补肾固冲系列方对雄激素所致无排卵大鼠垂体的影响

卵泡成熟及排卵是月经生理、生殖内分泌生理及受孕的基础 ,卵泡发育及成熟障碍可出现功能失调性子宫出血、月经稀发、闭经、不孕等无排卵性疾病。西医多采用激素促排卵 ,但存在许多问题。补肾固冲系列方是著名中医妇科专家顾小痴教授的验方之一 ,临床对治疗功能性子宫出血、不孕症、闭经等疾病有显著疗效。本研究是在补肾固冲系列方药治疗功能性子宫出血临床研究基础上 ,通过动物实验观察补肾固冲系列方对雄激素所致无排卵大鼠 (ASR)下丘脑—腺垂体—卵巢轴的影响 ,从细胞水平探讨补肾调经中药的调经和治疗无排卵疾病的作用环节和机理。为中药治疗无排卵疾病提供客观依据。本研究为河北省科技厅资助项目 (NO 96Z1113) ,现将其研究结果专题报告如下     

补肾固冲系列方对雄激素所致无排卵模型大鼠卵巢、子宫及微量元素的影响

为了探讨补肾固冲系列方对无排卵疾病的疗效机理 ,进一步观察了系列方对雄激素所致无排卵模型大鼠 (ＡＳＲ)卵巢、子宫及微量元素的影响 ,报告如下。1　材料和方法1 1　药物　同前1 2　试剂　Ｅ2 、Ｐ放免试剂盒 :北京北方生物技术研究所 ,批号 990 7。1 3　ＡＳＲ动物模型建立与分组　同前1 4　给药方法　同前1 5　观察指标1 5 1　大鼠阴道上皮细胞检查　甲基蓝染色。1 5 2　大鼠血液生殖激素Ｅ2 、Ｐ及微量元素Ｃｕ、Ｚｎ、Ｆｅ水平的变化Ｅ2 、Ｐ采用放免法测定。1 5 3　大鼠卵巢、子宫进行组织形态学 (ＨＥ染色 )观察 ,并对卵巢、子…     

补肾中药对雄激素致不孕大鼠胰腺及卵巢雄激素受体的影响

目的:探讨补肾中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)促排卵的作用机制。方法:新生SD雌性大鼠随机分为3组,ASR模型组:9日龄SD雌性大鼠皮下注射丙酸睾丸酮;中药组:ASR模型在80日龄起每日灌服天癸方;对照组:9日龄SD雌性大鼠皮下注射中性茶油。在106日龄左右(动情前期),放免法测定血Δ4-雄烯二酮(Δ4-A)、总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、雌二醇(E2)、胰岛素(Ins)和C-肽(C-P),RT-PCR方法检测胰腺及卵巢雄激素受体(AR)mRNA表达水平,并观察中药治疗前后上述指标的变化。结果:ASR模型血Δ4-A、TT、FT、E2、Ins、C-P均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),胰腺、卵巢的AR mRNA表达水平明显升高(P<0.01),中药天癸方治疗后,排卵率为58%,各项血激素及胰腺AR mRNA表达水平明显下降,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),卵巢AR mRNA水平与治疗前相比无明显改变。结论:ASR模型血雄激素水平升高,上调胰腺、卵巢的AR mRNA表达,引起高胰岛素血症和无排卵。天癸方可降低血雄激素和胰岛素,使胰腺AR mRNA表达水平下降,纠正ASR模型的内分泌-代谢失调状态,虽然卵巢的AR mRNA表达水平仍较高,但在正常的激素环境下仍出现了排卵。     

补肾中药天癸方对雄激素致不孕大鼠胰腺及卵巢雄激素受体的影响

目的:探讨补肾中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)促排卵的作用机制。方法:新生SD雌性大鼠随机分为3组,ASR模型组:9d龄SD雌性大鼠皮下注射丙酸睾丸酮;中药组:ASR模型在81d龄起每日灌服天癸方;对照组:9d龄SD雌性大鼠皮下注射中性茶油。在106d龄左右(动情前期),放免法测定血Δ4-雄烯二酮(Δ4-A)、总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、雌二醇(E2)、胰岛素(Ins)和C-肽(C-P),RT-PCR方法检测胰腺及卵巢雄激素受体(AR)mRNA表达水平,并观察中药治疗前后上述指标的变化。结果:ASR模型血Δ4-A、TT、FT、E2、Ins、C-P均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),胰腺、卵巢的AR mRNA表达水平明显升高(P<0.01);中药天癸方治疗后,排卵率为58%,各项血激素及胰腺AR mRNA表达水平明显下降,与模型组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01),卵巢AR mRNA水平与治疗前相比无明显改变。结论:ASR模型血雄激素水平升高,上调胰腺、卵巢的AR mRNA表达,引起高胰岛素血症和无排卵。天癸方可降低血雄激素和胰岛素,使胰腺AR mRNA表达水平下降,纠正ASR模型的内分泌-代谢失调状态,虽然卵巢的AR mRNA表达水平仍较高,但在正常的激素环境下仍出现了排卵。     

