HPLC特征指纹图谱结合化学计量学比较不同生长年限川牛膝化学成分差异

目的采用HPLC特征指纹图谱结合化学计量学方法比较1～6年生川牛膝的的化学成分特征差异。方法采用HPLC法测定1～6年生川牛膝的色谱图,建立6×54峰面积数据矩阵并进行特征峰差异分析,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对样品进行相似度分析,运用SPSS 22.0软件进行聚类分析和主成分分析。结果特征峰差异分析得出,1年生川牛膝在4个色谱峰处和6年生川牛膝在5个色谱峰处表现出组分专属性差异,1年生样品在4个色谱峰处峰面积明显高于其他年限样品,表现出较大的组分累积量差异。相似度分析得出3、4、5年生川牛膝相似度均大于0.98,1、2、6年生川牛膝相似度均小于0.85,聚类分析的树状图和主成分分析的得分三维图均将3、4、5年生川牛膝样品聚为一类。结论不同生长年限川牛膝间化学组分存有一定的差异,其中3、4、5年生川牛膝化学组分趋于一致,为川牛膝采收时期提供科学的参考依据。     

连翘HPLC指纹图谱的建立及其化学模式识别研究

目的:建立连翘醇溶性成分HPLC指纹图谱,为连翘质量控制提供理论依据.方法:对9批不同产地的连翘样品采用HPLC法进行指纹图谱的测定,选定8个共有峰,并使用SPSS 17.0软件,对样品共有峰的峰相对保留时间和相对峰面积进行化学模式识别研究.结果:该色谱方法简便,且方法学验证均符合要求,以聚类分析和主成分分析法结合指纹...     

安宫牛黄丸HPLC指纹图谱及化学模式识别分析

目的:采用高效液相色谱法(HPLC)建立安宫牛黄丸的指纹图谱,结合化学模式识别对其质量进行评价。方法:采用HPLC,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长230 nm,对10批安宫牛黄丸样品进行指纹图谱研究,通过相似度分析并结合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对安宫牛黄丸的质量进行评价。结果:10批样品相似度均0.9,标定了25个色谱峰为共有峰,通过对照品比较指认了其中10个色谱峰。通过PCA发现不同年份样品存在微小差异,进一步采用OPLS-DA发现了影响不同年份样品产生差异的14种成分,包括盐酸巴马汀、黄芩素、表小檗碱、栀子苷、盐酸小檗碱、黄连碱、汉黄芩素等。结论:建立的分析方法简便、准确、可靠,指纹图谱结合化学模式识别分析可更好地评价安宫牛黄丸的质量,为该制剂的质量控制提供科学依据。     

毛冬青HPLC-UV指纹图谱与化学模式识别

为了建立毛冬青的高效液相(HPLC-UV)指纹图谱的质量评价方法。该文采用Phenomenex Luna C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.05%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速为0.8 m L·min~(-1),柱温30℃,进样量10μL。检测波长210 nm,根据相似度评价,结合化学计量学方法对毛冬青进行质量评价。结果建立了16批毛冬青HPLC-UV指纹图谱,标定共有峰29个,通过对照品指认了12个共有峰,其中14批样品指纹图谱的相似度均0.92,通过聚类分析可将样品聚为3类,结合主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析发现其中7个成分是造成不同批次样品差异性的主要标记物。根据色谱峰的紫外吸收特征,可将毛冬青药材的指纹图谱分为3个区:A区域色谱峰主要为木脂素及酚酸类成分;B区域色谱峰主要为皂苷类成分;C区域色谱峰主要为其他类成分。该文所建立的液相指纹图谱特征性和专属性强,可作为毛冬青药材内在质量控制的有效方法。     

青海产暗紫贝母化学成分的气相色谱-质谱联用分析

目的 分析暗紫贝母鳞茎乙醚提取物中的化学成分.方法 采用索式提取法以乙醚为提取剂提取暗紫贝母鳞茎中的化学成分,运用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对化学成分进行研究,并应用色谱峰面积归一化法测定各组分的相对百分含量.结果 从暗紫贝母鳞茎乙醚提取物中鉴定出17种成分.结论 GC/MS方法简便、快速、灵敏度高,用此方法对暗紫贝母化学成分进行分析,可进一步提高对暗紫贝母药效物质基础的认识.     

