显降低雌性中枢性性早熟大鼠的子宫系数,降低卵巢系数,减少阴道开口数,降低子宫壁厚度和黄体生成数,降低促黄体生成素和雌二醇,升高夜间血清褪黑素,且能下调下丘脑GnRH mRNA,上调褪黑素受体MT1 mRNA的表达。结论:滋阴疏肝方可能通过升高夜间血清褪黑素,上调下丘脑MT1 mRNA的表达,抑制下丘脑GnRH的合成和释放,从而抑制下丘脑-垂体-性腺轴的启动,达到治疗中枢性性早熟的目的。     

疏肝泻火方对雌性性早熟大鼠性腺、雌激素和下丘脑GnRH、垂体GnRH-R表达的影响

目的:观察疏肝泻火方对雌性性早熟大鼠性腺、雌激素和下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、垂体促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)表达的作用。方法:取SD雌性大鼠60只,随机分为正常对照组、性早熟模型组、亮丙瑞林100μg/kg组、疏肝泻火方8.5g/kg、4.25g/kg、2.13g/kg组共6组,采用NMA建立性早熟模型,予不同剂量的疏肝泻火方和亮丙瑞林干预,观察性腺发育情况;测定血FSH、LH水平和下丘脑GnRH、垂体GnRH-R的mRNA表达。结果:性早熟模型组大鼠阴道口开放和出现第一个动情间期的时间分别为32.10±1.56天、35.24±1.46天,均较正常对照组提前,性早熟模型组第一只大鼠出现阴道口开放和第一个动情间期时,疏肝泻火方2.125g/kg组出现一只,其余各组均未见。各组子宫指数和卵巢指数均较模型组显著降低、血清FSH和LH分泌量显著降低,下丘脑GnRH mRNA、垂体GnRH-R mRNA的表达量显著降低,疏肝泻火方8.5g/kg组与亮丙瑞林100μg/kg组疗效相当,疏肝泻火方2.13g/kg、4.25g/kg、8.5g/kg组的作用呈现依次递增的趋势。结论:疏肝泻火方可以降低下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH-R mRNA的表达水平,降低雌激素水平,抑制性腺的发育,延缓HPG轴的启动。     

健乳灵对乳腺增生大鼠GnRH及其受体mRNA表达的影响

目的观察乳腺增生大鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)及垂体促性腺激素释放激素受体(GnRHR)mRNA表达与正常大鼠的差异,并观察治疗乳腺增生症的中药制剂健乳灵对其的影响,探寻乳腺增生症的内分泌机制及健乳灵治疗乳腺增生症的内分泌环节。方法将SD大鼠分为空白组、模型组、治疗组,后两组制成乳腺增生大鼠模型,空白组和模型组大鼠予生理盐水灌胃,治疗组大鼠予健乳灵药液灌胃;治疗60d,采用RT-PCR法检测GnRH及GnRHR基因表达。结果模型组与空白组比较,GnRH及GnRHRmRNA表达水平均明显上调;治疗组与模型组比较,GnRHRmRNA表达水平均明显下调;治疗组与空白组比较,GnRHmRNA表达水平明显上调,GnRHRmRNA表达水平无明显差异。结论乳腺增生症的内分泌发生机制可能与下丘脑GnRH及垂体GnRH受体表达增加有关;健乳灵对乳腺增生的治疗机理可能与调节下丘脑GnRH及垂体GnRH受体表达减少有关。     

知母总皂苷对雌性性早熟SD大鼠性激素水平的影响及对HPGA轴的作用研究

[目的]探讨知母总皂苷对雌性性早熟SD大鼠性激素水平的影响及对下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)的作用。[方法]建造雌性性早熟SD大鼠模型,随机分为模型组、知母总皂苷低剂量组(知低组)、知母总皂苷高剂量组(知高组)、阳性对照组,另设正常组。经相应干预后,记录各组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间;取大鼠性器官,计算子宫、卵巢指数;HE染色观察大鼠卵巢形态学变化;ELISA检测大鼠血清性激素卵泡生成激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)水平;qPCR和Western blot检测大鼠下丘脑肿瘤转移抑制基因亲吻素-1(KISS-1)、G蛋白偶联受体54(GPR54)、促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体(GnRHR)mRNA与蛋白表达。[结果]与正常组比较,模型组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较短,子宫、卵巢指数较高,黄体数量较多,血清FSH、LH、E2水平较高,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较高(P<0.05);与模型组比较,知低组、知高组、阳性对照组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较长,子宫、卵巢指数较低,黄体数量较少,血清FSH、LH、E2水平较低,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较低(P<0.05);与知低组比较,知高组、阳性对照组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较长,子宫、卵巢指数较低,黄体数量较少,血清FSH、LH、E2水平较低,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较低(P<0.05);与知高组比较,阳性对照组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较长,子宫、卵巢指数较低,黄体数量较少,血清FSH、LH、E2水平较低,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较低(P<0.05)。[结论]知母总皂苷可调节雌性性早熟SD大鼠性激素水平,对HPGA轴有抑制作用。     