补肾中药对雄激素致不孕大鼠垂体、卵巢及肾上腺作用的实验研究

目的：探讨雄激素致不孕大鼠发病机理和中药治疗作用。方法：采用光镜、电镜、细胞培养、免疫组化、放免测定等方法，对补肾药治疗前后的ＡＳＲ的垂体，卵巢、肾上腺的形态学及内分泌功能进行同步观察。结果：ＡＳＲ的腺垂体细胞浆内有“脂滴”、“粒溶”、“空泡”、“自嗜”、卵巢呈无排卵；肾上腺皮质网状带增生，同时促卵泡激素、促黄体激素明显低下（Ｐ〈０．０５￣０．００５）；睾酮、脱氰表雄酮明显升高（Ｐ〈０．０１￣０．     

补肾调经方对雄激素致无排卵大鼠模型卵巢血管舒-缩因子的影响

目的:观察补肾调经方(熟地、枸杞、覆盆子、淫羊藿、紫河车、当归、白芍、香附、红花、川芎、桃仁)对雄激素致无排卵大鼠模型血浆及卵巢血管舒张因子一氧化氮(NO)、环磷酸鸟苷(cGMP)、神经型一氧化氮合酶(nNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管收缩因子内皮素-1(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)的影响,探讨其治疗无排卵性疾病的作用及机理。方法:建立雄激素致无排卵大鼠模型。40只大鼠分为正常组、模型组和中药治疗组。采用放射免疫法测定大鼠血浆NO、cGMP、ET-1、ATⅡ以及血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)含量;采用免疫组化法检测大鼠卵巢nNOS、eNOS、ET-1表达;采用HE染色观察大鼠卵巢组织形态学变化。结果:与模型组比较,中药治疗组大鼠血浆NO、cGMP含量升高(P0.01),血浆ET-1、ATⅡ含量降低(P0.01),血清E2、T、E2/P降低(P0.01);卵巢颗粒细胞、髓质nNOS、eNOS表达增加(P0.01),ET-1表达降低(P0.01);卵巢结构有一定改善,卵泡发育并有黄体形成。结论:补肾调经方具有一定的调节无排卵大鼠模型血浆及卵巢血管舒-缩因子、改善无排卵大鼠模型卵巢血液供应、抑制颗粒细胞凋亡和卵泡闭锁的作用,揭示其可能促进卵泡发育、成熟、排卵的作用机制。     

补肾中药对雄激素致不孕大鼠肾上腺皮质形态学观察

本实验选用ＳＤ雌性大鼠幼仔，出生第９日龄注射丙酸睾丸酮制作雄激素致不孕大鼠，第８０日龄灌服补肾中药水溶液２周，第１００日龄心脏灌注处死，采用光镜，透射电镜、银交染色法和新生物素－生物复合法，分别测量核体组成区嗜银蛋白，增殖前期细胞核仁抗原，观察肾上腺皮质的形态学变化。结果显示：在调节性腺轴动能过程中，包括了肾上腺的调整。补肾中药水溶液能够使增生的肾上腺网状带恢复正常；细胞内增多的脂滴数和核仁组成区     

逍遥丸对雄激素致无排卵大鼠卵巢功能的影响

目的:探讨逍遥丸对雄激素致无排卵大鼠(ASR)卵巢功能的影响,研究其治疗无排卵性疾病的作用机制.方法:出生9日龄SD雌性大鼠随机分为ASR模型组及对照组.模型组大鼠1次性皮下注射丙酸睾丸酮(T)1.25 nag,建立ASR模型,模型组给予逍遥丸治疗7周.选择动情前期处死,观察比较各组大鼠血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)水平的变化,卵巢和子宫指数、卵巢形态学的变化,研究逍遥丸治疗ASR的作用机制.结果:无排卵大鼠血清E2、T水平明显高于正常组(P<0.01),卵巢、子宫重量指数明显降低.卵巢形态学观察:卵巢多囊变、黄体罕见,卵母细胞消失.逍遥丸治疗后,血清T、E2激素水平降低(P<0.01).卵巢、子宫重量指数明显增加,改善了卵巢形态结构.结论:逍遥丸可能通过调节性激素水平,进而改善卵巢形态结构,改善卵巢功能来达到治疗无排卵的作用.     

