六味地黄汤对5/6肾切除大鼠肾间质纤维化的影响

目的观察六味地黄汤对5/6肾切除大鼠肾间质纤维化的拮抗作用和对肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）及其特异性受体c-Met表达的影响。方法 SD大鼠分为假手术组、模型组和六味地黄汤组,采用5/6肾切除法复制慢性肾间质纤维化模型。造模1周后,灌胃干预8周。观察残肾病理改变,采用免疫组化检测肾组织中HGF和c-Met蛋白的表达。结果模型组和六味地黄汤组残肾均出现肾间质纤维化,模型组更为严重;与假手术组相比,模型组HGF表达升高（P〈0.05）,六味地黄汤组表达也升高（P〈0.01）,六味地黄汤组HGF表达强于模型组（P〈0.05）;与假手术组相比,模型组和六味地黄汤组c-Met表达均升高（P〈0.01）,六味地黄汤组表达强于模型组（P〈0.01）。结论六味地黄汤可能通过促进5/6肾切除大鼠肾组织HGF及其受体c-Met的表达,减轻肾间质纤维化程度。     

排毒保肾丸对5/6肾切除大鼠肾纤维化的影响

目的观察排毒保肾丸对5/6肾切除大鼠肾纤维化的疗效并探讨其作用机制。方法将50只SD雄性健康大鼠按1∶1∶3比例随机分为正常组(10只)、假手术组(10只)、造模组(30只),假手术组只分离肾包膜不行肾切除,造模组建立5/6肾切除模型。收集大鼠24 h尿液,检测24 h尿蛋白定量(24 h urinary protein,24h UP);采血检测血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(serum creatinine,SCr)。根据血SCr水平再将30只造模组大鼠随机分为模型组、排毒保肾丸组、尿毒清颗粒组,每组10只。排毒保肾丸组和尿毒清颗粒组分别予排毒保肾丸[1.0 g/(kg·d)]和尿毒清颗粒[3.33 g/(kg·d)]溶于蒸馏水中灌胃,正常组、假手术组、模型组均予2 m L蒸馏水灌胃。均每日1次,共给药4周。观察给药过程中大鼠精神状态、活动度、体毛色泽、大便形状等一般情况和体重的变化。4周后收集大鼠24 h尿液,检测24 h UP;采血检测BUN、SCr、转化生长因子β1(transforming growth fator-β1,TGF-β1)、Ⅲ型前胶原(procollagen typeⅢ,PCⅢ)、Ⅳ型胶原(collagen typeⅣ,ColⅣ)、层粘连蛋白(laminin,LN)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN);处死大鼠,取左侧残余肾组织行病理检查,免疫组织化学法检测肾组织TGF-β1、FN蛋白表达量,实时荧光定量PCR检测肾组织TGF-β1、FN mRNA表达。结果与正常组比较,假手术组大鼠上述观察指标差异无统计学意义(P0.05);与假手术组比较,模型组大鼠一般情况较差,体重增长缓慢,24 h UP增加(P0.01),血清BUN、SCr、TGF-β1、PCⅢ、ColⅣ、LN、FN升高(P0.01),残肾病变重,肾组织TGF-β1、FN蛋白及TGF-β1、FN mRNA表达增加(P0.01);与模型组比较,排毒保肾丸组和尿毒清颗粒组大鼠一般情况较好,体重增长较快,血BUN、SCr下降(P0.01),24 h UP减少(P0.05),血TGF-β1、PCⅢ、ColⅣ、LN、FN降低(P0.05,P0.01),残肾病变轻于模型组,肾组织TGF-β1、FN蛋白及TGF-β1、FN mRNA表达减少(P0.01);与尿毒清颗粒组比较,排毒保肾丸组血SCr、FN及肾组织FN蛋白及FN mRNA表达降低(P0.05)。结论排毒保肾丸具有抗5/6肾切除大鼠肾纤维化的作用,通过基因转录和蛋白翻译两个水平下调TGF-β1、FN的表达是其作用机制之一。     

