代谢指纹谱用于丹参活性成分的分析与筛选

建立了以SD大鼠肝匀浆作为体外代谢方法,并结合HPLC-DAD-MS分析手段作为代谢指纹谱平台,在此基础上,对单味中药丹参进行体外代谢,采用HPLC-DAD-MS辅以MALDI-TOF-MS 对代谢前后的指纹语差异与相似性进行比较,结合抑菌、血凝体外药理实验测定丹参提取物及其代谢物、3种主要成分的活性.抑制大肠杆菌活性和血凝活性药理实验结果表明,丹参代谢物活性均高于其提取物.通过考察隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮ⅡA的抑菌活性与血凝活性,并结合体外肝匀浆代谢实验,解释了其中的原因:丹参抑制大肠杆菌活性增高是因为隐丹参酮代谢转化为抑制率高的丹参酮ⅡA引起的;丹参提取物血凝活性在代谢后升高的原因是由于隐丹参酮谢转化为血凝活性更高的丹参酮ⅡA引起的.     

丹参的~(13)C-NMR指纹图谱研究

目的:利用傅立叶变换核磁共振波谱仪测定不同产地丹参提取物的13C-NMR图谱,建立鉴别丹参药材真伪优劣的核磁共振指纹图谱分析。方法:对丹参提取物的13C-NMR指纹图谱进行解析;并与其活性成分丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮和二氢丹参酮进行13C-NMR谱图的比较与指认;获得了两种丹参伪品13C-NMR谱图,并与丹参特征提取物谱图进行相似度分析。结果:相似度分析处理结果表明,利用NMR指纹图谱能快速确定丹参药材的真伪优劣。结论:该方法操作简单、快捷、可靠,可以作为丹参药材真伪鉴别的依据。     

丹参酮对肥大细胞脱颗粒的抑制作用

筛选了30种植物提取物的抗过敏作用,观察其对48h时被动皮肤过敏反应、介质诱导的血管渗透性改变以及大鼠肥大细胞组胺释放等的影响,发现中药丹参的提取物具有抗过敏活性。以活性引导分馏法分离丹参的甲醇提取物,得到4种具有体外抗过敏作用的活性物质,丹参酮-Ⅰ、15,16-二氢丹参酮-Ⅰ、丹参酮-Ⅱ A、隐丹参酮。其中15,16-二氢丹参酮-1与隐丹参酮可明显抑制体外培养的RBL-2H3细胞(一种培养的肥大细胞系)的β-氨基己糖苷酶     

指纹图谱结合一测多评在中成药丹参片质量控制中的应用

目的:采用指纹图谱结合一测多评法(QAMS)评价中成药丹参片的质量。方法:以丹参酮ⅡA为参照物建立丹参片醌类成分的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱。同时,测定丹参酮ⅡA与隐丹参酮、丹参酮Ⅰ的相对校正因子,以QAMS测定丹参片中丹参酮Ⅱ_A、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ的含量。结果:建立了丹参片HPLC指纹图谱,并指认了全部5个共有峰,12批丹参片的相似度均大于0.99;QAMS测定了丹参片中3个醌类成分的含量,样品间存在一定波动性。结论:指纹图谱与QAMS结合的质量控制模式准确可靠,可为全面合理评价丹参片的质量提供参考。     

丹参酮Ⅱ_A磺酸钠的促纤溶作用(摘要)

从丹参中提取的几种纯品成分的实验结果显示,丹参酮Ⅱ_A 磺酸钠有一定程度的促纤维蛋白溶解的活性。经初步观察。其作用与纤溶酶原激活为纤溶酶有关。方法按 T.Astrup 法制成含有纤溶酶原的纤维蛋白平皿和去纤溶酶原的纤维蛋白平皿。一、将丹参酸、隐丹参酮、丹参酮Ⅱ_A、Ⅱ_B、Ⅱ_A磺酸钠、原儿茶醛和丹参素等几种纯品成分各用其最适溶媒溶解后,分别点样(10μl)于两种平皿上,37℃     

