白术多糖的分离纯化和化学结构研究

采用柱层析进行分离纯化,并用HPLC和13CNMR等方法分别阐明中药白术中多糖PSAM-1和PSAM-2的化学结构.结果表明多糖PSAM-1和PSAM-2均为杂多糖,平均分子量分别为1.36×105、1.04×105,PSAM-1由半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖组成,PSAM-2由木糖、阿拉伯糖、半乳糖组成.     

当归中一种杂多糖的分离纯化与结构鉴定

 目的研究从当归[Angelica sinensis(Oliv)Diels]中分离纯化获得的均一多糖ASDII-3-3的结构。方法采用糖组成分析、甲基化分析以及NMR确定该多糖的结构。结果该均一多糖相对分子质量为44000,主要由阿拉伯糖和半乳糖组成,此外尚含有少量的鼠李糖、甘露糖和木糖;其中阿拉伯糖的连接方式为端基和1,5连接;半乳糖的连接方式为1,4和1,4,6连接;鼠李糖为1,2连接,甘露糖为端基,木糖为1,4连接。结论该均一多糖为首次从当归中分离获得的一种新的杂多糖。     

关黄柏总多糖的分离纯化及其对小鼠脾细胞增殖的影响

目的:分离纯化关黄柏总多糖,研究纯化组分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。方法:采用DEAE Cellulose 52,DEAE-Sepharose F.F,Sephacryl S-400等载体对关黄柏总多糖进行分离纯化,高效凝胶过滤色谱法鉴定纯度并测定分子量,PMP柱前衍生化测定单糖组成;采用MTT法测定各多糖组分对Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的作用。结果:关黄柏总多糖占药材的4.3%,从关黄柏总多糖中分离纯化得到3种多糖组分G1,G2,G3,分别占总多糖的6%,9%,10%,经HPLC鉴定证明为均一多糖,均主要含阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖和半乳糖醛酸,其摩尔比分别是G1(1∶1.06∶1.04∶1.14),G2(1∶1.27∶1.10∶1.09),G3(1∶1.23∶0.99∶1.55),3种均一多糖对Con A诱导的T淋巴细胞增殖有显著的抑制作用。结论:3种均一关黄柏总多糖主要由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖和半乳糖醛酸组成,具有一定显著的抑制细胞免疫的作用,为进一步研究提供了实验基础。     

虎杖多糖的分离纯化及结构研究

目的分离纯化虎杖总多糖,并对其结构进行分析。方法采用水提醇沉法提取虎杖总多糖,联合DEAE-纤维素、Sephadex G-100柱色谱对虎杖总多糖进行分离纯化;采用高效凝胶渗透色谱法对均一多糖进行纯度鉴定和分子量测定;PMP柱前衍生-高效液相色谱法(HPLC)测定单糖组成;甲基化、气质联用(GC-MS)、红外光谱和核磁共振波谱对其结构进行分析。结果经分离纯化得到2个均一多糖PPⅠ、PPⅡ,其相对分子量分别为7780 Da、5720 Da。单糖组成实验表明PPⅠ、PPⅡ主要由葡萄糖构成。甲基化实验表明PPⅠ、PPⅡ均以1→4、1→3,4、1→4,6葡萄糖苷键存在,摩尔比分别为17∶1∶4、21∶1∶3。红外光谱及核磁波共振波谱对其结构分析证明PPⅠ、PPⅡ由α-型吡喃糖连接而成。结论 PPⅠ、PPⅡ是由α-(1,4)、α-(1→3,4)α-(1→4,6)吡喃葡萄糖苷键连接而成的不同结构、不同分子量的均一多糖。为进一步研究虎杖均一多糖的结构及活性提供依据。     

铜绿微囊藻酸性多糖的分离、纯化与结构研究

用热水浸提法提取、DEAE-52纤维素柱分离纯化得到铜绿微囊藻酸性多糖,通过理化分析及IR、UV、HPLC、~(13)CNMR分析其性质和化学结构。结果表明铜绿微囊藻酸性多糖是一种新型的α型吡喃糖,平均分子量为2.0028×10~5,由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖和半乳糖醛酸组成。     

