恒古骨伤愈合剂促进坏死股骨头内BMP-2基因表达研究

目的:研究恒古骨伤愈合剂对兔坏死股骨头内BMP-2基因表达的影响。方法:以小剂量LPS间隔24h两次静注加甲基强的松龙(MPS)3次肌注制作的兔股骨头坏死模型,用恒古骨伤愈合剂治疗后取股骨头行免疫组化、原位杂交并提取总RNA行实时荧光定量PCR,观察兔股骨头内BMP-2基因表达的动态变化。结果:喂药至第4、8周时,恒古骨伤愈组与模型组股骨头内BMP-2基因表达均为阴性,表达量比较差别无统计学意义。喂药至第12周时,恒古骨伤愈组免疫组化和原位杂交结果为弱阳性,模型组为阴性,恒古骨伤愈组股骨头内BMP-2mRNA的表达量是模型组的3.13倍。正常兔喂药组与空白对照组比较差别无统计学意义。结论:小剂量LPS加MPS制作的兔股骨头坏死模型中股骨头内BMP-2基因表达受抑制,恒古骨伤愈合剂可促进坏死股骨头内源性BMP-2基因的表达,以用药时间长者效果明显。恒古骨伤愈对正常兔股骨头内BMP-2基因的表达无影响。     

恒古骨伤愈合剂对激素性股骨头坏死兔模型干预的组织外观和光镜观察

目的:观察恒古骨伤愈合剂干预激素性股骨头坏死兔模型的组织外观和光镜观察改变,并与没有干预的样本之间进行比较。方法:将150只新西兰白兔按随机数字表法分为空白组(A组)24只,正常兔服用恒古骨伤愈合剂对照组(B组)24只,实验组102只。对实验组耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素(10μg.kg-1)2次,注射间隔24 h。并于第2次注射大肠杆菌内毒素后,臀肌注射甲强龙(20 mg.kg-1)3次,注射间隔24 h,制备兔激素性股骨头缺血坏死模型。于造模后第5周,将造模成功的53只新西兰白兔以随机数字表法分配其中的48只至模型组(C组,造模后不喂恒古骨伤愈合剂)和恒古骨伤愈合剂治疗组(D组,造模后喂恒古骨伤愈合剂),每组24只。B组和D组以恒古骨伤愈合剂(按经由人与兔体表面积用药量换算计算出的剂量)灌胃,2 d 1次;A组和C组以等体积的蒸馏水灌胃。造模后8,12,16周,截取股骨头行外观观察和电镜观察。结果:外观观察及光镜观察显示C组出现明显的骨坏死灶,骨髓腔内可见大量脂肪细胞增生;与C组比较,D组骨细胞受损程度较轻,骨小梁密度较高,空骨陷窝比率较少,骨坏死面积和髓腔内脂肪细胞数量明显减少,骨坏死修复迹象明显;A组与B组股骨头形态正常。结论:恒古骨伤愈合剂可有效促进早期激素性股骨头坏死兔模型坏死股骨头的修复。     

