荧光扫描法测定八子补肾胶囊中蛇床子素含量

目的:建立蛇床子素最佳激发波长的荧光扫描法。方法:优选了激发波长,并对八子补肾胶囊中的蛇床子素进行了含量测定。结果:蛇床子素的最佳激发波长应为320nm,不是文献报道的365nm,本法蛇床子素的检测灵敏度为原荧光扫描法的约40倍。蛇床子素的点样量在0.0218～0.1308μg范围内,呈良好的线性关系。蛇床子素的平均回收率为98.67(n=6),RSD为1.83。结论:方法简便、灵敏、重现性好、精密度高。可用于控制八子补肾胶囊的质量,并为其它含蛇床子素的制剂含量测定提供了新方法。     

黄芪三维同步荧光光谱的建立及其在芒柄花素含量测定中的应用

目的 建立黄芪三维同步荧光光谱，并采同步荧光分析法测定黄芪中芒柄花素含量。方法 通过扫描三维同步荧光光谱，选择合适的波长间隔，用同步荧光法测定黄芪中芒柄花素含量。结果 最佳波长间隔为 130 nm，在0.005～1.28 ug.mL-1范围内同步荧光强度与发射波长具有良好的线性关系，以芒柄花素为对照品，标准曲线的回归方程为：IF = 252.55462c 4.95309，r = 0.9996。结论 建立的黄芪三维同步荧光光谱具有重复性，同步荧光分析法测定黄芪中芒柄花素含量准确度高，检测限低，结果可靠。     

RP-HPLC研究蛇床子素在大鼠组织的分布

蛇床子素（osthol，Ost）是从蛇床子（Fructus cnidii）中提取的烃基香豆素类成分。Ost对中枢神经系统，内分泌系统和心血管系统都有作用，目前对中药复方制剂中蛇床子素的检测方法很多，已见报道的有高效液相色谱法、气相色谱法、薄层荧光扫描法、紫外分光光度计法等。文献报道有用荧光法研究蛇床子素在兔体内脏器官的分布，本实验用反相高效液相色谱（RP-HPLC）测定蛇床子素在组织中的浓度，同时对方法的专属性，准确度，精密度及线性进行了考察。     

薄层扫描测定中荧光与增荧光成分的最佳激发波长研究

@@@@目的：为排除干扰，提高荧光扫描的灵敏度，对荧光与增荧光成分的最佳激发波长进行了选择研究。方法：采用同一荧光斑点，以不同的滤光片和不连续的波长，逐一激发，记录其相应强度积分值，以波长为横坐标，积分值为纵坐标，绘制曲线图，取曲线图的最大积分值条件，作为最佳激发波长和首选滤光片。结果：通过对盐酸小檗碱、蛇床子素、丹皮酚与胆酸的优选，其最佳激发波长分别为（338±2）nm、（320±2）nm、（292±2） nm 和（385±2） nm，首选滤光片分别是3号、1号、1号和2号，灵敏度高，点样量在 ng 级，即可准确定量。结论：证实了荧光化合物都沿用（366±1）nm 为激发波长的不合理性，揭示了首选滤光片和激发波长因化合物不同而异，验证方法时，需通过优选。     

三维同步荧光光谱法测定黄芪中芒柄花素的含量

目的建立三维同步荧光光谱法测定黄芪中芒柄花素含量的方法。方法通过扫描三维同步荧光光谱,确定同步荧光光谱的最佳波长间隔,用同步荧光测定不同产地的黄芪中芒柄花素含量。结果同步荧光光谱的最佳波长间隔为130 nm,芒柄花素在0.005~1.28μg·m L~(-1)范围内同步荧光强度与发射波长具有良好的线性关系,标准曲线的回归方程为:IF=252.554 62c+4.953 09,r=0.999 6。结论该方法重复性良好,准确度高,检测限低,结果可靠,可用于黄芪中微量芒柄花素的测定。     