徐长卿多糖的分离纯化与化学结构研究Ⅰ

 目的:研究中药徐长卿中一种葡聚糖的化学结构。方法:采用柱层析进行分离纯化,并用甲基化分析和¹³C-NMR等方法阐明多糖CPB-2IG的化学结构。结果:该多糖分子量为17×10⁴,由单一葡萄糖组成,比旋度为+1592°,构型为α型,单糖的连接方式为1,6连接。结论:CPB-2IG的化学结构为直链α-D--(1→6)葡聚糖。     

夹竹桃叶中一种阿拉伯半乳葡聚糖的化学结构

夹竹桃叶用 ３％ Ｎａ_２ＣＯ_３溶液提取,经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－２５阴离子交换层析,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００凝胶过滤法分离纯化,得到一种中性异多糖 ＮＩＢ－１,分子量为４ ３００,［ａ］_Ｄ~（２０）＋１１４． ７（ｃ,０．２,Ｈ_２Ｏ）,由Ｌ－Ａｒａ,Ｄ－Ｇａｌ和Ｄ－Ｇｌｃ构成。用化学分析及ＮＭＲ方法研究了其化学结构,由１,４连接的ａ－Ｄ－葡萄糖残基构成主链,阿拉伯糖和半乳糖分布于支链上,有多种分支形式,分支点在葡萄糖残基的６－Ｏ上。     

黄芪中一种新杂聚多糖的理化分析

 目的分析蒙古黄芪中一种杂聚多糖的理化性质。方法应用微波萃取技术提取黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS),采用蛋白酶法脱除其中的蛋白质,高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)测定其分子量(M_w),柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)测定其单糖组成及其分子摩尔比,红外光谱、1H核磁共振测定其主要化学构型,热失重(TG)和差示扫描量热法(DSC)对其进行热分析。结果提取物的分子量(M_w)为1.1×10⁴、纯度为97.16%,其单糖组成及其分子摩尔比为Rha-Glc-Gal-Ara=1.19∶72.01∶5.85∶20.95,主要化学构型为α-吡喃构型,主链部分由Glu1→6糖苷键构成,对光、热及湿均不稳定。结论提取物为黄芪中一种新的杂聚多糖。     

细脚拟青霉多糖Ⅰ的化学结构

目的研究细脚拟青霉多糖I的分离纯化方法、相对分子量、单糖组成及其结合方式.方法室温下水提取出粗多糖,采用Sephadex G-100柱层析纯化.经过酸全水解,利用阴离子交换柱测定单糖的组成.甲基化分析测定单糖的结合方式.IR以及NMR光谱的研究确定糖苷键的类型.结果经高效液相色谱检测为均一性组成,从以后的GC-MS及NMR图谱也获得证明.结论细脚拟青霉多糖I为α-(1→6)连结的葡聚糖,相对分子量为2.05×104u.     

一种在多糖分离纯化过程中新的脱蛋白方法

目的　寻找一种在多糖 (香菇多糖 )分离纯化过程中适宜的脱蛋白方法。方法　以正交试验法为主。结果　通过正交试验法找到了一种在多糖 (香菇多糖 )分离纯化过程中新的脱蛋白方法。 5因素 3水平正交试验的结果表明 ,影响脱蛋白率 ( DPR)的主要因素是 B(正丁醇 )、次主要因素是 D(乙醇 ) ,而因素 C(甲醇 )和 E(氯化钠 )的影响则较小 ;影响 DPR的主次顺序为 B>D>A(氯仿 ) >E>C。 DPR随着正丁醇浓度的增加而变化很大 ,开始缓慢上升 ,然后迅速降低 ;随着乙醇浓度的增大 ,DPR逐渐降低 ;而当氯仿浓度增大时 ,DPR则开始上升 ,然后下降 ;当甲醇浓度增大时 ,DPR则变化很小。脱蛋白的最佳条件是 A2 B2 C1 D1 E2 ,即在氯仿 4 0 %、正丁醇 10 %、甲醇 2 %、乙醇4 0 %、氯化钠 0 .0 1%的条件下 ,杂蛋白的去除率最高。验证性试验结果表明 ,在此条件下 ,杂蛋白的去除率达99.98 %。通过反复试验 ,还找到了适用于工业化生产的包括香菇原料的蒸煮、煮沸样品的浓缩、粗多糖的沉淀和脱色、粗多糖的干燥等在内的原料预处理的最佳工艺。结论　这种新的脱蛋白方法具有工艺简单、无需贵重设备、加工成本低、容易放大等特点 ,特别适合于多糖类产品的精制或其他需要去除杂蛋白的单元操作     

