酶促牛黄与天然牛黄HPLC指纹图谱比较研究

目的:建立天然牛黄HPLC-DAD指纹图谱并与酶促牛黄指纹图谱进行比较。方法:采用高效液相色谱法,色谱条件:DiamonsilC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-氯仿-1%的醋酸水溶液,梯度洗脱;检测波长370 nm;流速1.0 mL/min;分析时间40 min。结果:在选定的色谱条件下建立了天然牛黄色谱指纹图谱共有模式,并对酶促牛黄与天然牛黄的指纹图谱进行比较,两者指纹基本一致,但各成分间的相对含量有差异。结论:所建立的天然牛黄色谱指纹图谱方法精密度高、重现性好,可用于各种牛黄药材替代品的鉴别研究。     

3种牛黄中多种胆汁酸类成分的研究分析与比较

目的 建立UPLC-ELSD法同时测定天然牛黄、人工牛黄、体外培育牛黄中10种胆汁酸以及胆固醇,并比较3种牛黄中胆汁酸类成分的异同点。方法 采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（2．1 mm×50 mm,1．8 μm）,甲醇-10 mmol?L-1甲酸铵（pH=3．5）为流动相,梯度洗脱,流速0．3 mL?min-1,柱温：35 ℃,ELSD 检测器漂移管温度65 ℃。结果 建立的方法可有效分离10种胆汁酸以及胆固醇,各项方法学考察均符合要求,测定结果显示3种牛黄的胆汁酸类成分在种类和含量上存在一定差异。结论 本方法简便、准确、重复性好,可用于牛黄类药材中胆汁酸类成分的质量控制,并为其他胆酸类药物的测定提供参考。     

3种牛黄中胆汁酸类成分的含量测定与比较

目的建立超高效液相色谱-蒸发光散射检测器(UPLC-ELSD)法同时测定天然牛黄、人工牛黄、体外培育牛黄中10种胆汁酸以及胆固醇,并比较3种牛黄中胆汁酸类成分的异同。方法采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),甲醇-10 mmol·L~(-1)甲酸铵(p H=3.5)为流动相,梯度洗脱,流速0.3m L·min~(-1),柱温:35℃,ELSD检测器漂移管温度65℃。结果所建立的方法可有效分离10种胆汁酸以及胆固醇,各项方法学考察均符合要求,测定结果显示3种牛黄的胆汁酸类成分在种类和含量上存在一定差异。结论本方法简便、准确、重复性好,可用于牛黄类药材中胆汁酸类成分的质量控制,并为其他胆酸类药物的测定提供参考。     

培植牛黄与天然牛黄胆汁酸的含量测定

用薄层色谱法测定了10个生产单位的18批培植牛黄的游离和结合胆汁酸的含量,并与天然牛黄及牛胆粉比较。结果表明,培植牛黄含有与天然牛黄相同的胆汁酸成分,其中培植牛黄的游离胆汁酸比天然牛黄略高。多数样品结合胆汁酸含量与天然牛黄相当;总胆汁酸含量比天然牛黄略高。     

牛黄及代用品的红外指纹图谱鉴别研究

目的 通过开展牛黄、体外培育牛黄和人工牛黄的红外指纹图谱研究,建立牛黄、体外培育牛黄和人工牛黄的鉴别方法。方法 应用傅里叶变换红外光谱法（FTIR）进行测定,以450～4000 cm^–1的透射率为指标,对牛黄、体外培育牛黄和人工牛黄的红外光谱进行分析,并采用ChamPattern软件对红外光谱数据进行聚类分析和主成分分析。结果 牛黄、体外培育牛黄和人工牛黄在红外光谱中的信号存在差异。人工牛黄在1700～1500、1200～900、700～500 cm^–1波数处的峰强度与天然牛黄和体外培育牛黄存在明显差异;天然牛黄在1550、1450、1250 cm^–1波数处的峰强度明显弱于体外培育牛黄。聚类分析和主成分分析结果表明,牛黄、体外培育牛黄和人工牛黄的红外光谱数据可分别聚为一类。结论 红外光谱可用于牛黄、体外培育牛黄和人工牛黄的鉴别研究。     

体外培育牛黄的药学研究

目的：解决牛黄原料匮乏问题，为民族医药工业发展提供充足的优质牛黄原料药。方法：根据胆红素钙结石体内形成的原理和生物化学过程，应用现代生物工程技术，在体外牛胆囊胆汁内培育牛胆红素钙结石(体外培育牛黄)；采用电镜扫描、红外光谱法、紫外分光光度法等检测体外培育牛黄的性状、结构、成分和主要成分含量。结果：体外培育牛黄呈类球形，椋黄色；有同心层纹状结构，扫描电镜下见呈网状结构，网架富集胆红素钙颗粒；含胆红素、胆酸、胆固醇、磷脂、去氧胆酸、牛磺酸、糖蛋白、18种氨基酸及21种微量元素；在避光、密封、防潮条件下存放三年稳定。结论：体外培育牛黄的性状、结构、成分、含量与天然牛黄相似。     

