糖耐康对自发性2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素信号转导的影响

目的:观察糖耐康对自发性2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素抵抗及胰岛素信号转导途径中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3-K)、葡萄糖转运子4(GluT4)mRNA表达的影响。方法:将SPF级KKAy小鼠40只按血糖值随机分为模型组、糖耐康高剂量组、糖耐康低剂量组、吡咯列酮组,并选C57bl/6J小鼠为正常对照组,连续灌喂给药60 d。60 d后测定空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(Fins)并计算胰岛素敏感指数(ISI)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),游离脂肪酸(FFA)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α),并对胰岛进行病理学检查。用实时定量RT-PCR法测定小鼠骨骼肌和脂肪组织中PI3-K及GluT4的mRNA的表达。结果:糖耐康高剂量组的FPG、TNF-α水平较模型组显著降低(P<0.05),高,低剂量组PI3-K及GluT4mRNA表达较模型组明显升高(P<0.05或P<0.01),且糖耐康在一定程度上能够保护胰岛β细胞,延缓β细胞衰竭,对血脂及FFA有降低趋势。结论:通过提高胰岛素信号转导受体后途径中PI3-K的表达,从而改善GluT4的转位是糖耐康改善胰岛素抵抗状态的可能作用机制之一。     

匙羹藤对胰岛素抵抗小鼠脂肪组织蛋白激酶B 的影响

目的：观察匙羹藤对胰岛素抵抗（IR）KKAy 小鼠脂肪组织中蛋白激酶B 表达及磷酸化的影响以及调节机制。方法：将18只胰岛素抵抗KKAy小鼠按体质量随机分为模型组（DM）和匙羹藤水提物组（GS）,并选取9只C57BL/6J小鼠为正常对照组（NC）,连续灌胃给药8周。实验结束后取血测定空腹血糖（FPG）,空腹血清胰岛素（Fins）,并计算胰岛素敏感指数（ISI）,测定附睾脂肪组织中磷酸激酶依赖的激酶1（PDK1）、蛋白激酶B（PKB）、P-PKB（Ser473）,P-PKB（Thr308）蛋白相对含量,及磷酸酶和张力蛋白同源物基因（PTEN）mRNA 相对含量。结果：与DM 组相比,GS组小鼠FPG、Fins降低,ISI升高,P-PKB（Ser473）蛋白相对含量及其磷酸化水平升高,P-PKB（Thr308）蛋白相对含量升高,PDK1蛋白相对含量降低,PTENmRNA表达量降低。结论：匙羹藤可通过增加脂肪组织中P-PKB（Ser473）蛋白相对含量,增强Ser473位点磷酸化水平,以及增加P-PKB（Thr308）蛋白相对含量激活PKB,进而改善IR。     

电针对中枢Stat 5敲除所致胰岛素抵抗小鼠肝脏胰岛素信号通路的影响

目的:观察电针对中枢信号传导和转录活化蛋白5条件性基因敲除(Stat 5NKO)小鼠肝脏胰岛素信号通路的影响,分析电针改善胰岛素抵抗的机制。方法:将24只造模成功的雄性Stat 5NKO小鼠随机分为模型组和电针组,每组12只;12只雄性Stat 5 fl/fl小鼠作为正常组。电针组选取单侧"后三里""内庭"进行针刺治疗,2Hz/15Hz,0.8~1.0mA,20min/次,每日1次,双侧交替进行,6d为1个疗程,共治疗4个疗程。分别检测空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)的含量,计算胰岛素敏感指数(ISI)。运用Western blot法检测肝脏胰岛素信号通路相关蛋白胰岛素受体底物1(IRS 1)、胰岛素受体β(IRβ)、蛋白激酶B(Akt)的磷酸化表达水平。结果:与正常组小鼠相比,模型组小鼠胰岛素耐受和葡萄糖耐受功能受损(P0.05,P0.001),FPG明显升高、ISI下降(P0.01);与模型组小鼠相比,电针组小鼠胰岛素耐受和葡萄糖耐受均明显增强(P0.001,P0.01),FPG降低、ISI升高(P0.05);各组FINS比较差异无统计学意义(P0.05)。与正常组小鼠相比,模型组小鼠磷酸化的IRS 1、IRβ蛋白表达显著上升(P0.001),磷酸化的Akt蛋白表达明显下降(P0.01);与模型组小鼠相比,电针组小鼠磷酸化的IRS 1、IRβ蛋白表达明显下降(P0.001,P0.01),磷酸化的Akt蛋白表达上升(P0.01)。结论:电针通过增强肝脏Akt信号通路的传导,从而改善中枢Stat 5敲除所引起的胰岛素抵抗。     