滋阴泻火方对青春期大鼠性腺轴相关基因的影响

为研究滋阴泻火方 (生地黄、知母、牡丹皮、泽泻、黄柏、龟板 )治疗儿童性早熟的机理 ,15 0只 4周龄SD雌性大鼠均分为 5组 ,A组为空白对照组 (生理盐水2ml/d灌胃 ) ;B组为达菲林对照组 ( 1mg/kg ,每 3周 1次 ,共 3次 ) ;C、D、E组为中药大、中、小剂量组 ,分别予滋阴泻火方 10 ,2 0 ,4 0·kg- 1·d- 1灌胃 ,共 8周。在用药 4 ,8周 ,及停药 4周时 ,分 3次处死大鼠 ,比较下丘脑GnRH基因表达、垂体GnRH受体基因表达及卵巢E2 受体基因表达。结果 :B、D、E组GnRH受体基因、E2 受体基因表达较A组显著减少 ,A组无此变化 ;停药后所有差异全部消失。结论 :滋阴泻火方对青春期大鼠中枢促性腺激素及其受体、卵巢雌激素受体有可逆性抑制作用 ,这可能是该方治疗儿童性早熟的机理之一     

补肾中药对下丘脑GnRH、垂体FSH、LH及成骨细胞BGP基因表达的调节作用

目的:探讨补肾中药对下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、腺垂体促性腺激素卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及成骨细胞骨钙素(BGP)基因表达的调节作用。方法:采用定量的逆转录-聚合酶链式反应(定量的RT—PCR)方法,观察青春期大白鼠喂饲滋阴泻火或益肾填精中药后,下丘脑GnRH、腺垂体FSH、LH及成骨细胞BGP的信使核糖核酸(mRNA)表达水平的变化。结果:滋阴泻火药可使下丘脑GnRH、腺垂体FSH、LH及成骨细胞BGP的mRNA表达水平显著下调,而益肾填精药可使下丘脑GnRH、腺垂体FSH、LH及成骨细胞BGP的mRNA表达水平显著上调。结论:说明补肾中药可在转录水平调节下丘脑GnRH、腺垂体FSH、LH及成骨细胞BGP基因表达,这可能是补肾中药调整性早熟患儿青春发育进程和改善骨骼发育的主要作用机理之一。     

中药对大鼠下丘脑生长抑素及垂体生长激素基因表达与蛋白表达的调节作用

目的：观察滋阴泻火及益肾填精中药对大鼠下丘脑生长激素释放激素（GHRH）,生长抑素（SS）,垂体生长激素（GH）的基因表达及蛋白表达水平的影响。方法：将青春期SD雌性大白鼠分为3组。即对照组（喂饲生理盐水）,滋阴泻火组（喂饲滋阴泻火中药合剂）及益肾填精组（喂饲益肾填精中药合剂）。采用原位杂交,免疫组化技术分别检测下丘脑室周核SSmRNA及SS表达水平,弓状核GHRHmRNA及垂体GH的表达水平。结果：滋阴泻火组大鼠的下丘脑室周核SS基因表达,蛋白表达明显上调（P<0.05),垂体GH蛋白表达明显下调（P<0.05);而益肾填精组大鼠则相反,其室周核SS基因表达明显上调（P<0.05),垂体GH蛋白表达明显下调（P<0.05);而益肾填精组大鼠则相反,其室周核SS基因表达,蛋白表达明显下调（P<0.05),垂体GH蛋白表达明显上调（P<0.05)。但两组下丘脑弓状核GHRH基因表达无明显变化。结论：滋阴泻火和益肾填精中药可转录水平及蛋白合成水平,调节下丘脑室周核SS的基因表达及蛋白表达,从而调节垂体GH的合成及翻译,但对弓状核GHRH的基因表达无明显影响。     

