膈下逐瘀汤对肝纤维化大鼠TIMP-1/2蛋白表达的影响

采用免疫组化和原位杂交的方法分别测定6组肝纤维化大鼠治疗前后TIMP-1、TIMP-2的基因调节和蛋白表达,结果证明TIMP-1、TIMP-2与肝纤维化形成密切相关,膈下逐瘀汤对TIMP-1、TIMP-2的基因调节和蛋白表达有一定的抑制作用.     

膈下逐瘀汤与柴胡疏肝散对实验性肝纤维化作用研究

应用膈下逐瘀汤和柴胡疏肝散两个方剂的水提液和醇提液对实验性大鼠肝纤维经病变的作用进行了研究。结果表明柴胡疏肝散作用不够明显，膈下逐瘀汤效果明显，其中水提取液尤为明显，初步证明活血祛瘀，行气止痛法优于疏肝行气，和血止痛法。     

膈下逐瘀汤抗大鼠免疫性肝纤维化的研究

目的:观察膈下逐瘀汤逆转大鼠肝纤维化的疗效和对肝损伤的保护作用。方法:大鼠随机分为空白对照组、膈下逐瘀汤组、猪血清组、猪血清+膈下逐瘀汤组。猪血清0.5 mL/只(2次/周)ip诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,在制备模型的同时膈下逐瘀汤(含生药7.37 g.kg-1)ig干预,共12周。实验结束后处死大鼠,HE染色分析肝组织胶原纤维含量,ELISA法分析MMP胶原酶活性,分光光度法分析天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性。结果:与模型组比较,模型+膈下逐瘀汤组大鼠肝纤维化程度显著改善(U=2.57,P<0.05),AST和ALT活性显著降低(P<0.05),MMP胶原酶活性显著降低(P<0.05)。结论:膈下逐瘀汤对猪血清诱导的免疫性肝纤维化大鼠肝纤维化程度和肝损伤具有明显改善作用。     

加味膈下逐瘀汤对肝纤维化模型大鼠肝功能及纤维化指标的影响

目的:研究加味膈下逐瘀汤抗肝纤维化的效果及作用机制。方法:将大鼠分为正常组、模型组、秋水仙碱组及加味膈下逐瘀汤组,每组10只。秋水仙碱组按1 mg/kg药量给予秋水仙碱,加味膈下逐瘀汤组按生药量8.2 g/kg灌胃,正常组及模型组分别给予相同体积生理盐水。考察各组肝脏指数、血清肝功能和肝纤维化指标,并进行HE染色,观察肝组织病理改变。结果:与模型组比较,加味膈下逐瘀汤组大鼠肝纤维化明显改善,肝脏指数降低,丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、层粘连蛋白(LN)和透明质酸(HA)水平降低,清蛋白(ALB)和总蛋白(TP)含量升高,差异有统计学意义(P0.05);组织病理学结果显示,加味膈下逐瘀汤能明显改善肝脏病理损伤程度。结论:加味膈下逐瘀汤能有效减轻肝纤维模型大鼠的肝脏损伤,降低肝纤维化程度。     

膈下逐瘀汤对大鼠纤维化肝组织α-SMA和TGF-β1表达的影响

目的:观察膈下逐瘀汤抗猪血清诱导的大鼠肝纤维化作用及其可能的作用机制。方法:采用猪血清腹腔注射诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,VG染色法检测肝组织病理学改变,ELISA检测肝组织TGF-β1含量,定量RT-PCR检测肝组织TGF-β1和α-SMA mRNA表达。结果:与模型组大鼠比较,膈下逐瘀汤可显著降低猪血清诱导的肝纤维化程度,减少肝组织TGF-β1蛋白和mRNA表达,降低肝组织α-SMA mRNA表达。结论:膈下逐瘀汤可有效地逆转实验性大鼠肝纤维化,其机制可能与抑制肝星状细胞活化有关。     