5种贝母的弱极性成分HPLC指纹图谱研究

目的 :建立5种贝母弱极性成分的HPLC指纹图谱,以此鉴别贝母类药材,并对不同种的贝母加以区分。 方法 :以三相静态萃取法提取制备样品,采用高效液相色谱法,以乙腈-0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱;检测波长250 nm;记录时间60 min;以中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件分析图谱。 结果 :建立了5种贝母弱极性成分的HPLC指纹图谱,标定了16个共有指纹峰及各自的特有峰,方法学考察符合指纹图谱技术要求。相似度计算表明,5种贝母弱极性成分的指纹图谱存在一定的差异。 结论 :该实验建立的HPLC图分离度好、信息量大、基线平稳,为5种贝母的鉴别和质量控制提供了可靠的分析方法。     

湖北贝母药材的质量标准研究

目的:建立湖北贝母药材的质量标准,为该药材的质量控制提供可靠的参考方法。方法:采用薄层色谱法,以湖贝甲素为对照品,建立其薄层鉴别方法;采用HPLC-ELSD建立湖北贝母药材的高效液相特征图谱及贝母素乙含量测定的分析方法,并对10批不同产地湖北贝母药材的总灰分、酸不溶性灰分、杂质、浸出物、水分、重金属含量进行测定。结果:10批不同产地湖北贝母药材的薄层色谱中与对照品湖贝甲素相应的位置上,显相同颜色的斑点,薄层色谱检出14个共有色谱条带。在高效液相色谱中检出4个共有特征峰,不同批次湖北贝母特征图谱相似度均大于0.9,但相对峰面积差异明显。HPLC含量测定方法学结果表明贝母素乙分离度良好,在60~2400 mg·L~(-1)具有良好的线性关系,R~2=0.999 2(n=14),加样回收率为101.50%,RSD为3.35%。结论:该方法简便、高效、重现性好,为综合控制湖北贝母药材的质量提供了可行的分析方法。     

HPLC-ELSD测定乌贝益胃胶囊中贝母素甲和贝母素乙含量

目的 建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器法(HPLC-ELSD)同时测定乌贝益胃胶囊中贝母素甲和贝母素乙含量的方法,并对10批样品进行考察,制定含量限度.方法 采用HPLC-ELSD,色谱柱为Eclipse XDB C18(150mm×4.6mm,5 μm),流动相为乙腈-水-二乙胺(65∶35∶0.05),柱温为30℃,流速为1.0 mL/min. ELSD参数:漂移管温度为80℃,载气流速为2.5 L/min.结果 贝母素甲和贝母素乙进样量分别在0.294 ～2.944 μg、0.424～4.240 μg范围内与各自峰面积的对数值呈线性关系,平均加样回收率分别为98.13％ (RSD=1.02％,n=6)、98.38％ (RSD =0.92％,n=6).结论 本方法准确可靠,重复性好,为乌贝益胃胶囊质量标准的制定提供了依据.     

大黄[庶虫]虫丸UPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的建立大黄[庶虫]虫丸超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,辅以化学模式识别方法,为建立相应的质量评价体系提供思路和参考。方法色谱柱为Waters Acquity UPLC HSS T3柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以乙腈(A)-0.2%甲酸(B)为流动相,梯度洗脱,根据各味药材主成分出峰顺序优化检测波长切换程序,柱温:35℃,流速:0.3 mL/min,应用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012.1版)建立大黄[庶虫]虫丸对照指纹图谱并进行相似度评价,再运用ChemPattern化学计量学软件(2017年版)进行聚类分析、主成分分析(PCA)、偏最小二乘回归分析(PLS)和模式识别。结果共标定30个共有峰,根据色谱峰行为、超高效液相色谱-电喷雾离子源-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-ESI-QTOF-MS)对照品离子碎片及文献信息确认13个已知成分,并进行各峰归属。B、C、F、G厂家样品相似度均>0.90,PLS分析能较好地区分各个厂家样品;筛选出黄芩、大黄的多个主要成分及苦杏仁苷是强特征峰,聚类分析、PCA、PLS分析结果相互验证。结论大黄[庶虫]虫丸UPLC指纹图谱具有较好的稳定性和重复性,结合化学模式识别方法,能较为快速、准确地反映大黄[庶虫]虫丸的整体质量,可为其质量控制和评价提供依据。     

