抗心磷脂抗体导致妊娠丢失的免疫病理机制 及安子合剂的干预作用

目的:探讨抗心磷脂抗体(ACA)导致妊娠丢失与CD4+ CD25+ FOXP3+调节性T( CD4+ CD25+ FOXP3+ Treg)细胞的关系及安子合剂的免疫调节机制.方法:将BALB/c小鼠随机分组:空白组、模型组、安子合剂组(低、中、高剂量组)、阿司匹林组.于妊娠第1天,空白组和模型组以等量蒸馏水灌胃,安于合剂组(低、中、高剂量组分别以37.7,75.4,150.8 g·kg-1·d-1)药液ig,阿司匹林组以0.019 5 g·kg-1·d-1ig,连续给药14 d.于妊娠第8,12天通过给孕鼠腹腔注射抗心磷脂抗体-IgG(ACA-IgG),建立ACA阳性妊娠丢失动物模型.用流式细胞仪测定各组孕鼠外周血CD4+ CD25+ FOXP3 +Treg细胞的比例;用ELISA法测定各组孕鼠外周血ACA的滴度;并观察各组孕鼠胚胎吸收及胎鼠发育情况.结果:模型组CD4+ CD25+ FOXP3+Treg细胞的比例较空白组显著下降(2.67±0.51)％,(9.849±1.774)％,P＜0.01;与模型组相比,安子合剂低、中剂量组均能显著升高CD4+ CD25+ FOXP3 +Treg细胞的比例(9.47±1.26),(7.61±1.07)％,P＜0.01,显著降低ACA的滴度(P＜0.01),安子合剂低剂量组优于中剂量组.安子合剂低剂量组能显著降低胚胎吸收率,显著增加胎鼠和胎盘质量(P＜0.05).结论:ACA导致妊娠丢失的病理机制与免疫调节细胞-CD4+ CD25+ FOXP3+ Treg细胞比例减少有关.安子合剂干预ACA导致妊娠丢失的免疫调节机制是通过增加CD4+ CD25+ FOXP3 +Treg细胞的比例来实现的,其作用的强弱与药物的剂量相关.     

紫癜清颗粒对HSP患者CD4~+ CD25~+ Tregs细胞的影响

目的探讨紫癜清颗粒对过敏性紫癜(HSP)患者的临床疗效及外周血CD4+CD25+调节性T细胞、其转录因子FOXP3表达的影响。方法纳入60例确诊为HSP患者,随机分为两组,治疗组予以紫癜清颗粒(A组),对照组予以激素联合抗组胺药物(B组);两周为1个疗程,共观察4周,随访半年,采用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Treg、转录因子FOXP3的表达,同期选10例健康人作为正常对照。结果治疗组有效率与对照组相当(P0.05),但复发率较对照组减低(P0.01);A、B组治疗前外周血CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+FOXP3+表达比例较健康对照组明显降低(P0.01);紫癜清颗粒治疗后患者外周血CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+FOXP3+比例增高,与对照组治疗后患者外周血CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+FOXP3+的表达相比,无统计学意义(P0.05),但表达比例较对照组高。结论 1治疗组总有效率为93.33%,对照组总有效率为96.66%,说明中药汤剂紫癜清颗粒与西医传统治疗方案激素联合抗组胺药物疗效相当,但其复发率及临床副作用较西药治疗都明显减少;2A、B组治疗前CD4+CD25+Treg的表达低于正常,说明调节性T细胞可能参与了HSP的发病,而治疗后CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+FOXP3+的表达增高,可能是紫癜清颗粒治疗HSP有效的原因。     

安胎汤对先兆流产大鼠CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞免疫调节的影响

目的:从CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞变化角度探讨安胎汤对先兆流产大鼠的影响及作用机制。方法:将大鼠雌雄以2∶1的比例配对后筛选出孕鼠48只,以缩宫素及针灸合谷、三阴交穴的方法建立先兆流产模型,随机分为6组,分别为正常妊娠组、安胎汤低剂量组、安胎汤中剂量组、安胎汤高剂量组、黄体酮组及先兆流产大鼠模型组。于妊娠第13天取大鼠外周血后即用流式细胞仪检测CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞百分率,然后处死大鼠,计数双侧子宫着床点数及活胎数。结果:安胎汤可提高先兆流产孕鼠胚胎吸收率和CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞百分率,降低胚胎吸收率(P0.01)。结论:安胎汤通过调节先兆流产大鼠CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞百分率达到保胎目的,且疗效与剂量相关。     