恒古骨伤愈合剂对兔激素性股骨头坏死模型超微结构的影响

目的:观察恒古骨伤愈合剂干预激素性股骨头坏死兔模型的电子显微镜观察改变。方法:将150只新西兰白兔按随机数字表法分为空白对照组(A组)24只,正常兔服用恒古骨伤愈合剂对照组(B组)24只,实验组102只。对实验组耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素(10μg/kg)2次,注射间隔24h。并于第2次注射大肠杆菌内毒素后,臀肌注射甲基强的松龙粉针剂(20mg/kg)3次,注射间隔24h,制备兔激素性股骨头缺血坏死模型。于造模后第5周,将造模成功的53只新西兰白兔以随机数字表法分配其中的48只至模型组(C组,造模后不喂恒古骨伤愈合剂)和恒古骨伤愈合剂治疗组(D组,造模后喂恒古骨伤愈合剂),每组24只。B组和D组以恒古骨伤愈合剂(按经由人与兔体表面积用药量换算计算出的剂量)灌胃,1次/2d;A组和C组以等体积的蒸馏水灌胃。造模后8、12、16周,截取股骨头行透射电镜和扫描电镜观察。结果:透射电镜和扫描电镜观察显示A、B两组股骨头骨细胞及骨基质正常,细胞核呈卵圆形位于细胞一端,核膜完整,细胞质内线粒体丰富;C组可见骨细胞变性坏死,骨髓腔出血,骨髓腔毛细血管狭窄,血管内皮细胞受损;D组骨细胞变性、骨髓腔出血和狭窄程度均较轻,可见较多的成骨细胞、破骨细胞、新生骨细胞及骨基质,新生骨形成小梁。结论:恒古骨伤愈合剂可有效促进早期激素性股骨头坏死兔模型坏死股骨头的修复。     

恒古骨伤愈合剂治疗股骨头坏死189例临床报告

目的观察恒古骨伤愈合剂治疗股骨头坏死的临床疗效。方法189例股骨头坏死患者随机分为试验组和对照组，试验组132例服用恒古骨伤愈合剂，对照组57例服用复方丹参片，以Hards评分和影像学指标进行综合临床疗效评定。结果恒古骨伤愈合剂对股骨头坏死具有明显治疗作用，有效率为87．88％。结论恒古骨伤愈合剂对股骨头坏死疗效明显。     

恒古骨伤愈合剂口服联合透药治疗腰椎间盘突出症临床研究

目的：观察恒古骨伤愈合剂口服联合透药治疗腰椎间盘突出症（LDH）临床疗效。方法：选取93例LDH患者,按随机数字表法分为联合组、透药组、口服组各31例。联合组采取口服恒古骨伤愈合剂联合定向透药恒古骨伤愈合剂治疗,透药组采取定向透药恒古骨伤愈合剂治疗,口服组采取口服恒古骨伤愈合剂治疗。2天1次,4次为1个疗程,3组均连续治疗4个疗程。比较3组临床疗效,比较3组治疗前后疼痛视觉模拟评分法（VAS）、功能障碍指数评分表（ODI）评分的变化。结果：治疗后,3组VAS评分均较治疗前下降,差异均有统计学意义（P<0.05）;治疗后,联合组VAS评分低于透药组、口服组,差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗后,3组ODI评分均较治疗前下降,差异均有统计学意义（P<0.05）;治疗后,联合组ODI评分低于透药组、口服组,差异均有统计学意义（P<0.05）。联合组临床疗效总有效率为90.32%,透药组总有效率为74.19%,口服组总有效率为70.97%。联合组总有效率高于透药组及口服组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：恒古骨伤愈合剂口服联合透药治疗LDH能改善患...     

恒古骨伤愈合剂对骨质疏松性骨折兔骨密度及DKK-1蛋白的影响

目的探讨恒古骨伤愈合剂对骨质疏松性骨折(osteoporotic fracture,OPF)兔骨密度(bone mineral density,BMD)及血清Dickkopf-1(DKK-1)蛋白含量的影响。方法 45只雌性日本大耳兔随机分为治疗组、OPF模型组(模型组)和空白对照组(对照组),每组15只。治疗组和模型组兔切除双侧卵巢24周证实骨质疏松后再造成左侧桡骨骨折。于骨折手术次日治疗组每2天用恒古骨伤愈合剂灌胃1次,模型组使用等量生理盐水灌胃。各组于卵巢切除术前、术后24周及术后48周行全身BMD和血清DKK-1蛋白含量测定。结果卵巢切除术后24周,模型组BMD低于对照组(P0.05)。与模型组比较,治疗组干预后兔全身BMD提高(P0.05),血清DKK-1蛋白含量降低(P0.05);治疗组干预后血清DKK-1蛋白含量低于干预前(P0.05)。结论恒古骨伤愈合剂可提高OPF兔BMD,降低血清DKK-1蛋白含量水平。     