中药复方糖耐康对KKAy 小鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的：探讨中药复方糖耐康对KKAy小鼠肾小管上皮细胞转分化的影响及其可能机制。方法：12周龄雄性KKAy小鼠50只,按血糖随机分为模型组、缬沙坦组、糖耐康高、中、低剂量组,每组10只,另设10只C57BL/6J小鼠为正常组,正常组和模型组给予0.9%氯化钠溶液,其余组给予对应浓度的药液灌胃,用药8周后处死,取肾脏组织,进行Mosson、PAS染色,免疫组化染色观察平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达分布;Western Blot检测转化生长因子-β1（TGF-β1）表达。结果：与正常组相比较,模型组小鼠肾纤维化面积显著增大（P<0.01）,α-SMA 蛋白表达呈现较强阳性,E-cadherin 蛋白表达弱阳性。与模型组比较,缬沙坦组、糖耐康各剂量组肾纤维化面积显著减小（P<0.01）,α-SMA 蛋白表达显著减少（P<0.01）,而E-cadherin 蛋白表达明显增加（P<0.05）。KKAy小鼠肾脏组织TGF-β1蛋白表达较正常小鼠显著升高（P<0.01）;与模型组比较,缬沙坦组、糖耐康低、中和高剂量组TGF-β1蛋白表达含量都显著降低（P<0.01）,其中糖耐康高剂量组与缬沙坦组相比较TGF-β1显著降低。结论：中药复方糖耐康可抑制肾小管上皮细胞EMT的发生,减轻肾小管间质纤维化而发挥肾脏保护作用。     

葛根素通过PI3K/Akt/GSK-3β信号通路调节HepG2细胞胰岛素抵抗

目的:观察葛根素对胰岛素抵抗Hep G2细胞内磷脂酰肌醇3激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号分子的影响。方法:通过0.5 mmol·L~(-1)棕榈酸联合9×10~(-4)U·L~(-1)胰岛素孵育24 h诱导Hep G2胰岛素抵抗细胞模型,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞存活率以确定葛根素给药浓度。实验设正常组、模型组和葛根素各剂量组(40,80,160,320μg·L~(-1))。葡萄糖检测试剂盒检测细胞培养液上清葡萄糖的含量,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)的含量,肝糖原测定试剂盒测定Hep G2细胞内肝糖原含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内PI3K,Akt,磷酸化(p)-Akt,GSK-3β,p-GSK-3β的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组Hep G2细胞葡萄糖消耗率明显下调(P0.05),细胞内糖原含量减少(P0.05),细胞培养液上清中TNF-α和IL-6的含量增加(P0.05),PI3K和p-Akt蛋白表达下降(P0.05),GSK-3β蛋白表达增加(P0.05);与模型组比较,葛根素可呈剂量依赖性增加细胞葡萄糖消耗率(P0.05),增加细胞内肝糖原含量(P0.05),降低细胞培养液上清中TNF-α和IL-6的含量(P0.05),增加PI3K蛋白表达,上调Akt蛋白磷酸活化水平(P0.05),下调GSK-3β蛋白表达并增强其磷酸失活水平(P0.05)。结论:葛根素可通过增强PI3K/Akt/GSK-3β信号转导过程,增加肝细胞内糖原含量从而改善Hep G2细胞的胰岛素抵抗状态。     