毛细支气管炎患儿外周血CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的检测及其意义

目的探讨毛细支气管炎患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的表达,在毛细支气管炎发生发展机制中的作用。方法用流式细胞术检测48例毛细支气管炎患儿及19例健康对照者外周血中CD4+CD25+Treg的表达水平。结果毛细支气管炎患儿外周血CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的百分比明显低于健康对照组(P<0.01)。结论毛细支气管炎患儿外周血CD4+CD25+Treg数量减少,这种细胞免疫功能失调可能与其免疫学发病机制有关。     

针灸及其血清对荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖的影响

目的:观察针灸治疗对H_(22)荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞(CD4~+CD25~+regulatory T cells)体外增殖的影响和针灸血清刺激下的CD4~+CD25~+Treg细胞的体外增殖变化,探讨针灸及其血清对荷瘤小鼠免疫调节细胞的干预作用。方法:48只小鼠随机分为电针治疗组、艾灸治疗组、肿瘤对照组、正常对照组。采用H_(22)肿瘤细胞移植性实体瘤模型,电针和艾灸"大椎"治疗后,磁珠分离CD4~+CD25~+Treg细胞,氚标记胸腺嘧啶核苷掺入法观察不同组小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖能力和针灸血清对CD4~+CD25~+ Treg细胞体外增殖的影响。结果:肿瘤对照组CD4~+CD25~+Treg细胞增殖水平比正常对照组明显增高(P<0.05);电针治疗组和艾灸治疗组CD4~+CD25~+Treg细胞增殖水平与肿瘤对照组比较均明显降低(P<0.01)。电针治疗组和艾灸治疗组1:1、1:8稀释度血清刺激正常小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖,较正常对照、肿瘤对照组血清显著增高(P<0.05),各组1:16、1:32稀释度血清对Treg细胞作用的差别无统计学意义(P>0.05)。结论:针灸治疗能下调荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖能力。不同浓度针灸血清体外刺激CD4~+CD25~+Treg细胞增殖表现出不一致的效应。     

梅毒血清固定患者外周血CD4~+CD25~+ Treg和CD4~+CD25~+Foxp3~+ Treg的表达及意义

目的检测并比较梅毒血清固定患者与治疗后快速血浆反应素环状卡生试验(RPR)转阴患者外周血CD4+CD25+Treg以及CD4+CD25+Foxp3+Treg的表达情况。方法运用流式细胞术检测40例梅毒血清固定患者(实验组)和40例治疗后RPR转阴的梅毒患者(对照组)外周血CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg的表达水平并进行比较。结果实验组患者外周血CD4+CD25+Treg细胞占外周血CD4+T细胞总数的(11.90±0.64)%,对照组为(9.09±0.28)%,2组比较差异有统计学意义(t=4.01,P0.001);实验组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占外周血CD4+T细胞总数的(6.25±0.28)%,对照组为(3.37±0.24)%,2组比较差异有统计学意义(t=7.90,P0.001)。结论血清固定梅毒患者外周血中抑制性CD4+CD25+Treg细胞的比例明显高于RPR转阴梅毒患者,且其中大部分为具有抑制活性的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞亚群,推测这类Treg细胞在CD4+T细胞中所占的比例增加与梅毒患者血清固定有一定关系。     

胃肠道癌肿患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞的表达及临床意义

目的：研究胃肠道癌肿患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T（Treg）细胞的表达，并探讨其临床意义。方法：通过免疫荧光术及流式细胞仪检测20例胃癌患者及20例结肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg细胞、CD4^＋CD25^＋high Treg细胞、CD4^＋T细胞及CD4^＋ CTLA-4^＋T细胞。结果：胃癌组、结肠癌组与健康献血者比较外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋ Treg细胞、CD4^＋CD25^＋high Treg细胞及CD4^＋CTLA-4^＋T细胞显著增多，CD4^＋T细胞显著减少；胃癌、结肠癌患者之间其外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg细胞、CD4^＋CD25^＋high Treg细胞、CD4^＋T细胞及CD4^＋CTLA-4^＋T细胞无显著差异。结论：胃肠道癌肿患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg细胞显著高于健康献血者，这可能与胃肠道癌肿患者的免疫抑制和肿瘤的进展相关。     

