赤芍与白芍药材高效毛细管电泳指纹图谱方法学研究

目的确定赤芍和白芍的高效毛细管电泳分析方法,建立赤芍和白芍的高效毛细管电泳法(HPCE)指纹图谱。方法HPCE工作条件:采用未涂层熔融石英毛细管(内径75μm,有效长度50 cm),分离电压为25 kV,柱温25℃,二极管阵列检测器(DAD)检测波长为220 nm,缓冲液为30 mmol/L硼砂(pH=9.0)溶液。按此条件对来自不同产地的7种赤芍样品和8种白芍样品进行了分析。结果建立了赤芍和白芍HPCE指纹图谱,采用中药指纹图谱相似度计算软件,以系统生成的对照指纹图谱为对照模板对不同样品的图谱进行相似度计算。结论该方法简捷、有效,可以用于赤芍和白芍药材的质量控制。     

白芍和赤芍HPLC指纹图谱比较研究

目的通过建立白芍和赤芍药材的HPLC指纹图谱,进一步完善芍药野生品与栽培品药材的质量评价方法。方法采用HPLC测定了11批白芍和和11批赤芍样品,并建立标准对照指纹图谱,按国家药典委员会提供的中药色谱指纹图谱相似度评价系统对样品的相似度进行评价。色谱条件:固定相为Kromasil 100-5C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.3%H3PO4梯度洗脱;检测波长为220 nm,参比波长为290 nm;柱温35℃;体积流量0.8 mL/min。结果 建立的HPLC指纹图谱能区别白芍和赤芍。结论本法简单、快捷,为科学评价和控制芍药野生品与栽培品药材的质量提供了依据,为同来源于芍药的赤芍和白芍的临床应用提供依据。     

赤芍与白芍HPLC特征指纹谱的建立及其在质量控制中的应用

目的:建立赤芍与白芍的高效液相色谱特征指纹分析方法,为科学评价和有效控制其质量提供方法.方法:采用Polaris C18-A色谱柱;流动相乙腈磷酸水溶液(pH 3.0),梯度洗脱;检测波长230 nm;流速1.0 mL·min-1;测定了67批不同来源的赤芍与白芍样品的HPLC特征指纹谱.结果:指认了9个芍药苷类和酚酸类成分,并以龙胆苦苷为内标对特征指纹峰进行半定量分析,根据系统聚类分析和相似度分析结果,对赤芍与白芍进行了评价.结论:特征指纹谱可对赤芍和白芍进行鉴别,并能够用于赤芍和白芍的质量评价.     

不同产地及引种栽培白芍药材指纹图谱研究

目的 建立白芍药材的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价不同产地及引种栽培白芍药材的质量提供依据.方法 采用HPLC-DAD方法,测定了44批白芍样品(含2批赤芍药材和5批引种栽培白芍药材).色谱柱为Hypersil-C18柱(250 mm×4.6 mm i.d,5μm),流动相为乙腈和水(0.05%磷酸),梯度洗脱,流速1.0 ml/ml,柱温40℃.检测波长230nm,分析时间60 min,平衡时间14min.结果 确定了白芍药材中的14个共有峰,经相似度分析,可将白芍药材分成3类.不同质量等级白芍样品色谱指纹图谱中两个主要成分芍药苷和芍药内酯苷峰高比的变化规律如下:优质品在(5-10):1左右;一般品在(3.0～3.5):1之间;劣质品在(1.0~3.0):1之间.4批引种栽培白芍药材与其他主产地白芍药材指纹图谱的相似度均在0.90之上,且其共有峰的LC-MS测定结果与其它白芍药材一致,芍药苷和芍药内酯苷峰面积比为(5-10):1.结论 引种栽培的白芍药材与主产地白芍药材质量一致,且更加稳定可控,因此可以作为白芍药材的新来源;建立的白芍指纹图谱方法稳定、可靠、重复性好,结合芍药苷和芍药内酯苷峰高比的变化规律,可应用于全面控制白芍药材的质量.     

