白芍总苷对佐剂关节炎大鼠足爪组织病理的影响及MMP-9蛋白表达的抑制作用

目的:探讨白芍总苷(total glucosides of paeonia:TGP)对佐剂关节炎大鼠足爪组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达的抑制作用和对大鼠足爪组织病理改变的影响及血清中血管内皮生长因子(VEGF)和白介素-1β(IL-1β)含量的影响。方法:建立Ⅱ型胶原诱导的佐剂关节炎大鼠模型,用免疫组化染色法检测足爪组织中MMP-9蛋白的表达,病理切片观察不同剂量的TGP对佐剂关节炎大鼠的治疗效果,用ELISA法检测佐剂关节炎大鼠血清中VEGF和IL-1β的含量。结果:白芍总苷中(50 mg/kg)、大(100 mg/kg)剂量组的胞浆内MMP-9的阳性表达比模型对照组明显降低,TGP中、大剂量治疗组与地塞米松组能明显改变佐剂关节炎大鼠皮下组织细胞排列、炎性细胞浸润及血管增生现象,TGP 25 mg/kg组对改善佐剂关节炎大鼠足部皮肤的病理状况无明显作用。中、大剂量的TGP组和地塞米松组血清VEGF和IL-1β的含量明显降低。结论:TGP对佐剂关节炎大鼠炎症的抑制作用,可能与其下调MMP-9蛋白的表达,抑制炎性细胞浸润及血管增生,降低炎性细胞因子VEGF和IL-1β的产生有关。     

白芍总苷对CIA大鼠血清LI-1β、TNF-α、IL-4和IL-10及关节浸液NO和PGE_2影响的研究

目的:研究白芍总苷对大鼠胶原性关节炎治疗的可能机制。方法:型胶原诱导大鼠胶原性关节炎,用ELISA及放免法检测CIA大鼠血清LI-1β、TNF-α、IL-4和IL-10水平及关节浸液NO和PGE2含量。结果:TGP(50,100mg.kg-1)使CIA大鼠血清异常增高的LI-1β、TNF-α水平下降、使降低的IL-4和IL-10水平升高(P<0.01);TGP还可明显降低CIA大鼠关节浸液中NO和PGE2含量(P<0.05,P<0.01)。结论:TGP对大鼠胶原性关节炎的作用机制可能是抑制CIA大鼠内源性细胞因子活性和炎症局部区域相关炎症介质产生,提高抑炎细胞因子含量,诱导炎性细胞因子网络趋于平衡,从而对CIA发挥治疗作用。     

雷公藤多甙对胶原性关节炎大鼠血清MIF、IL-1β、TNF-α含量的影响

目的：研究雷公藤多甙（TG）对胶原性关节炎大鼠（CIA）血清巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、白细胞介素（IL-1β）、肿瘤坏死因子（TNF-α）含量的影响,以探讨其作用机制。方法：鸡Ⅱ型胶原诱导大鼠CIA,观察大鼠足爪容积,记录关节炎指数,采用双抗体夹心ELISA法和放射免疫法（RIA）检测三者的含量并进行相关分析,免疫组化法观察关节病理变化及检测滑膜组织中MIF表达。结果：给药14d后,治疗组明显抑制胶原性关节炎大鼠足爪肿胀,降低关节炎指数,显著降低异常升高的三者水平。大鼠踝关节病变积分与模型组比较皆明显下降。免疫组化定量分析,TG组MIF表达阳性密度降低最显著。结论：TG治疗大鼠CIA具有显著疗效,其作用机制可能与调节外周血清、滑膜组织内MIF、TNF-α和IL-1β等炎性细胞因子的表达有关。     

冬虫夏草素对小鼠胶原诱导性关节炎的治疗作用以及免疫调节机制研究

目的研究冬虫夏草素对小鼠胶原诱导性关节炎(CIA)的治疗作用及机制。方法 BALB/C小鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、冬虫夏草素低剂量组(5mg/kg)、高剂量组(10mg/kg)。除正常对照组以外的各组小鼠均以尾部皮内注射II型胶原建立胶原诱导性关节炎(CIA)动物模型。制作HE染色组织切片,观察小鼠足爪病理学特征;并测量小鼠体重和脾脏指数;ELISA方法检测小鼠血清中细胞因子IL-1β和IL-10的水平;使用蛋白质印迹分析实验技术(Western-blot)检测足爪关节组织内基质金属蛋白酶MMP-3以及TIMP-1的表达。结果冬虫夏草素高剂量组能显著降低CIA的发病率,并且改善CIA小鼠足爪的炎性肿胀和病理学特征,使脾脏指数降低;并且使血清中炎症性细胞因子IL-1β降低,抗炎细胞因子IL-10升高,可以降低关节炎模型中足爪关节组织MMP-3/TIMP-1的含量比值。结论冬虫夏草素通过调节MMP-3和TIMP-1之间的平衡,以及炎症细胞因子IL-1β和抗炎细胞因子IL-10之间的平衡发挥免疫调节作用,可以抑制机体对II型胶原的免疫反应,使小鼠足爪关节炎症程度减轻。     