黄芪对糖尿病小鼠肾脏基因表达谱的影响

目的:应用基因芯片技术研究黄芪对糖尿病肾病小鼠肾脏基因表达谱的影响。方法:分别检测黄芪治疗组、未经治疗糖尿病肾病组、正常组小鼠肾脏基因的差异表达变化,筛选出差异表达基因,用生物信息学对检测结果进行分析,应用半定量RT-PCR验证差异表达基因。结果:2张芯片相比,经黄芪治疗后糖尿病小鼠肾脏发生显著性差异表达变化的基因共有88个基因同时发生改变,其中81个表现为相反方向的改变,7个表现为相同方向的改变。差异表达基因主要涉及的功能有:物质代谢、炎症与免疫反应、信号转导等。结论:黄芪可通过多种途径在基因水平上起到对糖尿病肾病的保护作用,对物质代谢相关基因影响更为明显。     

黄芪提取成分对冲击波致家兔肾损伤模型中P-选择素表达的影响

目的:探讨黄芪抗体外冲击波碎石术(ESWL)致肾损伤的有效成分及作用机制。方法:69只家兔随机分为假处理组、对照组、黄芪总皂苷组、总黄酮组和总多糖组,观察ESWL前后P-选择素(p-selectin)在肾脏的表达及细胞超微结构的改变,测定肾组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:ESWL后p-selectin广泛表达于肾小球、肾小管及肾间质等部位,肾组织MDA含量升高,SOD活性明显下降(P<0.05)。黄芪总皂苷组p-se-lectin阳性率及细胞损伤程度显著降低(P<0.05),MDA含量及SOD活性分别明显低于和高于对照组水平(P<0.05)。黄芪总黄酮与总多糖对p-selectin无抑制作用,二者抗冲击波致肾损伤的能力均不如总皂苷显著。结论:黄芪总皂苷除具有清除自由基的能力外,还可显著抑制黏附分子p-selectin的异常表达,是黄芪抗冲击波致肾损伤的主要效应成分。     

蒙古黄芪中不同提取部位抗氧化活性的研究

目的:研究蒙古黄芪中不同提取部位的抗氧化活性.方法:采用生物化学发光法对蒙古黄芪的总黄酮、总皂苷以及总多糖于1.25×10~(-3)～25×10~(-3)g·L~(-1)的浓度检测其抗氧化能力.结果:蒙古黄芪的不同提物部位对3种自由基均有清除作用,而且都呈明显的量效关系.其中,总黄酮清除自由基的能力最强,不同纯度的总黄酮(55.48%TFA,0.59%TFA和0.36%TFA)清除超氧阴离子的IC_(50)分别为0.654 2,4.654 4,6.055 2 g·L~(-1),清除羟基离子的IC50分别为0.060 5,0.254 4,0.4930 g·L~(-1),清除过氧化氢的IC_(500分别为0.010 4,0.156 0,0.224 0 g·L~(-1).结论:蒙古黄芪对过氧化氢、羟基离子的清除能力明显强于超氧阴离子.总黄酮是蒙古黄芪抗氧化活性的主要成分,总皂苷和总多糖的抗氧化能力较弱.总黄酮清除自由基的能力随纯度的增高而增高,相反,总皂苷、总多糖清除自由基的能力随纯度的增高而下降.     