恒古骨伤愈合剂促进骨细胞增殖缓解骨质疏松症树鼩的分子机制

目的:探讨恒古骨伤愈合剂(osteoking)对子宫摘除去势骨质疏松症(osteoporosis)树鼩骨细胞增殖的促进作用及通过激活TGF-β/BMP-7信号通路改善骨质疏松症的分子机制。方法:36只雌性实验树鼩随机分为6组,空白对照组不做处理,骨质疏松症模型组摘除子宫(全身骨密度检测下降25%)每天进行生理盐水灌胃,恒古骨伤愈合剂0.05g/kg、0.10g/kg和0.20g/kg灌胃治疗,阿仑膦酸钠0.01g/kg灌胃治疗,10周后处死树鼩,记录体重,收集血清和右下肢骨骼。ELISA法测定各组树鼩血清骨碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(OC)、I型原胶原N-端前肽(PINP),抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)、I型胶原交联C-末端肽(CTX)、雌二醇(E2)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)的含量;分别采用RT-q PCR和Western blot法检测TGF-β和BMP-7的表达水平。结果:与对照组比较,骨质疏松症组E2含量下降明显,CTX、TRACP-5b、OC、PINP和BALP的含量都显著上升,经恒古骨伤愈合剂治疗后上述现象均有改善效果,且具有剂量依赖性;RT-q PCR与Western Blot结果显示Nrf2和HO-1表达水平经恒古骨伤愈合剂治疗后都有升高趋势,其中当恒古骨伤愈合剂的剂量低于(0.05g/kg)时,以上改善效果均不明显;而当恒古骨伤愈合剂的剂量大于(0.10g/kg)时疗效具有统计学意义,在恒古骨伤愈合剂的剂量达到(0.20g/kg)时治疗组疗效接近于正常组水平。结论:恒古骨伤愈合剂能够有效抑制骨吸收和促进骨形成,并通过激活TGF-β/BMP-7信号通路改善骨质疏松症。     

异构信息网络驱动的恒古骨伤愈合剂“异病同治”4种骨伤疾病的作用机制

目的 通过整合异构信息网络挖掘与实验验证，阐释恒古骨伤愈合剂“异病同治”骨折、股骨头坏死、骨性关节炎和腰椎间盘突出症的作用机制。方法 依托疾病相关数据库和转录组表达谱数据集，以及中医药百科全书数据库，通过生物信息学数据整合与分析，获得4种目标疾病相关基因集和恒古骨伤愈合剂候选靶标谱，进而构建“疾病-证候-方药-靶点-通路-效应”异构信息网络，整合功能富集分析，筛选恒古骨伤愈合剂干预4种骨伤疾病失衡网络的核心靶标，及其参与的生物学通路和对应的临床症状，并加以动物实验验证。结果 异构信息网络挖掘表明，恒古骨伤愈合剂矫正骨折、股骨头坏死、骨性关节炎、腰椎间盘突出症失衡网络的共性机制是，通过调控相关核心候选靶标如蛋白激酶B（Akt1）、连环蛋白β1（CTNNB1）、表皮生长因子受体（EGFR）、热休克蛋白90-α（HSP90AA1）、磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α亚型（PI3KCA）等，及相关生物学通路如磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）、Janus激酶/信号换能器和转录激活剂（JAK/STAT）、肿瘤坏死因子（TNF）、核转录因子-κB（NF-κB）、Toll样受体等，发挥其调节细胞功能与活性、抑制炎症反应、减少骨质破坏、提高机体免疫功能的药理作用；在个性机制方面，恒古骨伤愈合剂可通过调节疾病靶位的血液循环而改善骨折断端血供；通过调控激素相关通路而维持骨代谢平衡，促进骨折愈合；通过靶向调控脂质相关通路纠正脂代谢紊乱，加速骨形成和骨修复，延缓股骨头坏死的病情进展；通过作用于神经功能调节通路减轻骨性关节炎与腰椎间盘突出症患者病变局部的痛觉刺激，缓解患者疼痛的症状。进一步发现，PI3K/Akt信号通路是该方干预4种疾病关键网络靶标最显著富集的通路，且该方候选靶标与骨折相关基因的网络关联性最强，故选择骨折作为目标疾病进行实验验证，结果表明该方可通过抑制PI3K/Akt信号轴的活化而发挥其加速骨形成、促进骨折愈合的作用。结论 恒古骨伤愈合剂“异病同治”4种骨伤疾病的主要机制涉及细胞功能调节和免疫炎症相关信号通路，其中，PI3K/Akt信号轴可能是该方促进骨再生、骨重建，维持骨代谢平衡的关键作用通路之一。     

