丹参、三七的有效部位对血瘀证大鼠血小板粘聚性及TXA2、PGI2的影响

采用皮下注射肾上腺素加冰水冷浴法造大鼠血瘀模型 ,观察丹参、三七的有效部位丹酚酸B、Rg对血小板粘聚性及TXB2 、6 Keto PGF1α的含量的影响。结果表明 :大鼠肾上腺素血瘀模型组与正常对照组比较 ,血浆血小板聚集性 (ADP诱导 )、粘附性均显著升高 ,血浆中TXB2 、6 Keto PGF1α水平及TXB2 /6 Keto PGF1α比值均无显著影响 ,对ADP诱导血小板生成的TXB2 、腹主动脉组织的 6 Keto PGF1α的含量及TXB2 /6 Keto PGF1α比值亦无显著影响。有效部位丹酚酸B、Rg对肾上腺素血瘀模型大鼠血小板粘聚性升高有明显抑制作用。有效部位丹酚酸B、Rg对肾上腺素血瘀模型大鼠血浆中TXB2 、ADP诱导血小板生成TXB2 及血浆中 6 Keto PGF1α、腹主动脉组织 6 Keto PGF1α均有明显升高的作用 ,对TXB2 6 Keto PGF1α均无明显影响。结论 :此血瘀模型复制成功 ,推测其升高血小板聚集性的机理与TXA2 PGI2 系统无明显关系。有效部位丹酚酸B、Rg对肾上腺素血瘀模型大鼠血小板粘聚性抑制作用机理推测主要与升高 6 Keto PGF1α的水平有关     

复方丹参方对肾上腺素血瘀模型大鼠血小板粘聚性及TXB2、6-Keto-PGF1α的影响

目的 :研究复方丹参方对肾上腺素血瘀模型大鼠血小板粘聚性及TXB2 、6 Keto PGF1α含量的影响。方法 :采用皮下注射肾上腺素加冰水冷浴法造大鼠血瘀模型 ,观察复方丹参方对血小板粘聚性及TXB2 、6 Keto PGF1α 含量的影响。结果 :大鼠肾上腺素血瘀模型组与正常对照组比较 ,血浆血小板聚集性、粘附性均显著升高 ;复方丹参方对肾上腺素血瘀模型大鼠血小板粘聚性升高有明显抑制作用 ,对血浆中TXB2 及血浆中 6 Keto PGF1α、腹主动脉组织 6 Keto PGF1α均有明显升高的作用 ,对TXB2 6 Keto PGF1α无明显影响。结论 :此血瘀模型复制成功 ,推测其升高血小板粘聚性的机理与TXB2 PGI2 系统无明显关系。复方丹参方对肾上腺素血瘀模型大鼠血小板粘聚性升高有明显抑制作用     

复方丹参方对正常家兔血浆血小板粘聚性及TXA2、PGI2的影响

采用半体内实验方法 ,观察了复方丹参方对正常家兔血浆血小板聚集性、粘附性及TXA2 、PGI2 的影响。结果表明 :正常家兔口服复方丹参方 1 2、2 4、4 8g kg及Aspirin 4 4mg kg均显示出明显的抗ADP诱导的血小板聚集作用 ;明显抑制血小板粘附性 ;Aspirin明显降低正常家兔血浆TXA2 水平 (P <0 0 5 ) ;复方丹参方 (4 8g kg)明显升高血浆PGI2 的水平 (P <0 0 1) ;As pirin及复方丹参方各剂量组对血浆TXA2 /PGI2 比值均无明显影响。提示复方丹参方抗正常家兔血小板粘聚作用与促进 6 Ke to PGF1α的释放密切相关。     

HPLC同时测定复方血栓通片中丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹酚酸B、迷迭香酸、哈巴俄苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定复方血栓通片中丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹酚酸B、哈巴俄苷、迷迭香酸、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量。方法:采用HPLC,色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.05%磷酸溶液为流动相B,以乙腈为流动相A,梯度洗脱,柱温20℃,流速1 mL·min-1,检测波长203,270 nm。结果:丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹酚酸B、迷迭香酸、哈巴俄苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re在测定范围内呈良好线性关系,回收率符合要求。结论:方法简便、准确、重复性好,可用于复方血栓通片中丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹酚酸B、迷迭香酸、哈巴俄苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量测定。     