白芍多波长叠加指纹图谱研究

目的:采用HPLC法对白芍多波长叠加指纹图谱进行研究。方法:运用波长叠加技术建立指纹图谱,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.1%磷酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱;流速1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长230、260、290、320 nm。结果:多波长叠加指纹图谱体现了白芍230、260、290、320nm特征吸收波长的指纹信息,标定了18个共有峰,14批不同来源的白芍样品与指纹图谱之间具有良好的相似性,相似度均在0.880以上。结论:建立的白芍多波长叠加谱指纹图谱信息更加丰富全面,可用于白芍的质量控制。     

注射用辛芍(冻干粉针)指纹图谱研究

目的：采用RP-HPLC建立注射用辛芍(冻干粉针)的指纹图谱测定方法。方法：采用Diamonsil C₁₈色谱柱,80%乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温40 ℃,检测波长为230 nm。结果：在相同色谱条件下获得药材、中间体和制剂的各色谱峰分离较好,建立了注射用辛芍的HPLC对照指纹图谱,标注了制剂中的8个共有指纹峰,制剂与药材、中间体的指纹图谱有良好的相关性,10批样品相似度大于0.97,达到指纹图谱的技术要求。结论：该方法准确、重复性好,可作为注射用辛芍(冻干粉针)质量控制的重要依据之一。     

白芍UPLC指纹图谱研究

目的建立白芍UPLC指纹图谱测定方法,对不同产地白芍的质量进行较全面的评价。方法色谱柱ACQUITY UPLC#174;HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长230 nm,柱温30℃,体积流量0.4 m L/min。采用相似度评价、聚类分析、主成分分析3种方法对23批白芍饮片指纹图谱进行研究。结果建立了白芍饮片的专属性UPLC指纹图谱,确定了8个共有峰;23批白芍样品质量差异较大,不同产地间和同一产地内样品均具有一定差异。结论该方法简便、易行,为白芍饮片的质量控制提供了较为有效的快速评价方法。     

以芍药总苷为指标的白芍药材综合评价体系及指纹图谱研究

目的:研究白芍的高效液相色谱指纹图谱及芍药总苷的测定方法。采用高效液相色谱法测定了11批白芍样品。测试条件为C_(18)色谱柱(Xtimate C18;4.6mm×250mm;5μm),以乙腈和0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为230nm,流速为1.0m L/min。结果:白芍药材的液相色谱指纹图谱共检出11个共有色谱特征峰,其中以芍药总苷为主。结论:该方法简单、快捷且特征性和专属性极强,为科学评价白芍的质量控制提供了可靠方法,为白芍的临床应用提供了依据。     

白芍药材薄层色谱鉴别和高效液相色谱特征图谱研究

目的：研究白芍的薄层色谱和高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法采用薄层色谱法检测白芍样品中的芍药苷,展开剂为三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40∶5∶10∶0.2）。采用高效液相色谱法,梯度洗脱,测定10批白芍样品。色谱条件为：Kromasil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm,12 nm）,流速1.0 mL/min,柱温35℃,流动相A为乙腈,流动相B为0.05%磷酸水。结果薄层色谱斑点清晰。10批白芍样品获得包括芍药苷（9号峰）在内的15个共有峰,其中安徽、浙江的白芍饮片指纹图谱相互之间差异较小。结论白芍的指纹图谱特征性及专属性强,可用于白芍饮片的质量控制。     

海龙药材及其伪品的 HPLC 指纹图谱研究

  目的 建立海龙药材及伪品的指纹图谱,为其质量控制提供科学依据。 方法 样品用乙醇超声提取,采用 HPLC 分析。色谱条件 ： Waters C₁₈ 色谱柱, 柱温 40 ℃ ,测定波长 210 nm , 0.05% 磷酸 - 乙腈洗脱,测定时间 50 min 。应用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统 ” 对色谱化学成分信息进行分析。 结果 首次建立了 6 种海龙的指纹图谱。不同品种海龙的指纹图谱有明显差异,色谱聚类分析结果与性状鉴定结论一致。 结论 HPLC 指纹图谱简便、灵敏、专属性强,可用于海龙药材的质量控制。     

白亮独活的HPLC指纹图谱

目的: 建立白亮独活的HPLC指纹图谱分析方法并测定药材中佛手柑内酯及欧前胡素含量,为该药材的质量评价提供参考。方法: 收集10批白亮独活样品,采用HPLC建立指纹图谱方法,流动相水-甲醇梯度洗脱,检测波长为302 nm。利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"2004A版软件进行指纹图谱分析。结果: 10批白亮独活的HPLC指纹图谱相似度均>0.89,标定了11个共有峰。样品中佛手柑内酯、欧前胡素平均质量分数分别为0.117%和0.709%。结论: 该方法简单、重复性好,可用于白亮独活的品种鉴别和质量评价。     