低强度脉冲式超声波结合恒古骨伤愈合剂促进骨质疏松性桡骨远端骨折愈合的临床研究

【目的】探讨低强度脉冲式超声波（LIPU）刺激结合恒古骨伤愈合剂对骨质疏松性桡骨远端骨折愈合的促进作用。【方法】根据是否应用LIPU结合中药恒古骨伤愈合剂治疗,将90例新鲜骨质疏松性桡骨远端骨折患者分为观察组和对照组,每组各45例。2组患者均给予手法复位、夹板固定和康复锻炼,在此基础上,观察组患者给予LIPU及恒古骨伤愈合剂治疗,对照组未予LIPU及恒古骨伤愈合剂治疗,疗程为12周。每周对患者进行随访并拍摄X线片,比较2组患者术后X线片灰度值比值、骨折愈合情况、解剖学评分及患肢功能恢复情况。【结果】（1）治疗4周后,2组患者的X线片灰度值比值比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;但治疗8周后和治疗12周后,观察组的X线片灰度值比值水平均高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。（2）治疗后,观察组患者的骨折愈合时间较对照组明显缩短,Gartland-Werley腕关节评分的优良率较对照组明显提高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。（3）末次随访时,观察组患者的掌倾角、尺偏角均较对照组大,差异均有统计学意义（P＜0.05）;而2组患者的桡骨高度比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。【结论】LIPUS结合恒古骨伤愈合剂治疗骨质疏松性桡骨远端骨折疗效确切,可有效加速骨折愈合和局部骨形成,促进腕关节的功能恢复。     

恒古骨伤愈合剂联合冲击波对老年股骨头坏死急性发作患者关节功能的影响及疗效观察

目的:探讨恒古骨伤愈合剂联合冲击波对老年股骨头坏死急性发作患者关节功能的影响及疗效。方法:将94例老年股骨头坏死急性发作患者依据不同的就诊顺序将其分为对照组43例与试验组51例,对照组施以冲击波治疗,试验组在对照组基础上施以恒古骨伤愈合剂治疗,观察2组患者治疗前及治疗6个月后的髋关节Harris评分情况、髋关节功能恢复优良率情况。结果:治疗前,2组髋关节Harris评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗6个月后,2组髋关节Harris评分提升(P<0.05),治疗后组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组优良率为55.81%,试验组为80.39%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:恒古骨伤愈合剂联合冲击波能够有效的提升老年股骨头坏死急性发作患者的髋关节Harris评分,并且提升其髋关节恢复优良率。     

