当归补血汤的不同配比对黄芪甲苷、阿魏酸及芒柄花素含量的影响

目的:观察当归补血汤中当归与黄芪的不同配比对黄芪甲苷、阿魏酸及芒柄花素含量的影响。方法:将当归补血汤进行5种当归与黄芪的不同配比(1∶1、1∶2、1∶5、1∶7、1∶10),通过高效液相色谱法对黄芪甲苷、阿魏酸以及芒柄花素分别进行线性关系、精密度、重复性及回收率检测。结果:对照样品线性关系良好,精密度、重复性及回收率均满足标准;随着黄芪配比上升,黄芪甲苷、阿魏酸、芒柄花素含量上升,至1∶5(当归∶黄芪)时达最高值,后逐渐降低。结论:当当归补血汤内当归与黄芪配比为1∶5时,黄芪甲苷、阿魏酸及芒柄花素的含量最高,可保证配方药效充分发挥,需引起临床重视。     

HPLC法测定不同主产地黄芪饮片的4种黄酮的含量

目的采用HPLC法同时测定不同主产地黄芪饮片中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的含量。方法色谱柱固定相为Inertsil ODS-SP C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-水(含0.2%甲酸),梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,紫外检测波长260 nm,柱温为40℃。结果毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素在0.00569~0.0569、0.00448~0.0448、0.00257~0.0257、0.00265~0.0265mg/m L时与色谱峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为98.72%、99.32%、100.03%、99.78%,RSD为1.06%、2.32%、2.86%、1.08%。结论该方法准确灵敏,可作为评价不同产地黄芪饮片的质量控制方法。     

UPLC同时测定4种酶定向炮制黄芪中的6种黄酮类成分含量

目的:建立黄芪中6种黄酮类成分的含量测定方法,研究4种酶(复合酶、植物纤维素酶、蜗牛酶及β-葡萄糖苷酶)定向炮制对黄芪中黄酮苷类成分及其苷元含量的影响。方法:采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液梯度洗脱,检测波长260 nm,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,进样量2μL。结果:6种成分毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、黄芪紫檀烷苷、美迪紫檀素的分离度良好,在各自线性范围内线性关系良好(R2≥0.9985),精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<5.0%;平均加样回收率97.62%~101.13%,RSD 1.4%~2.7%。在0.5 g·L^-1酶溶液水平,毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、黄芪紫檀烷苷、美迪紫檀素在复合酶制黄芪中的质量分数分别为0.0820,0.3359,0.0559,0.1049,0.0150,0.0097 mg·g^-1,在纤维素酶制黄芪中的质量分数分别为0.1057,0.3642,0.0702,0.1174,0.0208,0.0125 mg·g^-1,在蜗牛酶制黄芪中的质量分数分别为0.0314,0.5100,0.0435,0.2109,0.0130,0.0130 mg·g^-1,在β-葡萄糖苷酶制黄芪中的质量分数分别为0.0853,0.3124,0.0615,0.1108,0.0058,0.0096 mg·g^-1。结论:黄芪经4种酶炮制后,除黄芪紫檀烷苷外,毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷的含量均降低,但这3种黄酮苷类成分所对应苷元的含量均显著增加。该方法操作简便、准确、重复性好,适用于黄芪中6种黄酮类成分的含量测定,可为黄芪的酶定向炮制研究提供参考。     

HPLC-DAD-ELSD法同时测定不同厂家前列癃闭通片中3种成分的含量

目的:建立HPLC-DAD-ELSD法同时测定前列癃闭通片中3种成分(芒柄花素、黄芪甲苷和齐墩果酸)的含量,比较8个不同生产厂家的18批前列癃闭通片中3种成分的含量差异。方法:采用SHISEIDO-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱;DAD检测器检测波长为248 nm;蒸发光散射检测器(ELSD);漂移管温度:60℃;载气流速:3.5 L/min;流速:1.0 m L/min;柱温:35℃。结果:芒柄花素、黄芪甲苷和齐墩果酸进样量分别在0.03908~0.3908μg、1.11840~5.5920μg、0.40448~2.0224μg范围内线性关系良好,加样回收率分别为101.24%、101.51%、102.56%;RSD分别为1.19%、1.51%、2.01%。沈阳神龙、吉林百琦、武汉健民各成分含量较高,江苏颐海黄芪甲苷含量较低,吉林吉尔吉和药圣堂(湖南)齐墩果酸含量较低。结论:不同生产企业由于原药材产地、采收季节、生产工艺等的不同,导致了各成分含量差异较大。     