六味地黄汤对5/6肾切除大鼠肌酐、尿素氮及24h尿蛋白定量的影响

目的:观察六味地黄汤对5/6肾切除大鼠残肾的保护作用.方法:按照随机数字表法将72只SD雄性大鼠分为正常组(12只)、假手术组(12只)和手术组(48只).手术组行5/6肾切除术诱导大鼠肾衰模型,假手术组同期行两次手术,每次仅打开腹腔,暴露肾脏后,再将肾脏纳入腹中,缝合关腹.造模后3d,将造模成功的43只大鼠随机分为模型组(15只)、依那普利组(14只)和六味地黄汤组(14只),分别对各组大鼠进行干预灌胃8周.观察大鼠毛色、行为及死亡率;所有大鼠每两周固定时间称重,留取24h尿,检验24h尿蛋白定量;于第8周抽取腹主动脉血,留取血清,检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN).结果:六味地黄汤组大鼠体质量增长情况接近正常组;六味地黄汤长期使用可降低5/6肾切除大鼠尿蛋白和SCr水平,对BUN水平影响不大.结论:六味地黄汤能有效保护5/6肾切除大鼠残余肾功能,降低血肌酐水平,改善大鼠生存质量.     

慢肾康宁对肾间质纤维化大鼠的影响

目的 观察慢肾康宁对肾间质纤维化大鼠肾组织Smad2、P-smad2及SARA蛋白表达的影响。方法 选用健康雄性Wistar大鼠60只,腺嘌呤灌胃21 d建立肾间质纤维化模型,将其随机分为正常模型组和(按1 ml/100 g体质量给予生理盐水经口灌服)氯沙坦组,慢肾康宁高、中、低剂量组。于治疗第30天大鼠腹主动脉取血。生化检测血清肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量。行HE染色观察实验大鼠肾脏组织形态学改变并用Western blot检测Smad2、P-smad2及SARA表达水平。结果 模型组Scr、BUN和24 h MTP均明显高于正常组(P <0.05);各治疗组Scr、BUN和24 h MTP均明显低于模型组(P <0.05);慢肾康宁高剂量组与氯沙坦组Scr、BUN和24 h MTP差异均无统计学意义(P> 0.05);各治疗组与模型组比较,Smad2、P-smad2蛋白显著下降,SARA蛋白显著升高;慢肾康宁高剂量组SARA蛋白显著高于氯沙坦组(P <0.05)。结论 慢肾康宁可降低肾间质纤维化大鼠的Scr、BUN,减少24 h MTP,具有肾功能保护作...     

加味六味地黄汤对大鼠肾间质纤维化的干预机制

【目的】 探讨加味六味地黄汤对大鼠肾间质纤维化的干预机制。【方法】 将120只健康成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组、缬沙坦组等4组,4组组内再按7、14、28 d 3个时间点分组,每组10只。除假手术组,其他组别大鼠均采用结扎输尿管法构建单侧输尿管梗阻模型。假手术组除不结扎输尿管外其他手术步骤均与上述造模方法相同。成功造模后,中药组术后24 h给予加味六味地黄汤2.376 g·kg-1·d-1灌胃,缬沙坦组术后24 h给予缬沙坦30 mg·kg-1·d-1灌胃,假手术组和模型组均在术后 24 h 给予等体积生理盐水灌胃,每日 1 次,直至相应实验时间点处死。采用免疫组织化学法检测肾组织c-myc、纤维连接蛋白（Fn）的表达,蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测肾组织Wnt4、β-连环蛋白（β-catenin）、磷酸化糖原合成激酶 3β（p-GSK-3β）、磷酸化T细胞因子/淋巴增强因子（p-TCF/LEF）的表达。【结果】 与假手术组相同时间点比较,模型组大鼠肾组织Wnt4、β-catenin、p-GSK-3β、p-TCF/LEF、Fn和c-myc蛋白表达水平显著上调,差异均有统计学意义（P <0.01）;与模型组相同时间点比较,中药组和缬沙坦组大鼠肾组织Wnt4、β-catenin、p-GSK-3β、p-LEF/TCF、Fn和c-myc蛋白的表达水平下调,差异均有统计学意义（P < 0.05 或 P < 0.01）,且 2 个治疗组组间比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。【结论】 加味六味地黄汤具有抗肾间质纤维化作用,其机制可能与阻断Wnt4/β-catenin信号通路的活化,下调Fn和c-myc蛋白的表达有关。     