丹参粉末衍射鉴定与丹参酮ⅡA成分定量分析方法研究

目的:建立丹参中药材粉末衍射鉴定分析技术与丹参酮Ⅱ_A成分的衍射定量分析方法.方法:采用粉末X射线衍射技术获取9个不同产地或来源的丹参样品及1个丹参对照品的粉末X射线衍射Fourier指纹图谱,通过对丹参酮ⅡA对照品的单一成分的衍射Fourier图谱获取其特征标记峰;通过高效液相色谱技术定量检测10个样品中的丹参酮Ⅱ_A成分含量值;分析计算丹参中药材粉末X射线衍射Fourier图谱中的衍射特征峰强度与丹参酮ⅡA含量关系.结果:粉末X射线衍射不仅可以给出反映中药材粉末的Fourier指纹图谱,并可实现对中药材中千分之一以上化学成分的定量含量检测.结论:利用粉末x射线衍射Fourier分析方法,可用于丹参中药材的粉末X射线衍射鉴定及丹参酮Ⅱ_A的定量成分检测.     

丹参抗肿瘤活性成分研究新进展

丹参中含有多种抗肿瘤活性成分,在水溶性成分中主要有丹酚酸A,丹酚酸B,salvinal等,在脂溶性成分中主要有丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_A、二氢丹参酮Ⅰ、次丹参酮、隐丹参酮、凤眼草内酯、新丹参内酯、含氮化合物等.这些抗肿瘤活性成分在肿瘤发生发展及转移的不同阶段,起着重要作用.丹参中新的抗肿瘤活性成分的发现,对丹参的抗肿瘤临床应用具有推动作用.     

赤霉素及其合成抑制剂对丹参酮类活性物质含量的影响

目的研究赤霉素及其合成抑制剂对丹参毛状根中丹参酮类活性物质含量的影响.方法分别将不同浓度的赤霉素和多效唑加入到丹参毛状根的液体培养基中,培养25 d后对毛状根中的隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮Ⅱ.含量进行测定.结果赤霉素可以促进丹参毛状根中丹参酮类活性物质的积累,而多效唑则抑制了它们的积累.结论推测多效唑是丹参毛状根中丹参酮ⅡA等化合物的合成抑制剂,且赤霉素可以作为一种有效的丹参酮类活性成分的诱导子.     

UPLC-QE/MS法分析丹参酒炙前后5种质变化合物

目的通过UPLC-QE/MS法分析丹参Salvia miltiorrhiza Bge.酒炙前后5种质变化合物(迷迭香酸、丹酚酸B、隐丹参酮、二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_A)的转化机制。方法采用已知对照品模拟炮制技术,制备丹参酒炙前后5种质变化合物的模拟炮制品,其80%甲醇溶液的分析采用Halo C_(18)柱(100 mm×2.1 mm,2.7μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;柱温45℃;体积流量0.25 mL/min;检测波长280 nm。结果丹参中5种主要成分发生了质变,丹酚酸B模拟炮制品中检出了丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸C;隐丹参酮模拟炮制品中检出了丹参酮Ⅱ_A;二氢丹参酮Ⅰ模拟炮制品中检出了极少的丹参酮Ⅰ;丹参酮Ⅱ_A模拟炮制品中检出了二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅰ;迷迭香酸模拟炮制品中检出了丹参素、咖啡酸、阿魏酸。结论丹参酒炙后主要酚酸类成分和丹参酮类成分均发生了质变。     

丹参不同居群的生物量与活性成分含量分析

目的：为优质丹参新品种选育研究提供依据。方法：采用HPLC测定来自不同居群丹参根的丹参酮Ⅱ_A、隐丹参酮、丹参素和丹酚酸B的含量,采用分光光度法测定根的总丹参酮与总丹酚酸的含量。结果：四川中江丹参的单株生物量、山西丹参的丹参酮ⅡA、四川中江丹参的隐丹参酮和总丹参酮、河北的高茎类型的丹参素、四倍体丹参的丹酚酸B和总丹酚酸的含量分别高于其他样品。以单株生物量和各活性成分含量乘积为考察指标,四川中江丹参的各成分的单株乘积值均高于其他样品。结论：结合丹参的生物量与各活性成分含量可以认为,四川中江丹参可以作为一份质量较好的材料。     

