活血化瘀、软坚散结法对子宫内膜异位症自然杀伤细胞活性影响的实验研究

目的　观察活血化瘀、软坚散结法 (代表方为妇痛宁颗粒 )对大鼠子宫内膜异位症模型自然杀伤 (NK)细胞活性的影响 ,分析其获效机制。方法　采用手术移植法制备大鼠子宫内膜异位症模型。实验共分 6组 ,即正常对照组、模型对照组和妇痛宁高、中、低剂量组及丹那唑组 ,每组 1 0只 ,观察 6组脾脏NK细胞活性。结果　模型对照组大鼠脾脏NK细胞活性显著低于正常对照组 (P <0 .0 1 )。妇痛宁高、中、低剂量组能够明显提高模型大鼠的脾脏NK细胞活性 ,与模型对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ,其中中剂量组疗效明显优于高剂量组 (P <0 .0 5 )。结论　子宫内膜异位症大鼠模型存在NK细胞功能异常。活血化瘀、软坚散结法的代表方妇痛宁颗粒冲剂对子宫内膜异位症模型大鼠脾脏NK细胞活性具有显著的调整作用 ,提示可能通过提高NK细胞活性达到治疗子宫内膜异位症的目的。     

针刺疗法对子宫内膜异位症模型鼠免疫功能的影响

目的:探讨针刺疗法治疗子宫内膜异位症的免疫学机理。方法:建造SD大鼠EMT模型。30只大鼠随机分为空白对照、模型对照、针刺治疗共3组。并监测各组大鼠血清免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM);脾脏T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8)水平;及NK细胞、IL-1、IL-6的活性。结果:针刺疗法能抑制增强的体液免疫反应,改善细胞免疫功能,提高NK细胞活性,降低血清IL-1、IL-6分泌水平。结论:针刺疗法能较好调节子宫内膜异位症紊乱的免疫机能。     

活血化瘀法对慢性盆腔炎大鼠免疫调节的实验研究

目的：探讨活血化瘀方剂对慢性盆腔炎（CPID）模型大鼠T 细胞亚群和红细胞免疫功能的影响。方法：75 只Wistar 大鼠,用混合菌加机械损伤造模法建立CPID 大鼠模型。将大鼠分为正常组、假手术组、模型组、桂枝茯苓胶囊组、少腹逐瘀胶囊对照组、金刚藤胶囊对照组,桂枝茯苓胶囊对照组、少腹逐瘀胶囊组、金刚藤胶囊对照组分别给予相应药物灌胃。检测各组大鼠脾脏CD3+、CD4+、CD8+ T 细胞以及CD4+CD25+调节性T 细胞（Treg）数量百分比,血红细胞C3b 受体花环率（RBC-C3bRR）及红细胞免疫复合物花环率（RBC-ICR）。结果：各组药物均能提高模型鼠CD3+、CD4+ T 细胞数量百分比及CD4 /CD8 T 细胞比值（P<0.05）,均能降低CD8+ T 细胞数量百分比（P<0.05）。桂枝茯苓胶囊能明显降低模型大鼠异常升高的CD4+CD25+ Treg 数量百分比（P<0.05）。桂枝茯苓胶囊及少腹逐瘀胶囊使模型大鼠RBC-C3bRR 升高（P<0.05）,RBC-ICR 降低（P<0.05）。结论：活血化瘀方通过调控T 细胞亚群和红细胞的免疫功能,达到治疗CPID 的目的。     

黄芩素治疗子宫内膜异位症的作用研究

目的观察黄芩素对大鼠子宫内膜异位症防治作用及其机制。方法采用手术移植法制备大鼠子宫内膜异位症模型,大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和黄芩素高、低剂量组,测定大鼠的血清TNF-α,IL-6,IL-8含量及脾脏NK细胞活性,采用免疫组织化学的方法检测异位内膜标本中Bcl-2,ICAM-1的表达。结果黄芩素治疗组与模型组相比血清TNF-α,IL-6,IL-8活性明显降低,脾脏NK细胞活性显著增高,异位内膜标本中ICAM-1,Bcl-2表达明显下降。结论黄芩素对子宫内膜异位症大鼠具有治疗作用,其作用机制可能与其抑制TNF-α,IL-6,IL-8产生,抑制ICAM-1,BcI-2的表达以及增强脾脏NK细胞活性有关。     