温郁金挥发油通过PI3K/Akt信号途径对阿尔茨海默模型小鼠tau蛋白磷酸化表达的影响

目的观察温郁金挥发油对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠tau蛋白磷酸化的影响,探讨其相关作用机制。方法 60只昆明种小鼠随机分为假手术组、模型组、温郁金挥发油低剂量组、温郁金挥发油高剂量组、盐酸多奈哌齐组和参枝苓组,海马组织注射Aβ25-35制作AD小鼠模型,各给药组给予相应药物灌胃,连续15 d。末次给药后,免疫组化检测小鼠tau蛋白磷酸化位点(Ser 404和Thr 231)的蛋白表达,Western blot检测tau蛋白磷酸化位点及磷脂酰肌醇-3-激酶信号/蛋白激酶B(PI3K/Akt)的蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组tau蛋白磷酸化位点蛋白表达增加(P0.05),PI3K及Akt磷酸化水平明显降低(P0.05);与模型组比较,温郁金挥发油高剂量组tau蛋白(Thr231和Ser404)磷酸化水平明显降低(P0.05),PI3K及Akt磷酸化水平明显增加(P0.05,P0.01)。结论温郁金挥发油可降低模型小鼠tau蛋白磷酸化水平,其作用机制可能与PI3K/Akt信号途径有关。     

糖耐康对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 探讨中药糖耐康治疗2型糖尿病的作用机制.方法 44只Wistar大鼠随机分为中药组(n=18),空白组(n=20),西药组(n=6).中药组给予糖耐康灌胃,制备中药血清;西药组给予吡格列酮灌胃制备西药血清;空白组给予蒸馏水灌胃制备空白血清.用3T3-L1脂肪细胞制备胰岛素抵抗模型,分为模型组、吡格列酮组及糖耐康高、中、低剂量组,并以正常脂肪细胞作为空白组.糖耐康高剂量组予含中药血清的培养液,糖耐抗中剂量组予含1份空白血清及2份中药血清配置的培养液,糖耐康低剂量组予含2份空白血清及1份中药血清的培养液,吡格列酮组予含西药血清的培养液,空白组和模型组给予基础培养液.各组均培养72h后采用ELISA法测各组细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,免疫荧光法观察各组细胞内TNF-α蛋白表达,RT-PCR法测定细胞内TNF-α mRNA水平. 结果 模型组脂肪细胞TNF-α蛋白水平较正常组显著升高(P＜0.01);各给药组TNF-α蛋白水平均显著低于模型组(P＜0.01),且糖耐康高、中剂量组显著低于吡格列酮组(P＜0.01).模型组细胞内有大量TNF-α阳性反应颗粒,糖耐康中剂量组和高剂量组及吡格列酮组TNF-α阳性反应颗粒较模型组明显减少.与模型组比较,糖耐康高剂量组、中剂量组及吡格列酮组TNF-α mRNA表达明显减少,且以糖耐康中剂量组最少.结论 糖耐康能够有效改善成熟的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗,明显降低胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞中TNF-α的蛋白及其mRNA表达水平,这可能是其治疗2型糖尿病的作用机制之一.     

花旗泽仁对胰岛素抵抗大鼠肌肉组织中CaSR基因、蛋白表达及AKT活性的影响

目的:通过观察花旗泽仁对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠肌肉组织中钙敏感受体(CaSR)基因、蛋白表达及AKT活性的影响,探究花旗泽仁治疗胰岛素抵抗的作用机制。方法:取雄性Wistar大鼠持续灌胃脂肪乳、腹腔注射链脲佐菌素的方式复制2型糖尿病胰岛素抵抗模型。将造模成功的胰岛素抵抗大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组、花旗泽仁组。花旗泽仁组给予花旗泽仁水煎液,阳性对照组给予罗格列酮药液。给药结束后,分别检测各组大鼠空腹血糖(FBG)及空腹血清胰岛素(FINS),计算胰岛素敏感指数(ISI),并且取大鼠肌肉组织,采用qRT-PCR和Western blot技术检测钙敏感受体CaSR mRNA、CaSR蛋白和磷酸化AKT(Ser473和Thr308)蛋白表达水平。结果:胰岛素抵抗大鼠模型被成功建立。CaSR mRNA、CaSR蛋白表达水平明显降低(P0.001),磷酸化AKT(Ser473和Thr308)蛋白含量明显下降(P0.001,P0.01);花旗泽仁组与模型组比较,FBG及FINS水平明显降低(P0.01),ISI显著升高(P0.01),CaSR mRNA、CaSR蛋白和磷酸化AKT(Ser473和Thr308)蛋白表达水平均明显增加(P0.01,P0.05)。结论:花旗泽仁可能通过上调CaSR表达水平,上调与胰岛素抵抗关系密切的PI3K/AKT信号通路中的AKT蛋白(Ser473、Thr308位点)磷酸化水平,从而改善胰岛素抵抗。     