六味地黄汤干预肾纤维化作用机制的网络药理学分析

目的 基于网络药理学方法 及体内外实验探讨六味地黄汤(LWDHD)干预肾纤维化的潜在作用机制。方法 (1)通过TCMSP平台检索筛选LWDHD的活性成分及其作用靶点;通过GeneCards、OMIM、TTD数据库检索肾纤维化疾病相关靶点;利用R语言VennDiagram包对LWDHD活性成分靶点和肾纤维化疾病相关靶点取交集,得到共同(交集)靶点,即为LWDHD治疗肾纤维化的关键靶点;运用Cytoscape 3.9.1软件构建LWDHD治疗肾纤维化的“活性成分-关键靶点”网络,分析核心活性成分;通过STRING平台构建共同靶点蛋白互作(PPI)网络;分别通过DAVID数据库、R语言软件的Pathview包对共同靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析;采用AutoDock Vina软件对核心活性成分与核心靶点进行分子对接。(2)体内实验：将24只雄性SD大鼠随机分为4组：假手术组、模型组、LWDHD组(6.75 g·kg^-1)及依那普利组(10 mg·kg^-1),每组6只。采用单侧输尿管结扎术(UUO)建立肾纤维化大鼠模型。各组以相应药物灌胃给...     

析因设计探讨黄芩南五味子协同防治肝纤维化的作用

目的:评价黄芩、南五味子在防治肝纤维化方面所表现的相互作用。方法:将SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、黄芩提取物2g/kg、南五味子浸膏2g/kg以及黄芩提取物2g/kg+南五味子浸膏2g/kg,每天灌胃给药一次,连续4周,对照组和模型组则给以等体积的0.5%CMC;同时,除对照组外,其余各组动物均腹腔注射二甲基亚硝胺(DMN)10mg/kg,每天1次,每周连续3d,持续4周。末次给药后24h,取血清检测总胆红素(T-Bi L)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP),谷氨酰转移酶(γ-GT)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)等生化指标。取肝脏称其重量,测定羟脯氨酸(Hy P)含量;取同一叶肝脏分别进行HE、Masson染色观察组织形态变化和胶原堆积情况。结果:DMN大鼠血清TP和ALB显著降低,T-Bil、ALP、γ-GT、AST、ALT以及肝脏组织Hy P水平都显著升高;HE染色显示肝脏纤维化明显,Masson染色显示胶原容积百分比显著增加,与对照组比较有统计学差异。南五味子浸膏2g/kg可显著对抗DMN引起的肝脏指数降低、可显著增加DMN大鼠血清ALB,显著降低DMN大鼠血清T-Bi L、γ-GT、AST和ALT活性。其肝脏纤维化病变以及胶原堆积均明显减轻;黄芩提取物2g/kg可显著对抗DMN肝脏胶原纤维的生成;黄芩提取物2g/kg+南五味子浸膏2g/kg可显著对抗DMN引起的肝脏指数降低,降低DMN大鼠血清T-Bi L、AST、ALT、γ-GT和肝脏组织Hy P,显著改善其肝脏病理组织结构以及胶原堆积。方差分析结果显示南五味子浸膏2g/kg、黄芩提取物2g/kg在增加DMN大鼠血清ALB水平和降低其肝脏组织Hy P方面表现出显著的协同增效作用。结论:研究结果表明黄芩与南五味子配伍能协同防治DMN诱导的大鼠肝纤维化,其协同作用机理值得进一步探讨。     

六味地黄汤及其组方对小鼠血糖和肝糖元的影响

讨论了六味地黄汤及其组方的水煎剂对正常小鼠血糖和肝糖元的影响。三补、山茱萸加丹皮和山药加茯苓可降低血糖水平;全方、三补、熟地加泽泻及山茱萸加丹皮可增加肝糖元的含量。对六味地黄汤对糖代谢的影响及其配伍机理进行了初步的探讨。     