生脉成骨方对股骨头坏死I型胶原表达的调节作用研究

目的　研究生脉成骨方对股骨头坏死Ⅰ型胶原mRNA表达的影响以揭示其作用机制。方法　以内毒素加甲基强的松注射制备兔骨坏死模型 ,分为模型组及生脉成骨方组 ,分批于用药后 4,8,12周处死 ,于原位杂交法测定骨Ⅰ型胶原表达 ,进行病理学检查 ,并与正常对照组比较。结果　模型组各时段成骨细胞及骨髓基质细胞内的Ⅰ型胶原mRNA的阳性表达减少 ;中药组 4周时mRNA的表达信号强度和量稍弱于正常组而稍高于模型组 ,8周和 12周时其信号强度和量以及阳性表达的骨髓基质细胞分布进一步改善 ,接近于正常组。结论　生脉成骨方在股骨头坏死的治疗中能促进成骨细胞功能活跃 ,增加骨髓基质细胞向前成骨细胞的分化 ,促进Ⅰ型胶原的合成     

温阳补肾方对兔激素性股骨头坏死血清OPG、RANK、RANKL的影响

目的：探讨温阳补肾方对兔激素性股骨头坏死血清OPG、RANK、RANKL表达的影响,进一步揭示温阳补肾方对激素性股骨头坏死的作用机制。方法：136只新西兰大白兔随机分为正常组、模型组、中药低、中、高剂量组。造模成功后,分别于给药后第4、8、12周取血清,用酶联免疫法检测OPG／RANK／RANKL含量。结果：第4周时,正常组、中药中、高剂量组RANK、RANKL明显低于模型组（P〈0．01）,而OPG明显高于模型组（P〈0．01）。第8周时,正常组、中药低、中、高剂量组RANK、RANKL明显低于模型组（P〈0．01）,而OPG明显高于模型组（P〈0．01）。第12周时正常组、中药低、中、高剂量组RANK、RANKL明显低于模型组（P〈0．01）,而OPG明显高于模型组（P〈0．01）。结论：大剂量激素使用可上调RANK、RANKL的表达,下调OPG的表达,使骨过度吸收从而破坏骨质导致股骨头坏死。温阳补肾方可以提高OPG表达,降低RANK、RANKL的表达,抑制破骨细胞的活化,促进新骨的形成,是治疗激素性股骨头坏死的作用机制之一。     

丹参骨髓腔内注射对兔股骨头坏死破骨细胞数量的影响

目的:复制激素性股骨头坏死动物模型,观察兔破骨细胞数量,从分子水平探讨丹参注射液骨髓腔内注射预防激素性股骨头缺血性坏死的可行性及机制。方法:选用家兔30只,随机分为对照组、模型组、丹参注射液预防组,每组10只。糖皮质激素诱导兔激素性股骨头坏死动物模型,造模同时预防组行骨髓腔内注射丹参注射液,每侧0.4 mg.kg-1,每周2次,连续8周。8周后观察3组家兔破骨细胞数量及组织病理学的改变。结果:预防组能有效的降低破骨细胞数量及股骨头空骨陷窝率。结论:丹参骨髓腔内注射可抑制破骨细胞生成,对早期激素性股骨头缺血性坏死有预防作用。     

Bcl-2 mRNA在中药防治早期激素性股骨头坏死中的表达变化

目的:建立激素性股骨头坏死家兔模型,观察和评价中药对早期激素性股骨头坏死的防治效果,并探讨其作用机理。方法:选用成年雄性日本大耳白兔随机分为3组:正常组、治疗组、模型组。治疗组和模型组经耳缘静脉注射马血清两次,第1次10mL.kg-1,间隔3 w后,第2次注射6mL.kg-1,间隔2w后,连续3d每日1次腹腔注射甲强龙45mg.kg-1。注射激素后第2d治疗组用骨蚀灵胶囊进行灌胃,正常组和模型组两组均以等体积的蒸馏水灌胃。在灌胃第4w和第8w时分批处死动物,迅速取出股骨头,截取股骨头取材后迅速投入液氮中,从骨组织中提取核酸,应用RT-PCR法检测不同时间点Bcl-2 mRNA表达。结果:联合应用马血清和甲强龙的方法可成功造成家兔激素性股骨头坏死模型,成功率高,死亡率低。应用液氮下迅速研磨骨组织的方法成功提取了骨组织核酸,RT-PCR法检测不同时间点Bcl-2 mRNA表达,Bcl-2 mRNA的表达随着时间推移各组表达量逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:中药骨蚀灵胶囊通过调节股骨头局部血循环,可以抑制细胞凋亡,同时促进成骨和组织修复,作用全面,通过多种途径防治激素性股骨头坏死早期病理变化,防止病变的进展。通过探讨中药防治激素性股骨头坏死机理的研究,能够加深对激素性股骨头坏死早期病理变化的认识,针对其中的关键环节进行干预,可以更好的预防和治疗糖皮质激素所导致的骨坏死。     