匙羹藤对2型糖尿病db/db小鼠骨骼肌葡萄糖转运信号通路的影响

目的观察匙羹藤(Gymnema sylvestre(Retz.)Schult.对自发性db/db小鼠胰岛素抵抗及骨骼肌葡萄糖转运信号通络中关键蛋白表达的影响。方法将SPF级27只db/db小鼠随机分3组(n=9):模型组、匙羹藤提取物组、吡格列酮组;并选8只db/+m鼠为正常组。连续灌胃给药4周后检测FBG、Fins、血脂、FFA,采用Western blot对骨骼肌葡萄糖转运信号通路中的关键蛋白和基因进行了研究。结果模型组和治疗组的体重、FBG、Fins、TG、CHOL、LDL、FFA水平明显高于正常组,而ISI指数低于正常组;与模型组相比,匙羹藤组db/db小鼠的FBG、Fins、TC、LDL-C水平降低,提高ISI指数,上调骨骼肌组织中PI3-K/Akt途径中磷酸化Akt(Ser473)蛋白表达和GLUT m RNA表达水平。结论匙羹藤可改善糖脂代谢紊乱,增加胰岛素的敏感性,其改善胰岛素抵抗的机制可能与胰岛素信号转导的"经典途径"PI3-K/Akt通路有关,通过调节靶蛋白或基因的表达及活性以增加葡萄糖的转运。     

苦荞麦总黄酮对2型糖尿病大鼠胰岛素信号转导通路中GSK-3β、AKt相关基因与蛋白表达的影响

目的:观察苦荞麦总黄酮对2型糖尿病大鼠胰岛素信号转导通路中GSK-3β与AKt基因与蛋白表达情况的影响。方法:雄性wistar大鼠链脲佐菌素诱导建立T2DM模型,将T2DM模型大鼠随机分为5组:模型组、苦荞麦总黄酮低剂量组(50 mg/kg)、苦荞麦总黄酮中剂量组(100 mg/kg)、苦荞麦总黄酮高剂量组(200 mg/kg)、西药组(二甲双胍100 mg/kg),另外设置对照组。灌胃给药后,采用ELISA法测胰岛素水平、血糖水平,计算胰岛素敏感指数;采用RT-PCR法检测大鼠肝组织中GSK-3β、Akt的mRNA表达情况;采用Western-blot法测定大鼠肝组织中GSK-3β、AKT的蛋白表达情况。结果:与模型组相比,苦荞麦总黄酮可降低大鼠肝组织中GSK-3βmRNA和蛋白表达(P0.05)、增加Akt mRNA和蛋白表达(P0.05)。结论:苦荞麦总黄酮能降低模型大鼠肝组织中GSK-3βmRNA和蛋白表达、增加Akt mRNA和蛋白表达进而起到积极的影响作用。     