姜酚对胶原诱导性关节炎的抗炎作用及其机制研究

目的探讨姜酚对牛II型胶原诱导性关节炎(Collagen Induced Arthritis,CIA)大鼠的抗炎作用及其机制。方法将6周龄雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、姜酚组和雷公藤多苷组,每组10只。制备CIA模型,观察姜酚对CIA大鼠关节病理、关节炎指数的变化及对大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)、白介素-1β(IL-1β)表达的影响。结果姜酚能够抑制CIA大鼠踝关节肿胀,降低关节炎指数,并能降低血清TNF-α、IL-1及IL-1β水平,减轻关节滑膜细胞增生、滑膜层及滑膜下层淋巴细胞浸润,其疗效与雷公藤多苷组相当(P>0.05)。结论姜酚对CIA大鼠关节炎具有治疗作用,其机制可能与下调TNF-α、IL-1和IL-1β有关。     

电针对大鼠胶原诱导型关节炎的缓解效应及作用机制

目的:观察电针对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠关节炎性反应及骨质破坏的缓解效应,探讨针刺防治类风湿性关节炎的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,每组10只。采用大鼠尾根部多点皮内注射牛Ⅱ型胶原乳剂法诱导建立CIA模型。电针组取双侧"足三里""三阴交"穴进行电针干预,疏密波,2 Hz/100 Hz,强度1 mA,30 min/次,1次/d,连续28 d。每周监测各组大鼠关节炎指数和足容积;干预结束后通过HE染色、番红O-固绿染色和酒石酸酸性磷酸酶染色观察大鼠踝关节病理学改变;酶联免疫吸附法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)含量;Western blot法检测大鼠滑膜组织中基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3、MMP-13和核因子κB受体激活因子配体(RANKL)蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠足容积增大、关节炎指数升高(P0.01);踝关节滑膜增生,伴有大量炎性细胞浸润,关节软骨与骨部分损毁,破骨细胞数量增加(P0.01);血清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量升高(P0.05);膝关节滑膜组织中MMP-1、MMP-3、MMP-13及RANKL蛋白表达上调(P0.01,P0.05)。与模型组比较,电针组大鼠足容积减小、关节炎指数降低(P0.05);踝关节面较完整,滑膜组织增生不明显,炎性细胞浸润减少,软骨层较厚,破骨细胞数量减少(P0.01);血清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量降低(P0.05);膝关节滑膜组织中MMP-1、MMP-3、MMP-13及RANKL蛋白表达下调(P0.01,P0.05)。结论:电针干预"足三里""三阴交"穴对CIA大鼠关节炎性反应与骨质破坏具有较好的缓解效应,该作用可能是通过抑制滑膜细胞分泌炎性因子和骨破坏相关蛋白来实现的。     

穿山龙总皂苷对胶原性关节炎大鼠炎性细胞因子的影响

目的 观察穿山龙总皂苷(total saponin from Rhizoma Dioscorea nipponica,TSRDN)对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(collagen -induced arthritis,CIA)大鼠血清中炎性细胞因子的影响,初步探讨穿山龙总皂苷治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)可能的作用机制.方法 建立CIA大鼠模型.于初次免疫后第14天,将造模成功的大鼠随机分为CIA模型组,穿山龙总皂苷高、中、低剂量组,雷公藤组.其中穿山龙总皂苷高、中、低剂量组分别经胃灌服100 mg·kg-1·d-1,50 mg·kg-1·d-1、25 mg·kg-1·d-1剂量的穿山龙总皂苷,雷公藤组灌服12 mg·kg-1·d-1剂量的雷公藤多苷,正常对照组、CIA模型组灌服等体积溶媒.用药后21 d,记录各组大鼠后肢体积、足垫厚度、关节炎指数;测定血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平;观察关节滑膜病理变化.结果 经穿山龙总皂苷灌胃治疗21 d后,与模型组相比,治疗组大鼠后肢体积、足垫厚度、关节炎指数有降低趋势(P＞0.05),大鼠滑膜增生减轻,炎细胞浸润减少,软骨及骨组织侵蚀破坏减轻,血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低(P＜0.01).结论 穿山龙总皂苷能明显降低CIA大鼠血清中TNF-α、IL-Iβ和IL-6水平,减轻滑膜组织的病理损伤,表明其对治疗类风湿关节炎有一定作用.     

