定心方对大鼠缺氧及正常心肌细胞内钙、膜电位和线粒体膜电位的影响

目的：探讨定心方（DXR）抗心律失常的分子机理。方法：采用胰蛋白酶法分离培养心肌细胞，用不同荧光染料分别标记细胞，在激光共聚焦显微镜上测定DXR血清对心肌细胞内钙[Ca^2+]i、膜电位（MP）和线粒体膜电位（MMP）的变化。结果：缺氧使心肌细胞[Ca^2+]i和MMP升高，而使MP降低，DXR血清降低了正常和缺氧心肌细胞[Ca^2+]i,改善了缺氧引起的MP降低，使缺氧状态下MMP保持在基线水平。结论：DXR能通过抑制缺氧引起的[Ca^2+]i和MMP升高，及拮抗缺氧所致的MP降低，从而发挥保护心肌细胞，防治心律失常的作用。     

大枣中性多糖对小鼠腹腔巨噬细胞胞浆游离Ca^2＋浓度的影响

目的：探讨大枣中性多糖（JDP－N）对小鼠腹腔巨噬细胞（MΦ）胞浆游离Ca^2 浓度（[Ca^2 ]i)的影响。方法：采用激光扫描共聚焦显微镜技术（LSCM）测定[Ca^2 ]i。结果：JDP－N能引起MΦ内Ca^2 浓度[Ca^2 ]i明显升高,[Ca^2 ]i的升高是由胞外Ca^2 内流和通过IICP（IP3-induced calcium release)和CICR（calcium-induced calcium release)机制释放细胞内贮存Ca^2 引起。结论：[Ca^2 ]i升高是JDP－N活化MΦ的重要信号转导通路。     

补肾中药对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴、血淋巴细胞Ca2+和血清钙的影响

目的：研究细胞内Ca^2 信号在肾阳虚发病中的作用及补肾中药的调整作用。方法：用流式细胞仪及钙荧光探针Flou-3/AM对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴，血淋巴细胞胞内Ca^2 ([Ca^2 ]i)和血清钙进行测定。结果：肾阳虚大鼠下丘脑和血淋巴细胞[Ca^2 ]i及血清钙显著升高，补肾中药能够显著抑制下丘脑，血淋巴细胞内[Ca^2 ]i和血清钙的升高，结论：肾阳虚时下丘脑，血淋巴细胞[Ca^2 ]i和血清钙的显著升高，导致Ca^2 信号的异常，使下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱，免疫功能低下，出现肾阳虚的症状，补肾中药可能通过调整下丘脑，血淋巴细胞[Ca^2 ]i及血清钙而起作用。     

脉心康胶囊对载脂蛋白E基因敲除小鼠肝细胞内Ca2+及线粒体膜电位的影响

目的观察脉心康胶囊对载脂蛋白E基因敲除[ApoE（-/-）]小鼠肝细胞内Ca^2＋浓度及线粒体膜电位的影响.方法采用胶原酶消化法分离ApoE（-/-）小鼠肝细胞,体外原代培养8天后,加入10%含药大鼠血清的培养液,48 h后以Flou-3和Jc-1为探针,应用激光共聚焦显微镜测量肝细胞内Ca^2＋浓度和线粒体膜电位.结果脉心康可明显降低ApoE（-/-）小鼠肝细胞内Ca^2＋浓度,与生理盐水及洛代他汀组比较差异有显著性（P＜0.01）;同时,脉心康可明显提高ApoE（-/-）小鼠肝细胞线粒体膜电位（P＜0.01）,脉心康的这两种作用无明显的剂量效应关系.结论脉心康可降低ApoE（-/-）小鼠肝细胞内Ca^2＋浓度,提高线粒体膜电位,从而调节脂代谢、对抗高脂血症及动脉粥样硬化的发生和发展.     

半夏泻心汤药物血清对ICC线粒体膜电位与[Ca~(2+)]i的影响

目的:观察半夏泻心汤对小鼠Cajal间质细胞(Interstitial Cells of Cajal,ICC)线粒体膜电位与细胞内Ca2+浓度的影响。方法:制备大鼠含半夏泻心汤药物血清,体外分离培养ICC,用药物血清处理ICC,作用24h后,采用ICC特异的c-kit抗体进行免疫荧光测定,利用激光共聚焦显微扫描技术和特异性荧光探针标记线粒体膜电位及[Ca2+]i。结果:半夏泻心汤药物血清能提高ICC线粒体膜电位,降低ICC[Ca2+]i。结论:半夏泻心汤可能通过提高ICC线粒体膜电位,降低ICC[Ca2+]i以促进胃肠运动。     