醒脑益智剂联合罗格列酮改善2型糖尿病小鼠记忆障碍的作用机制

目的:研究醒脑益智剂联合罗格列酮对2型胰岛素抵抗型糖尿病痴呆小鼠学习记忆能力及胰岛素信号通路的影响及其作用机制。方法:雄性10周龄C57BL小鼠16只为正常对照组,雄性10周龄KKay小鼠80只为模型组,高糖高脂饲料喂养8周后,随机血糖≥13.9mmol/L为模型成立,随机分为模型对照组、阳性对照组和联合给药高、中、低剂量组。阳性组每日用马来酸罗格列酮片(0.003g/kg)灌胃,联合给药高、中、低剂量组每日分别用马来酸罗格列酮片(0.003g/kg)和醒脑益智剂(3.6、7.2、14.4g/kg)灌胃,对照组每日用等体积生理盐水ig,连续42 d。给药前后分别行1次Morris水迷宫实验,最后1次水迷宫后立即在冰具上采集样本,检测小鼠大脑皮层及海马中PI-3K/Akt的蛋白表达水平以及GSK-3β(糖原合酶激酶-3β)、Tau蛋白及P-Tau(Tau蛋白磷酸化)水平。结果:与正常组相比,模型组小鼠的平台潜伏期明显偏高(P0.05),PI-3K活性明显偏低(P0.05),GSK-3β和p-Tau水平均明显偏高(P0.05),联合给药组各项指标与正常组无明显差异。与模型组相比,阳性组与之各项指标差异均不明显,联合给药组平台潜伏期均明显偏低(P0.05),PI-3K/Akt活性均明显偏高(P0.05),GSK-3β和P-Tau水平均明显偏低(P0.05),其中以联合给药中剂量组效果最为明显。给药后各组间InsR水平差异不大。结论:在常规改善胰岛素抵抗的基础上,醒脑益智剂能有效提高2型糖尿病痴呆小鼠学习、记忆能力,其可能的作用机制为改善大脑海马胰岛素信号传导通路,增强PI-3K活性,降低GSK-3β表达和Tau蛋白磷酸化水平。     

中药复方糖耐康对KKAy糖尿病小鼠低度炎症信号通路的影响

目的:观察中药复方糖耐康对KKAy小鼠血糖、体重及低度炎症通路中关键因子的影响。方法:选取自发性2型糖尿病动物模型KKAy小鼠65只及 C57BL/6J 小鼠13只屏障系统饲养,给予高脂饲料喂养,连续给药8周后,评价静脉空腹血糖(禁食8 h以上)及体重变化,采用半定量酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)的水平。蛋白免疫印迹法检测肌肉组织核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达水平。结果:中药糖耐康给药组中,尤其高剂量组,能够显著降低模型组血糖水平(P<0.05),具有一定控制体重增长趋势的作用; 可下调炎性因子TNF-α、IL-1β及MCP-1的水平(P<0.05),下调肌肉组织中NF-κB蛋白的表达水平(P<0.05)。结论:糖耐康可能通过抑制炎症信号通路中关键炎性因子的表达水平,抑制机体低度炎症反应,从而起到改善胰岛素抵抗及抗糖尿病的作用。     

黄连素对PCOS大鼠胰岛素抵抗通路关键蛋白的影响

目的通过观察实验动物检测指标变化,探究卵巢局部胰岛素信号通路在PCOS形成过程中的作用,并评价黄连素的治疗作用。方法选用清洁级SD雌性大鼠,予以硫酸普拉睾酮钠颈背部皮下注射建立PCOS大鼠模型,并予黄连素干预,对照组选用二甲双胍干预。干预疗程结束后检测各组大鼠空腹血糖(FPG)、口服葡萄糖耐量试验(OGTT)及空腹胰岛素(FINS)水平,计算葡萄糖曲线下面积及稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。利用WB技术检测各组大鼠卵巢组织中PI3K/Akt/GSK-3β信号通路中关键蛋白的表达情况。结果各治疗组大鼠OGTT试验给糖后30 min和60 min血糖水平降低、葡萄糖曲线下面积减少、FINS水平、HOMA-IR指数降低,具有统计学意义(P 0.05)。与模型对照组大鼠相比,黄连素治疗组PCOS模型大鼠卵巢组织PI3k P85α、Akt2、p GSK-3β(Thy216)蛋白表达升高;p GSK-3β(Ser9)表达降低,差异显著(P 0.05),具有统计学意义。结论黄连素能够改善PCOS大鼠血清及卵巢局部胰岛素抵抗,其可能机制为良性调节PI3K/Akt/GSK-3β胰岛素信号通路中关键蛋白表达,这可能是黄连素治疗PCOS的作用机制之一。     