薏苡仁酯对胶原诱导性关节炎小鼠Foxp3+CD4+CD25+调节性 T 细胞影响的研究

目的研究薏苡仁酯对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)小鼠外周血中Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的影响,探讨薏苡仁酯类风湿关节炎治疗中的可能机制。方法从25只小鼠随机选取5只为正常组,剩余20只小鼠进行CIA造模。造模成功后随机分为造模对照组10只及薏苡仁酯组10只。薏苡仁酯组予薏苡仁酯注射液25 m L/kg,正常组及造模对照组注射生理盐水25 m L/kg,均每天腹腔内注射1次。共用药21天。用药后对各组关节炎进行评分,计算关节炎指数,并应用流式细胞术测定小鼠外周血Foxp3+CD4+CD25+Treg比例。结果与正常组比较,造模对照组关节炎指数明显升高(P0.01),薏苡仁酯组较造模对照组小鼠关节炎指数明显下降(P0.01)。与正常组比较,造模对照组Foxp3+CD4+CD25+Treg水平均明显下降(P0.01),薏苡仁酯组较造模对照组用药后Foxp3+CD4+CD25+Treg水平明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论薏苡仁酯能上调CIA小鼠Foxp3+CD4+CD25+Treg比例,可能在CIA的发病中具有一定的免疫调节作用。     

变应性鼻炎患者CD4+CD25+Treg细胞的检测及意义

目的:探讨变应性鼻炎患者外周血CD4+CD25+T调节细胞(regulatory T cell,Treg细胞)的变化及其意义。方法:采用流式细胞术对36例变应性鼻炎(Allergic,AR)患者和19例健康对照者外周血CD4+CD25+Treg细胞进行检测,并观察CD4+CD25+Treg细胞与患者免疫球蛋白E(IgE)水平的关系。结果:变应性鼻炎组(1.67士0.87)%低于正常对照组(4.80士1.50)%,(P0.01),变应性鼻炎组和正常对照组相比有显著性差异(P0.01);CD4+CD25+Treg细胞的变化与IgE的变化成正相关(r=0.43,P0.01)。结论:变应性鼻炎患者Treg细胞失衡可能在其发病中起作用。     

CD4~+CD25~+CD127~-调节性T细胞在维吾尔族和汉族晚期非小细胞肺癌患者外周血中的表达及其临床意义

目的探讨维吾尔族和汉族晚期非小细胞肺癌患者外周血中CD4~+CD25~+CD127~-调节性T细胞(Treg)的表达及临床意义。方法采用流式细胞术测定58例Ⅲb、Ⅳ期非小细胞肺癌患者和20例健康人外周血中CD4~+CD25~+CD127~-Treg的水平并进行比较,并进一步比较分析维吾尔族和汉族肺癌患者间外周血中CD4~+CD25~+CD127~-Treg的水平。结果肺癌患者外周血中CD4~+CD25~+CD127~-Treg占CD4~+T细胞的百分率显著高于健康人(P0.05)。维吾尔族与汉族肺癌患者外周血中CD4~+CD25~+CD127~-Treg占CD4~+T细胞的百分率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论肺癌患者中异常增高的Treg细胞抑制了机体正常的抗肿瘤免疫效应,并与肺癌的进展有关,但在不同民族的晚期非小细胞肺癌患者中尚未观察到Treg细胞水平存在差异。     

血必净注射液对高海拔地区老年肺部感染患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的影响

目的 观察血必净注射液对高海拔地区老年肺部感染患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的影响.方法 将48例患者随机分为两组,对照组给予抗感染综合治疗,干预组在综合治疗基础上加用血必净注射液静滴7d.流式细胞仪检测治疗前、治疗第7日外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例,并比较两组临床疗效.结果 与治疗前比较,干预组CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例下降明显（P＜0.05）,平均治疗时间明显缩短.结论 血必净注射液在治疗高海拔地区老年肺部感染时能调节细胞免疫,提高疗效.     

