三七、黄芪对2型糖尿病大鼠肾脏MMP-9表达的影响

糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy，DN）是糖尿病最常见和最严重的并发症之一，其主要病理改变是肾小球基底膜增厚和以肾小球系膜区为主的细胞外基质（ExtracellularMatrlx，ECM）沉积，基质金属蛋白酶-9（Matrix Metalloproteinase-9，MMP-9）能特异性降解明胶，在肾脏主要由系膜细胞分泌，与DN的发生、发展关系密切。     

Ⅳ型胶原在糖尿病肾病中的作用

糖尿病肾病是糖尿病最常见和最严重的慢性并发症之一，其病理特点是肾基底膜增厚和以肾小球系膜区为主的细胞外基质积聚，导致弥漫性或结节性肾小球硬化，出现蛋白尿、肾功能衰竭等，而基底膜和细胞外基质由胶原、非胶原糖蛋白和蛋白多糖构成，在胶原成分中，最重要的是Ⅳ型胶原。本文作者从Ⅳ型胶原的分子结构、分布、生物功能及其在糖尿病肾病发展过程中的作用作一简要概述。     

灵芝对糖尿病大鼠肾组织MMP-2、MMP-9和IV型胶原表达的影响

目的:观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)在糖尿病大鼠肾组织中的表达及灵芝的干预作用.方法:40只雄性SD大鼠随机分为正常时照组(C组)、糖尿病未治疗组(DM组)、糖尿病灵芝(1.2g·k-1·d-1)治疗组(GL组),用免疫组化方法(SP法)检测治疗后各组大鼠肾皮质MMP-2、MMP-9及Ⅳ-C的表达,同时进行光镜、透射电镜观察各组大鼠肾皮质病理改变.结果:DM组大鼠肾小球MMP-2、MMF-9蛋白表达较C组明显降低,Ⅳ-C蛋白表达明显升高,出现糖尿病肾病典型的病理改变.GL组MMP-2、MMP-9蛋白较DM组表达明显升高,Ⅳ-C表达较DM组明显降低,病理改变好转.结论:灵芝通过上调MMP-2、MMF-9蛋白表达,减少细胞外基质Ⅳ-C积聚而对糖尿痛大鼠起到肾脏保护作用.     

灵芝对糖尿病大鼠肾组织MMP-2、MMP-9和Ⅳ型胶原表达的影响

目的:观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)在糖尿病大鼠肾组织中的表达及灵芝的干预作用.方法:40只雄性SD大鼠随机分为正常时照组(C组)、糖尿病未治疗组(DM组)、糖尿病灵芝(1.2g·k-1·d-1)治疗组(GL组),用免疫组化方法(SP法)检测治疗后各组大鼠肾皮质MMP-2、MMP-9及Ⅳ-C的表达,同时进行光镜、透射电镜观察各组大鼠肾皮质病理改变.结果:DM组大鼠肾小球MMP-2、MMF-9蛋白表达较C组明显降低,Ⅳ-C蛋白表达明显升高,出现糖尿病肾病典型的病理改变.GL组MMP-2、MMP-9蛋白较DM组表达明显升高,Ⅳ-C表达较DM组明显降低,病理改变好转.结论:灵芝通过上调MMP-2、MMF-9蛋白表达,减少细胞外基质Ⅳ-C积聚而对糖尿痛大鼠起到肾脏保护作用.     

益肾方对糖尿病大鼠肾脏Ⅳ型胶原、转化生长因子-β_1基因表达的影响

肾小球系膜区扩张、细胞外基质(ECM)积聚是糖尿病肾病(DN)的主要病理特征,人与动物发生高血糖后肾小球Ⅳ型胶原、转化生长因子β_1(TGF-β_1)表达增强,Ⅳ型胶原增加与肾小球细胞外基质(ECM)积聚相关,TGF-β_1则可促使Ⅳ型胶原表达增加,参与 DN 病理形成过程,而抑制 TGF-β_1、Ⅳ型胶原的过度表达可延缓 DN 的进展。我们以往研究表明益肾方具有降低糖尿病(DM)大鼠血糖,减少尿微量蛋白排出,减轻肾脏病理变化的作用。本实验将进一步观察益肾方对糖尿病大鼠早期肾脏Ⅳ型胶原、TGF-β_1基因表达的影响,旨在探讨益肾方对 DN发生、发展的防治作用。     

肾乐和法安明防治大鼠肾小球硬化机制的探讨

目的：观察肾乐和法安明（达肝素钠）对5/6肾切除大鼠残肾组织中Ⅳ型胶原和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9)/组织金属蛋白梅抑制物-1（tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1）基因表达的影响，旨在探讨两种药物对细胞外基质降解酶系MMP-9/TIMP-1的影响，从而进一步提示其减轻肾小球硬化的机制。方法：用5/6肾切除的方法诱导大鼠局灶节段性肾小球硬化模型并给予肾乐（4g·kg^-1·d^-1)及法安明（1000IU·kg^-1·d^-1）治疗20周，观察大鼠血压、蛋白尿、血肌肝、血脂和残余肾组织的病理改变程度，以及残肾组织Ⅳ型胶原、MMP-9的沉积和TIMP-1基因的表达。结果：肾乐及法安明治疗组显著降低5/6肾切除大鼠血压、蛋白尿、血肌肝、血脂和减轻肾组织的病理改变程度，并且显著减少残肾组织中Ⅳ型胶原、MMP-9沉积以及下调Ⅳ型胶原、MMP-9/TIMP-1的基因表达；定量分析结果显示，与5/6Nx组比较，肾乐组和法安明组MMP-9的表达量分析下调了30.0%、28.5%TIMP-1的表达量分别下调了59.3%、55.0%。结论：肾乐和法安明可能通过调节MMP-9/TIMP-1的基因表达，减轻肾小球重塑过程中细胞外基质的异常代谢和积聚，促进了细胞外基质的降解，这可能是肾乐和法安明防治肾小球硬化的重要作用机制之一。     