交泰丸对糖尿病小鼠认知功能障碍的影响及机制

目的:观察交泰丸(Jiaotaiwan,JTW)不同配伍比例对糖尿病胰岛素抵抗、认知功能障碍的作用,并探讨其机制。方法:自发性糖尿病db/db小鼠40只,随机分为模型组,交泰丸1号组(1.68 g·kg-1),交泰丸2号组(3.36 g·kg-1),交泰丸3号组(8.40 g·kg-1),每组8只,另设同周龄C57BL/6J小鼠8只为正常组。干预8周后,检测小鼠学习记忆,空间探索能力;检测空腹血糖(fasting blood glucose,FBG),胰岛素水平(fasting insulin,Fins),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),总甘油三酯(total triglyceride,TG),总胆固醇(total cholesterol,TC),游离脂肪酸(free fatty acids,FFA),高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL),低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)等;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测tau蛋白p Ser199,p Ser202,p Ser214位点,磷酸化蛋白激酶B (p-Akt),糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β),磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)蛋白表达。结果:与模型组比较,交泰丸2,3号组FBG,Fins和HOMA-IR显著降低(P0.01); TG,TC,HDL,FFA显著降低(P0.01);分辨指数、穿越平台次数显著提高(P0.01);小鼠海马tau蛋白p Ser199,p Ser202,p Ser214位点,GSK-3β蛋白表达明显降低(P0.05,P0.01),p-Akt,p-GSK-3β表达显著升高(P0.01)。结论:交泰丸3号(黄连-肉桂10∶1)具有改善胰岛素抵抗及认知功能障碍的作用,可能与其抑制tau蛋白过度磷酸化,下调GSK-3β蛋白表达和上调p-Akt,p-GSK-3β表达有关。     

西洋参茎叶总皂苷对脂肪细胞糖脂代谢及胰岛素抵抗信号转导的影响

目的观察西洋参茎叶总皂苷(panax quinquefolius saponin,PQS)对脂肪细胞糖脂代谢及胰岛素抵抗信号转导的影响。方法将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,用游离脂肪酸(FFA)制备脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)模型,再加入相应药物作用,最后用葡萄糖氧化酶法检测药物作用后脂肪细胞培养液中葡萄糖消耗量,用比色法检测药物对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的脂解作用的影响,用Western-blot法检测胰岛素刺激后信号蛋白磷酸化水平。结果模型组葡萄糖消耗量(mmol/L)为5.250±2.671,显著低于对照组14.133±1.305(P0.01);与模型组相比,二甲双胍组(1 mmol/L及PQS大、中、小剂量组(0.08、0.04、0.02 mg/mL)葡萄糖消耗量均显著增加(P0.01),分别为11.807±1.358、10.784±2.373、10.217±1.237、9.984±2.006,且随着PQS用药剂量的增加,葡萄糖消耗量也逐渐增加。TNF-α组培养液中FFA浓度(nmol/μg)(2.479±0.597)显著高于对照组(1.320±0.538)(P0.01);与TNF-α组相比,二甲双胍及PQS大、中、小剂量组培养液中FFA浓度均显著降低(P0.01),分别为1.210±0.566、1.105±0.631、1.108±0.260、1.201±0.593,且随着PQS用药剂量的加大,其抗脂解作用逐渐增强。模型组胰岛素受体β亚单位、IRS-1酪氨酸磷酸化水平及PKB的Ser473磷酸化水平均较对照组减低;与模型组比较,PQS小剂量组信号蛋白磷酸化水平无明显变化,但PQS中、大剂量和二甲双胍组信号蛋白磷酸化水平均有不同程度增高的趋势。结论PQS能够促进脂肪细胞利用葡萄糖、抑制TNF-α的促脂解作用,从而调节糖脂代谢。PQS调节糖脂代谢的作用可能与其促进脂肪细胞胰岛素信号转导、改善胰岛素抵抗有关。     