通络汤对慢性盆腔炎大鼠免疫系统和细胞功能调节的实验研究

目的:观察通络汤对慢性盆腔炎大鼠血清IL-8、IL-10、TNF-α含量及子宫内膜中Caspase-3、NF-κB蛋白表达的影响。方法:90只雌性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、桂枝茯苓胶囊组及通络汤低、中、高剂量组,大鼠慢性盆腔炎模型通过苯酚胶浆复制而成,给药15 d,取子宫组织,观察病理组织学改变,ELISA法检测血清中IL-8、IL-10、TNF-α含量,免疫组织化学法检测子宫内膜组织中Caspase-3、NF-κB蛋白表达,流式细胞术检测血清中CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)百分比。结果:与模型组比较,通络汤中、高剂量组及桂枝茯苓丸组血清中IL-10含量和子宫内膜组织中Caspase-3的表达显著升高,血清中IL-8、TNF-α含量及子宫内膜组织中NF-κB表达显著降低(P0.05或P0.01)。通络汤各剂量组及桂枝茯苓丸组CD4+CD25+Treg百分比显著降低(P0.05或P0.01)。结论:通络汤对慢性盆腔炎大鼠具有保护作用,可能与调节机体免疫系统,促进细胞凋亡有关。     

内异消癥汤对子宫内膜异位症大鼠CD_4~+及CD_8~+ T细胞表达的影响

目的探讨内异消癥汤对子宫内膜异位症模型大鼠CD4+、CD8+T细胞表达的影响。方法将47只大鼠随机分为对照组,模型组和内异消癥汤高、低剂量组,除对照组外均采用大鼠子宫组织自体移植手术制作子宫内膜异位症模型,灌胃给药4周后用免疫组化方法检测大鼠子宫内膜异位移植物局部CD4+、CD8+T细胞表达。结果与模型组相比,低剂量组CD4+表达显著降低(P<0.05),高、低剂量组CD8+的表达强度降低更显著(P<0.01);高、低剂量组的CD4+/CD8+比值较模型组增高,低剂量组比值增高尤为明显;高、低剂量组之间CD4+、CD8+表达比较无显著差异(P>0.05)。结论内异消癥汤能改善大鼠子宫内膜异位移植物局部组织免疫学变化,降低CD4+及CD8+表达,并有提高CD4+/CD8+比值的趋势,可能通过此途径达到治疗效果。     

理气补气与补气中药对于大运动量训练后免疫功能恢复治疗的比较研究

目的 :比较两种中药———理气补气中药组方与单纯补气中药对长期大运动量训练大鼠免疫功能的影响。方法 :主要观察了 4 0只SD大鼠 ,经过 5周的大强度训练以及理气补气中药或补气中药治疗后 ,外周血T细胞亚群、NK细胞活性、白细胞介素 6浓度的变化 ,以及体外实验时 ,实验动物血清对正常小鼠NK细胞杀伤活性的影响。大鼠经过 5周的大强度训练后 ,被断头处死 ,收集血清、外周血和脾脏单细胞悬液并分别测定。结果 :强化训练组大鼠的白细胞介素 6的浓度显著升高 ,NK细胞的数目和活性 ,以及T细胞亚群CD4 /CD8 细胞比例都有比较明显的下降趋势。体外实验强化训练组大鼠的血清对正常小鼠NK细胞杀伤活性有明显抑制作用。结论 :理气补气中药可以显著提高强化训练组大鼠的T细胞亚群CD4 /CD8 细胞比例 ,NK细胞的活性 ,显著降低强化训练大鼠的血清对于正常小鼠NK细胞杀伤活性的抑制作用。补气中药可以显著提高T细胞亚群CD4 /CD8 细胞比例 ,增加外周血中NK细胞的数目 ,显著抑制长期跑台训练引起的白细胞介素 6浓度的升高。     

桂枝茯苓胶囊对大鼠子宫内膜异位症异位内膜组织中MCP-1和ICAM-1 mRNA的影响

目的:研究桂枝茯苓胶囊对大鼠子宫内膜异位症(EMs)异位内膜组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),细胞黏附分子-1(ICAM-1)在蛋白水平和转录水平的影响。方法:改进制作大鼠EMs动物模型,ig桂枝茯苓胶囊0.256,1.024 g.kg-1,28 d后取子宫内膜,采用免疫组化法检测内膜组织中MCP-1,ICAM-1的分布和表达;采用RT-PCR检测异位内膜组织中MCP-1,ICAM-1 mRNA的表达。结果:桂枝茯苓胶囊可降低大鼠子宫内膜异位内膜组织中MCP-1,ICAM-1的表达;高、低剂量组可使MCP-1,ICAM-1 mRNA水平显著下降(P<0.01),两剂量之间无显著性差异。结论:桂枝茯苓胶囊可降低EMS异位内膜组织中MCP-1,ICAM-I的表达,降低其mRNA的表达。     