体外培育牛黄的药理研究进展

体外培育牛黄有抗氧化、抗炎、保肝、提高免疫功能等药理作用，与天然牛黄成分基本一致，可作为天然牛黄的理想替代品．本文综述了近几年来体外培育牛黄的药理研究进展．     

不同消化液介质对难溶中药溶出量的影响:以牛黄为例

目的通过模拟人体胃肠消化液条件,比较不同溶出介质中动物结石药物牛黄及其代用品人工牛黄中胆汁酸类成分的溶出量差异,从体外溶出的角度探讨影响难溶中药疗效的可能因素。方法分别取同一批天然牛黄、人工牛黄,分别加入3种不同溶出介质(人工胃液、小肠液、大肠液),平行提取处理,以UPLC法测定胆汁酸类成分的溶出量,以甲醇中的溶出量为参比,计算各胆汁酸成分的相对溶出率。液相检测色谱柱为WatersAcquityCSH柱(50mm×2.1mm,1.7μm),流动相为乙腈(A)-0.2%甲酸-水(B),线性梯度洗脱:0～2分钟,10%A;2～3分钟,12%～25%A;3～3.01分钟,25%～35%A;3.01～10分钟,35%～37%A;10～17分钟,37%～43%A;17～17.01分钟,43%～48%A;17.01～20分钟,48%～52%A。检测波长254nm,流速0.4ml/min,柱温35℃。结果牛黄中胆汁酸类成分在人工大肠液(pH7.6)中溶出率高于人工胃液和小肠液;天然牛黄中,除去氧胆酸外,各胆汁酸成分的溶出率均高于人工牛黄,其中鹅去氧胆酸相差9.13倍;天然牛黄中甘氨胆酸、甘氨去氧胆酸和鹅去氧胆酸溶出率较高,而现行药典质量控制指标胆酸的溶出较差。结论以胆汁酸类成分来看,天然牛黄溶出能力高于人工牛黄,可能是人工牛黄临床疗效低于天然牛黄的原因之一。加强难溶性中药的溶出研究,对提高相关制剂的疗效、节约药材等具有重要意义。     

培植牛黄与天然牛黄化学成分比较研究：Ⅲ.红外光谱的测定和比较

应用红外光谱研究了3批天然牛黄、10批培植牛黄、1批冻干牛胆粉及1批胆红素,证明天然牛黄间红外图谱有很好的相似性,发现培植牛黄与天然牛黄的红外光谱的相似性与培植牛黄胆红素含量相平行。     

天然牛黄薄层鉴别的再研究

本文报道了牛黄中含量最高的成分胆红素的薄层鉴别,并在天然牛黄的薄层分析中发现两个特征荧光斑点。经13批天然牛黄和4批培植牛黄的验证,重现性、稳定性均好,可作为天然牛黄薄层色谱的特征,与胆红素、胆汁酸的薄层色谱作综合判别,可有效地鉴别天然牛黄。     

A Rapid and Effective HPLC Method for Identification of Bovis Calculus in Chinese Patent Medicines

Objective Due to the limited resource and the large demand,many kinds of Bovis Calculus(BC)including artificial Bovis Calculus(ABC),in vivo cultured Bovis Calculus(in vivo CBC),and in vitro cultured Bovis Calculus(in vitro CBC)were used in Chinese patent medicines(CPMs).Previous studies have shown that the chemical constituents of ABC and their properties were different from other BC.The two types of CBC with much higher price than ABC were approximately equivalent with natural Bovis Calculus in quality and clinical effect.The aim of the study is to establish a rapid and effective method for the identification of BC in CPMs.Methods An HPLC method with the higher specificity for analyzing bilirubin was established to distinguish ABC from other three kinds of BC by comparing the change of bilirubin content with the addition of EDTA-2Na as the extraction solvent and stabilizer.Results The bilirubin content in CPMs containing ABC was basically unchanged,while that in CPMs containing other kinds of BC showed significant difference.The proposed method was employed to analyze a variety of CPMs containing Bovis Calculus(CPMBCs)and proven to be universal.Conclusion An effective analytical method is established for the quality control of CPMBCs and further ensures the safety and efficacy of these drugs in clinical practice.     

培植牛黄药理作用的研究

用比较药理学研究方法,对培植牛黄与天然牛黄的主要药效和毒性在同等条件下进行了比较研究。结果表明,两者均具有镇静、抗惊厥、解热、抗炎、强心、降压作用,其作用强度与毒性也相近似。     

新仿牛黄的抗惊厥作用

牛黄为脊椎动物哺乳纲牛科牛BostaursdomesticusGmelin的胆结石。由于天然牛黄极为短缺,价格昂贵,因而许多学者都在进行人工牛黄的研究。五十年代,唐德煊首先进行了人工合成牛黄的研究并获得成功。后经朱颜进行的药理实验表明,人工牛黄对古柯碱和咖啡碱引起的小鼠惊厥有对抗作用,此点与天然牛黄的药理作用是一致的。1971年,卫生部组织了人工牛黄药理实验协作小组进行了实验,观察到人工牛黄对戊四氮引起的小鼠惊厥也有较好的对抗作用。同年年底,卫生部     