中药复方糖耐康含药血清对3T3-L1脂肪细胞GSK-3β及Glu-T4的影响

目的观察中药复方糖耐康含药血清对3T3-L1脂肪细胞胰岛素信号转导途径中糖原合成激酶(Glycogen synthase kinase-3 GSK-3β)蛋白及葡萄糖转运子4(Glucose Transport 4 Glu T-4)mRNA表达的影响。方法将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞(油红"O"染色鉴定),用胰岛素联合地塞米松造成胰岛素抵抗细胞模型。同时制备糖耐康、罗格列酮及空白含药血清,对细胞进行分组,分为正常组(3T3-L1脂肪细胞)、模型组、空白血清组、罗格列酮含药血清组(含8%罗格列酮血清)、中药高(含12%中药血清)、中(含8%中药血清)、低(含4%中药血清)7个剂量组。作用48h。后提取蛋白和RNA以检测。用半定量RT-PCR法测定抗性3T3-L1脂肪细胞中Glu T-4 mRNA的表达。免疫印迹杂交法(Western blot)测定GSK-3的蛋白表达含量。结果正常组各项指标表达量最高。与模型组比较,各给药组中蛋白及基因表达量均有一定程度上调,且随着中药含药血清浓度升高上调程度升高,西药血清组作用接近中药高组或中组。结论糖耐康含药血清可能通过上调胰岛素信号转导受体后途径中Glu T-4 mRNA,下调GSK-3β蛋白表达量等,从而成为糖耐康改善胰岛素抵抗状态的作用机制之一。     

复方石斛合剂单次给药对db/db小鼠胰岛素信号的影响

目的:探讨复方石斛合剂单次给药对db/db小鼠胰岛素信号的影响,并探讨相关的作用机制。方法:选取30只14~16周龄雄性db/db小鼠,按空腹血糖及体重随机分成模型组、中药1方组、中药2方组;另10只db/m小鼠为正常组。以复方石斛合剂1方与2方单次给药后,从整体水平观察葡萄糖耐量(OGTT)的变化;单次给药30 min与60 min后,从细胞水平观察肝细胞6-磷酸果糖激酶-1(PFK)与丙酮酸脱氢酶(PDH)活性,胰岛素受体(InsR)与Akt蛋白磷酸化水平的变化。结果:与正常组比较,模型组db/db小鼠OGTT 0,30,60,120 min的血糖水平显著升高,肝细胞PFK与PDH活性显著降低,30 min与60 min InsR与Akt蛋白表达显著降低(P0.01);与模型组比较,石斛合剂1方和2方单次给药均能明显降低db/db小鼠OGTT 60,120 min的血糖水平(P0.05,P0.01),改善葡萄糖耐量;石斛合剂1方和2方单次给药均增加肝细胞PFK与PDH活性,促进InsR Tyr1150/1151与Akt Thr308和Ser473磷酸化水平,呈现药物时间依赖效应(P0.05,P0.01)。结论:复方石斛合剂1方,2方分别单次给药都能提高db/db小鼠的葡萄糖耐量,增加肝细胞PFK和PDH酶活性,其机制可能与增加InsR Tyr150/1151与Akt Thr308和Ser473磷酸化,改善胰岛素信号的快速转导有关。     

益气化浊胶囊对KKAy小鼠胰岛素、抵抗素、视黄醇结合蛋白4的影响

目的:观察益气化浊胶囊对KKAy小鼠胰岛素抵抗及脂肪组织抵抗素(resistin)、视黄醇结合蛋白-4(RBP4)表达的影响。方法:将KKAy小鼠随机分为模型对照组(20 mL·kg-1·d-1)、益气化浊胶囊高、低剂量组(2,1 g·kg-1·d-1)、阳性对照(吡格列酮)组(2.5 mg·kg-1·d-1),另选C57BL/6J小鼠为空白对照组(20 mL·kg-1·d-1)。连续灌胃给药10周,每天1次,其中空白对照组、模型对照组,灌服无菌水。10周后测空腹血糖(FBG)、空腹血清胰岛素(FINS)并计算胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、脂肪组织抵抗素(resistin)、视黄醇结合蛋白(RBP)4含量。结果:模型对照组FBG,FINS,HOMA-IR,ISI,resistin,RBP4显著高于正常对照组(P<0.01);益气化浊高剂量组FBG低于模型对照组(P<0.05);益气化浊低、高剂量组FINS,HOMA-IR,ISI均低于模型组(P<0.01);益气化浊高剂量组resistin,RBP4低于模型组(P<0.05)。结论:模型组KKAy小鼠产生明显的胰岛素抵抗,表现为FBG,FINS,HOMA-IR,resistin,RBP4明显增高,ISI降低;益气化浊胶囊明显改善KKAy小鼠胰岛素抵抗状态,其结果为FBG,FINS,HOMA-IR,Resistin,RBP4降低,ISI升高,总体趋势为高剂量组优于低剂量组。     