桃红四物汤对激素性股骨头缺血坏死局部微血管密度的影响

目的：通过观察桃红四物汤对激素性股骨头缺血性坏死股骨头局部微血管密度的影响，进一步阐明活血化瘀法防治激素性股骨头缺血性坏死的机理。方法：60只健康成年新西兰大白兔，随机分正常组6只和实验组54只，采用贺氏造模法，6周后处死正常组6只和实验组6只，确定造模成功；将剩余实验动物随机分为治疗组和对照组：治疗组以桃红四物汤7ml／kg灌胃治疗，一日一次，对照组以生理盐水7ml／kg治疗，一日一次。并分别于治疗后第1、2、4周全部处死取材。分别进行股骨头组织病理学观察，并检测股骨头局部微血管密度的变化。结果：①对照组空缺骨陷窝数明显增多，骨小梁稀疏，髓腔脂肪细胞增大、增多；治疗组空缺骨陷窝数减少，骨小梁增多、增密；②治疗组股骨头局部微血管密度明显高于对照组股骨头局部微血管密度。结论：桃红四物汤能促进激素性股骨头缺血性坏死股骨头局部微血管的生长，改善股骨头局部血运，促进坏死股骨头的修复。     

介入配合骨复活汤对激素性股骨头缺血性坏死股骨头局部血管内皮生长因子表达的影响

目的：观察股动脉药物灌注配合骨复活汤治疗实验性激素性股骨头缺血性坏死（SANFH）股骨头局部血管内皮生长因子（VEGF）的表达。探讨介入配合骨复活汤对骨坏死再血管化和再骨化的机理。方法：新西兰兔24只,利用大肠杆菌内毒素和大剂量甲基强的松龙造成兔股骨头坏死模型,造模后第2周随机分为3组：介入组：经左侧股动脉注射尿激酶3万U和丹参注射液2mL;介入配合骨复活汤组：给药同介入组,同时每天给予骨复活汤灌胃给药;对照组：经股动脉注射生理盐水4mL。在治疗后4周,对股骨头标本进行VEGF免疫组化染色。计数VEGF阳性成骨细胞率、阳性软骨细胞率和阳性血管率,并进行统计学分析。结果：介入配合骨复活汤组比介入组能提高VEGF阳性成骨细胞率、阳性软骨细胞率和阳性血管率（P〈0．05）,改善骨坏死。结论：介入配合骨复活汤能改善骨坏死,其机理在于促进VEGF等细胞因子的分泌从而加速股骨头的再血管化和再骨化进程。     

血脉脂康胶囊对高血脂症兔OX-LDL水平及LOX-1表达的影响

目的探讨血脉脂康胶囊对高血脂症兔氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)水平及植物血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-(LOX-1)表达的影响。方法:应用胆固醇、高脂灌胃法制作兔高血脂症模型,实验设正常组、模型组、对照组(辛伐他汀)和中药组(血脉脂康胶囊)。在实验的0周、5周和10周(实验结束)时分别检测各组动物的OX-LDL水平,并在实验结束时应用RT-PCR法检测LOX-1 mRNA的表达。结果实验第5、10周时中药组OX-LDL水平明显低于模型组;实验结束时中药组LOX-1基因表达亦明显低于模型组。结论血脉脂康胶囊可降低高血脂症动物的OX-LDL水平和LOX-1的表达,从而达到治疗AS的目的。     