膈下逐瘀汤对免疫性肝纤维化大鼠肝组织MMP-9和TIMP-2表达的影响

目的:观察膈下逐瘀汤对肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响。方法:大鼠随机分为空白对照组、膈下逐瘀汤组、猪血清组、猪血清+膈下逐瘀汤组。猪血清腹腔注射诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,同时膈下逐瘀汤灌胃给药干预。消化法检测肝组织羟脯氨酸含量,ELISA法检测肝组织MMP-9和TIMP-2蛋白含量,实时定量RT-PCR检测肝组织MMP-9和TIMP-2 mRNA表达。结果:与模型对照组比较,膈下逐瘀汤可显著降低肝组织羟脯氨酸、MMP-9及TIMP-2蛋白含量,下调肝组织MMP-9、TIMP-2 mRNA水平。结论:膈下逐瘀汤可有效地逆转实验性大鼠肝纤维化,其机制可能与调节MMP-9和TIMP-2的表达有关。     

膈下逐瘀汤对大鼠纤维化肝组织TIMP1和MMP-2表达的影响

目的:探讨Sprague-Dawley(SD)大鼠皮下注射四氯化碳诱发中毒性肝纤维化病理模型后肝组织TIMP1 mRNA和MMP-2表达的变化及膈下逐瘀汤对其干预作用.方法:Sprague-Dawley(SD)大鼠60只随机分为空白对照组(n=20)、模型对照组(n=20)和膈下逐瘀汤组(n=20)共3组.结论:大鼠皮下注射四氯化碳可诱导肝脏组织TIMP1 mRNA和MMP-2表达水平明显增高,膈下逐瘀汤可以抑制肝组织TIMP1 mRNA和MMP-2的表达,从而发挥抗肝纤维化的作用.     

膈下逐瘀汤对大鼠纤维化肝脏组织谷胱甘肽抗氧化系统的影响

目的:观察膈下逐瘀汤对大鼠纤维化肝脏组织氧化应激及谷胱甘肽(glutathione,GSH)抗氧化系统的影响。方法:60只大鼠随机分为空白组、正常组、模型组,膈下逐瘀汤组。以猪血清腹腔注射(0.5 m L/只,2次/周)制备免疫性大鼠肝纤维化模型,同时各组大鼠分别给予生理盐水或膈下逐瘀汤(生药7.37 g·kg~(-1)·d~(-1))灌胃共12周。采用分光光度法检测肝组织丙二醛(MDA)和GSH含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(glutamate-cysteine ligase catalytic subunit,GCLc)mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2),GCLc表达和糖原合酶激酶-3β(glycogen synthasc kinase-3β,GSK-3β)磷酸化。结果:与模型组比较,膈下逐瘀汤显著抑制了纤维化肝脏组织MDA含量(P0.05),增加了GSH含量(P0.05),上调了GCLc和Nrf2表达(P0.05),提高了GSK-3β磷酸化水平(P0.05)。结论:膈下逐瘀汤通过活化Nrf2信号通路增强机体肝脏GSH抗氧化系统进而缓解大鼠纤维化肝脏组织氧化应激。     

加味膈下逐瘀汤治疗肝血管瘤32例

加味膈下逐瘀汤治疗肝血管瘤３２例扬中市八桥中心卫生院（２１２２１９）张纪宏关键词肝血管瘤加味膈下逐瘀汤１９９１年８月至１９９５年４月，笔者运用加味膈下逐瘀汤治疗肝血管瘤２２例，疗效显著。现小结如下。１临床资料２２例均经Ｂ超检查（其中１０例行肝穿刺，穿...     