辛开苦降方对初发2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素敏感性及糖脂代谢的影响

目的:观察辛开苦降方干预初发2型糖尿病(T2DM)KKAy小鼠胰岛素敏感性及糖脂代谢的影响。方法:10周龄雄性初发T2DM KKAy小鼠40只按血糖值随机分为4组:模型组、罗格列酮组、辛开苦降低剂量组、辛开苦降高剂量组。正常对照组选10周龄雄性C57BL/6J小鼠10只。正常组及模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液(CMC)灌胃。各组连续灌胃给药四周后取材,测定其空腹血糖(Fasting Plasma glucose,FPG)、血清胰岛素(Fasting Insulin,FINS)、血脂,肝糖原、肝脂质含量。显微镜下观察肝脏组织形态。结果:给药四周后,与正常组相比,模型组胰岛素敏感指数(Insulin Sensitivity Index,ISI)明显降低(P0.01),FPG、FINS、总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、三酰甘油(Triglyceride,TG)、游离脂肪酸(Free Fatty Acid,FFA)、肝脏TC、肝脏TG均明显升高(P0.01),肝糖原含量降低(P0.01)。与模型组相比,罗格列酮组ISI好转(P0.01),FPG、FINS、TC、TG、FFA、TG明显降低(P0.01,P0.05),肝糖原含量明显增加(P0.01)。辛开苦降低剂量组及其高剂量组2组FINS、ISI、肝糖原含量均高于模型组(P0.05,P0.01),TG水平低于模型组(P0.05,P0.01);辛开苦降高剂量还能显著降低FPG、TC水平、FFA水平(P0.05,P0.01)。辛开苦降低剂量组还可显著降低肝脏TG水平(P0.05)。肝脏病理显示:正常组小鼠肝脏结构正常,而模型组小鼠肝脏脂肪变性明显。罗格列酮组小鼠肝脏脂肪变性较模型组有所减轻。辛开苦降低剂量组和辛开苦降高剂量组小鼠肝脂肪变性较模型组有明显改善。结论:辛开苦降方可增加KKAy T2DM小鼠胰岛素敏感性,减轻肝胰岛素抵抗,肝糖原合成增加,从而改善血糖水平,并能降低血及肝脏脂质水平,减轻肝脏脂肪变性,有效保护肝脏组织形态结构。     

糖耐康改善ZDF大鼠胰岛β细胞凋亡的作用机制研究

目的：探讨糖耐康干预2型糖尿病大鼠（ZDF）胰岛β细胞凋亡的作用及机制。方法：6只雄性ZDF（fa/+）大鼠设为正常对照组,雄性ZDF（fa/fa）大鼠30只设为2型糖尿病成模组。根据体质量及随机血糖将成模组大鼠随机分为5组,即模型组、二甲双胍组、糖耐康高、中、低剂量组。给药前测大鼠空腹血糖值及血清胰岛素值;给药6周再次检测大鼠空腹血糖值及血清胰岛素值并进行比较。采用HE染色观察胰岛形态结构的改变;采用TUNEL法检测各组大鼠胰腺组织中胰岛β细胞凋亡情况;免疫组织法观察细胞死亡信号转导效应酶Caspase-3在胰岛中表达情况。结果：给药6周后,糖耐康高、中、低剂量组均可显著改善ZDF大鼠空腹血糖（P<0.01）;糖耐康高、中、低剂量组血清胰岛素值较模型组均有所升高,其中,高、低剂量组有显著性差异（P<0.05）;给药组胰岛素抵抗指数较模型组均有所下降,其中,糖耐康高剂量组及二甲双胍组有极显著性差异（P<0.01）。HE染色显示给药组的胰岛细胞形态、结构较模型组有所改善。TUNEL结果显示ZDF（fa/fa）大鼠胰腺组织内均可见胰岛细胞凋亡改变,与模型比,给药组TUNEL阳性表达率均显著性减少（P<0.05）。免疫组化结果显示给药组Caspase-3蛋白表达下降（P<0.05）。结论：糖耐康能有效降低ZDF大鼠胰岛β细胞的凋亡,即对胰岛β细胞有一定的保护作用。