不同引经药对股骨头坏死模型兔骨髓干细胞归巢的影响

目的:观察比较活骨Ⅱ方配伍不同引经药对液氮冷冻性股骨头坏死(ONFH)兔股骨头内骨髓干细胞归巢的影响,探讨其防治ONFH的作用机制。方法:84只兔经液氮冷冻法建立股骨头坏死模型后,随机分为模型、活骨Ⅱ方及活骨Ⅱ方分别加牛膝、细辛、独活和桔梗(简称活骨、牛膝、细辛、独活和桔梗)等6组,另14只设为假手术组。在造模同时所有动物均皮下注射rhG-CSF(30μg.kg-1.d-1,连续7 d),并分别灌胃生理盐水和相应中药。于注射rhG-CSF前后分别进行外周血WBC计数。分别于给药2周和4周后,股骨头经HE染色观察组织病理学改变,血管墨汁灌注观察血管形态,免疫组织化学法检测BrdU及SDF-1的表达。结果:与假手术组相比,模型组股骨头空骨陷窝率明显升高,血管面积和SDF-1蛋白表达水平显著降低;与模型组相比,活骨Ⅱ方组股骨头空骨陷窝率降低,血管面积增大、BrdU阳性细胞数和SDF-1表达升高;与活骨Ⅱ方组比较,牛膝组给药4周时股骨头内空骨陷窝率降低、血管面积增大,2周时SDF-1表达增高;桔梗组股骨头内空骨陷窝率有增高趋势,4周时BrdU阳性细胞数明显减少;细辛和独活组无明显变化。结论:活骨Ⅱ方能通过促进动员起来的骨髓干细胞定向归巢从而防治股骨头坏死;引经药牛膝可进一步提高活骨Ⅱ方的上述作用。     

活骨Ⅱ方加不同引经药对股骨头坏死兔股骨头内血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察比较活骨Ⅱ方配伍不同引经药对股骨头坏死(0NFH)兔股骨头内血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨其防治ONFH的作用机制.方法:84只兔经液氮冷冻法建立股骨头坏死模型后,随机分为以下6组:模型组活骨Ⅱ方组、活骨Ⅱ方加不同引经药组(牛膝、独活、细辛和桔梗),另14只设为伪手术组.造模后中药组立即分别给予活骨Ⅱ方(6 g·kg-1·d-1)、活骨Ⅱ方(6 g·kg-1·d-1)加引经药(牛膝0.75 g·kg-1·d-1,细辛0.15 g·kg-1·d-1,独活0.75 g·kg-1·d-1,桔梗0.75 g·kg-1·d-1,分别相当于临床等效量)灌胃,连续4周;模型和伪手术组给予生理盐水灌胃,所有动物均皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF) 30 μg· kg-1 ·d-1,连续7d.实验2周和4周时取左侧股骨头,分别行苏木精-伊红(HE)染色观察其组织病理学改变和墨汁灌注染色观察股骨头内血管形态变化,并经免疫组织化学法检测股骨头内VEGF的表达水平.结果:与伪手术组相比,模型组实验2周和4周时股骨头空骨陷窝率显著增多,血管面积及VEGF表达明显减少(P ＜0.01或P ＜0.05).活骨Ⅱ方能显著降低股骨头空骨陷窝率,并提高血管面积及VEGF的表达(P＜0.01或P＜0.05).与活骨Ⅱ组相比,牛膝组4周时空骨陷窝率显著减少,血管面积明显增多(P＜0.01或P＜0.05),2周和4周VEGF表达均明显增多(P＜0.01);桔梗组4周时VEGF表达显著降低;细辛和独活组无显著变化.结论:引经药牛膝具有进一步提高活骨Ⅱ方上调股骨头内VEGF表达的作用,这可能是其有效改善股骨头血循环、防止坏死的机制之一.