薄层扫描法测定复方蛇床子洗剂中蛇床子素的含量

目的采用薄层扫描法测定复方蛇床子洗剂中蛇床子素的含量。方法采用日本岛津CS-9000型薄层扫描仪,硅胶G薄层板,展开剂:苯-醋酸乙酯(30∶1),激发波长365 nm。结果制剂中其它成分对测定无干扰。蛇床子素的点样量(x)在1.838~18.38μg范围内与荧光强度积分值(y)线性良好,y=4 120.744x 0.562,r=0.999 6,n=6。平均回收率是97.06%。实验的精密度、稳定性、重现性都很好。结论该法操作简便,精密度好,结果准确可靠。     

高效液相色谱法测定保肾片中蛇床子素含量

目的：提高保肾片的质量标准，对处方中蛇床子药材中的蛇床子素进行含量测定。方法：应用紫外．可见分光光度法对标准品溶液及供试品溶液在200～800nm下进行全波长扫描，发现最大吸收波长为322nm，应用高效液相色谱法对蛇床子中有效成分蛇床子素进行含量测定。结果：蛇床子素在0．1998～1．998mg范围内呈良好线性关系，回归方程为Y=68656．28206X-1912069．218，r=0．9998。其精密度试验、稳定性试验、重现性试验、回收率试验的1LSD值分别为0．27％、1．22％、1．72％、1．19％，均符合相关规定。结论：含量测定方法简便、灵敏、准确、专属性强，可作为复方保肾片中蛇床子素含量测定的方法。     

RP-HPLC法同时测定蛇床子中蛇床子秦、欧芹属素乙和异茴芹素的含量

目的建立蛇床子Cnidium monnieri中蛇床子素(osthole)、欧芹属素乙(imperatorin)和异茴芹素(isopimpinellin)的高效液相色谱测定方法。方法采用Vercopark Inertsil N-5ODS柱，1％醋酸-甲醇(梯度为0～30min 1％醋酸95％～5％)为流动相，检测波长254nm。结果该法回收率蛇床子素为99．1％，欧芹属素乙为95.8％，异茴芹素为97.3％；RSD蛇床子素为1．8％，欧芹属素乙为0．8％，异茴芹素为3．3％(n=5)。结论本方法为蛇床子药材、蛇床子提取物及含蛇床子药材的复方的质量评估提供了可靠的依据。     

渗透促进剂对蛇床子素透皮吸收的影响

 目的研究渗透促进剂对蛇床子素的体外经皮渗透的影响。方法将蛇床子有效部位制成饱和生理盐水溶液，采用Valia-Chien扩散池考察了土荆芥油、薄荷醇和月桂氮-酮(Azone)3种渗透促进剂对蛇床子素经离体鼠皮渗透性的影响。结果应用土荆芥油、薄荷醇和Azone为渗透促进剂，药物的稳态流量与对照组比较均有提高，增渗倍数分别为3.09，3.41及4.38；药物的表观扩散系数分别提高为1.10，2.18及6.30倍，但表观分配系数却分别降低为0.309，0.341及0.438倍。结论3种渗透促进剂的作用机制主要为改变角质层的通透性，减低了药物经皮肤渗透的阻力，提高了药物在皮肤角质层的扩散系数。     

采用细胞CT分析技术研究补肾生血药保护骨髓作用的分子基础

采用细胞CT技术，分析了补肾生血药对经致死剂量(60Co750rad)照射的小鼠骨有核细胞的保护和抗辐射作用。采用激光扫描、光学切片0．6μ、三维重组、动态旋转120度．DNA荧光强度分布图象分析。结果发现,经60Co致死剂量照射后，小鼠骨髓原红细胞严重破坏．从PI荧光染色、实时激光扫描、共焦三维重组动态旋转图象上发现细胞核DNA的荧光物质凝聚、断裂，其荧光强度与未经照射的对照组有明显区别；而补肾生血药组小鼠骨髓原红细胞结构完整，细胞核DNA荧光物质密集、无断裂，其荧光强度分布与未照射的空白对照组一样。结果表明补肾生血药对维持骨髓原红细胞核的DNA结构完整具有明显地保护作用。     