蜜炙过程对黄芪(体外)抗氧化作用的影响

实验结果表明,蜜炙过程不明显影响黄芪对超氧阴离子自由基(O₂^-)清除作用,但生黄芪对羟自由基(·OH)和多形核白细胞(PMN)呼吸爆发产生的活性氧的清除作用优于制黄芪水提物。提示加热炮制可部分降低黄芪抗氧化作用的能力。     

蒙古黄芪的化学成分研究

目的研究蒙古黄芪Astragalus membranaceus var.mongholicus的化学成分。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、大孔树脂柱色谱、ODS柱色谱及制备高效液相等色谱技术对蒙古黄芪70%乙醇提取物进行分离纯化,根据理化数据和波谱数据鉴定化合物的结构。结果共分离得到16个化合物,分别鉴定为芒柄花素(1)、毛蕊异黄酮(2)、(6aR,11aR)-3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷(3)、染料木素(4)、芒柄花苷(5)、毛蕊异黄酮苷(6)、7,2′-二羟基-3′,4′-二甲氧基异黄烷-7-O-β-D-葡萄糖苷(7)、(6aR,11aR)-9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷(8)、红车轴草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(9)、黄芪甲苷(10)、异黄芪皂苷II(11)、黄芪皂苷VIII(12)、腺嘌呤(13)、鸟嘌呤核苷(14)、尿嘧啶核苷(15)、胡萝卜苷(16)。结论化合物13、14为首次从该属植物中分离得到。     

蒙古黄芪叶绿体全基因组特征解析及亲缘性分析

目的 以蒙古黄芪Astragalus membranaceus var. mongholicus为材料,解析其叶绿体基因组的序列特征,并进行系统发育分析。方法 利用Illumina NovaSeq测序平台对蒙古黄芪叶绿体全基因组进行测序,完成其组装、注释、特征分析,构建系统发育树。结果 蒙古黄芪叶绿体基因组全长为123 349 bp,GC含量为34.09%,由于缺失反向重复IR区,Circos图呈现出非典型四分体结构,属于IRLC群体。获得注释基因109个,其中蛋白编码基因76个,rRNA基因4个,tRNA基因29个。蒙古黄芪叶绿体基因组的密码子偏好性较弱,密码子偏向使用A碱基和U碱基。MISA检测出263个SSR位点,以A/T重复为主;叶绿体全基因组比较分析可知17种豆科植物叶绿体基因组的基因区间组成差异较小;但trnF-GAA～trnTUGU、trnfM-CUA～psbC、trnE～trnD、psbM～rpoB、ycf1和ycf2等编码区存在差异性;系统发育树显示,蒙古黄芪与胶黄芪A. gummifer聚为一类,与阿纳卡黄芪A. nakaianus、膜荚黄芪A. membranac...     

蒙古黄芪与膜荚黄芪种子形态特征及其鉴别方法的研究

目的为黄芪种子鉴定提供方法,为按中药材GAP原则制定相关标准操作过程(SOP)提供基础研究资料。方法采用肉眼直接观察、光学显微镜观察和电子显微镜进行扫描观察,比较蒙古黄芪和膜荚黄芪两种药用黄芪的种子形态特征和微观结构;通过萌发试验,比较二者的差异。结果通过肉眼和光学显微镜观察,两种黄芪种子的形态差异不明显,在电子显微镜下观察,两种黄芪种子的萌发孔形状、种脐和种皮的微观结构有明显差异;蒙古黄芪较膜荚黄芪种子硬实率高,萌发不整齐,萌发高峰滞后。结论在电子显微镜下能够对两种黄芪种子准确地做出鉴定,种脐、萌发孔、种皮的微观结构可作为鉴别两种黄芪种子的指标;种子硬实率和萌发动态规律可用于两种黄芪种子的辅助鉴别。     