三棱丸对子宫内膜异位症大鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的:观察三棱丸(SLW)对子宫内膜异位症大鼠T淋巴细胞亚群的影响.方法:采用大鼠自体子宫内膜移植建立子宫内膜异位症(内异症)大鼠模型.将造模成功大鼠随机分为模型对照组、孕三烯酮组和SLW高、中、低剂量组,另设正常对照组.连续给药4周后,测量异位内膜体积,流式细胞仪检测大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4 和CD8 .结果:与模型对照组比较, 5.0g/kg·d、2.5 g/kg·d、1.25 g/kg·d SLW治疗组使异位内膜体积明显缩小,CD4 及CD4 / CD8 比值增高,CD8 降低.结论:三棱丸可增强子宫内膜异位症大鼠细胞免疫功能,并可能通过此途径达到治疗目的.     

盆宁颗粒免疫调节作用的实验研究

目的:观察盆宁颗粒的免疫调节作用.方法:建立混和菌感染引起的盆腔炎大鼠模型,随机分组并给药,测定T细胞亚群,NK细胞活性;并进行碳廓清实验测定小鼠网状内皮系统的吞噬功能.结果:与模型组比较,各用药组均能明显提高T淋巴细胞CD4亚群含量,降低T淋巴细胞CD8亚群含量,显著提高CD4+/CD8+值,显著增强天然杀伤细胞(NK细胞)的活性,统计学分析有非常显著性差异(P＜0.01),其中盆宁颗粒高剂量组与庆大霉素组、康妇消炎栓组比较亦有显著性差异(P＜0.05),与正常组比较无统计学意义(P＞0.05).与空白组比较,各用药组均能明显增强小鼠网状内皮系统吞噬功能(P＜0.01).结论:盆宁颗粒对免疫功能有明显调节作用.     

Immunological regulation of Chinese herb Guizhi Fuling Capsule on rat endometriosis model

Aim of the study

To investigate the immunological regulation of Guizhi Fuling Capsule (GZFLC) on rat endometriosis.

Materials and methods

Twenty-seven rats, in which endometriotic implants were induced by transplanting autologous uterine tissue to the peritoneum, were randomly divided into three groups equally: (1) the GZFLC group of low dose (480 mg/kg/day); (2) the GZFLC group of high dose (1920 mg/kg/day); and (3) the model group(saline solution). Another 10 rats were treated as sham operation group. After rats were treated for four weeks, we examined the alterations of implants volume, the percentage of CD4⁺ T lympholeukocyte, the activity of NK cell and the expression of cytokines (MCP-1 and ICAM-1) on each group.

Results

Statistical analysis showed that posttreatment volumes were significantly reduced compared with pretreatment in GZFLC groups, whereas there was no significant change in the model group. The percentage of CD4⁺ T lympholeukocyte and the activity of NK cell in GZFLC groups significantly increased to the level of the sham group compared with the model. RT-PCR and immunohistochemistry showed that the endometria of the sham operation and treatment groups were similar on expression level of MCP-1 and ICAM-1.

Conclusions

GZFLC plays an important role in the regression of endometriotic implants by immunological regulation in the rat model.     

五子衍宗汤对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫调节作用

目的:研究五子衍宗汤对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫调节作用。方法:将实验用Balb/C小鼠32只,雌雄各半,随机分为空白组、模型组、五子衍宗汤低、高剂量组,每组8只。空白组ip生理盐水,其余各组小鼠ip环磷酰胺50mg.kg-1.d-1建立免疫低下模型。空白组和模型组灌胃生理盐水,五子衍宗汤低、高剂量组分别按照2,4 g.kg-1剂量灌胃五子衍宗汤。给药35 d后,观察五子衍宗汤对模型小鼠外周血象、体重、脾脏指数、骨髓有核细胞数量和脾脏淋巴细胞数量的影响,流式细胞术检测脾脏中CD3+,CD4+,CD8+,CD19+,NK细胞的绝对数量。结果:造模结束后,模型组小鼠外周血白细胞数、脾细胞绝对数量、相对数量、骨髓有核细胞数量及脾脏中CD3+,CD4+,CD8+,CD19+,NK细胞的数量低于空白组,差异有统计学意义(P﹤0.01或P﹤0.05)。五子衍宗汤能显著增加模型小鼠体重、脾重、外周血白细胞数、骨髓有核细胞数及脾脏中CD3+,CD4+,CD8+,CD19+,NK细胞的数量,差异有统计学意义(P﹤0.01或P﹤0.05)。结论:五子衍宗汤可显著增强环磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫功能。     