春和丹治疗肝纤维化大鼠的实验研究

目的探讨春和丹对肝纤维化大鼠的治疗作用。方法将SD大鼠40只随机分为正常组、模型组、春和丹低剂量组(20g/kg)、春和丹高剂量组(40g/kg)及护肝片组(1.5g/kg),每组8只。除正常组外,其余各组以四氯化碳(CCl4)皮下注射制备大鼠肝纤维化模型。除正常组和模型组外,于实验第5周开始分别给予春和丹和护肝片灌胃给药,连续5周。观察各组肝纤维化指标、肝功能指标及肝组织病理的变化。结果春和丹可明显降低肝纤维化大鼠血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及肝组织羟脯氨酸定量(Hyp);明显升高血清白蛋白(Alb);光镜观察肝组织病理明显改善(P<0.05);春和丹低剂量组和春和丹高剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论春和丹抗肝纤维化作用确切,同时够修复肝脏炎症损伤,纠正蛋白质代谢,且不同剂量春和丹与护肝片比较差异无统计学意义(P>0.05)。     

益肝煎剂抗肝纤维化的临床研究

目的　观察益肝煎剂抗肝纤维化的临床疗效 ,并探讨其抗肝纤维化机制。方法　将 45例慢性肝病肝纤维化患者随机分为 2组 ,治疗组 30例 ,口服益肝煎剂 ,每次 1袋 ,每日 2次温服。对照组 1 5例 ,口服强肝胶囊 ,每次 6粒 ,每日 2次。 2组均 90日为 1个疗程。观察治疗前后血清透明质酸 (HA)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ ) ,层粘连蛋白 (LN)、Ⅳ型胶原 (ⅣC)、丙氨酸氨基转移酶 (ALT)变化。结果　治疗组总有效率为 93.33% ,对照组总有效率为 86.67% ,2组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。 2组治疗后血清PCⅢ、LN水平比较有显著性差异(P <0 .0 5 ) ;而血清HA、ⅣC、ALT水平比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　益肝煎剂有良好抗肝纤维化作用 ,其作用机制可能与其保护肝细胞、抑制胶原合成并促进其降解有关     

乙肝系列中成药对免疫性肝纤维化大鼠肝功能和肝纤维化指标的影响

目的:采用乙肝系列中成药(乙肝清热解毒颗粒、乙肝益气解郁颗粒、乙肝养阴活血颗粒)探讨中医清热解毒法、益气解郁法、养阴活血法单独使用及联合应用对免疫性肝纤维化模型大鼠肝功能和血清肝纤维化四项指标的影响。方法:用猪血清腹腔注射诱导免疫性肝纤维化模型,成模后再用乙肝系列中成药进行干预治疗,用全自动生化分析仪测定肝功能,用放射免疫分析法测定血清肝纤维化四项指标。结果:猪血清诱导的肝纤维化大鼠血清中ALT、AST、HA、LN、IV-C和PC-Ⅲ含量均明显升高(P<0.05,P<0.01),经乙肝系列中成药治疗后,上述指标明显降低(P<0.05,P<0.01),且合方效果优于单方,清热解毒法和益气解郁法的联合应用能更好的改善肝功能,清热解毒法和养阴活血法的联合应用能更好的改善肝纤维化四项指标。结论:中医清热解毒法、益气解郁法、养阴活血法对免疫性肝纤维化有一定的防治作用,能降低肝纤维化程度,同时可减轻肝细胞损伤,改善肝功能。     

A Chinese herbal medicine, Gexia-Zhuyu Tang (GZT), prevents dimethylnitrosamine-induced liver fibrosis through inhibition of hepatic stellate cells proliferation

Ethnopharmacological evidence

Gexia-Zhuyu Tang (GZT), also called Gexiazhuyu decoction (GXZYD), is a traditional Chinese herbal medicine for chronic liver diseases such as cirrhosis and liver fibrosis.

Aim of the study

In this study, we have investigated the affects of GZT on a rat model of dimethylnitrosamine (DMN)-induced liver fibrosis.

Materials and methods

In this study, the protective effects of GZT on DMN-induced liver fibrosis were measured using a rat model. Following 5 weeks of DMN-treatment (8 mg/kg, i.p., given 3 consecutive days each week), oral administration of GZT at 1.8 g/kg daily via oral gavage for 2 weeks beginning at week 13.