滋阴泻火中药对下丘脑GnRH的合成、分泌及其调节机制的影响

目的：探讨滋肾阴泻相火（简称滋阴泻火）中药对下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH)的合成、分泌及其调节机制的影响。方法：青春大白喂饲滋阴泻火中药后，采用内侧基底下丘脑区的脑片孵育法，测定KCl刺激后孵育液中GnRH的含量观察其正丘脑GnRH的紧张性分泌中心（弓状核及腹内侧核）GnRH成水平的变化，采用免疫组化及计算机图像处理技术，测定其下丘脑视前区GnRH阳性的积分光密芳值，观察其下丘脑GnRH的脉冲性分泌中心（视前内侧核）GnRH含量的变化；采用下丘脑的内侧视前区的挽灌流技术，以放射免疫法测序列的灌注流中GnRH的含量，观察其下丘脑视前内侧核GnRH脉冲释放频率及幅度的变化；以高效液相色谱－荧光检测法，测定灌注液中门冬氨酸，谷氨酸及γ氨基酸的含量，并以放射免疫法测定灌流液中β-内啡肽的含量，观察其正丘脑GnRH的脉冲性分泌中心（视前内侧核区）兴奋性、抑制性氨基酸递质及β-内啡肽放量的变化。结果：滋阴泻火中药可使内侧基底下丘脑区（弓状核、腹内侧核）及下丘脑视前区（视前内侧核）的GnRH含量显著减少，并可使下丘脑视前内侧核GnRH脉冲释放的频率及幅度明显降低，滋阴泻火中还可使下丘脑内侧视前区门冬氨酸和谷氨酸的释放明显减少，而使γ氨基丁酸和β-内啡肽的释放明显增加。结论：滋阴泻火中药可通过抑制中枢兴奋性氨基酸递质的释放及促进中枢抑制性氨基酸递质和β-内啡肽的放明显增加。结论：滋阴泻火中药可通过抑制中枢奋性氨基酸递质的释放井枢抑制性氨基酸递质和β-内啡肽的释放，使下丘脑GnRH神经元的功能活动显著降低，从而使下丘脑GnRH的紧张性分泌中心和脉冲性分泌中心GnRH的合成及分泌明显减少，这可能是滋阴泻火中药能有效地治疗特发性真性早熟的主要作用机理之一。     

中药天癸方对雄激素致不孕大鼠促性腺激素释放激素的影响

目的探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)及雄激素受体(AR)mRNA 的影响。方法新生9日龄 SD 雌性大鼠一次性皮下注射丙酸睾丸酮,建立 ASR 模型,免疫组织化学法检测下丘脑视前区 GnRH 含量,RT-PCR 法测定下丘脑 AR mRNA 表达水平,并观察中药治疗前后上述两种物质的变化。结果 ASR 模型下丘脑视前区 GnRH 含量显著低于对照组(P<0.01),下丘脑 ARmRNA 表达水平显著升高(P<0.05),中药天癸方治疗后,下丘脑视前区 GnRH 含量上升至正常大鼠水平(P>0.05),AR mRNA 表达水平显著下降(P<0.001)。结论 ASR 模型下丘脑 AR mRNA 过度表达,视前区GnRH 含量降低,是引起该模型低促性腺激素和无排卵的原因之一,中药天癸方可使 AR mRNA 表达下降,改善低促性腺激素状态而产生促排卵作用。     

针刺对痛经大鼠神经-内分泌影响的机制初探

目的:探讨针刺对痛经大鼠下丘脑-垂体-卵巢功能活动的影响。方法:雌性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组、益母草膏组,每组10只,己烯雌酚灌胃12 d建立痛经模型。针刺组取"关元",双侧"地机"三阴交"穴,留针30 min;益母草膏组采用益母草膏(每日80 g/kg)灌胃治疗。两组均在灌服己烯雌酚的第5天开始治疗,每日1次,连续7 d。末次给予己烯雌酚1 h后,腹腔注射催产素,观察各组大鼠的扭体反应潜伏期和30 min内扭体数;放射免疫法检测血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的水平;RT-PCR检测各组大鼠下丘脑、卵巢促性腺激素释放激素(GnRH),垂体促性腺激素释放激素受体(GnRH-R),子宫雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)mRNA表达的差异。结果:①针刺组和益母草膏组的大鼠扭体次数明显低于模型组,潜伏期高于模型组(P<0.05);②针刺组和益母草膏组与模型组比较,FSH、LH、E2含量显著降低(P<0.05),P含量明显升高(P<0.05);③针刺组和益母草膏组下丘脑、卵巢GnRH,垂体GnRH-R,子宫ER mRNA表达水平均低于模型组(P<0.05),子宫PR mRNA表达水平高于模型组(P<0.05)。结论:针刺治疗原发性痛经的神经-内分泌机制可能与针刺调节大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的性激素及其受体表达有关。     