CIA模型大鼠关节滑膜细胞NF-κB信号表达及姜酚胶丸的调控作用研究

目的探讨姜酚胶丸对胶原诱导性关节炎大鼠关节滑膜细胞NF-κB信号表达及炎症因子TNF-α、IL-1和IL-1β影响的研究。方法将6周龄雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、姜酚胶丸治疗组和雷公藤多苷对照组,每组10只。制备CIA模型,采用Western blot法检测关节滑膜细胞NF-κB/P65、IκBα表达,ELISA法检测大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-1β表达情况。结果 1姜酚胶丸治疗组及雷公藤多苷对照组可下调CIA大鼠滑膜细胞NF-κB/P65、IκBα的表达,与模型组比较均有显著性差异(P0.01);2姜酚胶丸治疗组及雷公藤多苷对照组可下调CIA大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-1β的表达,与模型组比较均有显著性差异(P0.01)。结论姜酚胶丸可通过降低CIA大鼠关节滑膜细胞NF-κB/P65、IκBα信号蛋白表达,显著下调CIA大鼠血清致炎因子TNF-α、IL-1、IL-1β表达,达到缓解炎症的作用。     

川芎嗪对大鼠胶原性关节炎及免疫功能的影响

目的:探讨川芎嗪对胶原性关节炎大鼠的影响。方法:采用Ⅱ型胶原诱导胶原性关节炎大鼠模型。随机分为正常组、模型组与川芎嗪(50 mg/kg、100mg/kg)处理组。实验过程中观察胶原性大鼠的一般情况、足爪肿胀度和关节指数的变化。给药结束后第2天,3%巴比妥那麻醉处死大鼠,取足爪组织制备切片观察病理变化;无菌取脾制备脾细胞悬液,用MTT法检测脾T细胞和B细胞增殖反应;制备10%脾组织匀浆用ELSIA法检测脾组织IL-1β、TNF-α和IL-12含量;心脏取血,制备血清用ELSIA法测定血清中抗CⅡ抗体水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠关节红肿,表面皮肤发亮充血,关节指数上升,脾T细胞和B细胞增殖反应、血清中抗CⅡ抗体水平和脾组织中IL-1β、TNF-α和IL-12水平明显升高,大鼠足爪皮下组织细胞排列紊乱且有大量炎性细胞浸润及血管增生。与模型组比较,川芎嗪100mg/kg可改善胶原性关节炎大鼠一般状况,明显抑制大鼠足爪肿胀;降低关节指数;抑制脾T细胞和B细胞增殖反应,在570nm的吸光度A分别为0.579±0.017 vs 0.624±0.015,0.263±0.021 vs 0.312±0.017;血清中抗CⅡ抗体水平显著降低,由模型对照组的(0.756±0.020)μg/L降低到(0.579±0.023)μg/L;脾组织中IL-1β〔(80.32±12.25)vs(160.06±20.61)ng/L〕,TNF-α〔(81.26±13.57)vs(123.51±20.34)ng/L〕和IL-12〔(181.05±19.57)vs(260.08±17.52)ng/L〕水平均明显降低;能明显改善大鼠足爪组织病理改变,炎性细胞浸润及血管明显减轻,川芎嗪50 mg/kg对上述指标无明显影响。结论:川芎嗪100 mg/kg可抑制CIA大鼠脾T和B淋巴细胞的增殖反应,降低脾组织中IL-1β、TNF-α和IL-12和血清中抗CⅡ抗体水平,改善足爪组织病理变化,对Ⅱ型胶原诱导的关节炎具有治疗作用。     

中药熏蒸疗法对II型胶原诱导型关节炎大鼠血清IL-1β、IL-ra含量及IL-ra/IL-1β比值的影响

目的 研究中药熏蒸疗法对II型胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠血清中炎性细胞因子IL-1β和IL-lra水平及IL-lra/IL-1β比值的影响.方法 建立II型胶原诱导的大鼠模型,ELISA法检测大鼠血清中IL-1β和IL-ra的含量,计算IL-ra/IL-1β比值.结果 中药熏蒸能明显降低CIA血清中IL-β含量及升高IL-ra及IL-ra/IL-1β比值.结论 中药熏蒸疗法具有抑制CIA大鼠关节炎症的作用,其机制可能与调节体内炎性细胞因子IL-1β及抗炎性细胞因子IL-ra的水平有关.