Results

Both body and liver weights were significantly decreased. The reductions in body and liver weights corresponded with increasing liver damage severity. Furthermore, GZT-treatment remarkably decreased the levels of serum GOT (glutamate oxaloacetate transaminase) and GPT (glutamic pyruvic transaminase), and the mRNA expression levels of collagen alpha-1(I) and alpha-smooth muscle actin (alpha-SMA) in DMN-induced hepatic fibrosis. In addition, hepatic stellate cells (HSCs) play a major role in various types of liver fibrosis through initial myofibroblast transformation. The proliferation of HSCs was inhibited by GZT. Treatment with GZT also induced HSC apoptosis in a dose- and time-dependent manner. GZT treatment induced HSC apoptosis by facilitating Ca²⁺ release from the mitochondria within 6 h. Subsequently, caspases 3 and 12 were elevated by 72 h after treatment.

Conclusions

Our studies indicate that GZT exhibited both hepatoprotective and antifibrogenic effects in DMN-induced hepatic injury. These findings suggest that GZT may be useful in preventing the development of hepatic fibrosis.     

Herb medicine Yin-Chen-Hao-Tang ameliorates hepatic fibrosis in bile duct ligation rats

The accumulation of hydrophilic bile acids in the liver is considered to play a pivotal role in the induction of hepatic injury. Yin-Chen-Hao-Tang (YCHT) decoction is an aqueous extract from three different herbs: Artemisia capillaries Thunb (Compositae), Gardenia jasminoides Ellis (Rubiaceae), Rheum officinale Baill (Polygonaceae), which has been recognized as a hepatoprotective agent for various types of liver diseases. Therefore, we used an experimental of biliary atresia model to test that YCHT plays a regulatory role in the pathogenesis of hepatic fibrosis. Hepatic damage with fibrosis was produced by common bile duct ligation (BDL) for 27 days in experimental cholestasis animal model. After surgery, YCHT (250 and 500mg/kg BW) oral administration once a day continued for 27 days. BDL caused a prominent liver collagen deposition that was supported by the increased alpha-SMA protein and mRNA expression of procollagen I. YCHT significantly decreased hepatic alpha-SMA protein levels and decreased in hydroxyproline and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) levels of BDL rats. On the other hand, the normalizing effect of YCHT (250mg/kg) on the TGF-beta1mRNA expression was independent on the dose of YCHT, 500mg/kg was not effectively changed the quantitative composition of mRNA levels. The study shows that hepatic hydroxyproline accumulation caused by hydrophilic bile acids accompanied by elevated hepatic lipid peroxidation, and hepatic collagen levels can be decreased in the presence of YCHT. In conclusion, long-term administration of YCHT in rats ameliorated the hydropholic bile acids induced hepatic injury that probably related to a reduced oxidant stress and degree of hepatic fibrosis.     

牛磺酸对实验性肝纤维化大鼠保护作用的研究

[目的]研究牛磺酸(Tau)对实验性肝纤维大鼠肝组织的保护作用。[方法]将120只实验用大鼠随机分为正常对照组、模型组、牛磺酸低(150 mg/kg)、中(300 mg/kg)、高(600 mg/kg)剂量组和复方鳖甲软肝片540 mg/kg组,每组20只;采用CCl4复合法制备肝硬化门静脉高压大鼠模型,灌胃给药治疗4周后,测定血清中丙氨酸氨基转移酶门冬氨酸(ALT)、氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)含量,测定血清中肝纤四项(CⅣ、PCⅢ、LN、HA)含量,HE染色法观察肝脏组织形态结构变化并对肝组织细胞坏死和组织增生进行分级;通过天狼星染色观察肝脏组织纤维化状况;测定抗氧化酶(SOD、GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;测定血清中炎症细胞因子IL-10、TNF-α含量。[结果]与模型组相比,牛磺酸中、高剂量组大鼠血清中ALT、AST、TBIL含量和CⅣ、PCⅢ、HA含量均显著降低(P0.05,P0.01),高剂量组LN含量显著降低(P0.05);牛磺酸各剂量组大鼠肝组织纤维化病变呈不同程度改善,以高剂量组效果最为显著;牛磺酸中、高剂量组大鼠肝脏组织SOD、GSH-Px活性显著升高且MDA含量显著降低(P0.05,P0.01),血清中IL-10、TNF-α含量显著降低。[结论]牛磺酸对实验性肝纤维化大鼠具有保护作用,其机制可能与牛磺酸能够有效保肝降酶、抑制氧化应激反应和炎症反应、改善肝功能有关。     