大补阴丸治疗雌性大鼠真性性早熟的实验研究

目的:研究大补阴丸对雌性大鼠真性性早熟的治疗作用,并探讨其可能的作用机制.方法:26日龄SD雌性大鼠于每日14:00和16:00皮下注射N-甲基-DL-天冬氨酸(N-methyl-DL-aspartic acid,NMA)40 mg·kg-1建立性早熟模型,同时给予大补阴丸进行干预,通过肉眼观察大鼠阴门开启时间;阴道涂片法观察第1个发情间期出现的时间;取卵巢、子宫称重计算脏器系数;制作常规组织病理切片观察子宫、卵巢的组织形态并计算子宫壁厚度和卵巢黄体个数;检测血清中的E2水平等对大补阴丸对NMA性早熟大鼠的治疗作用进行判定,并通过半定量RT-PCR法检测下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、G蛋白偶联受体54(GPR54)和Kiss-1 mRNA的表达,探讨大补阴丸的可能作用机制.结果:大补阴丸1.62,3.24 g·kg-1剂量能明显减轻性早熟大鼠的子宫系数(P＜0.05),减少动物阴道开口数(P＜0.01),对子宫壁厚度和黄体生成数均有一定的降低作用(P＜0.05),且能明显下调下丘脑GnRH,GPR54,Kiss-1 mRNA的表达水平(P＜0.05),而对血清E2水平无明显影响.结论:大补阴丸可能通过下调下丘脑Kiss-1/GPR54 mRNA的表达,抑制下丘脑GnRH的合成和释放,从而抑制下丘脑-垂体-性腺轴的启动,达到治疗真性性早熟的目的.     

电针对功能性消化不良模型大鼠行为学及下丘脑5-HT3R、CRH mRNA表达的影响

目的:观察电针“印堂”“内关”“足三里”对功能性消化不良(FD)大鼠的行为模式及下丘脑5-羟色胺3受体(5-HT3R)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA表达水平的影响。方法:模型组和电针组大鼠采用多因素造模法复制FD模型。电针组电针“印堂”“内关”“足三里”,每次干预30 min,1次/d,连续2周。观察各组大鼠治疗前后的体重变化; 旷场实验检测电针对FD模型大鼠新环境的自主适应能力以及紧张度的影响; HE染色法观察大鼠胃窦形态的改变; 实时荧光定量PCR法测定大鼠下丘脑5-HT3R、CRH mRNA的表达。结果:干预前,模型组和电针组大鼠体重、旷场自主运动距离以及运动速度均低于空白组(P<0.01)。干预后,电针组大鼠体重、旷场自主运动距离以及运动速度较干预前升高,均高于模型组(P<0.01)。模型组大鼠胃窦组织黏膜下层轻度水肿,黏膜层排列疏松,伴有少量的淋巴细胞存在; 空白组和电针组大鼠胃窦组织结构完整,黏膜层排列整齐,胃腺间质无异常增生,不存在明显病理改变。与空白组相比,模型组大鼠下丘脑5-HT3R、CRH mRNA表达明显上升(均P<0.05)。与模型组相比,电针组大鼠下丘脑5-HT3R、CRH mRNA表达显著降低(均P<0.05)。结论:电针能改善FD大鼠消化不良症状,提高FD大鼠自主运动水平,减轻大鼠胃窦炎症细胞浸润,其机制可能与抑制下丘脑5-HT3R、CRH mRNA的表达有关。     