鹤蟾片HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的:建立鹤蟾片HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别法进行质量评价。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为270 nm;柱温为30℃;进样量为10μL。建立鹤蟾片HPLC指纹图谱,并进行相似度评价,结合化学模式识别法对鹤蟾片进行质量评价。结果:鹤蟾片HPLC指纹图谱共确定46个共有峰,指认出22种成分,并进行色谱峰归属;10批样品相似度均在0.950以上,表明不同厂家的样品质量相对稳定;聚类分析及主成分分析均将样品分为2类;偏最小二乘法判别分析发现16个成分为样品质量差异的标志性成分。结论:该研究建立的方法简便、准确,可对鹤蟾片进行整体性质量评价。     

近红外漫反射光谱法鉴别贝母药材的研究

目的:建立贝母药材及其伪品鉴别的近红外漫反射光谱分析法.方法:将炉贝、松贝、青贝、浙贝、伊贝母、平贝母、湖北贝母及贝母伪品东贝母、光慈菇、山慈菇等10种药材烘干、粉碎、过筛,直接测定其近红外漫反射光谱;分别采用聚类分析、褶合变换-可视化-相似系数分析等方法对10种药材进行鉴别.结果:10种药材的近红外漫反射光谱原谱极其相似,无法鉴别;聚类分析可将3种贝母伪品与7种贝母正品区分开,但不同贝母正品之间的鉴别效果不甚理想;褶合变换-可视化-相似系数分析将贝母正品之间的微小差异进一步扩大化、量化,正品之间的鉴别效果得到改善.结论:近红外漫反射光谱分析法可直接、无损测定固体样品,结合信息处理技术,可以为贝母及其他中药鉴别分析提供一种新的方法.     

贝母合剂对肺损伤大鼠血管新生的影响

目的:探讨贝母合剂对平阳霉素诱导肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠血管新生的影响。方法:麻醉大鼠后,经气管软骨环间隙注入平阳霉素5mg/kg建立大鼠肺损伤模型,假手术组大鼠在同样条件下气管内注入等量生理盐水。术后灌胃给药28天,假手术组和模型组予5‰羧甲基纤维素钠(CMC钠)溶液,地塞米松组予等体积地塞米松蒸馏水溶液,贝母合剂组予等体积贝母合剂,给药结束后麻醉处死大鼠,将左肺常规固定、包埋、切片、脱蜡,采用免疫组化SP法检测肺组织血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和CD34水平。采用光学显微镜和全自动图像获取系统随机测量并计算平均光密度(IOD)值及微血管密度(microvascular density,MVD)。结果:贝母合剂组大鼠肺组织VEGF的水平明显低于模型组(P0.01),贝母合剂组大鼠肺组织微血管密度明显高于模型组(P0.01)。结论:降低肺组织VEGF水平和增加微血管密度可能是贝母合剂治疗肺损伤的机制之一。     

皖贝母产生物碱内生真菌的筛选与鉴定

目的：从皖贝母中分离产生物碱的内生真菌。方法：采用组织块法、薄层层析、高效液相色谱-旋转蒸发光检测器法以及形态学和分子生物学方法从皖贝母鳞茎中筛选出产生物碱的内生真菌。结果：从皖贝母中分离出1株产生物碱的内生真菌，并鉴定为极细链格孢菌（Alternaria tenuissima）。结论：从皖贝母中分离到了一株产生物碱内生真菌bm-2 ，为解决皖贝母药用资源匮乏的问题提供理论依据。     

席德治临证治疗咳嗽处方分析

目的总结席德治先生治疗咳嗽的中药运用经验。方法收集席德治先生治疗咳嗽医案95则,按中医证型分类,建立医案资料库,统计所用中药的类别,及各类别中药总使用频次、不同证型中各类别中药的使用频次;每张处方平均药味及剂量。结果①共用137味中药,归属于15类,出现频次居前5位者为化痰药、补虚药、清热药、止咳平喘药、解表药。②风热犯肺证常用药物为:象贝母、牛蒡子、甘草、桔梗、前胡、桑叶等;痰热壅肺证常用药物为:象贝母、杏仁、桔梗、甘草、黄芩、牛蒡子等;肺阴亏虚证常用药物为:象贝母、北沙参、甘草、杏仁、桔梗等;肺气亏虚证常用药物为:象贝母、甘草、北沙参、白术、杏仁等;肝火犯肺证常用药物为:象贝母、杏仁、忍冬藤、茯苓、黄芩、败酱草等。③每张处方平均药味数(13.5±1.2)个,总剂量(147.67±22.17)g。结论席德治先生临证治疗咳嗽,重视"痰"这一病理因素及病机证候要点,注重化痰与清热,用药轻灵。     