中医药防治肝纤维化

肝纤维化是各种病因所致肝损伤的代偿性修复反应,表现为肝内纤维结缔组织增生与沉积,是多种慢性肝病共有的病理过程。尽管中西医对肝纤维化的认识各有异同,但阻断肝纤维化的发生和发展具有重要意义。目前,利用现代医学的方法对肝纤维化发生的机制及诊断研究取得了许多重要的进展,而利用中医药的理论和方法,对肝纤维化的防治也取得了显著的成绩并引起了西方医学的广泛关注。文章在此领域进行述评,并提出今后的防治展望。     

扶正理气合剂抗酒精性肝纤维化的实验研究

目的 探讨复方中药扶正理气合剂对洒精性肝纤维化的预防机制和效果.方法 雄性SD大鼠80只,随机分为正常组、模型组、复方丹参组和扶正理气合剂组.以乙醇灌胃诱导大鼠肝纤维化模型,复方丹参组造模同时给予复方丹参灌胃,扶正理气合剂组造模同时给予扶正理气合剂灌胃,共16周.16周后处死大鼠取肝组织标本,光镜观察肝组织的病理变化,放射免疫法测定血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 ①模型组多数正常小叶结构破坏或消失,由汇管区和中央静脉伸出粗大胶原纤维条索分割肝小叶,肝细胞索排列紊乱,肝细胞明显水肿,广泛脂肪变性.纤维隔内有大量淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞等浸润.与模型组比较,两个用药组肝小叶结构破坏明显减轻,肝脏胶原纤维增生亦明显减轻,纤维条索疏松变窄.肝细胞水肿好转,炎细胞浸润减少.②Masson染色胶原纤维面积比较:模型组胶原面积比正常组显著增加(P＜0.05),复方丹参组和扶正理气合剂组胶原面积较模型组均减轻(P＜0.05),扶正理气合剂组与复方丹参组比较无显著差异(P＞0.05).③与模型组比较,复方丹参组、扶正理气合剂组MDA下降(P＜0.01)、SOD升高(P＜0.05).结论 扶正理气合剂抗纤维化作用可能与其抗脂质过氧化作用有关.     

中医药治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床研究

目的：观察中医药治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床疗效。方法：76例乙型肝炎肝纤维化患者随机分为观察和对照组各38例,对照组例采用阿德福韦酯联合硫普罗宁治疗,观察组例在对照组的基础上采用中医药治疗;均连续治疗6个月后观察两组治疗前后肝纤维化及肝脾B超影像变化。结果：两组患者治疗后肝纤维化程度的HA、LN、IV-C均有明显下降。治疗前后比较差异均有统计学意义（aP〈0．05）：治疗后两组组间比较,观察组的HA、LN、IV-C均低于对照组,差异均有统计学意义（bP〈0．05）：治疗后两组患者的门静脉内径、脾静脉内径和脾脏厚度均有明显下降,治疗前后比较差异均有统计学意义（cP〈0．05）：且治疗后观察组的门静脉内径、脾静脉内径和脾脏厚度均低于对照组,差异均有统计学意义（dP〈0．05）。结论：中医药治疗慢性乙型肝炎肝纤维化疗效确切,值得进一步深入研究。     

化纤复肝方抗肝纤维化的临床研究

[目的]观察中药化纤复肝方在抗肝纤维化方面的疗效.[方法]选取62例肝纤维化患者随机分为两组,治疗组32例.对照组30例.治疗6个月.观察治疗前后两组患者的症状、体征、肝功能及肝纤维化指标的变化,评价中药化纤复肝方抗肝纤维化的疗效.[结果]治疗组改善肝纤维化患者的症状、恢复肝功能、降低血清肝纤维化指标明显优于对照组(P<0.05).[结论]化纤复肝方有比较良好的抗肝纤维化的效果.