黄芪药材的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱研究

目的:采用高效液相色谱法-二极管阵列检测器-蒸发光检测器( HPLC-DAD-ELSD)联用技术对黄芪药材进行指纹图谱研究.方法:采用Waters 2695-SpursilTMC18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm),流动相乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温25℃,进样量20 μL,检测波长254 nm.蒸发光散射检测器的条件为:漂移管温度112.8℃,载气流速3.2L·min-1.结果:10批药材HPLC-DAD指纹图谱找到14个共有峰,鉴别了毛蕊异黄酮和芒柄花素;HPLC-ELSD指纹图谱找到9个共有峰,鉴别了毛蕊异黄酮苷、黄芪甲苷、黄芪皂苷黏、黄芪皂苷Ⅱ.结论:方法准确可靠,为全面控制黄芪药材质量提供了一种方法.     

丹溪玉屏风颗粒中黄芪甲苷的含量测定

目的:建立中成药丹溪玉屏风颗粒的含量测定方法。方法:应用HPLC-ELSD法,测定丹溪玉屏风颗粒中黄芪甲苷的含量。结果:以峰面积的自然对数为纵坐标,进样量的自然对数为横坐标作标准曲线,结果显示黄芪甲苷在0.4545～3.030μg峰面积的对数与黄芪甲苷进样量的对数呈良好线性关系。3批丹溪玉屏风颗粒黄芪甲苷含量分别为0.057,0.081,0.071mg.g-1。结论:建立的方法简便、准确快速、重现性好,可有效控制丹溪玉屏风颗粒的质量。     

HPLC-ELSD测定不同主产地黄芪饮片中黄芪甲苷的含量

目的测定不同批次,不同产地的黄芪饮片中黄芪甲苷的含量。方法收集8个批次,4个主产地(甘肃、山西、内蒙古、四川)的黄芪饮片;采用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷含量。结果黄芪甲苷在0.03696~0.924 mg·m L-1时,进样量的对数与峰面积的对数呈良好的线性关系,平均回收率为98.63%,RSD为1.76%。结论所建立的方法可有效评价黄芪饮片的质量;测定结果表明,不同主产地黄芪饮片黄芪甲苷含量差异较大,临床应用时应注意区分。     

HPLC法测定泰痹颗粒Ⅱ号中虎杖苷、葛根素、黄芪甲苷含量

目的建立泰痹颗粒Ⅱ号中虎杖苷、葛根素、黄芪甲苷的高效液相色谱测定方法。方法虎杖苷、葛根素测定方法:色谱柱为Alltima~(TM)C_(18)(4.6 mm×150 mm,5μm);柱温为30℃;流动相为乙腈-水(18∶82);流速为1 mL·min~(-1);检测波长为306 nm。黄芪甲苷测定方法:色谱柱为Lichrospher 5HE C_(18)(4.6 mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-水(35∶65);流速为:1.0 mL·min~(-1);蒸发光检测器:漂移管温度为80℃;气体流量为2.0 L·min~(-1)。结果虎杖苷、葛根素分别在10.42~62.52μg·mL~(-1)、5.04~30.24μg·mL~(-1)浓度范围内与峰面积呈良好线性关系;平均加样回收率(n=6)分别为98.81%、98.33%;RSD分别为1.30%、1.46%;黄芪甲苷在进样量0.524~3.144μg范围内线性关系好,平均加样回收率为98.61%,RSD为0.59%。结论该方法灵敏、结果准确、重现性好、简便,可用于泰痹颗粒Ⅱ号中3种成分的含量测定,为泰痹颗粒Ⅱ号的质量评价提供参考。     