中药材川贝母DNA指纹鉴定研究

目的 建立川贝母DNA指纹鉴别方法.方法 采用CTAB法从川贝母等样品中提取基因组DNA,对其5s rDNA区序列进行扩增并在此基础上展开了分子鉴定研究.经Primer Primer 5.0引物设计软件设计川贝母的特异性引物,利用PCR技术对川贝母与其他品种的贝母进行鉴别比较.结果 川贝母能扩增出274 bp大小的片段...     

贝母生物碱的体外气管松弛作用研究(英文)

目的:贝母是一种常用的传统止咳中药, 贝母生物碱被认为是其镇咳的主要活性成分,但其作用机理和各种生物碱的作用强度仍然不是很明确。方法:选用离体大鼠气管和支气管作为体外模型并用卡巴胆碱诱导其收缩, 研究和比较了5种主要贝母生物碱[imperialine(IMP),verticine(VER),verticinone(VERN), ebeiedine(EBE)和puqietinone(PUQ)] 的舒张作用。结果:5种贝母生物碱均有气管和支气管舒张作用并呈量效关系, 其活性强度为IMP>VER≌VERN>EBE>PUQ。在所测试的生物碱中,IMP(D和E环顺式异甾体贝母生物碱)的舒张作用最强; 而 PUQ(甾体贝母生物碱)的舒张作用最弱。此外,3种贝母生物碱,IMP,VER和VERN(≥1μmol·L-1) 能引致卡巴胆碱浓度反应曲线平行右移, 证明他们的作用机理是对M受体具竞争性拮抗作用。同时抑制钙离子的流入亦可能是贝母生物碱舒张气管和支气管的另一作用机理。结论:异甾体贝母生物碱可能是贝母的主要活性成分,其作用机理为竞争性拮抗胆碱能受体并抑制钙离子的流入。     

HPLC结合DTA用于不同品种及不同加工法的浙贝母质量分析

 目的　建立用HPLC-DTA分析不同栽培法及不同加工法浙贝母质量的方法。方法采用高效液相色谱法(HPLC)及差热分析法(DTA)测定了贝母产地在相同生态环境条件下并采用不同加工方法得到的浙贝母、东贝母、湖北贝母及皖贝母的质量。结果显示采用传统方法加工的浙贝母、东贝母、湖北贝母及皖贝母含有相同的成分,可以混用。而采用硫磺熏蒸的样品则由于杂有二氧化硫而有所差异,以石灰干燥法加工的贝母质量稳定。结论本法简便、快速,结果准确,可用于同类中药的质量标准研究及质量检验。     

新疆贝母的紫外光谱鉴别

目的 研究新疆贝母的鉴别依据。方法 利用紫外分光光度法测定和比较了新疆贝母与其它4种贝母样品无水乙醇提取物的紫外光谱。结果 新疆贝母与其它4种贝母有明显而稳定的差异。结论 该光谱特征作为新疆贝母与其它4种贝母区别的依据。     

贝母药物资源的植物化学和生物学研究

贝母属药用植物含有多种药用化合物,在传统中医药中已应用上千年。近年对贝母药物资源的深入研究导致在多种贝母中发现更多的甾体生物碱、皂苷、萜类、糖苷和许多其它化合物,由此关于贝母的化学分类,分子系统发育和药理研究也日益增多。本文基于作者的贝母药用亲缘研究,评述近年贝母属植物化学、化学分类、分子生物和系统发育研究的进展,及其与贝母药效的关联。通过检索文献总结了贝母研究涉及的多种技术,用基于细胞核和质体DNA标记的系统发育分析推断了川贝,伊贝等复合群内部的相互关系和其与其它中国贝母物种的关系,并明确了中国贝母与国外贝母之间的关系。指出化学分类与分子系统发育结果的不一致并讨论了原因。深入研究更多的贝母物种对于贝母药物资源的可持续利用和寻找新的治疗用化合物十分重要。系统生物学和组学技术将对今后贝母药用化合物研究的深入起到关键作用。