益气养阴、活血化瘀法对糖尿病大鼠血小板聚集功能的影响

目的：观察益气养阴、活血化瘀法对糖尿病大鼠血小板聚集功能的影响。方法：在以链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型上,测定血糖及二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板最大聚集率、血浆中血栓素A2（代谢产物为TXB2）、前列环素（代谢产物为6-Keto—PGF1α）的含量。结果：糖尿病大鼠的血糖、ADP诱导的血小板最大聚集率、血浆中TXB2含量及TXB2／6-Keto—PGF1α比值明显高于正常组,血浆中6-Keto—PGF1α的含量低于正常组。益气养阴、活血化瘀法治疗后糖尿病大鼠的血糖降低,ADP诱导的血小板最大聚集率下降,血浆中TXB2的含量降低,6-Keto—PGF1的含量升高,6-Keto—PGF1比值降低。结论：益气养阴、活血化瘀法能抑制糖尿病大鼠ADP诱导的血小板聚集,其机制与调节TXA2／PGI2平衡有关。     

加味四逆散对溃疡性结肠炎肝郁大鼠模型血清中TXB_2和6-Keto-PGF_(1α)的影响

目的 :观察加味四逆散对溃疡性结肠炎 (UC)肝郁大鼠模型血清中TXB2 和 6 Keto PGF1α的影响 ,研究加味四逆散治疗肝郁UC的机制。方法 :采用三硝基本磺酸 /乙醇法外加束缚的复合因素复制UC肝郁大鼠模型。ELISA法检测加味四逆散各剂量组与各对照组血清中TXB2 和 6 Keto PGF1α的含量 ,对结果进行统计学分析。结果 :模型组血浆TXB2 较正常组明显升高、6 Keto PGF1α降低、TXB2 / 6 Keto PGF1α比值升高 ,各中西药物治疗组血浆TXB2 、6 Keto PGF1α、TXB2 / 6 Keto PGF1α比值均向正常组不同程度回归 ,与模型组比较有显著差异 ,且中药大、中剂量组疗效最显著。结论 :加味四逆散能调节UC大鼠血清中TXB2 和 6 Keto PGF1α的含量及其比值 ,从而改善肠黏膜血液循环 ,这可能是加味四逆散抑制UC肠道炎性反应的作用机制之一     

亚麻子油对血栓素A2、前列腺环素影响的实验研究

目的 :研究富含α 亚麻酸的亚麻子油对家兔血浆TXA2 、PGI2 及TXA2 PGI2 比值的影响。方法 :采用基础、高脂、高油、低油等不同饲料喂饲家兔 ,采用放射免疫方法测定喂饲前、喂饲后30d、6 0d、90d血浆TXB2 和 6 Keto PGF1α水平。结果 :高脂饲养家兔可使血浆TXA2 升高 ,6 Keto PGF1α降低 ,TXA2 PGI2 比值失调。亚麻子油能明显降低血浆TXA2 和 6 Keto PGF1α。维持血浆TXA2 PGI2平衡。结论 :亚麻子油可能通过调节血浆TXA2 PGI2 水平以抗血栓形成及动脉粥样硬化     

拟血管性痴呆小鼠血浆血栓素B2、6-酮-前列腺素F1α的变化及电针的影响

目的　观察拟血管性痴呆小鼠血浆血栓素B2 (TXB2 )、6 酮 前列腺素F1 α( 6 Keto PGF1 α)的变化及电针的影响 ,探讨针刺治疗血管性痴呆的作用机制。方法　复制脑缺血再灌注拟血管性痴呆小鼠模型 ,电针肾俞、膈俞、百会穴 ,与药物喜德镇对照 ,分别于术后 7、1 5、30日 ,检测血浆TXB2 、6 Keto PGF1 α含量。结果　该造模方法对小鼠的TXB2 、6 keto PGF1 α 2项指标未见明显影响 ,电针可使正常小鼠 6 Keto PGF1 α含量在术后 1 5日与 30日均明显升高。结论　电针可提高正常小鼠抗血小板聚集、扩血管能力 ,此可能为针刺治疗血管性痴呆的作用途径之一。     