跌打止痛巴布剂不同提取方法的比较

目的:对跌打止痛巴布剂的不同提取方法进行了比较研究.方法:采用3种不同的提取溶剂和方法,对提取物中蛇床子素的含量进行测定比较,确定最佳的提取溶剂和方法.结果:以甲醇回流所提取的蛇床子素的含量最高.结论:甲醇回流提取法与其它方法相比,具有提取快速完全、节省时间,所提取的有效成分含量较高等优点.     

高效液相色谱法测定感冒一小时胶囊中异欧前胡素和蛇床子素的含量

目的 :采用反相高效液相色谱法对感冒一小时胶囊中羌活、独活的指标成分异欧前胡素、蛇床子素同时测定。方法 :采用HypersilC₁₈柱 ,流动相为乙腈水(425∶575) ,检测波长 320nm。结果 :线性范围异欧前胡素 0～03975 μg,蛇床子素 0～03825μg ,相关系数异欧前胡素 0.9999,蛇床子素 0.9997,平均回收率异欧前胡素98.1% ,蛇床子素 99.8%。结论 :方法简便、准确、灵敏可靠 ,适用于制剂及药材中异欧前胡素和蛇床子素的分析测定。     

蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运机制研究

 目的 研究蛇床子素在 Caco-2 细胞模型中的转运机制。方法 通过研究蛇床子素在 Caco-2 细胞模型中的转运,考察蛇床子素浓度、PEG600、P-gp抑制剂维拉帕米（verapamil及温度对蛇床子素转运的影响。结果 随着蛇床子素溶液浓度和温度的升高,蛇床子素在Caco-2 细胞中 AP-BL 的转运量增加;PEG600对蛇床子素在 Caco-2 细胞中的 AP-BL 的转运量有显著增加;P-gp 抑制剂维拉帕米对蛇床子素在 Caco-2 细胞中转运的表观通透系数 PAP 和 PBL 无显著影响。结论 蛇床子素表观通透系数 PAP大于10×10-6 cm·s-1,较易被 Caco-2 细胞吸收,但由于3个浓度蛇床子素溶液的PAP 和 PBL比值无明显变化、P-gp 抑制剂对 PAP 和 PBL 无明显影响及转运的活化能较低(17.31 kJ·mol-1,因此,蛇床子素在 Caco-2 细胞模型中的转运机制主要是被动转运。     

固相萃取-光化学荧光-高效液相色谱测定血浆中叶酸含量

 目的采用固相萃取-光化学荧光-高效液相色谱法测定血浆中叶酸含量。方法叶酸血浆样品经LD₆₀₅固相萃取小柱分离净化,在紫外灯下照射,经高效液相色谱分离,荧光检测。结果线性范围在0.100～100.0mg·L^-1之间,方法回收率不低于79.4%,精密度(n=5)小于13.9%,检测限为0.2ng。结论本法具有准确、灵敏、选择性好、回收率高等特点,能满足临床常规血药浓度监测。     