含体外培育牛黄的安宫牛黄丸治疗流行性乙型脑炎的临床研究

目的观察含体外培育牛黄的安宫牛黄丸治疗暑温风痰闭窍证(流行性乙型脑炎)的临床疗效及安全性.方法采用随机双盲和单盲对照法,与含天然牛黄的安宫牛黄丸对照研究,共治疗乙脑患者 260例,其中含体外培育牛黄的安宫牛黄丸治疗组 182例,对照组 78例.结果治疗组与对照组的愈显率分别为 94.50 %,88.46 %,总有效率分别为 99.45 %,97.44 %.两种牛黄的安宫牛黄丸均有较好的疗效,两组比较差异无显著性意义(P > 0.05). ECG及实验室各项检查表明,两种牛黄的安宫牛黄丸对病人均无明显毒副作用.结论含体外培育牛黄的安宫牛黄丸治疗流行性乙型脑炎疗效显著.     

牛黄与其一种伪品的鉴别研究

目的：对牛黄与其一种伪品进行鉴别研究。方法：将中药传统性状鉴定与体式显微和光学显微技术相结合，鉴定并报道了一种新发现的牛黄伪品。并应用高效液相色谱法及液质联用方法对染色物质进行了确证。结果：牛黄与该伪品在层纹的断面特征及颗粒状团块的显微特征等方面存在差异。该伪品主要是用淀粉和色素混合制作而成，伪品中掺有金胺O、皂黄、金橙Ⅱ、柠檬黄、胭脂红等5种染色物质。结论：从宏观到微观层级递进的观察方法可有效鉴别牛黄药材的真伪。HPLC-DAD和HPLC-MS等现代仪器分析方法可用于牛黄药材染色物质的确认。     

贵重动物类中药材蛋白质SDS-PAGE的图谱研究

目的:为贵重动物类中药材的真伪鉴别提供科学的依据。方法:用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定人工牛黄、鹿蹄筋、蝮蛇、乌梢蛇、金钱白花蛇及其伪品的主要蛋白质分子量。结果:获得清晰的电泳谱带及相应数据。结论:方法准确、可靠、重复性好,可为蛇类药材、人工牛黄、鹿蹄筋及其制剂的生产、质量控制提供参考。     

香港市场商品牛黄的鉴定研究

应用性状鉴定、显微鉴定、显微化学和薄层层析试验方法对6批香港市场的商品牛黄进行了分析鉴定研究,样品分别来源于澳大利亚、巴西和印度。鉴定结果表明,有一半的商品牛黄属伪劣、低次品。     

4种人工牛黄的X衍射Fourier谱分析

目的 为弥补珍贵中药材天然牛黄之奇缺,应用粉末Ｘ衍射Ｆｏｕｒｉｅｒ谱,分析建立人工牛黄的Ｘ衍射特征标记峰,并对其进行鉴定。方法 应用粉末Ｘ衍射分析法对４种人工牛黄样品及猪去氧胆酸、胆酸的Ｘ衍射Ｆｏｕｒｉｅｒ谱进行分析计算。结果 获得人工牛黄的Ｘ衍射特征标记峰与图形振扑规律,并确证猪去氧胆酸、胆酸的存在。结论 Ｘ衍射分析法是鉴定与识别中药复方制剂一种可行方法。     

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??OBJECTIVE To develop a method for determination of different types of bilirubin in bezoar and explore the differences in their contents or ratios between natural and in vitro cultured Calculus Bovis to provide reference for identification of Chinese patent drugs containing bezoar.METHODS Free bilirubin was determined directly by HPLC, while unconjugated and total bilirubin in bezoar were converted into free bilirubin respectively using different chelating agents. Converted bilirubin was eluted on a Diamonsil C₁₈ column(4.6 mm??150 mm,5 ??m)using isocratic mobile phase composed of acetonitrile-1% acetic acid (95??5) and detected at 450 nm.RESULTS A small amount of free bilirubin was detected in Calculus Bovis but not found in in-vitro cultured Calculus Bovis. The content of total bilirubin in Calculus Bovis from different sources varied greatly while being similar in in vitro cultured samples. Bilirubin in covalent form occupied a great part in Calculus Bovis,and bilirubin in conjugated form hold a great proportionin in vitro cultured Calculus Bovis.CONCLUSION The contents or ratios of different types of bilirubin can be used as the quality control parameters of naturaland in vitro cultured Calculus Bovis. The established method is easy to operate with high effectiveness in quality control,suggesting a new way of identifying bezoar.     

体外培育牛黄治疗中风的临床研究

目的评价单味体外培育牛黄治疗中风(痰热闭窍证)的临床疗效及安全性.方法采用随机单盲对照法,与单味天然牛黄对照研究,共治疗中风患者127例,其中体外培育牛黄治疗组95例,天然牛黄对照组32例.结果 治疗组与对照组愈显率分别为37.90%和32.25%,总有效率分别为86.3%和80.6%,两种牛黄均有较好的疗效,治疗组与对照组比较无显著性差异(P＞0.05).结论:体外培育牛黄治疗中风有良好的疗效,两种牛黄在治疗过程中均未见明显的不良反应.