内异消癥汤对子宫内膜异位症大鼠CD4^＋及CD8^＋ T细胞表达的影响

目的探讨内异消癥汤对子宫内膜异位症模型大鼠CD4^＋、CD8^＋T细胞表达的影响。方法将47只大鼠随机分为对照组,模型组和内异消癥汤高、低剂量组,除对照组外均采用大鼠子宫组织自体移植手术制作子宫内膜异位症模型,灌胃给药4周后用免疫组化方法检测大鼠子宫内膜异位移植物局部CD4^＋、CD8^＋T细胞表达。结果与模型组相比,低剂量组CD4^＋表达显著降低（P〈0.05）,高、低剂量组CD8^＋的表达强度降低更显著（P〈0.01）;高、低剂量组的CD4^＋/CD8^＋比值较模型组增高,低剂量组比值增高尤为明显;高、低剂量组之间CD4^＋、CD8^＋表达比较无显著差异（P〉0.05）。结论内异消癥汤能改善大鼠子宫内膜异位移植物局部组织免疫学变化,降低CD4^＋及CD8^＋表达,并有提高CD4^＋/CD8^＋比值的趋势,可能通过此途径达到治疗效果。     

乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠CD4^＋／CD8^及Fas、FasL蛋白表达的实验研究

目的：观察乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠CD4^＋／CD8^及Fas、FasL蛋白表达的影响。方法：采用雌性BALB／c小鼠皮下多点注射小鼠透明带多肽,建立免疫性卵巢早衰模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、己烯雌酚组、六味地黄丸组、乌鳖颗粒大、中、小剂量组。另设正常组和佐剂组,共灌胃给药4周。实验末应用免疫组化法测定脾脏CD4^＋、CD8^,计算CD4^＋／CD8^的比值。应用免疫组化法测定卵巢Fas、FasL蛋白的表达。结果：模型组小鼠脾脏CD4^＋／CD8^比值明显高于正常组和佐剂组（P〈0．05）。乌鳖颗粒各剂量组小鼠脾脏CD4^＋／CD8^比值明显低于模型组（P〈0．05,P〈0．01）。模型组小鼠卵巢Fas蛋白表达低于正常组,Fas—L蛋白表达明显高于正常组,卵巢Fas、Fas—L蛋白表达和Fas／Fas—L比值与正常组比较具有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）。乌鳖颗粒大剂量组和中剂量组小鼠Fas蛋白表达明显高于模型组,（P〈0．05,P〈0．01）。乌鳖颗粒各剂量组Fas—L蛋白表达明显低于模型组（P〈0．05,P〈0．01）。乌鳖颗粒大剂量组、中剂量组小鼠Fas／Fas—L比值与模型组比较具有显著性差异（P〈0．01）。结论：乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠具有调节CD4^＋／CD8^比值和Fas／FasL系统的作用。     

黄芪甲苷在体外对高迁移率族蛋白B1介导小鼠调节性T淋巴细胞免疫功能的影响

目的在前期实验基础上,明确经高迁移率族蛋白B1（HMGB1）刺激的小鼠调节性T细胞（Treg）对CD4^＋CD25^-T淋巴细胞免疫功能的影响,观察黄芪甲苷（AST IV）对HMGB1介导Treg免疫功能的拮抗作用。方法随机将CD4^＋CD25^-T细胞分为对照组、Treg组、（HMGB1＋Treg）组、（HMGB1＋AST IV＋Treg）组。4组均于培养后72 h检测脾脏CD4^＋CD25^-T细胞增殖活性及CD4^＋CD25^-T细胞孵育上清液中IL-4、IFN-γ表达水平。结果 Treg组CD4^＋CD25-T细胞增殖活性受到抑制（P〈0.01）,其上清中IFN-γ表达水平较对照组明显下降（P〈0.01）,IL-4表达水平较对照组显著增加（P〈0.01）;HMGBI＋Treg组CD4^＋CD25-T细胞增殖活性受抑制程度明显逆转（P〈0.01）,与Treg组比较,（HMGB1＋Treg）组IFN-γ表达水平明显升高（P〈0.01）,IL-4表达水平显著下降（P〈0.01）;与（HMGB1＋Treg）组比较,（HMGB1＋AST IV＋Treg）组CD4^＋CD25^-T细胞增殖受抑制程度显著加重（P〈0.01）,IFN-γ表达水平明显降低（P〈0.01）,IL-4水平显著上升（P〈0.01）。结论 HMGB1在体外可明显降低小鼠Treg免疫抑制能力,而黄芪甲苷可拮抗此抑制作用,表明其对HMGB1介导的促炎效应具有治疗作用。     