补肾调经方、逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠腺垂体、卵巢影响的比较研究

目的观察补肾调经方、逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠（ASR）腺垂体、卵巢形态及其分泌性激素的影响。方法60只9日龄SD雌性大鼠随机选取10只为正常组,余50只皮下注射丙酸睾丸酮建立ASR模型,选取30只造模成功者,随机分为模型组、补肾调经方组（灌服补肾调经方混悬液）、逍遥丸组（灌服逍遥丸混悬液）,每组10只,给药5周,择动情前期,断头法取血,放射免疫分析法检测血清雌二醇（E2）、孕酮（P）、睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）;HE染色后观察腺垂体、卵巢形态。结果与正常组比较,模型组血清E2、T升高,FSH、LH降低（均P〈0．01）;腺垂体、卵巢形态异常。与模型组比较,补肾调经方组和逍遥丸组E2、T降低,FSH、LH升高（P〈0．05,P〈0．01）,且补肾调经方组E2、T,逍遥丸组FSH恢复正常（均P〉O．05）;两组受损的腺垂体、卵巢结构均得到不同程度修复。结论补肾调经方及逍遥丸可改善排卵障碍性疾病。     

补肾调经方对雄激素诱导无排卵大鼠氧化损伤、抗氧化能力及卵巢雌激素水平的影响

目的:探讨补肾调经方对无排卵大鼠血浆丙二醛(MDA)、血清总胆红素(Tbil)、直接胆红素(Dbil)、间接胆红素(Ibil)、总抗氧化能力(T-AOC) 及卵巢雌激素水平的影响.方法:采用雄激素诱导无排卵模型大鼠为研究对象,应用苯甲酸钠-咖啡因比色法、比色法、放免法测定大鼠血浆丙二醛,血清总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、总抗氧化能力和雌激素水平.结果:无排卵大鼠血浆丙二醛含量显著高于正常大鼠,血清总胆红素、直接胆红素和总抗氧化能力明显低于正常组.补肾调经方能显著提高无排卵大鼠血清总胆红素、直接胆红素、间接胆红素及总抗氧化能力,降低丙二醛含量.结论:氧化损伤可能影响无排卵的发生,补肾调经方具有提高无排卵大鼠血清总胆红素、直接、间接胆红素水平及总抗氧化能力,降低丙二醛堆积的作用.     

补肾阴药治疗高胰岛素高雄激素无排卵症的临床观察

本研究对高胰岛素高雄激素无排卵症患者３５例采用补肾阴为主的中药治疗３个周期。治疗期间选用基础体温，系列Ｂ超和血中激素测定以监测排卵，并测定治疗前后口服糖耐量试验中的血糖及胰岛素水平的变化。     

补肾方药对地塞米松所致实验性骨质疏松大鼠卵巢功能的影响

目的 :探讨补肾中药对地塞米松 (DXM )所致实验性骨质疏松 (OP)大鼠卵巢功能的影响。方法 :采用放射免疫分析方法对正常对照组、病理对照组、中药治疗组大鼠生长激素 (GH)、黄体生成素(LH)、卵胞生成素 (FSH)、雌二醇 (E2 )、孕酮 (P)、睾酮 (T)和泌乳素 (PRL)的水平进行比较。并对三组大鼠卵巢、子宫分别称湿重和进行组织形态学观察。结果 :病理对照组与正常对照组大鼠比较GH、LH、FSH、E2和P的水平明显降低 (P <0 0 5) ,子宫和卵巢重量减轻 (P <0 0 5)。中药治疗组与病理对照组相比GH、LH、FSH、E2 和P的水平显著增高 (P <0 0 5) ,子宫和卵巢重量增加 (P <0 0 5)。各组间T和PRL无显著性变化 (P >0 0 5)。组织形态学观察可见补肾中药能明显改善病理状态下大鼠卵巢和子宫的形态结构。结论 :补肾中药能提高大鼠体内GH、LH、FSH、E2 和P的水平 ,使子宫、卵巢重量增加 ,组织形态改善。说明补肾中药对DXM所致实验性骨质疏松大鼠有治疗作用。     

益气补肾活血法治疗儿童特发性血小板减少性紫癜及血小板聚集功能的变化

应用益气补肾活血法为主治疗41例特发性血小板减少性紫癜,结果治愈及恢复率达73.3%,总有效率97.6%;治疗后血小板聚集功能恢复至正常。停药后随访疗效巩固。     

补肾中药对雄激素致不孕大鼠胰岛素样生长因子—1及胰岛 …

目的：观察补肾中药治疗前后雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）及胰岛素样生长因子－１受体（ＩＧＦ－１Ｒ）的变化。方法：建立雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠模型,通过阴道涂片筛选各组大鼠;血清ＩＧＦ－１测定采用放免法,ＩＧＦ－１Ｒ的检测采用免疫组化法。结果：（１）血清ＩＧＦ－１水平：模型组〉模型服中药组〉正常组,但各组间比较差异无显著性。（２）胰腺、肝脏、卵巢和肾上腺Ｉ     