不同剂量五福饮对大鼠尾椎间盘退变髓核β—连环素、聚蛋白多糖及Ⅱ型胶原调控作用的实验研究

目的:探索不同剂量五福饮对大鼠尾椎间盘退变(IVDD)髓核β-连环素(β-catenin)、聚蛋白多糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原(Col2)的调控作用。方法:取SD大鼠64只,随机分为空白组、模型组、五福饮低剂量组及五福饮高剂量组。除空白组外,其余各组大鼠构建IVDD模型。模型构建成功后,五福饮低、高剂量组灌服不同剂量的五福饮药液,空白组和模型组大鼠灌服生理盐水。五福饮干预8周后,检测椎间盘髓核β-catenin阳性表达细胞数及mRNA表达水平,Aggrecan及Col2 mRNA水平。结果:模型制备4周后,与空白组比较,模型组、五福饮低、高剂量组大鼠50%缩足阈值(PWT)明显降低(P<0.05);尾椎间盘髓核β-catenin阳性表达细胞数明显升高(P<0.05)。五福饮干预8周后,与空白组比较,模型组大鼠尾椎5~6椎间盘Aggrecan与Col2 mRNA表达明显降低(P<0.05),β-catenin mRNA及阳性表达细胞数明显升高(P<0.05)。与模型组比较,五福饮低、高剂量组大鼠50%PWT、尾椎5~6椎间盘Aggrecan与Col2 mRNA表达均明显升高(P<0.05),β-catenin mRNA及阳性表达细胞数明显降低(P<0.05)。与五福饮低剂量组比较,五福饮高剂量组大鼠50%PWT、尾椎5~6椎间盘Aggrecan与Col2mRNA表达均明显升高(P<0.05),β-catenin mRNA及阳性表达细胞数明显下降(P<0.05)。结论:五福饮可延缓或部分逆转大鼠尾IVDD,且五福饮对大鼠尾IVDD治疗作用存在剂量依赖性。椎间盘髓核β-catenin可能是五福饮的作用靶点。     

不同时机针刺对卵巢早衰模型大鼠中枢及外周激素水平的影响

目的探讨不同时机针刺对卵巢早衰模型大鼠中枢及外周激素水平的影响。方法50只清洁级性成熟未交配雌性SD大鼠,随机分为模型组(10只)、预针刺组(10只)、针刺组(10只)、佐剂组(5只)、空白组(5只)。模型组、针刺组及预针刺组连续15 d腹腔注射去氧乙烯基环己烯(4-vinylcyclohexene diepoxide,VCD)160 mg/kg建立卵巢早衰动物模型;佐剂组连续15 d注射同等剂量佐剂二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO);预针刺组在开始造模时即开始针刺,造模成功后继续治疗4周;针刺组于造模成功后开始针刺治疗,连续治疗4周;空白组不干预。治疗结束后,采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测各组下丘脑促性腺激素释放激素(gonadotropin release hormone,GnRH)、垂体促卵泡生成素(follicle stimulatin hormone,FSH)、垂体促黄体生成素(luteotropic hormone,LH),卵巢中促卵泡生成素受体(follicle stimulatin hormone receptor,FSHr)、促黄体生成素受体(luteotropic hormone receptor,LHr)、雌激素受体(estradiol receptor,Er)、雌二醇(estradiol,E2),血清中GnRH、FSH、LH和E2水平。结果VCD腹腔注射可以造成大鼠卵巢早衰的动物模型,成功率为83.3%。与空白组比较,模型组大鼠下丘脑GnRH含量升高(P<0.05),垂体FSH和LH含量均升高(P<0.05);血清中GnRH、FSH、LH含量均升高(P<0.05),E2含量降低(P<0.05);卵巢组织中FSHr、LHr含量均升高(P<0.05),Er和E2含量均降低(P<0.05)。与模型组比较,预针刺组和针刺组大鼠下丘脑GnRH含量降低(P<0.05),垂体FSH含量降低(P<0.05);预针刺组和针刺组大鼠血清中GnRH、FSH含量均降低(P<0.05);预针刺组和针刺组大鼠卵巢组织中FSHr、LHr含量均降低(P<0.05),E2含量升高(P<0.05)。预针刺组和针刺组各项指标组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论针刺对POF模型大鼠中枢及外周激素水平均可产生一定的调节作用,不同时机针刺组间比较无差异。     