北五味子总木脂素的GC-MS分析及其生物活性

目的:分析北五味子总木脂素中的挥发性成分,并对其抗烟草花叶病毒(TMV)活性和抗肿瘤活性进行研究。方法:运用GC-MS技术分析北五味子总木脂素中挥发性化学成分;采用活体半叶枯斑法和MTT法分别研究了其抗TMV活性和抗肿瘤活性。结果:从北五味子总木脂素中检测出58个化合物,鉴定出其中43个,含量较多的有五味子素(13.974%),香芹蒎酮(8.064%),去氢香树烯(6.063%),缬草萜烯醇(5.416%),戈米辛A(4.732%)等,其中非木脂素成分含量为67.06%。抗TMV活性和抗肿瘤活性数据显示北五味子总木脂素对A549细胞增殖有一定的抑制作用,对TMV有较好的抑制作用。结论:运用GC-MS方法对北五味子总木脂素中的低极性成分进行分析检测,该分析方法简便、快捷、准确、可靠,这为分析中药五味子总木脂素中非木脂素成分提供了一种更加高效的检测方法,同时为五味子中总木脂素品质的化学和生物功能研究提供了科学依据。     

胡椒薄荷叶挥发油化学成分及活性分析

目的:研究胡椒薄荷Mentha piperita叶挥发油的化学成分及其生物活性,为胡椒薄荷资源的开发利用奠定基础。方法:采用超临界CO_2萃取法提取叶片挥发油,通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析其化学成分,分别采用DPPH法和卤虫幼体研究其抗氧化活性及生物毒性,纸片扩散法及埃及伊蚊幼虫毒杀法评价其抗菌活性和杀虫活性。结果:用超临界CO_2萃取法提取得到的挥发油得率为0.089%,从中鉴定了11个化学成分,已鉴定出的组分占挥发油总量的93.0%,其中芳樟醇占总挥发油的49.9%,可以认为是其主要成分;挥发油对DPPH的半数抑制浓度(IC50)0.45 g·L~(-1),对卤虫幼体的半数致死浓度(LC50)526.0 mg·L~(-1);在挥发油质量浓度为10 g·L~(-1)时,对大肠埃希菌抑菌圈直径为(9±1)mm,对金黄色葡萄球菌效果不明显;对埃及伊蚊的LC50339.6 mg·L~(-1)。结论:胡椒薄荷叶挥发油对大肠埃希菌有一定的抑制作用,在抗氧化及杀虫方面具有一定活性,但是相对较弱,不宜用于杀虫剂产品开发;此外,胡椒薄荷叶挥发油具有弱的生物毒性。本研究为胡椒薄荷的开发利用提供了科学依据。     

抗菌金属配合物药物研究现状分析

开发有效的抗菌剂,以及使抗菌剂在更广阔的领域中得到应用,是我国今后在抗菌材料领域中面临的2个最主要的课题。金属配合物药物由于其独特的结构,已成为世界范围研究的热点。本文以不同配体为分类依据,对目前的抗菌金属配合物进行了现状分析,并且提出了对于抗菌金属配合物药物迫待解决的问题,展望了此类研究的发展趋势：（1）金属配合物药物药效绝大多数强于配体本身,原因不详。（2）利用天然产物的有效成分进行合成金属配合物,促进天然产物的开发利用,是今后抗菌配合物研究的方向之一。（3）抗菌机理尚在研究中。     