六味地黄汤对慢性肾衰竭大鼠线粒体凋亡途径的影响

目的:观察六味地黄汤对慢性肾衰竭大鼠线粒体凋亡途径的影响。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为正常组(10只)、假手术组(10只)及手术组(25只),手术组进行5/6肾切除造模,造模成功后再随机分为模型组及治疗组。治疗组予以6.75 g·kg~(-1)六味地黄汤灌胃,其余3组予以等体积蒸馏水灌胃,各组均给药8周。检测各组大鼠血肌酐、血尿素氮及尿蛋白定量水平;苏木素-伊红(HE),马松(Masson)染色观察肾组织形态学变化;电镜观察肾小管上皮细胞中线粒体超微结构变化;原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测肾组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),细胞色素C(Cyt C),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白及mRNA的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血肌酐、尿素氮及尿蛋白定量水平显著升高(P0.01),治疗组较模型组上述指标得到改善(P0.05);正常组及假手术组大鼠肾脏未观察到明显病理变化及线粒体结构破坏,模型组存在不同程度的肾小管萎缩和扩张,间质性炎性细胞浸润和胶原沉积,以及线粒体肿胀和断裂,治疗组较模型组上述病灶明显减轻;与正常组比较,模型组细胞凋亡显著增多(P0.01),Bax,Caspase-3表达显著升高(P0.01),Bcl-2表达显著降低(P0.01);与模型组比较,治疗组细胞凋亡显著减少(P0.01),Bax,Caspase-3表达显著降低(P0.01),Bcl-2表达显著升高(P0.01);正常组及假手术组Cyt C主要定位在线粒体,模型组细胞质中Cyt C表达显著增加(P0.01),治疗组较模型组细胞质中Cyt C表达显著减少(P0.01)。结论:六味地黄汤可减轻肾纤维化,延缓肾功能进展,其机制可能是通过保护线粒体结构及调控线粒体凋亡途径相关蛋白的表达减少细胞凋亡。     

抗纤灵对5/6肾切除诱导的慢性肾纤维化小鼠Akt-mTOR信号通路的影响

  目的：观察抗纤灵对5/6肾切除诱导的慢性肾脏纤维化小鼠磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)及Akt,mTOR mRNA表达的影响,从Akt-mTOR信号通路角度探讨抗纤灵的作用机制  方法：C57BL/6J雄性小鼠采用5/6肾切除制备慢性肾脏纤维化模型。2周后根据肌酐水平将手术组小鼠分为模型组、雷帕霉素组和抗纤灵组,同时设立假手术组,每组10只。雷帕霉素组、抗纤灵组分别给予雷帕霉素(0.8 μg/g)、抗纤灵(20 g/kg)每天0.5 ml灌胃治疗,模型组和假手术组灌胃等量蒸馏水。连续用药8周后处死小鼠,检测各组小鼠肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24小时尿蛋白(24 h UP)含量;采用蛋白质印迹法(Western blotting)、RT-PCR检测肾脏组织中p-Akt、p-mTOR蛋白及Akt、mTOR mRNA的表达  结果：与假手术组比较,模型组Scr、BUN、24 h UP、p-Akt、p-mTOR蛋白及Akt、mTOR mRNA显著升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,雷帕霉素组、抗纤灵组Scr、UN、24 h UP、 p-Akt、p-mTOR蛋白及Akt, mTOR mRNA均有所降低(P<0.05, P<0.01)。雷帕霉素组与抗纤灵组比较,在降低Scr、24 h UP方面,抗纤灵组明显优于雷帕霉素组(P<0.05);在降低p-mTOR蛋白及mTOR mRNA方面,雷帕霉素优于抗纤灵组(P<0.05)  结论：抗纤灵可能通过调节Akt-mTOR信号通路,对肾纤维化有一定的改善作用。     

六味地黄汤对大鼠巨噬细胞Ia抗原表达的影响

六味地黄汤能够明显提高正常大鼠腹腔Ｍψ表面Ｉａ抗原表达的阳性率，强度与阳性对照绵人参皂甙组相似，该方还能够使ＣＯＲＴ肌肉注射所致“阴虚”模型大鼠ＭψＩａ抗原表达率的抑制得以明显改善。方中三味补药六味地ＭψＩａ抗原表达的主要成功，三味泻药单用对正常及模型大鼠ＭψＩａ的抗原表达均无直接影响。但民三配伍后同能够提高其对ＭψＩａ抗原表达的阳性率。     