肾络宁对膜性肾病小鼠基质金属蛋白酶-9及白介素-10的影响

目的:观察辛通畅络法肾络宁对膜性肾病(MN)模型小鼠基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、白介素-10 (IL-10)的影响。方法:实验Balb/c小鼠采用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导膜性肾病模型,分为模型组、肾络宁组和MMP-9基因敲除组,另设空白对照组,其中基因敲除组于造模前行MMP-9基因敲除。实验以肾络宁为治疗药物,于实验第0周、第6周末检测各组小鼠尿蛋白,血清IL-10、MMP-9的变化情况。结果:治疗6周后,模型组和肾络宁组、基因敲除组小鼠均出现不同程度的尿蛋白排泄量增加,其中肾络宁组、基因敲除组较模型组小鼠尿蛋白排泄量减少;MMP-9基因敲除组小鼠MMP-9表达显著降低,肾络宁组和模型组有不同程度升高,其中肾络宁组MMP-9表达较模型组降低;模型组、肾络宁组、基因敲除组IL-10表达均匀不同程度降低,肾络宁组、基因敲除组高于模型组(P﹤0.05)。结论:肾络宁对MN模型小鼠具有减少尿蛋白排泄的作用,其机制可能与调节IL-10及MMP-9的表达相关。     

扶正化瘀方对纤维化肝脏MMP-2活性及Ⅳ型胶原表达的影响

目的:探讨扶正化瘀方影响基质金属蛋白酶-2活性和Ⅳ型胶原蛋白表达的抗肝纤维化作用机制。方法:二甲基亚硝胺腹腔注射4周诱导大鼠肝纤维化模型,成模后治疗组以扶正化瘀方灌胃4周。检测血清肝功能、肝脏病理学、羟脯氨酸含量;免疫组织化学方法检测肝组织Ⅳ型胶原表达;Western印迹法分析肝组织Ⅳ型胶原、基质金属蛋白酶-2/9(matrix-metalloproteinases-2,MMP-2/9)、金属蛋白酶组织抑制物-2(tissue inhibitors of metalloproteinase-2,TIMP-2)表达水平;明胶酶图法检测肝组织MMP-2/9活性。结果:与正常大鼠比较,模型大鼠血清肝功能异常、肝组织炎症明显、肝组织Ⅳ型胶原表达与沉积增加,TIMP-2蛋白表达增加,MMP-2蛋白表达变化不明显,而MMP-2活性水平明显上升。扶正化瘀方显著减轻肝脏炎症和胶原沉积;减少Ⅳ型胶原蛋白表达和沉积;降低TIMP-2蛋白表达;抑制MMP-2活性。结论:扶正化瘀方可通过抑制肝脏Ⅳ型胶原病理增生沉积、下调MMP-2活性水平、减轻肝组织的破坏与重构而发挥抗肝纤维化的作用。     

通络益肾方对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞MMP-9/TIMP-1和TGF-β1表达的影响

目的观察通络益肾方对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞增殖、细胞外基质调控系统MMP-9/TIMP-1、TGF-β1表达的影响,探讨其防治糖尿病肾病的可能机制。方法以体外培养的大鼠肾小球系膜细胞为研究对象,将培养的肾小球系膜细胞分为空白对照组、高糖培养组(高糖组)、通络益肾方高、中、低剂量组及西药对照组,用大鼠含药血清给药,分别给予相应处理48 h后,采用四甲偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,ELISA法检测细胞培养上清液TGF-β1、MMP-9和TIMP-1的水平。结果与空白对照组比较,高糖组肾小球系膜细胞增殖明显(P<0.01),上清液中TGF-β1和TIMP-1水平显著增加,MMP-9水平减少(均P<0.01);通络益肾方高、中、低剂量均能明显抑制肾小球系膜细胞增殖(P<0.01或P<0.05),下调TGF-β1和TIMP-1表达,上调MMP-9表达(P<0.05或P<0.01),尤以高剂量组效果最佳,呈剂量依赖性;西药对照组上述指标表达水平和中药中剂量组相当(P>0.05)。结论通络益肾方可能通过抑制肾小球系膜细胞增殖和下调TGF-β1、促进细胞外基质的降解而拮抗糖尿病肾病肾小球硬化,发挥其肾保护作用。     

辛通畅络法对膜性肾病小鼠基质金属蛋白酶-9及肿瘤坏死因子-ɑ 的影响

目的:观察辛通畅络法中药复方肾络宁对膜性肾病(MN)模型小鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:实验Balb/c小鼠采用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导膜性肾病模型,分为模型组、肾络宁组和MMP-9基因敲除组,另设空白对照组,其中基因敲除组于造模前行MMP-9基因敲除。实验以以中药复方肾络宁为治疗药物,于实验第0周、第6周末检测各组小鼠尿蛋白,血清MMP-9、TNF-α的变化情况。结果:治疗6周后,模型组和肾络宁组、基因敲除组小鼠均出现不同程度的尿蛋白排泄量增加,其中肾络宁组、基因敲除组较模型组小鼠尿蛋白排泄量减少;MMP-9基因敲除组小鼠MMP-9表达显著降低,肾络宁组和模型组有不同程度升高,其中肾络宁组MMP-9表达较模型组降低;模型组、肾络宁组、基因敲除组TNF-α表达均匀不同程度升高,肾络宁组、基因敲除组低于模型组。结论:辛通畅络法中药复方肾络宁对MN模型小鼠具有减少尿蛋白排泄的作用,其机制可能与调节TNF-α及MMP-9的表达相关。