西红花酸对过氧化氢诱发心肌细胞[Ca2+]i改变的作用

目的 观察西红花酸对H2O2诱发培养心肌细胞[Ca^2 ]i改变的效应，并探讨其机制。方法 应用Fluo-3／AM荧光标记技术和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测不同因素处理的单个培养心肌细胞[Ca^2 ]i。结果 H2O2呈浓度依赖性地使单个培养心肌细胞[Ca^2 ]i增加，并不受细胞外环境是否存在Ca^2 的影响，L-型Ca^2 通道阻滞剂维拉帕米也不能完全中止[Ca^2 ]i的增加；不同剂量的西红花酸则能减低H2O2引发的单个培养心肌细胞[Ca^2 ]i增高的幅度。结论 西红花酸能明显抑制H2O2诱发培养心肌细胞[Ca^2 ]i增加的作用，可能与调整胞内钙库Ca^2 的释放和摄取、Ca^2 内流等机制有关。     

氧应激对豚鼠心肌细胞线粒体膜电位的影响及益心康胶囊含药血清保护作用的研究

目的观察氧应激对豚鼠心肌细胞线粒体的影响，探讨抗心肌缺血中药复方——益心康胶囊(H303)含药血清对氧应激损伤的保护作用机制。方法利用激光共聚焦显微镜，观察羟自由基损伤体系(Fe2＋／H2O2)与豚鼠心肌细胞共同孵育30～60min后对心肌细胞线粒体膜电位的影响。结果豚鼠心肌细胞氧应激后，可致线粒体细胞色素氧化酶活性降低，以及荧光染料Rh123所显示的线粒体膜电位明显降低。H303含药血清可明显减轻上述损伤，表现为明显增强豚鼠心肌细胞线粒体氧化酶活性，使心肌细胞存活率增加；并具有保护心肌细胞膜电位的作用。结论氧应激可造成心肌线粒体膜电位降低。益心康胶囊含药血清可保护线粒体膜电位，从而发挥其膜稳定作用。     

海嘧啶对肿瘤细胞内[Ca2+]i的影响

目的：揭示海嘧啶诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法：采用激光扫描共聚焦技术观察海嘧啶对肿瘤细胞内[Ca^2 ]i的影响及[Ca^2 ]i变化时Ca^2 的来源,采用定磷法测定海嘧啶对肿瘤细胞膜钙泵活性的影响。结果：海嘧啶可显著升高肿瘤细胞内[Ca^2 ]i的浓度,[Ca^2 ]i升高时,Ca^2 同时来源于细胞外钙内流和细胞内钙释放。海嘧啶可显著降低肿瘤细胞膜钙泵活性。结论：海嘧啶通过升高肿瘤细胞内[Ca^2 ]i的浓度,从而启动肿瘤细胞凋亡机制,诱导肿瘤细胞凋亡;海嘧啶升高肿瘤细胞内的作用是通过开放肿瘤细胞膜钙通道,引起肿瘤细胞内钙库释放,降低肿瘤细胞钙泵活性3条途径达到的。     

红景天苷对缺氧 缺糖损伤的神经细胞线粒体膜电位和凋亡的影响

目的：观察红景天苷对神经细胞系SH—SY5Y细胞缺氧／缺糖损伤时线粒体膜电位和凋亡的影响。方法：四唑盐比色实验（MTT）检测线粒体活性，流式细胞术检测细胞凋亡百分率和线粒体膜电位。荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率。结果：缺氧／缺糖损伤2h可诱导SH—SY5Y细胞凋亡和坏死。分别为18．59％（P〈0．01）和4．94％（P〈0．01），形态学观察也发现SH—SY5Y细胞的染色质凝聚。核碎裂，凋亡小体产生，线粒体膜电位和活性分别降低29．17％（P〈0．01），38．80％（P〈0．01），随着缺氧／缺糖时间的延长，细胞凋亡的发生也越来越多，坏死的细胞也增多，线粒体膜电位和活性进一步下降；红景天苷能显著降低SH—SY5y细胞凋亡及坏死的百分率，提高线粒体膜电位和活性，其作用随剂量增加而作用增加。结论：红景天苷可抑制缺氧／缺糖损伤所致的线粒体膜电位和活性的降低，从而具有稳定线粒体膜电位的作用，抑制神经细胞凋亡的发生。     