不同炮制方法对毫白芍中芍药苷含量的影响

目的考察不同炮制方法对毫白芍饮片中芍药苷含量的影响，为稳定白芍的炮制工艺提供依据。方法采用RP—HPLC法，色谱柱：Agilent Eclipse XDB—C18（150mm×4．6mm，5μm）；流动相：乙腈-0．1％磷酸溶液（14：86）；流速：1．0mL／min；柱温：25℃；检测波长：230nm。结果样品平均回收率为99．195％，RSD=0．8％（n=6），4种不同炮制方法亳白芍饮片中芍药苷的含量分别为0．55％、2．70％、3．40％、3．25％。结论在白芍的炮制过程中，加热、加水浸泡、硫磺熏对白芍中芍药苷的含量影响较大。     

Distribution of Metabolites in Root Barks of Seven Tree Peony Cultivars for Quality Assessment Using NMR-based Metabolomics

Objective To determine the distribution of metabolites in the root barks of different tree peony cultivars for quality assessment. Methods Seven tree peony phenotypic cultivars with different colors were systematically analyzed using NMR-based metabolomics. Results A total of 16 metabolites from their methanol extracts were simultaneously identified and quantified, including one primary metabolite (sucrose) and 15 secondary ones (acetophenones, phenolics, monoterpene glycosides, flavonoids, and unsaturated fatty acids). The quantitative data indicated that sucrose (90-180 mg/g) and acetophenones (15-100 mg/g), and non-phenolics, monoterpene glycosides, flavonoids, and unsaturated fatty acids (2-15 mg/g) were the major metabolites in these tree peony cultivars. The significantly increasing levels of paeonoside with bioactivity were observed in “Xiangyu”, “Wujinyaohui”, “Roufurong”, “Yaohuang”, “Zhaofen”, “Doul?”, and “Yingrihong” in order. Opposite trends in the levels of paeonoside and paeonol were observed in “Xiangyu” and “Yingrihong”, suggesting that the changes of the secondary metabolites in plants were influenced by primary metabolites, such as sucrose/glucose, and the different physiological processes occurred in different tree peony cultivars. Conclusion “Yingrihong” with red flower has the highest medicine quality whereas “Xiangyu” with white flower has the worst one based on the content of paeonoside.     

运用R型因子与神经网络两种聚类分析方法对不同产地赤芍进行质量评价

目的:运用R型因子与神经网络两种聚类分析方法对收集到得不同产地来源的赤芍药材样品HPLC指纹图谱进行聚类分析,建立对赤芍进行质量判别的分类模型.方法:收集不同产地来源的赤芍样品40个,用HPLC法测定芍药苷含量,结合传统的经验对赤芍进行分类并获得HPLC图谱,运用获得R型因子与神经网络两种方法对不同产地赤芍进行指纹图谱的聚类分析,形成判别函数.结果:两种分析方法结果比较仅19,27,34号样品判别结果有所差异,相似度达91.4％.结论:两种聚类分类方法互相验证,所建立的模型能够为药材的质量评价提供一个快捷、准确、可行的鉴别方法.     

雷公藤药材HPLC指纹图谱的研究

 目的建立雷公藤药材的色谱指纹图谱。方法采用高效液相色谱法分析,色谱柱:Kromasil C₁₈(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-水(0.1%磷酸)进行梯度洗脱,柱温35℃,检测波长267nm,分析时间80min;流速1.0mL·min^-1,测定10批药材的色谱图,确立标准指纹图谱。结果指纹图谱标出雷公藤药材的29个共有峰,以化学对照品结合HPLC-MS鉴定了其中18个峰。结论该分析方法的稳定性、精密度、重现性较好,为雷公藤药材的质量控制提供了依据。     

大黄、赤芍对肝衰竭大鼠血清一氧化氮的影响

目的:探讨大黄、赤芍对肝衰竭大鼠血清NO的影响。方法:采用85%肝叶切除术构建大鼠肝衰竭肝再生模型,检测血清NOS、NO含量,观察肝细胞有丝分裂指数,并观察大鼠术后168h内存活率。结果:药物干预组及模型组血清中NOS、NO的峰值出现在术后12h,于术后36h出现个次峰值,药物干预组与模型组比较(P<0.01),大黄赤芍联合组与促肝细胞生长素组比较(P>0.05);模型组及药物干预组肝细胞有丝分裂于术后24h、48h出现2次高峰,药物干预组与模型组比较(P<0.05);成模后168h各组之间的存活率以大黄赤芍联合组和促肝细胞生长素组疗效最佳。大黄、赤芍具有促进肝细胞再生作用,其机理可能与其诱导血清NO的水平有关。     