补肾中药对雄激素致不孕大鼠胰岛素样生长因子-1及胰岛素样生长因子-1受体的影响

目的 :观察补肾中药治疗前后雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠胰岛素样生长因子 1(IGF 1)及胰岛素样生长因子 1受体 (IGF 1R)的变化。方法 :建立雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠模型 ,通过阴道涂片筛选各组大鼠 ;血清IGF 1测定采用放免法 ,IGF 1R的检测采用免疫组化法。结果 :( 1)血清IGF 1水平 :模型组 >模型服中药组 >正常组 ,但各组间比较差异无显著性。 ( 2 )胰腺、肝脏、卵巢和肾上腺IGF 1R免疫组化定量分析 :模型组 <模型服中药组 <正常组。结论 :雄激素致不孕大鼠存在着高水平血清IGF 1及主要靶器官低水平IGF 1R ,而补肾中药对其有一定的调节作用。由此推测 ,补肾中药对雄激素致不孕大鼠的促排卵作用可能是部分通过调节IGF 1/IGF 1R来实现的     

阴阳平补中药对雄激素致不孕大鼠肝细胞膜胰岛素受体的影响

目的 :观察阴阳平补中药治疗前后雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠肝细胞膜胰岛素受体的变化。方法 :建立雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠模型 ,采用阴道涂片的方法观察阴阳平补中药对不孕大鼠的促排卵作用 ;采用放射配体结合分析方法检测肝细胞膜胰岛素受体的数目与亲和力。结果 :阴阳平补中药对雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠的促排卵率为 43 1 % ,而服药与未服药的不孕大鼠 ,其肝细胞膜胰岛素受体的数目及亲和力均与正常大鼠相似。结论 :阴阳平补中药对雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠的促排卵作用不是通过影响胰岛素受体的结合而实现。     

补肾填精法对再生障碍性贫血模型大鼠外周血细胞的影响

目的：观察补肾填精法对再生障碍性贫血（AA）模型大鼠血常规和网织红细胞的影响和作用。方法：将清洁级Wistar大鼠36只随机分为对照组、模型组、治疗组（补肾填精中药）3组,每组各12只;对照组正常饲喂,模型组和治疗组用5-氟尿嘧啶（5-FU）与马利兰合用诱导建立大鼠AA模型,之后治疗组每天给予补肾填精中药10g/kg.d灌胃,连续4周,4周后观察各组大鼠外周血WBC、RBC、Hb、PLT及网织红细胞的变化。结果：模型组与治疗组外周血细胞以上各值水平显著低于对照组,治疗后治疗组外周血细胞以上各值水平提高,差异有统计学意义。结论：补肾填精法能够提高再障模型大鼠的外周血细胞的数量,对再生障碍性贫血具有肯定的治疗作用。     

肾阳虚大鼠垂体-甲状腺轴功能动态分析

目的:了解肾阳虚时垂体-甲状腺轴功能动态变化特征。方法:肌肉注射可的松复制肾阳虚大鼠模型,采用分批宰杀的方法观察早期、中期和晚期肾阳虚大鼠垂体-甲状腺轴功能指标,分析变化规律和特征。结果:肾阳虚不同时期垂体-甲状腺轴功能下降程度不一。结论:较理想的肾阳虚动物模型时间为15~30天。     

加味一贯煎对实验性肝肾阴虚证大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴的影响

目的 :探讨加味一贯煎滋补肝肾作用的机理。方法 :以慢性激怒应激法制造大鼠肝肾阴虚证模型 ,以下丘脑、血清TRH ,垂体、血清TSH ,血清FT₄ ,FT₃ ,rT₃ 为指标 ,观察加味一贯煎对下丘脑 垂体 甲状腺轴的影响。结果 :肝肾阴虚证大鼠下丘脑TRH分泌增加 (P<0.05 ) ,垂体TSH ,血清TSH降低 (P<0.05 ) ,血清FT₃ ,FT₄ 同时降低 ,rT₃ 增多 ;加味一贯煎治疗组上述指标与正常对照组比较无显著差异。结论 :加味一贯煎有调节下丘脑 垂体 甲状腺轴功能的作用。     

药用植物中抗血小板活化因子成分的研究进展

有关药用植物中抗血小板活化因子成分研究的现况,并简介结构修饰,类似物合成以及药效基因模型。