黄精多糖的结构分析及功能活性研究进展

黄精是一种传统的药食同源类中药,具有补气养阴、健脾、润肺、益肾等功能,主要含有多糖、甾体皂苷、蒽醌类化合物、生物碱、强心苷、木质素、维生素等化合物,而黄精多糖是黄精的主要活性成分。近年来,黄精多糖的组成结构分析及其功能活性的研究取得了很大的进展,本文通过查阅国内外相关文献,对黄精多糖的主要化学组成及其分子量测定、结构分析及功能活性进行系统的归纳,结果显示黄精多糖的化学组成主要有阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、果糖和半乳糖醛酸,以及少量的木糖和葡萄糖醛酸;在药理活性方面,其具有一定的抗肿瘤、抗氧化与抗衰老、提高免疫力、调节血糖血脂、抗菌抗炎及调节细胞内分泌等作用,具有广泛的应用价值及市场前景。但是,缺少黄精多糖化学组成及其体内、体外生物学作用及机制的研究,因此,本文将对其应用前景进行讨论与展望,提出进一步的研究方向,为其保健品的开发及疾病的治疗提供理论依据。     

炉甘石炮制机理分析

目的:研究分析炉甘石炮制方法和机理。方法:采用热重分析技术和纳米技术分析并合成炉甘石的组成成分,以四环素为对照,测定不同粒径的炉甘石及其纳米成分的抑菌活性。结果:炉甘石主要含碳酸锌,炮制使部分碳酸锌分解为氧化锌,且粒径变小。炉甘石抑菌活性主要取决于氧化锌的含量和粒径大小,与碳酸锌无关。氧化锌含量越高、粒径越小,抑菌活性越强。结论:氧化锌含量和粒径大小可做为炉甘石炮制的主要指标。     

METase在不同原核表达系统中的表达和活性比较

目的：构建L-蛋氨酸γ-裂解酶（Metase）基因的两种高效原核表达载体，建立最佳高效原核表达体系。方法：在Metase基因已经克隆的基础上，通过分子克隆技术构建两种重组表达质粒pBV220-Metase和pGEX-4T-1-Metase,重组质粒转化感受态大肠杆菌Dh5α,诱导表达，测定Metase活性，统计分析比较。结果：成功构建出两种高效重组表达质粒pBV220-Metase和pGEX-4T-1-Metase,经诱导后都能测出Metase活性。结果：重组表达质粒pBV220-Metase具有比pGEX-4T-1-Metase更强的活性，可作为Metase的高效表达体系。     

哈蟆油蛋白抗疲劳活性及SDS-PAGE凝胶成像分析研究

目的对哈蟆油蛋白抗疲劳活性及不同来源的哈蟆油与混伪品的鉴别研究。方法采用Lowry法测定哈蟆油总蛋白的含量,并运用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离哈蟆油总蛋白;采用整体动物实验观察小鼠游泳和爬杆时间;利用SDS-PAGE和凝胶成像分析系统对不同来源哈蟆油及其混伪品进行鉴别。结果测得哈蟆油水溶性蛋白的含量为42%,哈蟆油中蛋白的分子量在1万~12万可以分离出较清晰的蛋白质点,并具有7条主蛋白带;哈蟆油组和哈蟆油蛋白组相对于对照组均能延长小鼠游泳和爬杆的时间,差异具有统计学意义,且哈蟆油蛋白组优于哈蟆油组;经SDS-PAGE电泳的凝胶成像分析系统分析,表明4个不同地区的哈蟆油均有相同的电泳行为,泳道上有6条主带,而伪品大蟾蜍的干燥输卵管只有一条明显的主谱带。结论哈蟆油总蛋白是哈蟆油中抗疲劳有效组分,SDS-PAGE电泳的凝胶成像分析法可用于不同来源的哈蟆油与混伪品的鉴别,为哈蟆油的开发利用提供了必要的科学依据。     