葛根汤对缩宫素复合寒冷刺激诱导的寒湿凝滞型原发性痛经小鼠模型的影响

目的:探讨葛根汤对寒湿凝滞型原发性痛经小鼠模型的影响和可能的作用机制.方法:将70只雌性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、布洛芬组、桂枝茯苓胶囊组和葛根汤低、中、高剂量组,每组10只.连续3 dip雌激素使小鼠子宫同步化并进行寒冷刺激,第4天ip缩宫素注射液造模,观察30 min内小鼠扭体次数,并测定子宫匀浆液内钙离子(Ca2+)和一氧化氮(NO)的水平.造模的同时,布洛芬、桂枝茯苓胶囊、葛根汤低、中、高组分别按0.12,1.12,3.5,7.0,14.0 g·kg-1·d-1的剂量ig给药.结果:葛根汤低、中、高剂量均能够有效地抑制缩宫素复合寒冷刺激诱导的扭体反应,抑制率分别为81.03％,84.14％,90.15％;能够提高子宫匀浆液中NO水平、降低Ca2水平(P ＜0.001),与目前治疗原发性痛经的一线药物布洛芬和桂枝茯苓胶囊的药效相当.结论:葛根汤能有效缓解缩宫素复合寒冷刺激诱导的子宫平滑肌痉挛,其作用机制可能与影响子宫组织中Ca2+和NO水平有关.     

中药灌肠1号对小鼠结肠炎CD4+ CD25+免疫作用的研究

目的：探讨CD4⁺CD25⁺调节性T细胞(Tregs)在2，4-二硝基氯苯(DNCB)和醋酸 (AA)复合法诱发的小鼠溃疡性结肠炎中的变化规律及中药灌肠1号治疗的作用机制。方法：建立DNCB＋AA复合法诱发的小鼠溃疡性结肠炎模型，设立正常对照、模型对照、柳氮磺氨吡啶(SASP)和中药灌肠1号治疗共4组，用流式细胞仪检测各组外周血、肠系膜淋巴结CD4⁺CD25⁺ Tregs细胞的变化以及结肠组织病理学改变。结果：建模后1～2周，模型组外周血和肠系膜淋巴结的CD4⁺CD25⁺ Tregs细胞数量较正常组明显下降，而使用SASP和中药灌肠Ⅰ号治疗后该细胞亚群明显高于模型组。结论：具有较强免疫抑制作用的CD4⁺CD25⁺Tregs细胞亚群在小鼠实验性溃疡性结肠炎的发病及病情转归中可能具有重要免疫调节作用，中药灌肠1号通过调节Tregs细胞的数量对溃疡性结肠炎发挥治疗作用。     

桂枝茯苓丸加减方对脑缺血及再灌注过程中Ca2+、氨基酸水平的变化研究

目的:研究桂枝茯苓丸加减方在脑缺血及再灌注模型中血清及脑组织中谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)、γ氨基丁酸(GABA)的变化。同时测定用药前后脑组织中Ca2+水平变化及脑水肿的程度。方法:氨基酸自动分析仪测定Glu,Asp,Gly,GABA。原子吸收分光光度法测定脑组织中的钙。结果:中药治疗组的氨基酸水平及钙含量与对照组有明显差异。结论:桂枝茯苓丸加减方对缺血性脑损伤有缓解作用。     

抗心磷脂抗体导致妊娠丢失的免疫病理机制 及安子合剂的干预作用

目的:探讨抗心磷脂抗体(ACA)导致妊娠丢失与CD4+ CD25+ FOXP3+调节性T( CD4+ CD25+ FOXP3+ Treg)细胞的关系及安子合剂的免疫调节机制.方法:将BALB/c小鼠随机分组:空白组、模型组、安子合剂组(低、中、高剂量组)、阿司匹林组.于妊娠第1天,空白组和模型组以等量蒸馏水灌胃,安于合剂组(低、中、高剂量组分别以37.7,75.4,150.8 g·kg-1·d-1)药液ig,阿司匹林组以0.019 5 g·kg-1·d-1ig,连续给药14 d.于妊娠第8,12天通过给孕鼠腹腔注射抗心磷脂抗体-IgG(ACA-IgG),建立ACA阳性妊娠丢失动物模型.用流式细胞仪测定各组孕鼠外周血CD4+ CD25+ FOXP3 +Treg细胞的比例;用ELISA法测定各组孕鼠外周血ACA的滴度;并观察各组孕鼠胚胎吸收及胎鼠发育情况.结果:模型组CD4+ CD25+ FOXP3+Treg细胞的比例较空白组显著下降(2.67±0.51)％,(9.849±1.774)％,P＜0.01;与模型组相比,安子合剂低、中剂量组均能显著升高CD4+ CD25+ FOXP3 +Treg细胞的比例(9.47±1.26),(7.61±1.07)％,P＜0.01,显著降低ACA的滴度(P＜0.01),安子合剂低剂量组优于中剂量组.安子合剂低剂量组能显著降低胚胎吸收率,显著增加胎鼠和胎盘质量(P＜0.05).结论:ACA导致妊娠丢失的病理机制与免疫调节细胞-CD4+ CD25+ FOXP3+ Treg细胞比例减少有关.安子合剂干预ACA导致妊娠丢失的免疫调节机制是通过增加CD4+ CD25+ FOXP3 +Treg细胞的比例来实现的,其作用的强弱与药物的剂量相关.     