心复宁V号对垂体后叶素致急性心肌缺血大鼠血浆TXA2及PGI2的影响

目的:观察心复宁V号对垂体后叶素所致急性心肌缺血大鼠血浆TXA2及PGI2的影响。方法:60只大鼠,随机分成6组,即空白对照组、模型对照组、心复宁V号大剂量组(17.08g/kg)、心复宁V号中剂量组(8.54g/kg)、心复宁V号小剂量组(4.27g/kg)、阳性对照组(单硝酸异山梨酯)。采用灌胃给药,每天1次,连续14d。末次给药后1h,舌下静脉给予垂体后叶素造成急性心肌缺血模型。1h后取血,分离血浆,测定各组TXA2、PGI2的代谢产物6-Keto-PGF1a、TXB2,分析PGI2/TXA2比值。结果:大鼠给予垂体后叶素后,血浆中TXB2升高,6-Keto-PGF1a/TXB2比值降低(P<0.05、0.01)。与模型对照组比较,心复宁V号(17.08g/kg,8.54g/kg)明显降低垂体后叶素所升高的TXB2,升高6-Keto-PGF1a/TXB2(P<0.01)。结论:心复宁V号抗垂体后叶素致大鼠心肌缺血作用机制之一是通过抑制升高的血浆TXA2,纠正PGI2/TXA2失衡。     

丹酚酸A与丹酚酸B改善大鼠心肌缺血作用比较

目的观察丹酚酸A与丹酚酸B对大鼠心肌缺血的作用。方法通过结扎大鼠冠脉以及静脉注射脑垂体后叶素两种方法,观察舌下注射丹酚酸A 10、5、2.5mg/kg及丹酚酸B 10mg/kg对大鼠不同时间点心电图、血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)及心肌梗死面积的影响。结果丹酚酸A 10、5、2.5mg/kg及丹酚酸B 10mg/kg对结扎大鼠冠脉导致的急性心肌梗死模型有降低心电图ST段抬高程度、减少梗死面积及降低血清CPK、LDH的作用,其中丹酚酸A 10、5mg/kg的效价明显高于丹酚酸B,2.5mg/kg丹酚酸A的作用相当于10mg/kg丹酚酸B;对静脉注射脑垂体后叶素导致的大鼠急性心肌梗死模型有降低心电图ST段抬高程度作用,其中丹酚酸A10、5mg/kg的作用明显强于丹酚酸B,2.5mg/kg丹酚酸A的作用与10mg/kg丹酚酸B无显著差异。结论10、5mg/kg丹酚酸A改善大鼠心肌缺血作用明显强于10mg/kg丹酚酸B,2.5mg/kg丹酚酸A改善大鼠心肌缺血作用相当于10mg/kg丹酚酸B。     

免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱荧光法测定保和系列制剂中黄曲霉毒素

目的 研究建立光化学柱后衍生-高效液相色谱( HPLC) -荧光检测器测定保和系列制剂中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的方法.方法 70％甲醇提取样品,免疫亲和柱净化后,经高效液相色谱分离,由光化学柱后衍生,通过荧光检测器测定.结果 在优化条件下,黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1分别在0.064 6～3.230 ng、0.1992 ～9.960 ng、0.0684～3.420ng、0.1954～9.770 ng的范围内有良好的线性关系,r＞0.9996,回收率在85.5％ ～ 114.6％之间,RSD＞8.结论 该方法快速简便,灵敏度高、重现性好,对68个生产企业生产的3个剂型148批保和制剂进行了检测,结果表明该方法可作为保和系列制剂中黄曲霉毒素的检测,保和制剂黄曲霉毒素状况较好.     

复合前处理方法净化-HPLC-FLD用于复方板蓝根颗粒中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的测定

建立了一种复合前处理手段应用于中成药中的黄曲霉毒素B₁,B₂,G₁,G₂的HPLC测定方法。样品经复合前处理方法处理后,用高效液相色谱-柱后衍生-荧光检测技术测定痕量黄曲霉毒素。结果表明,样品经甲醇-水系统提取、无水硫酸镁和氯化钠脱去水分、中性氧化铝吸附后,能有效去除中成药基质中不同基源的杂质干扰,待测峰和杂质峰分离度良好。4种目标分析物(AFB₁,AFB₂,AFG₁,AFG₂)的检出限分别为0.25,0.25,0.50,0.25 μg·L^-1,定量限分别为1.00,0.50,1.00,0.50 μg·L^-1,AFB₁,AFG₁线性范围1.0~50 μg·L^-1,AFB₂,AFG₂线性范围0.5~12.5 μg·L^-1,R²>0.99。平均回收率为80.40%~108.6%。该方法操作简单、重复性好、回收率较高,适用于中成药中黄曲霉毒素的快速分析。     