六味地黄汤对大鼠巨噬细胞Ia抗原表达的影响

六味地黄汤能够明显提高正常大鼠腹腔Ｍφ表面Ｉａ抗原表达的阳性率，强度与阳性对照的人参皂甙组相似；该方还能够使ＣＯＲＴ肌肉注射所致“阴虚”模型大鼠ＭφＩａ抗原表达率的抑制得以明显改善。方中三味补药是六味地黄汤促进ＭφＩａ抗原表达的主要成分，三味泻药单用对正常及模型大鼠的ＭφＩａ抗原表达均无直接影响，但与三补配伍后则能够明显提高其对ＭφＩａ抗原表达的阳性率     

六味地黄汤不同配伍对马钱素药物动力学的影响

目的研究六味地黄汤不同配伍对马钱素药物动力学的影响。方法小鼠一次灌胃六味地黄汤、三补汤(山茱萸、山药、地黄)、一补一泄汤(山茱萸、丹皮)、山茱萸汤后,用建立的 HPLC 法测定吸收入血的马钱素血药浓度-时间曲线,用梯形法计算血药浓度-时间曲线下面积(AUC),比较马钱素的吸收速度及程度。结果以 C_(max)/AUC、T_(max)和 t_(1/2ka)为吸收速度指标,以一补一泻汤最快,其次为三补汤及全方汤,单味药山茱萸汤最慢;以 AUC 及 C_(max)为吸收程度指标,单味药山茱萸汤吸收程度最高,一补一泻汤最低。结论六味地黄汤不同配伍会影响马钱素药物动力学。     

六味地黄汤对佐剂性关节炎大鼠脾脏细胞表达细胞因子的影响

目的 :观察六味地黄汤 (LW)对佐剂性关节炎 (AA)大鼠脾脏辅助T细胞 (Th)的作用 ,并与免疫抑制剂环磷酰胺 (Cy)、环孢素A(CsA)进行比较。 方法 :运用定量PCR技术 ,检测AA大鼠脾脏T淋巴细胞因子IFN-γ ,IL-2 ,IL-4和IL-10的mRNA的表达水平。结果 :AA大鼠脾淋巴细胞IL-2mRNA表达水平与对照组相比有增高趋势 ;IFN-γ ,IL-4和IL-10mRNA的表达水平则明显降低。口服LW对AA大鼠脾细胞的表达水平则具有明显提高作用 ,与Cy和CsA相比具有明显不同的特点。 结论 :LW可能对AA大鼠脾脏表达的细胞因子水平有调节作用 ,提示LW可纠正Th1/Th2亚群功能的平衡紊乱。     

六味地黄汤和四物汤中诸元素的含量及煎出率

研究了六味地黄汤中和四物汤中各单味药的铜、锌、铁、钙、镁等元素的含量及煎出率,并与复方煎出率作了比较。实验结果表明,不同生药中诸元素的煎出率有很大差异,各生药中元素含量与煎剂中的含量不一定成正比。     

六味地黄汤中抗癌元素的研究

用荧光分光光度法测定了六味地黄汤中六味药材及煎剂,五种不同配伍的煎剂和全方煎剂的硒含量。结果表明,地黄对硒具有富集作用。硒在各药材通煎液中的溶出率约为30～40%。     

补阳还五汤合六味地黄汤对局灶性脑缺血大鼠脑组织bFGF表达的影响

目的观察补阳还五汤合六味地黄汤对局灶性脑缺血大鼠脑组织碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）表达的影响及反方是否有协同作用。方法采用改良Haruo Nagasawa法复制老龄大鼠脑缺血模型,随机分为补阳还五汤合六味地黄汤组（即健脑通络汤组）、六味地黄汤组、补阳还五汤组、模型组、假手术组,观察各组术后24 h、72 h、7 d后脑组织bFGF的表达。结果六味地黄汤和补阳还五汤合用能协同提高急性持续脑缺血大鼠bFGF的表达,其作用优于单用,其中单用补阳还五汤优于单用六味地黄汤。结论通过诱导内源性bFGF的表达,可能是健脑通络汤进行脑保护的机制,补阳还五汤与六味地黄汤合用优于单用补阳还五汤。     

大鼠小肠对四物汤、四君子汤和六味地黄汤中铁、锌、铜的吸收

微量元素吸收;;四物汤;;四君子汤;;六味地黄汤