蒙古黄芪种子带菌检测及种衣剂处理

目的 通过检测蒙古黄芪种子外部携带真菌孢子数和内部携带真菌种类,筛选适合蒙古黄芪种子的专用种衣剂。方法 采用离体平皿法检测不同地区采集的10批蒙古黄芪种子外部真菌孢子数和内部携带真菌种类,对所携带的真菌进行分离、纯化和鉴定;采用发芽盒及马铃薯葡萄糖琼脂培养基平皿培养基法检验4个常用种衣剂组合对蒙古黄芪种子的抑菌效果。结果 不同批次蒙古黄芪种子外部携带真菌孢子负荷量差异有统计学意义（P<0.05）,以甘肃省陇西县最多、山西省五寨县最少;蒙古黄芪种子内部主要携带青霉属、链格孢菌属等真菌。不同产地种子适用的种衣剂配方不同。满益佳种衣剂+锐胜种衣剂对甘肃省陇西县蒙古黄芪种子的抑菌效果较佳,但对甘肃省民乐县、青海省互助县、山西省五寨县种子的抑菌效果较差;利农种衣剂+锐胜种衣剂、顶苗新种衣剂+锐胜种衣剂对山西省应县、甘肃省民乐县、青海省互助县蒙古黄芪种子的抑菌效果较佳,但对其他产地种子抑菌效果较差。结论 不同产地黄芪种子适用种衣剂配方不同,研究结果为开发不同产地蒙古黄芪种子专用种衣剂提供了参考。     

海拔高度对蒙古黄芪主要药效成分积累及其关键酶基因表达量影响研究

目的研究不同海拔高度与蒙古黄芪Astragalus membranaceus var. mongholicus主要药效成分含量及其关键酶基因表达量之间的关系。方法采用HPLC法检测黄芪根中黄芪甲苷与毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量,采用实时荧光定量PCR法检测黄芪甲苷生物合成过程中关键酶基因乙酰辅酶A乙酰基转移酶[AACT,acetoacetyl-co zymeA (CoA)thiolase]、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶(HMG-CoAsynthase, HMGS)、 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶[3-hydroxy-3-methylglutarylcoenzymeA(HMG-Co A)reductase,HMGR]、异戊二烯焦磷酸异构酶(iso-pentenyldiphosphateisomerase,IDI)、法尼基焦磷酸合酶(farnesyldiphosphatesynthase,FPS)、鲨烯合酶(squalenesynthase,SS)、鲨烯环氧酶(squaleneepoxidase,SE)、环阿尔庭烷合酶(cycloartenolsynthase,CAS)基因的表达量。结果 4个样地中样地HQ-2(内蒙呼和浩特可可以力更镇)中黄芪甲苷含量、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量及总皂苷含量普遍高于其他样地;相关性分析表明,海拔高度对黄芪总皂苷合成的影响较大,IDI、SE和SS基因在黄芪总皂苷的合成过程中起主要作用,海拔高度有利于IDI、SE和SS基因的表达,海拔高度对黄芪皂苷合成途径中关键酶基因具有一定的调控作用。结论在处于海拔1730m左右的地区种植蒙古黄芪有利于其药效成分的积累。     

膜荚黄芪叶中三萜皂苷类成分的分离与鉴定

目的：研究膜荚黄芪叶中的三萜皂苷类成分。方法：采用硅胶、十八烷基硅烷键合硅胶(ODS)等色谱方法对膜荚黄芪叶的化学成分进行分离,通过一维核磁共振氢谱(¹D-NMR)和²D-NMR法分析鉴定化合物。结果：从膜荚黄芪叶提取物中共分离出15个化合物,分别鉴定为黄芪叶苷B(1)、黄芪叶苷L(2)、cyclounifolioside D(3)、3-O-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃木糖基]-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基-24-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基-16-乙酰基-3β,6α,16β,24(S),25-五羟基环菠萝蜜烷(4)、黄芪叶苷K(5)、黄芪叶苷A(6)、astraverrucinⅠ(7)、cycloaraloside A(8)、黄芪叶苷D (9)、astralanosaponin D (10)、大豆皂醇E (11)、3β,21α,24-三羟基-齐墩果-12-烯(12)、3β,22β,24,29-四羟基齐墩果-12-烯(13)、豌豆皂苷Ⅰ(14)、大豆皂醇B-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-...