甘肃一年生、二年生红芪和黄芪HPLC-ELSD指纹图谱比较

目的:建立甘肃一年生、二年生红芪和黄芪指纹图谱,对比研究红芪和黄芪指纹图谱相似度。方法:采用HPLCELSD,选用Agilent ZROBAX-SBC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,柱温35℃,进样体积15μL,Alltech ELSD 2000蒸发光检测器,漂移管温度110℃,载气流速3.0 L·min-1,分别建立一年生和二年生红芪各24批以及一年生和二年生黄芪各24批药材指纹图谱。结果:一年生、二年生红芪药材共有峰分别为8,7个,相似度分别为0.923,0.825,相同色谱峰6个,分别为毛蕊异黄酮苷,芒柄花苷,大豆皂苷Ⅰ,芒柄花素,异黄芪皂苷Ⅱ,黄芪皂苷Ⅰ;一年生、二年生黄芪药材共有峰分别为25,17个,相似度分别为0.980,0.997,相同色谱峰7个,分别为毛蕊异黄酮苷,芒柄花苷,毛蕊异黄酮,黄芪甲苷,黄芪皂苷Ⅲ,异黄芪皂苷Ⅱ,黄芪皂苷Ⅰ;一年生红芪与黄芪相似度为0.032,二年生红芪与黄芪相似度为0.023,共有色谱峰均为4个,分别为毛蕊异黄酮苷,芒柄花苷,异黄芪皂苷Ⅱ,黄芪皂苷Ⅰ。结论:在所确定的色谱条件下,一年生和二年生红芪和黄芪药材指纹图谱差异明显,可有效区分两种药材,二者共有成分少,相似度低,故红芪和黄芪不宜替代使用。     

黄芪不同炮制品中黄酮类成分的含量比较

目的:比较黄芪经不同方法炮制前后黄酮类成分含量变化.方法:采用Kromasil C18柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm);以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1;检测波长为260 nm,柱温35℃.结果:在上述条件下,毛蕊异黄酮-7-0-β-D-葡萄糖苷、芒柄花素-7-0-β-D-葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的质量浓度分别在2.120 ～ 42.40,1.360～ 27.20,1.060 ～21.20,0.360 0～7.200 mg·L-1与色谱峰面积呈良好的线性关系,低、中、高浓度的平均加样回收率(n=3)均在95.1 ～98.5％,RSD均＜3.0％.酒制黄芪中毛蕊异黄酮的含量较黄芪生品有所增加,蜜制黄芪中4神黄酮成分及总黄酮含量均较生品组有所降低.米制、盐制黄芪中4种黄酮成分和总黄酮含量略显降低,但未见统计学差异.结论:黄芪经酒制后毛蕊异黄酮含量增加,蜜制后黄酮类成分含量降低,盐制、米制未对黄芪的黄酮类成分产生显著影响.     

黄芪薄层鉴别方法的改进

目的:改进黄芪的薄层鉴别方法。方法:以黄芪甲苷、芒柄花素、芒柄花苷和黄芪对照药材为对照,对黄芪药材进行了薄层鉴别条件的研究,改进了原标准的供试品前处理方法和展开系统。结果:薄层色谱斑点清晰,黄芪甲苷、芒柄花素和芒柄花苷的分离度好,Rf值适当。结论:所建立的黄芪薄层鉴别方法可以同时鉴别黄芪中的黄芪甲苷、芒柄花素和芒柄花苷,操作简单、耐用性佳,可替代原标准用于黄芪的鉴别。     

HPLC-ELSD同时测定益心血脂康胶囊中4种皂苷类活性成分

目的:建立HPLC-ELSD同时测定益心血脂康胶囊中人参皂苷Rg1,Rb1,Rd和黄芪甲苷含量的方法。方法:采用SHIMADZU C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-水梯度洗脱,柱温35℃,流速1 m L·min~(-1),蒸发光检测器(ELSD)漂移管温度60℃,雾化室温度30℃,载气压强23.0 psi。结果:益心血脂康胶囊中活性成分人参皂苷Rg1,Rb1,Rd和黄芪甲苷的分离度良好,各成分质量浓度与峰面积在测定范围内呈良好的对数线性关系(r≥0.999 1),平均回收率分别为99.60%(RSD 1.6%),99.89%(RSD 2.8%),98.13%(RSD 2.7%),98.36%(RSD 2.5%)。结论:该方法简便易行、准确度高,重复性好,可作为益心血脂康胶囊的质量控制方法。     