活动期类风湿关节炎蛋白质代谢变化及相关性分析

目的：观察类风湿关节炎（RA）患者蛋白质的变化及其相关性分析。方法：测定40例RA患者和20例正常对照组的PA、ALB、A/G、Apo-A1、Apo-B、HDL、LDL、Treg表达水平等,比较蛋白质各指标与Treg表达水平两者之间是否存在差异;分析蛋白质变化与生活质量、临床症状、活动性指标、焦虑自评量表（SAS）、抑郁自评量表（SDS）标准分、类风湿性关节炎活动度评分表（DAS-28）及调节T细胞等的相关性。结果：①活动期RA患者的PA、A/G、Treg水平较正常对照显著下降（P〈0.01）,40例RA患者PA下降的有37人,占92.5%;A/G下降的有21人,占47.5%。②TP、ALB与生理功能呈明显负相关（P〈0.01或P〈0.05）;PA、ALB、A/G、HDL与DAS-28呈明显负相关（P〈0.01或P〈0.05）;TP与心理功能、生活质量总计分呈明显负相关（P〈0.05）;GLO与DAS-28呈明显正相关（P〈0.05）;蛋白质指标与Treg水平无特殊相关性。③TP、ALB与步行时间呈明显负相关（P〈0.01或P〈0.05）;④PA、ALB、TP、Apo-B与RBC、HB、Fe呈明显正相关（P〈0.01或P〈0.05）;PA、ALB、A/G、HDL、Apo-A1与a1-AGP、CRP、ESR呈明显负相关（P〈0.01或P〈0.05）;GLO与IgG、C3、ESR呈明显正相关（P〈0.01或P〈0.05）;LDL与C4呈明显正相关（P〈0.01）;Apo-A1/B与PLT、IgM呈明显负相关（P〈0.05）。结论：RA患者中存在蛋白质代谢的异常,具体表现为PA、A/G等指标水平明显下降,其变化与RA炎症活动有关,但与CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg表达水平关系有待进一步研究。     

冷水花抗菌活性部位薄层指纹图谱

目的: 建立冷水花药材抗菌活性部位薄层色谱指纹图谱.方法: 通过抗菌活性研究确定冷水花药材抗菌活性部位,进而采用薄层色谱法对贵州产10批冷水花药材抗菌活性部位进行薄层色谱比较分析.结果: 冷水花药材乙酸乙酯部位具有抗菌活性.另外,贵州产l0批冷水花药材的乙酸乙酯部位薄层色谱图十分相似,均有8个斑点和对应的8个峰,但峰强度上有差异.结论: 该方法操作简单,稳定,可用于冷水花药材的鉴别及质量控制.     

不同产地连翘挥发油主要成分分析及抗菌活性研究

目的:进行不同产地连翘挥发油的主要成分气相测定及其体外抗菌作用的比较研究。方法:采用水蒸气蒸馏法提取不同产地16批连翘果实中的挥发油,利用气相色谱分析检测其主要成分及含量,采用K-B纸片扩散法比较分析其抗菌活性。色谱条件为HP-5毛细管色谱柱(0.25 mm×30 m,0.25μm),程序升温为初始温度50℃,以5℃·min~(- 1)的速率升至86℃,保持3 min,再以20℃·min~(- 1)的速率升至220℃保持1 min,进样口温度230℃,检测器温度250℃。结果:α-蒎烯,莰烯,β-蒎烯,月桂烯,对伞花烃,柠檬烯和α-松油醇的线性关系良好(r均0.999 7),线性范围分别为0.016 5~0.988 8,0.005~0.300,0.038 1~2.286 0,0.003 2~0.192 0,0.000 8~0.048 0,0.008 2~0.492 0,0.002 4~0.144 0μg;稳定性、重复性试验的RSD均3.0%;加样回收率为99.0%~103.4%(RSD3.0%);不同产地连翘挥发油中主要成分含量有差异,其对5种试验菌均有不同程度抑制作用。结论:所建立的连翘挥发油多成分GC测定方法简便、准确,可用于连翘药材的质量评价;抗菌实验结果可靠,可用于连翘药材的抗菌作用评价。