刺五加药材根和茎HPLC的指纹图谱研究

 目的 建立刺五加药材根和茎的高效液相色谱(HPLC) 指纹图谱及绿原酸的含量测定方法。方法 选择不同产地刺五加根（6批）和茎（10批）,用Diamonsil C₁₈(4.6 mm×250 mm, 5 μm)色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸(含2.5%四氢呋喃)为流动相(梯度洗脱),检测波长340 nm,柱温为25 ℃,流速为0.8 mL·min^-1,分析时间为150 min。结果 不同产地的刺五加药材中绿原酸的含量差别较大;刺五加药材根中共标示出6个共有峰,茎中8个共有峰。结论 从整体上显示刺五加根和茎的特征,为刺五加的质量控制提供有效手段。     

5种发酵虫草菌丝类制剂的特征图谱及其模式识别研究

 目的 采用高效液相色谱-二极管阵列检测器,建立5种发酵虫草菌丝类制剂的核苷类成分特征图谱的质量控制方法。方法 采用色谱柱:Lichrospher RP-C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm),甲醇-水二元梯度洗脱模式,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长:260 nm,柱温为25 ℃,建立5种发酵虫草菌丝类制剂68批样品的核苷类成分特征图谱,同时指认了5个核苷类成分,并采用相似度分析和系统聚类分析方法对特征图谱数据进行模式识别研究。结果 采用系统聚类分析法对样品分析,百令胶囊、金水宝胶囊和心肝宝胶囊各自聚为一类,说明对于独家生产的品种质量差异小,样品质量较为一致。而多厂家生产的品种如至灵胶囊,样品的差异性较大,进一步分析表明,不同厂家的同一制剂质量存在着较大差异,甚至同一厂家不同批次的样品差异性也较大,应引起足够的重视。结论 所建立的发酵虫草菌丝类制剂的核苷类成分特征图谱的特征性和专属性强,方法简便、快速、可靠,可用于各发酵虫草菌丝制剂的质量控制及综合评价。     

苦玄参HPLC指纹图谱研究

 目的研究苦玄参的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法采用HPLC-DAD分析法,梯度洗脱,测定了10批苦玄参样品。色谱条件为:YMC J'sphere ODS-M80(4.6 mm×150 mm,4 μm)分析柱,柱温为35℃; 流动相A为乙腈;流动相B为1%醋酸水溶液。流动相A梯度洗脱(15%-45%乙腈),分析时间为65 min,时间为0,5,10,60, 65 min,A(%)为15,15,20,45,5,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为254 nm。结果10批苦玄参样品得到的指纹图谱有8个共有峰,通过与对照品的保留时间及紫外光谱比较,1,2,6,7,8号峰分别鉴定为顺式阿克苷、阿克苷、苦玄参苷I_B苦玄参苷Ⅳ和苦玄参苷I_A。结论建立的HPLC指纹图谱分析法能较好地反映苦玄参中三萜和苯乙醇苷两大药效部位,可用于苦玄参的质量控制。     

中药复方制剂仙灵骨葆胶囊HPLC指纹图谱研究

目的 建立中药复方仙灵骨葆胶囊的HPLC指纹图谱,对市售制剂进行质量控制。方法 采用C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm),以乙腈-水(各含体积分数为0.1%的甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速0.80 mL·min^-1,检测波长270 nm,柱温35 ℃;建立仙灵骨葆胶囊HPLC指纹图谱,运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件”对28批市售制剂进行相似度评价,通过比对化学分离对照品的保留时间对主要特征峰进行明确化学指认并初步确定组方中药来源。结果 建立的仙灵骨葆胶囊HPLC指纹图谱的专属性、精密度、重现性和稳定性均良好;28批市售制剂的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度值在0.952~0.995之间;覆盖该复方六味组方中药的27个主要特征峰得到明确的化学指认、指认峰面积约占总峰面积的70%。结论 上述建立的主要特征峰化学成分明确的HPLC指纹图谱基本全面反映该中药复方制剂中各味组方中药、多成分的整体特征,可以用于市售产品的质量评价。以上工作可为提高仙灵骨葆整体质量控制方法提供实验依据。