经皮穴位电刺激对过度训练大鼠性腺轴的影响及机制研究

目的观察经皮穴位电刺激(transcutanclus electrical acupoint stimulation,TEAS)对过度训练大鼠性腺轴(HPG)的调控作用,并探讨其机制。方法将32只雄性SD大鼠,随机分为空白对照组、造模前干预组、造模后干预组和模型组,每组8只。采用递增强度的跑台建立过度训练大鼠模型。两个干预组分别在造模前和造模后进行TEAS干预。实验结束时取全血、下丘脑、垂体、杏仁核进行检测。荧光定量PCR检测下丘脑促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)mRNA与垂体GnRH-R mRNA的表达;ELISA法检测黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)、睾酮(Testosterone,T)浓度;ELISA法检测杏仁核蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)、环磷酸鸟苷(cyclic Guanosine Monophosphate,cGMP)活性。结果与空白对照组比较,模型组垂体GnRH-R mRNA表达显著下降(P0.05),T明显降低(P0.05)提示实验中所采用的训练方案抑制了HPG轴的功能。造模前干预组与模型组比较,可以显著增加垂体GnRH-R mRNA的表达(P0.05);造模后TEAS干预可以显著增加运动机体下丘脑GnRH mRNA的表达与T水平(P0.05,P0.01)。与模型组比较,造模前干预组可以显著提高杏仁核PKC活性(P0.01)。造模后干预组杏仁核cGMP活性显著高于模型组(P0.05)。结论过度训练大鼠HPG轴功能处于抑制状态。TEAS干预过度训练机体,可以提高HPG轴功能,但不同时间段进行干预,所影响的HPG轴的靶点有所不同。造模前TEAS干预运动机体是通过增加杏仁核PKC活性调整HPG功能,而造模后干预是通过加强杏仁核cGMP活性而调整HPG轴功能。     

经前平颗粒对经前期综合征肝气逆证大鼠脑μ阿片受体mRNA及蛋白表达的影响

目的 观察经前平颗粒对经前期综合征(premenstrual syndrome, PMS)肝气逆证大鼠脑顶区皮质、额区皮质、下丘脑、海马μ阿片受体(μ opioid receptor, MOR) mRNA及蛋白的表达的影响。方法 取20只大鼠制备PMS肝气逆证大鼠模型。造模后大鼠分为模型组、中药组,每组10只。另选取10只大鼠作为正常对照组(正常组)。造模同时,中药组大鼠给予经前平颗粒 (1.6 g/kg) 灌胃,正常组和模型组大鼠给予等体积生理盐水(1 mL/100 g)灌胃,每天1次,连续5天。采用RT-PCR和Western blot法分别检测大鼠顶区皮质、额区皮质、下丘脑和海马MOR mRNA及蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠顶区皮质、额区皮质MOR mRNA及蛋白扩增产物电泳条带相对较弱,光密度值降低,顶区皮质、额区皮质MOR mRNA及蛋白相对表达降低;下丘脑、海马MOR mRNA及蛋白电泳条带相对较强,光密度值升高;下丘脑、海马MOR mRNA及蛋白相对表达升高,差异均有统计学意义(P<0.01, P<0.05)。与模型组比较,中药组大鼠顶区皮质、额区皮质MOR mRNA及蛋白扩增产物电泳条带增强,顶区皮质MOR mRNA表达升高,顶区皮质和额区皮质MOR蛋白相对表达升高;下丘脑和海马MOR mRNA及蛋白电泳条带亮度减弱,下丘脑和海马MOR mRNA相对表达降低,海马MOR蛋白相对表达降低,差异均有统计学意义(P<0.01, P<0.05)。结论 MOR在PMS肝气逆证大鼠不同脑区呈现特异性表达,经前平颗粒表现出相应调节作用。     

肠激安胶囊对IBS-D模型大鼠脑肠轴中NPY mRNA表达及ACTH含量的影响

目的探讨肠激安胶囊对腹泻型肠易激综合征（diarrhea predominant irritable bowel syndrome,IBS-D）大鼠下丘脑和结肠组织神经肽Y（neuropeptide Y,NPY）mRNA表达和血清促肾上腺皮质激素（adreno-cortico-tropic hormone,ACTH）含量的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组,模型组,匹维溴铵组（0．018g／kg）,肠激安胶囊高（2．812g／kg）、中（1．406g／kg）、低（0．703g／kg）剂量组,每组8只,模型组以及给药组采用母乳分离＋醋酸刺激＋四肢束缚法制备IBS—D大鼠模型,正常组和模型组给予生理盐水,给药组灌胃14天,采用ELISA法检测各组大鼠血清ACTH含量,采用RT-PCR法检测各组大鼠下丘脑及结肠组织NPYmRNA表达。结果与正常组比较,模型对照组大鼠血ACTH明显升高（P〈0．01）,下丘脑、结肠组织NPYmRNA表达明显降低（P〈0．01）;与模型组比较,肠激安胶囊高、中剂量组及匹维溴胺组大鼠血ACTH明显降低（P〈0．01,P〈0．05）,匹维溴铵组和肠激安胶囊高、中、低剂量组下丘脑、结肠组织NPYmRNA表达上调（P〈0．05）。结论肠激安胶囊对IBS．D大鼠脑肠轴异常有调节作用,其作用机制可能是通过上调下丘脑和结肠组织NPYmRNA表达和下调HPA轴中ACTH含量。