Antitumor effects of Osthol from Cnidium monnieri: an in vitro and in vivo study

Cnidium monnieri (L.) Cusson is a Chinese medicine which is used widely by traditional medicine doctors. Osthol is a major bio-activity compound of the herb. In this study, osthol was isolated from C. monnieri and its in vitro and in vivo antitumor effects studied. The results of the in vitro study showed: that osthol inhibited the growth of HeLa, in a time- and concentration-dependent manner, with IC(50) values of 77.96 and 64.94 microm for 24 and 48 h, respectively; that osthol had lower cytotoxic effects in primary cultured normal cervical fibroblasts; and that increased DNA fragmentation and activated PARP in HeLa after treatment with osthol which could induce apoptosis. The results of the in vivo model showed that the survival days of the P-388 D1 tumor-bearing CDF(1) mice were prolonged (ILS% = 37) after osthol (30 mg/kg) was given once a day for 9 days. Based on these results, it is suggested that osthol could inhibit P-388 D1 cells in vivo and induce apoptosis in HeLa cells in vitro, and that osthol is good lead compound for developing antitumor drugs. However, C. formosanum Yabe of Taiwan's endemic plants contained little osthol, with no imperatorin, and its major components were different from that of C. monnieri. Therefore, it is suggested that C. formosanum also may possess economic worth.     

用细胞膜色谱模型筛选长春七抑制HeLa细胞增殖的活性成分

 目的筛选药用植物长春七中具有细胞毒性作用的活性成分。方法用细胞膜色谱模型,筛选条件:红细胞膜色谱柱(50mm×2mm),流动相为三蒸水,柱温37℃,检测波长244nm,流速0.2 mL·min^-1,以阿霉素为对照进行筛选;对筛选得到的活性成分用紫外、红外和质谱方法测定结构,并与文献数据比较确定为蛇床子素;并用MTT法测定了其对HeLa细胞增殖的抑制作用。结果长春七所含蛇床子素在红细胞膜色谱模型系统中,具有类似于阿霉素的保留特性;蛇床子素可抑制HeLa细胞增殖,且随着浓度增加而抑制作用增强,最大抑制率达76.6%,半数抑制浓度为10.0～11.0μg·mL^-1。结论红细胞膜色谱模型可用于筛选药用植物中的细胞毒性成分,长春七所含蛇床子素能够作用于红细胞膜及膜蛋白表面,并对HeLa细胞增殖有较强的抑制作用。     

罐疗提高盐酸维拉帕米透皮吸收的研究

 目的研究中医传统付罐疗法对促进盐酸维拉帕米(Ver)透皮吸收的作用。方法应用中医传统罐法后，采用RP HPLC荧光检测色谱法，流动相组成为甲醇-水-三乙胺=68∶32∶0.4，冰醋酸调pH为6.5，荧光检测波长Ex=275 nm,Em=320 nm，检测Ver的血药浓度。结果罐疗能显著提高Ver的透皮吸收。结论罐疗可作为一种新的物理促进药物透皮渗透的方法。     

高效液相色谱法测定复方蛇床酊中蛇床子素的含量

目的建立复方蛇床酊中蛇床子素含量的高效液相色谱测定方法。方法采用HyperSil ODS色谱柱（150mm×4．6mm，5μm）；流动相为甲醇-水（70：30），流速为1．0mL／min；测定波长为322nm；柱温为室温。结果蛇床子素在0．018～0．126μg范围与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9999），平均回收率为98．55％，RSD=1．45％。结论该方法操作简便快速、准确可靠，可用于复方蛇床酊中蛇床子素含量的测定。     

心虚证大鼠心肌荧光组织化学及超微结构的实验研究

目的:观察心虚证对心肌细胞微细结构及超微结构的影响。方法:选用健康大鼠随机分为造模组和对照组,于造模48h、72h分别取心肌组织作冰冻切片、超薄切片,采用荧光组织化学及电镜技术,观察心肌细胞内糖原和DNA的分布、含量及超微结构的变化。结果:心虚证造模组大鼠的心肌细胞在48h后过碘酸-Schiff反应(荧光PAS反应)明显减弱,72h后DNA荧光反应阳性物明显低于对照组;电镜观察心肌细胞内线粒体肿胀、变形,嵴断裂,数量减少.基质密度降低,肌原纤维有断裂,糖原减少。经立体学定量分析,线粒体体密度与对照组相比差异有显著性(P<0.01)。结论:心虚证可导致心肌细胞的损伤,影响心肌代谢及细胞结构。本研究为心虚证的病因病机学提供一定的实验依据,可指导临床治疗。