HPLC 测定广西牛大力药材中芒柄花素和高丽槐素的含量

目的:建立牛大力药材中芒柄花素和高丽槐素的含量测定方法.方法:采用HPLC测定药材中芒柄花素和高丽槐素含量,色谱柱C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈-0.1%冰醋酸溶液(38∶62),检测波长248,310 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃.结果:芒柄花素进样量在0.002 3~0.060 0 μg与峰面积值呈现良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率100.0%,RSD为2.0%(n=6);高丽槐素进样量在0.039 1~1.015 6 μg与峰面积值呈现良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为100.6%,RSD为0.7%(n=6).结论:该方法可用于牛大力药材中芒柄花素和高丽槐素的含量测定.     

HPLC梯度洗脱法同时测定阿胶益寿晶中的二苯乙烯苷、大黄素甲醚、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素

目的:建立梯度洗脱法同时测定阿胶益寿晶中二苯乙烯苷、大黄素甲醚、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素含量的高效液相色谱法。方法:采用Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相A乙腈-甲醇(9∶1),流动相B 0.1%磷酸溶液梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 m L·min-1,进样量20μL;二苯乙烯苷和大黄素甲醚检测波长为280nm,毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素检测波长为254 nm。结果:二苯乙烯苷、大黄素甲醚、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素分别在5.23~104.60 mg·L-1(r=0.999 5),5.05~101.00 mg·L-1(r=0.999 1),5.92~118.40 mg·L-1(r=0.999 3),4.74~94.80 mg·L-1(r=0.999 8),4.85~97.00 mg·L-1(r=0.999 7),6.91~138.20 mg·L-1(r=0.999 7)线性关系良好;平均加样回收率(n=6)和RSD分别为98.52%(1.6%),97.95%(1.4%),99.47%(1.6%),96.99%(1.0%),99.24%(1.1%),98.13%(1.4%)。结论:建立的HPLC梯度洗脱法同时测定阿胶益寿晶中二苯乙烯苷、大黄素甲醚、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素含量。方法准确、灵敏度高、重复性好,为评价阿胶益寿晶质量控制提供可靠方法。     

基于UPLC/Q-TOF-MS技术的大鼠尿液中蜜炙黄芪三种主要活性成分含量测定方法的建立

目的建立大鼠尿液中蜜炙黄芪三种活性成分毛蕊异黄酮、芒柄花素和黄芪甲苷的含量测定方法。方法采用Phenomenex kinetex柱为色谱柱,0.2%乙酸水-乙腈为流动相梯度洗脱,柱温2 5℃,流速0.3 ml/min,在负离子模式下采用UPLC/Q-TOF-MS技术对大鼠尿液中毛蕊异黄酮、芒柄花素和黄芪甲苷的含量进行测定。结果毛蕊异黄酮、芒柄花素和黄芪甲苷分别在6.42 min,10.48 min和11.14 min左右出峰,表明三个物质在色谱柱上分离度良好;其分子离子峰分别为m/z 283.06[M-H]~-,m/z 267.06[M-H]~-和m/z 843.47[M+CH_3COO]~-,选择性强。毛蕊异黄酮、芒柄花素和黄芪甲苷分别在1.55~250μg/ml,0.234~50.0μg/ml和0.100~12.8μg/ml范围内线性良好;在不同浓度内,此法的日内、日间精密度和准确度均小于±15%,相对回收率均大于80%,基质效应的RSD值均小于15%。结论 UPLC/QTOF-MS技术可用于蜜炙黄芪的体内含量测定,且符合生物样品分析要求,灵敏度高,重复性好,是一种快速可靠的新方法。     