黄芩汤对湿热型溃疡性结肠炎大鼠CD4+ T细胞 及其共刺激分子的影响

目的:观察CD4+T细胞及其共刺激分子(CSF)在湿热型溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜中的表达及分布,探讨黄芩汤治疗该病可能的免疫学机制。方法:采用高脂、高糖饲料联合人工气候箱法造出湿热型体质,结合三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法建立湿热型UC模型;造模成功后将大鼠分为模型组、黄芩汤组及美沙拉嗪组,用免疫组化SP法检测大鼠结肠黏膜CD4+T细胞,CD28,CD152,OX40T细胞亚型的表达及分布,通过图像数码采集系统及Image pro plus 6.0软件分析平均光密度,以检测各分子表达含量。结果:与正常对照组比较,造模大鼠结肠中CD4+T细胞、CD28,CD152,OX40等T细胞亚型升高(P<0.05),主要分布于黏膜下层及固有肌层;治疗后,黄芩汤和美沙拉嗪组大鼠结肠中CD4+T细胞,CD28,OX40T细胞亚型表达均下降(P<0.05),但CD152的表达无明显变化且维持在模型组水平;黄芩汤组及美沙拉嗪组以上各分子的表达均无统计学差异。结论:黄芩汤可能通过调节CD4+T细胞的CSF的表达含量从而发挥对溃疡性结肠炎的免疫调节作用。     

艾可康胶囊对白血病小鼠免疫功能的影响

目的:观察艾可康胶囊对Friend型白血病鼠的治疗作用.方法:BALB/c小鼠70只,分为正常对照组、模型对照组、齐多夫定对照组(0.1g·kg-1)、唐草片对照组(3.2 g·kg-1)、艾可康高、中、低剂量组(5,2.5,1.25 g·kg-1);除正常组外,每只小鼠ip 0.5 mL FLV病毒稀释液,正常组给予0.5 mL生理盐水.24 h后开始给药,正常对照组和模型对照组给予生理盐水,连续给药21 d.末次给药后取血,摘取脾脏.称取脾脏质量,计算脾指数,流式细胞仪测定CD4+,CD8+及CD4+,CD8+T淋巴细胞的幼稚细胞和记忆细胞.结果:与模型组相比较,艾可康高、中剂量组的脾指数、CD4+T淋巴细胞的记忆细胞均显著降低,CD4+,CD4 +/CD8+,CD4+T淋巴细胞的幼稚细胞百分率,CD8+T淋巴细胞的幼稚细胞百分率均显著升高(P＜0.05),艾可康高剂量组CD8+均显著升高,CD8+T淋巴细胞的记忆细胞百分率均显著降低(P＜0.05).结论:艾可康胶囊可提高Friend 型白血病鼠的免疫功能.     

Immunomodulatory effects of Abnormal Savda Munsiq,a traditional Uighur medicine,on the combined stress mice

Objective

To investigate the immunomodulatory effects of ASMq, a herbal preparation used in Traditional Uighur Medicine, on the combined stress mice.

Materials and methods

The combined stress was induced on mice by application of the electric-foot shock in a cold–dry environment and three different doses of ASMq were orally administered to the animals for 14 days. The effect of ASMq on the immune apparatus weight index, lymphocytes proliferation, serum levels of the cytokines, immunoglobulins, hemolysin and NK cells as well as the phagocytic activity of the macrophages were evaluated.

Results

Oral administration of ASMq was found to increase the thymus and spleen indices, lymphocytes proliferation induced by Con A and LPS, the percentage of CD4⁺ in thymus, spleen and peripheral blood and restore the CD4⁺/CD8⁺ ratio. The serum concentrations of INF-β, IL-2, IL-6, IgG, NK cells and hemolysin were also increased. The macrophage phagocytic activity was also enhanced.