β-细辛醚对缺血再灌注损伤心肌细胞线粒体膜电位的影响

目的观察石菖蒲有效成分β-细辛醚对缺血再灌注损伤(MIRI)心肌细胞线粒体膜电位(MMP)的影响。方法采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)建立心肌细胞MIRI模型,将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞分6组:正常对照组、MIRI模型组、β-细辛醚高、中、低剂量组(25,12.5,6.25μg/mL)、基质组。利用流式细胞术(FCM)检测MMP平均荧光强度。结果MIRI模型组心肌细胞MMP明显降低,与正常对照组比较有统计学意义(P<0.05);β-细辛醚能不同程度升高MMP,与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。结论β-细辛醚能有效抑制MIRI心肌细胞线粒体的损伤,稳定MMP。     

养阴生肌膜主要药效学实验研究

目的:对养阴生肌膜进行功能主治相关的药效学研究,为临床安全使用提供依据。方法:用大鼠、小鼠作动物实验观察养阴生肌膜的药效学作用。结果:养阴生肌膜能明显缩短醋酸所致大鼠口腔溃疡的愈合时间,显著减轻2%复合巴豆油所致的小鼠耳肿胀,减轻琼脂所致的大鼠肉芽肿重量,显著延长小鼠热板实验的潜伏期。结论:养阴生肌膜可促进溃疡面愈合、提高机体的痛阈。     

养阴生胍膜治疗复发性口腔溃疡102例

目的：观察养阴生肌膜治疗复发性口腔溃疡的,临床疗效。方法：将307例患者随机分为3组。养阴生肌膜组给予养阴生肌膜口腔患处贴敷,3次／d。养阴生肌散给予养阴生肌散组口腔患处贴敷,3次／d。奥硝唑膜组给予奥硝唑膜口腔患处贴敷,3次／d。3组均以用药10天为1个疗程,治疗5个疗程后进行病例回访,随访时间1．5年。结果：临床疗效养阴生肌膜组、养阴生肌散组与奥硝唑膜组相比差异显著（P〈0．05）。养阴生肌膜组与养阴生肌散组相比,无显著差异（P〉0．05）。疼痛消失时间、溃疡愈合时间、复发间隔时间养阴生肌膜组、养阴生肌散组与奥硝唑膜组相比差异显著（P〈0．05）;养阴生肌膜组与养阴生肌散组相比,无显著差异（P〉0．05）。结论：养阴生肌膜治疗复发性口腔溃疡临床疗效显著。     

中西医结合治疗人工晶体前膜14例

外伤性白内障、伴糖尿病的白内障及葡萄膜炎并发的白内障 ,术后因炎症反应较重而在瞳孔区形成纤维膜 ,如不及时处理 ,易形成瞳孔膜闭 ,继发青光眼。自 1 992年 7月 1 998年 7月 ,我科施行白内障囊外摘除联合人工晶体植入术 45 1例 ,其中 2 8例术后形成前膜 ,笔者以中西医结合治疗 ,并设单纯西药组进行对比观察 ,现报道如下。1　临床资料观察病例共 2 8例 (2 9只眼 ) ,其中男 1 3例 (1 3只眼 ) ,女1 5例 (1 6只眼 ) ;年龄最小者 1 7岁 ,最大者 6 8岁 ,平均 5 4岁。其中糖尿病性白内障 1 8例 (1 9只眼 ) ,外伤性白内障 (角膜穿孔伤 ,晶体前囊…     

芪丹通脉片含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的观察芪丹通脉片对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管新生的影响。方法制备CAM模型,用芪丹通脉片含药血清作用于CAM,以碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及生理盐水分别作为阳性对照和阴性对照观察血管生成的情况。结果芪丹通脉片具有明显的促进CAM血管新生作用,但效果弱于bFGF。结论芪丹通脉片能够促进CAM血管新生。     

糖尿病血瘀证与血浆α—颗粒膜蛋白和内皮素关系的研究

目的探讨Ⅱ型糖尿病血瘀证与血小板活化和血管内皮细胞之间的关系。方法采用酶联免疫吸附法以及放射免疫法，测定７４例Ⅱ型糖尿病患者血浆α－颗粒膜蛋白（ＧＭＰ－１４０）和内皮素（ＥＴ）的浓度，并与２０名健康者作对照比较。结果Ⅱ型糖尿病患者血浆中ＧＭＰ—１４０与ＥＴ的浓度明显增高（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１）；糖尿病血瘀证这两项指标的变化比无血瘀证者更为明显（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１）。结论Ⅱ型糖尿病患者血小板活化程度增强和内皮细胞功能受损。ＧＭＰ—１４０和ＥＴ与糖尿病血瘀证的发生有密切联系，这两项指标增高对判断血瘀证有一定的意义。     