急性化脓性扁桃体炎营分证外周血T淋巴细胞亚群的变化及临床意义

目的：探讨急性化脓性扁桃体炎营分证患者外周血中T淋巴细胞亚群数目及比值变化的临床意义。方法：将55例观察对象分为观察组（急性扁桃体炎营分证患儿）25例与对照组（健康体检儿童）30例。采用免疫荧光流式细胞技术检测外周血T淋巴细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋的细胞数目及细胞数比值,并进行分析比较。结果：两组CD3＋、CD4＋、CD8＋细胞数目比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）,而CD4＋／CD3＋和CD4＋／CD8＋细胞数比值明显升高,CD8＋／CD3＋比值明显降低,两组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）。结论：急性化脓性扁桃体炎营分证可能与T淋巴细胞CIM＋／CD3＋和CD4＋／CD8＋比值升高、CD8＋／CD3＋比值降低有关。     

循环EPCs CD34^＋水平与高血压病患者心血管危险因素的关系

目的 探讨能否将循环内皮祖细胞（EPCs）CD34^＋水平作为评价高血压病患者心血管危险度的标志。方法 高血压病患者组62例，对照组20例。高血压病患者采用Framingham心血管危险因素积分分层心血管危险因素，分为低危组18例，中危组14例，高危组17例，极高危组13例。作外周血循环EPCs CD34^＋水平与Framingham心血管危险因素积分的相关性分析。结果 各研究组高血压病患者外周循环EPCs CD34^＋水平随着其心血管危险程度的增加，逐步下降，各组间比较有统计学意义（P〈0．05）。EPCs CD34^＋水平与Framingham心血管危险因素积分呈负相关关系（r=0．875，P〈0．01）。结论 高血压病患者循环EPCs CD34^＋水平下降与心血管危险因素有显著的相关性。循环EPCs CD34^＋水平可以作为高血压病患者心血管危险度的标志。     

升降散对脓毒症小鼠CD4~+、CD8~+T细胞的影响

目的观察升降散对脓毒症小鼠脾细胞中CD4+、CD8+T细胞的影响。方法雄性Balb/c小鼠84只,按随机数字表法分为正常组、假手术组、脓毒症组、升降散组,各组又分为6 h、12 h和24 h 3个时间点亚组。除正常组外,其余各组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症小鼠模型。各组在造模前72 h开始灌胃给药或0.9%Na Cl溶液,术后按各个时间点采用流式细胞仪方法检测小鼠脾细胞中CD4+、CD8+T细胞占淋巴细胞百分比。结果与脓毒症组相比,升降散组可显著上调CLP后6 h及12 h的CD4+水平,下调CLP后6 h及12 h的CD8+水平,差异均有统计学意义(P0.05)。结论升降散可以纠正脓毒症初期小鼠的细胞免疫功能紊乱,具有免疫调节作用。     

三氧化二砷对哮喘豚鼠肺组织中CD34^＋祖细胞、Eotaxin及CCR3表达的影响

目的：观察三氧化二砷对支气管哮喘豚鼠模型肺组织中CD34^＋祖细胞、Eotaxin及CCR3表达的影响，探讨三氧化二砷治疗哮喘的可能机制。方法：健康雄性豚鼠40只随机分成对照组（A组）、哮喘组（B组）、As2O3治疗组（C组）、地塞米松治疗组（D组），每组10只。B、C及D组以卵白蛋白（OVA）作为抗原腹腔内注射联合雾化吸入复制哮喘模型，末次激发后24h处死豚鼠，制备豚鼠肺组织病理标本，苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织炎症改变；免疫组化检测CD34^＋祖细胞、Eotaxin及CCR3在肺组织中的表达。结果：（1）哮喘组肺组织CD34^＋祖细胞、Eotaxin及CCR3的阳性细胞数明显增加；（2）As2O3治疗组及地塞米松治疗组肺组织中CD34^＋祖细胞、Eotaxin及CCR3的表达相对于哮喘组均有不同程度的减轻，差异均有统计学意义。结论：哮喘豚鼠肺组织中CD34^＋祖细胞、Eotxin及CCR3表达增强。As2O3通过下调肺组织中CD∥祖细胞、Eotaxin及CCR3的表达水平，发挥其抗EOS性气道炎症的作用。