苦杏仁中黄曲霉毒素B1, B2, G1, G2的液质联用检测分析

基质效应是影响液质联用定量准确性的一个重要因素,在方法学评价阶段中必不可少。该研究采用稀释法,并通过优化色谱和质谱条件,成功克服苦杏仁的基质效应对整个分析过程的干扰,建立了一种可对苦杏仁污染黄曲霉毒素B₁,B₂,G₁,G₂进行大量筛查及检测的液质联用方法,与Mycosep226净化柱纯化的方法相比,具有回收率高、经济、简便的特点;对11批样品进行检测发现有2批样品的黄曲霉毒素检测结果呈阳性,其中黄曲霉毒素B₁的污染水平为1.590~2.340 μg·kg^-1,黄曲霉毒素总量(B₁+B₂+G₁+G₂)的污染水平为2.340~3.304 μg·kg^-1,表明苦杏仁污染黄曲霉毒素这一现象应当引起重视,并且有必要对其贮藏方式进行考察,以减少黄曲霉毒素的污染。     

HPLC法测定林下山参制浆前后人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1、Rg_3、Rh_1、Rh_2含量的变化

目的分析林下山参制浆后人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1、Rg_3、Rh_1、Rh_2含量的变化情况。方法采用HPLC-UV法,Innoval ODS-2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水溶液进行梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;进样体积20μL;检测波长203 nm。结果林下山参中6种人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1、Rg_3、Rh_1、Rh_2质量分数分别由制浆前的0.651、0.506、0.363、0.014、0.023、0.031 mg/g变化为制浆后的0.517、0.413、0.105、0.122、0.214、0.098 mg/g。人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1、Rg_3、Rh_1、Rh_2分别在2.5~100 mg/L具有良好的线性关系,r2均大于0.999 5;精密度、稳定性及重复性良好;平均加样回收率为95%~105%,RSD为1.25%~3.05%。结论林下山参中6种人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1、Rg_3、Rh_1、Rh_2的含量在制浆前、后发生变化。林下山参制浆后人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的含量降低,稀有人参皂苷Rg_3、Rh_1、Rh_2的含量分别增高8.7、9.3、3.2倍。基于HPLC最佳分离参数建立的6种人参皂苷成分同时分析的方法具有较好的准确性和可靠性,可为林下山参浆的质量评价提供科学依据。     

免疫亲和柱净化-在线柱后光化学衍生-HPLC-FLD 同时测定甘草中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2 和赭曲霉毒素A的含量

目的:建立同时检测甘草中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2和赭曲霉毒素A的免疫亲和柱净化-在线柱后光化学衍生-HPLC- FLD测定的方法.方法:样品经甲醇-水(80:20)超声提取后,用免疫亲和柱净化和富集;以甲醇和0.5％乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱,通过柱后光化学衍生,荧光检测器测定.结果:黄曲霉毒素G2,G1,B2,B1和赭曲霉毒素A的检测限分别为0.02,0.06,0.015,0.03,0.25μg·kg-1,平均加样回收率为76.0％～103％,RSD低于13％.结论:该方法快速简便、准确,可用于甘草中同时测定黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2和赭曲霉毒素A的含量.     

稀释法结合LC-MS/MS检测在10种中药材污染黄曲霉毒素高通量筛查中的应用研究

该研究运用稀释法,克服了基质效应对10种中药材污染黄曲霉毒素B₁,B₂,G₁,G₂的液质联用检测的影响,高、中、低3个浓度水平的基质效应检测结果在80.23%~115.5%,符合准确定量的要求。为增强检测结果的特异性和准确性,研究结合保留时间窗、定量离子与定性离子的峰面积比值2个指标对83批中药材的检测进行色谱峰的辨认,并以苦杏仁为基质溶液配制的3个浓度的质控样品对检测体系的稳定性进行考察。检测结果显示医院和药店的药材污染率分别为13.89%和17.02%,其中以使君子和红枣的污染率较高。质控样品的RSD<6.6%,表明该分析方法可用于这10种中药材的高通量的筛查和检测,具有经济、快速的优点。     