高效液相色谱法测定黄芪精口服液中芒柄花素的含量

目的:建立黄芪精口服液中芒柄花素的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(rom asil 5-C18,250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(60:40);流速:1m l.m in-1;检测波长:249 nm。结果:芒柄花素在0.02~0.36μg范围内,其进样量与峰面积呈良好线性关系。芒柄花素的平均回收率为99.14%,RSD=0.87%。结论:该方法准确,重复性好,可对该制剂进行含量测定及质量控制。     

不同产地黄芪药材和饮片的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱分析

目的:建立黄芪药材和饮片的高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器联用法(HPLC-DAD-ELSD)指纹图谱分析方法。方法:采用Agilent Zorbax SB C_(18)(150 mm×4.6 mm, 3.5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.5%甲酸,梯度洗脱,流速1.0 mL·min~(-1),柱温35℃,检测波长254 nm,载气气压241 kPa,漂移管温度90℃,增益50,并使用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004A版)软件计算40批不同产地黄芪药材和饮片的相似度。结果:建立了黄芪药材和饮片的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱方法,确立了HPLC-DAD指纹图谱的12个共有峰,HPLC-ELSD指纹图谱的11个共有峰,指认了其中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷等6个峰。除少数几批外,黄芪药材和饮片相似度均大于0.9。结论:该方法前处理方法简单,重复性好,可用于评价和控制不同产地的黄芪药材和饮片质量。     

RP-HPLC法测定黄芪及玉屏风颗粒中4种异黄酮类成分

目的建立定量测定黄芪饮片及玉屏风颗粒中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素的方法。方法采用RP-HPLC法,Phenomenex Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱;体积流量1 mL/min;检测波长251 nm。结果毛蕊异黄酮苷在0.132～0.792μg、芒柄花苷在0.066～0.396μg、毛蕊异黄酮在0.07～0.42μg、芒柄花素在0.034～0.204μg范围内分别与峰面积积分值呈良好的线性关系;黄芪饮片各成分平均回收率分别为100.7%(RSD为2.4%)、100.0%(RSD为2.0%)、99.7%(RSD为2.0%)和101.0%(RSD为2.0%)。玉屏风颗粒中4个成分的平均回收率分别为99.8%(RSD为2.2%)、101.2%(RSD为2.1%)、100.6%(RSD为2.1%)和98.4%(RSD为1.9%)。结论黄芪与白术和防风混合煎煮提取,可能提高了黄芪中毛蕊异黄酮苷和芒柄花苷两个成分的溶出率。     

丹溪玉屏风颗粒中黄芪甲苷的含量测定

目的：建立中成药丹溪玉屏风颗粒的含量测定方法。方法：应用HPLC-ELSD法,测定丹溪玉屏风颗粒中黄芪甲苷的含量。结果：以峰面积的自然对数为纵坐标,进样量的自然对数为横坐标作标准曲线,结果显示黄芪甲苷在0．4545—3．030μg峰面积的对数与黄芪甲苷进样量的对数呈良好线性关系。3批丹溪玉屏风颗粒黄芪甲苷含量分别为0．057,0．081,0．071mg.g^-1。结论：建立的方法简便、准确快速、重现性好,可有效控制丹溪玉屏风颗粒的质量。     

黄芪饮片质量评价和分级标准探讨

目的:通过分析黄芪饮片外观指标与内在成分关系,得出黄芪饮片质量评价和制订其等级标准的参考依据。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C_(18)色谱柱,流动相为乙腈-水(32∶68),蒸发光散射检测器检测,氮气流速为2.7 L·min~(-1);漂移管温度为105℃;增益为1,测定黄芪甲苷成分含量。采用Waters XBridge C_(18)色谱柱,流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液(梯度洗脱),二极管阵列检测器检测,检测波长为260 nm,测定4种黄酮类成分含量。利用SPSS分析软件对饮片外观指标和各有效成分内在指标进行数理统计分析。结果:黄芪饮片外观指标与黄芪甲苷含量呈显著的负相关,即黄芪饮片直径和质量越大,黄芪甲苷含量越小;与毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷和芒柄花素4种黄酮类成分含量不呈相关性,但各黄酮类成分之间呈显著的、不同的正负相关性。结论:本实验结果为评价黄芪饮片质量和制订其等级标准提供参考。