紫草多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜流动性与带3蛋白的影响

目的:观察紫草多糖对S180荷瘤小鼠瘤重、红细胞膜流动性和带3蛋白含量的影响。方法:采用荧光探针DPH标记法测定红细胞膜的荧光偏振度P,计算微黏度(η)与膜脂流动性(LFU);电泳法测定红细胞膜带3蛋白含量。结果:紫草多糖中剂量组抑瘤率达43.05%;且各剂量组对红细胞膜膜脂流动性、带3蛋白均有影响,以中剂量组效果最佳,与对照组相比P<0.01,P<0.05。结论:紫草多糖通过影响荷瘤小鼠红细胞膜流动性和带3蛋白恢复红细胞的正常功能发挥其抗肿瘤作用。     

痛刺激人体穴位和非穴位对皮层诱发电位和脊髓诱发电位的影响

对36例自愿受试者给予痛刺激穴位和非穴位,同时记录脊髓和皮层体感诱发电位,观察到痛刺激内关,合谷穴以及附近的非穴位点,记录到的脊髓诱发电位由 P-N-P 波组成,皮层诱发电位通常由 P_1、N_1、P_2、N_2、P_3、N_3P_4和 N_4等波组成复合波。该复合波的早成分由 P1、N1、P2组成,晚成分由 N2、P2、N3、P4和 N4等波组成,以上各波均有一定的潜伏期和振幅,痛刺激内关、合谷所记录的晚成分各波潜伏期均显著短于痛刺激内关、合谷附近的非穴位所记录的晚成分各波的潜伏期,而痛刺激穴位时,晚成分各波的振幅则显著大于刺激非穴位各波的振幅。这表明,痛刺激穴位所记录的传入信息是一种特征性的传入信息。对痛刺激穴位和非穴位所记录的颈脊髓诱发电位、皮层诱发电位各成分的分析,提示皮层可能是痛刺激穴位传入信息进行复杂整合过程的重要部位。     

山药潜在功能的考察与分析

通过对历代本草、含山药古方及2015版《中华人民共和国药典》一部中山药功用的比较,确认历代本草所记载的基本功用已被2015版《中华人民共和国药典》收录。但含山药古方治疗疼痛、神志不安、中风、疮疡肿毒、出血、视物不清、虚寒等病症的功能未被收录,经现代药效学研究和临床应用证明,山药具有止痛、平肝息风、解毒消肿、止血、明目、温里散寒的潜在功能。     

基于网络药理学的藤茶黄酮类成分体内潜在作用靶点及可能干预疾病研究

目的:基于网络药理学探讨藤茶黄酮类成分体内的潜在作用靶点及可能干预的疾病。方法:通过文献检索建立藤茶化学成分数据库,运用吸收、分布、代谢、排泄(ADME)筛选藤茶中黄酮类成分;采用PubChem数据库收集藤茶黄酮类成分的潜在作用靶点;采用Metascape数据库对疾病类型、生物过程、通路进行富集分析;运用Cyoscape 3.6.1软件构建“成分-靶点-疾病”网络,预测藤茶黄酮类成分可能干预的疾病。结果:建立藤茶化学成分数据库,收集到136种化合物,运用ADME最终筛选到8个黄酮类成分,对应430个潜在作用靶点。对藤茶黄酮类成分体内潜在的作用靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。结果显示,其潜在作用靶点涉及调节蛋白激酶活性、氧化应激、炎症等信号通路等。“成分-靶点”“靶点-疾病”等网络图显示,肿瘤坏死因子(TNF)、前列腺素内环氧化物合成酶2(PTGS2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、雌激素受体1(ESR1)、蛋白激酶B1(AKT1)、肿瘤蛋白P53(TP53)为藤茶黄酮类成分发挥作用的主要靶点蛋白。结论:藤茶黄酮类成分协同发挥药理作用,体现出藤茶“多成分-多靶点”的特点,可能对肿瘤、神经精神类疾病、肝损伤、代谢类疾病有干预作用。同时发现藤茶对抑郁症、阿尔茨海默病等神经精神类疾病的作用研究较少,值得深入研究与开发。     

经穴体感诱发电位与听皮层声诱发电位的相互作用

以穴位电针作为躯体感觉刺激，观察了大脑皮层经穴体感诱发电位与声诱发电位的相互作用。在豚鼠听皮层可记录到电刺激穴位的体感诱发电位以及同时给予穴位电刺激和短声刺激引起的听觉-体感复合诱发电位。听觉-体感复合诱发电位不是独立的听皮层诱发电位和穴位体感诱发电位在听皮层相加的结果，说明这种多感觉信息处理来源于皮层下水平。