不同产地雄黄及其炮制品中二硫化二砷和可溶性砷含量比较

目的:比较研究不同产地雄黄及其炮制品中主成分As2S2及可溶性砷盐As2O3的含量差异。方法:采用2010年版《中国药典》雄黄项下的滴定法测定不同产地雄黄及其炮制品中As2S2的含量,采用AFS-230E型原子荧光光度计检测上述样品中可溶性砷盐As2O3含量。结果:不同产地的雄黄及其炮制品中As2S2,As2O3含量存在显著差异。雄黄炮制后,炮制品中As2S2含量均提高,As2O3含量均明显降低。除吉林和江苏2个产地的的雄黄及其炮制品中As2S2含量<90.0%,其余样品均符合药典规定;且雄黄炮制品中As2O3含量均能控制在1.7 mg.g-1以下。结论:研究结果可为指导雄黄临床合理用药提供参考依据。     

不同构型拟人参皂苷Rg_2、拟人参皂苷Rh_1和拟原人参三醇合成方法的研究

目的探索一种高效制备拟人参皂苷Rg_2、拟人参皂苷Rh_1和拟原人参三醇(PPT)的新方法,为制备拟人参皂苷和PPT提供理论依据。方法依次以人参皂苷Re、人参皂苷Rh_1和PPT为原料,通过简单的3步反应(乙酰化反应、一步消去-加成反应、还原反应)进行制备,然后再利用色谱分离纯化,通过NMR、HR-ESI-MS、IR进行结构鉴定。结果拟人参皂苷Rg_2(E/Z)、拟人参皂苷Rh_1(E/Z)和拟PPT(E/Z)产率分别是41%/13%、43%/11%、56%/15%。其中20(Z)-拟PPT为新化合物。结论通过价格相对低廉且原料易得的人参皂苷Re、人参皂苷Rh_1和PPT制备出活性较好的拟人参皂苷Rg_2、拟人参皂苷Rh_1和拟PPT,为制备其他类型的拟人参皂苷提供了一种新的思路。同时此方法操作简单,产率较高。     

化风丹中As2S2及As2O3的含量测定

目的:建立化风丹中不溶性砷盐和可溶性砷盐的含量测定方法,为该制剂的质量控制提供参考。方法:采用滴定法和紫外分光光度法分别测定18批化风丹中二硫化二砷和三氧化二砷的含量。结果:建立的二硫化二砷含量测定方法重复性好,平均加样回收率97.61%,RSD 2.0%。三氧化二砷在4~16μg与吸光度线性关系良好,平均回收率97.77%,RSD2.1%。18批化风丹中二硫化二砷质量分数0.012~0.021 3 g·g-1,平均质量分数0.018 4 g·g-1,差异系数13.3%;三氧化二砷质量分数75.24~124.55μg·g-1,平均质量分数92.99μg·g-1,差异系数15.3%。结论:建立的含量测定方法简单、准确,为化风丹质量标准提升提供实验依据。不同批次化风丹中二硫化二砷和三氧化二砷含量差异较大。     

从检测血中FT3、FT4、T、E2及皮质醇等指标探讨寒证热证的本质

目的：探讨内分泌激素FT3、FT4、T、E2及皮质醇（cortisol,CO)水平与中医寒证热证的相关规律。方法：选实热、虚热、实寒、虚寒证患者202例及健康对照组50名，检测血中FT3、FT4、T、E2、CO指标。结果：（1）FT3、FT4数值热证高而寒证低，依次为虚热证组＞实热证组＞对照组＞实寒证组＞虚寒证组，提示热证基础代谢及氧消耗升高而寒证正相反。（2）CO值实证高而虚证低，依次为实寒证组＞实热证组＞对照组＞虚热证组＞虚寒证组，提示CO为形成虚实的因素之一而与寒热关系不显著。（3）性激素T热证高而寒证低；E2女性热证低而寒证高。提示T值高为形成热证的因素之一，E2值高为形成女性寒证的因素之一。结论：内分泌激素水平的高低是形成寒证热证的主要病理生理基础之一。