西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435和MCF-7细胞增殖的影响

研究西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞MDA-MB-435和MCF-7细胞增殖以及Bcl-2,Bax,TP53 mRNA及蛋白表达的影响,以期探讨西黄丸抗乳腺癌的作用特点和机制。大鼠灌胃给药制备西黄丸含药血清,实验设置大鼠空白血清组(Control)和西黄丸含药血清组(XH),以含药血清干预人乳腺癌细胞株MDA-MB-435和MCF-7,MTT法检测细胞增殖,RT-PCR法检测Bcl-2,Bax,TP53 mRNA的表达,免疫荧光法检测Bax蛋白的表达。结果显示,西黄丸大鼠含药血清可抑制MDA-MB-435细胞增殖(P0.05),西黄丸大鼠含药血清可以提高MDA-MB-435细胞中TP53和Bax mRNA以及Bax蛋白的表达(P0.05),降低Bcl-2/Bax的比值(P0.05)。同时西黄丸含药血清可以上调MCF-7细胞中Bax mRNA,并降低Bcl-2/Bax的比值(P0.05),而西黄丸含药血清干预MCF-7细胞后TP53 mRNA和Bax蛋白表达无显著性差异。结果表明,西黄丸含药血清可诱导雌激素受体阴性乳腺癌细胞凋亡,机制有可能是通过上调TP53 mRNA表达,从而诱导凋亡蛋白Bax表达,促进Bax向线粒体转移,最终发挥诱导细胞凋亡作用。     

西黄丸通过调控Bcl-2/Bax蛋白表达促进乳腺癌耐药细胞凋亡

目的:探讨西黄丸含药血清对多西他赛耐药的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231/DOX的作用及其机制。方法:制备西黄丸含药血清并用其处理MDA-MB-231/DOX细胞,用CCK-8试剂盒检测细胞增殖变化,流式细胞仪技术检测细胞凋亡率,蛋白印迹法(Western blot)法检测Bcl-2及Bax蛋白表达。结果:不同浓度西黄丸含药血清处理后,与对照组相比,MID-XHW组和HIG-XHW组增殖受到抑制;且MID-XHW组、HIG-XHW组的MDA-MB-231/DOX细胞凋亡率逐渐升高(P0.01);对照组Bax蛋白表达量高于MID-XHW组和HIG-XHW组(增加41.2%、71.3%,P0.01),而对照组Bcl-2蛋白表达量低于MID-XHW组和HIG-XHW组(减少40.1%、54.8%,P0.01)。结论:西黄丸可能通过上调Bax蛋白表达、下调Bcl-2蛋白,促进乳腺癌耐药细胞MDA-MB-231/DOX的凋亡。     

西黄丸含药血清对SW480人结肠癌细胞迁移及侵袭的影响

目的:研究西黄丸对人结肠癌细胞SW480迁移及侵袭的影响,并初步探讨其作用机制。方法:以人结肠癌细胞SW480为研究对象,细胞划痕试验检测不同剂量西黄丸含药血清对SW480细胞迁移的影响,并Transwell侵袭实验检测西黄丸含药血清对细胞侵袭能力的改变;用Western blot的方法检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)和p-ERK蛋白表达水平,RTq PCR法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin),多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)、波形蛋白(Vimentin)和转录因子Snail的mRNA水平。结果:与空白组比较,西黄丸含药血清可降低SW480细胞迁移及侵袭的能力,增加E-cadhenrin mRNA表达水平,并抑制PARP-1,Vimentin和Snail mRNA表达水平,明显降低ERK蛋白的磷酸化水平,均具有统计学意义(P0.05)。结论:西黄丸含药血清可抑制SW480细胞的体外侵袭及迁移,并影响上皮-间皮转化(EMT)相关基因E-cadherin,PARP-1,Vimentin和Snail的mRNA表达,其机制可能与ERK/MAPK信号通路有关,本研究为西黄丸抑制结肠癌转移提供了科学证据。     

基于AR/mTOR信号通路探讨西黄丸对前列腺癌LNCaP细胞增殖、凋亡影响的实验研究

基于雄激素受体(androgen receptor, AR)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)信号通路，研究西黄丸含药血清对前列腺癌LNCaP细胞增殖、凋亡的影响。西黄丸悬液灌胃制备SD大鼠含药血清。细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测低、中、高剂量西黄丸含药血清对前列腺癌LNCaP细胞体外增殖的影响。流式细胞术检测不同浓度西黄丸干预后LNCaP细胞的凋亡水平；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase caspase-3, cleaved caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、AR的蛋白表达以及mTOR蛋白的磷酸化水平。结果显示，与空白血清组相比，各给药组均能使LNCaP细胞的活力显著降低；低、中、高剂量西黄丸含药血清均能使细胞凋亡率显著增加；低、中、高剂量西黄丸含药血清组细胞中cleaved ...     

白花败酱草提取物对人结直肠癌细胞SW480增殖和凋亡的影响

目的探讨白花败酱草提取物通过抑制Notch信号通路影响人结直肠癌细胞SW480增殖、凋亡机制的研究。方法噻唑蓝(MTT)法检测不同质量浓度的白花败酱草对人结直肠癌SW480细胞增殖的影响,流式细胞仪检测白花败酱草对SW480细胞凋亡的影响,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测其对凋亡相关蛋白剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响,荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测其对SW480细胞中Notch信号通路中Notch1及下游靶基因Hes-1 mRNA表达的影响。结果白花败酱草提取物能够抑制人结直肠癌SW480细胞的增殖,呈质量浓度和时间依赖效应,差异具有统计学意义(P0.05);流式细胞检测显示白花败酱草提取物干预SW480细胞后凋亡率升高,呈质量浓度依赖性(P0.05);白花败酱草提取物可促进SW480细胞中cleaved caspase-3和Bax的表达,抑制Notch1和Hes-1的表达,具有质量浓度依赖性(P0.05)。结论白花败酱草提取物能够抑制人结直肠癌SW480细胞的增殖,诱导SW480细胞凋亡,作用机制与其抑制Notch信号通路的激活有关。     

降糖消渴颗粒含药血清对INS-1细胞凋亡的影响

目的:研究降糖消渴颗粒含药血清对胰岛瘤细胞INS-1凋亡的影响并对其作用机制进行初步探讨。方法:应用中药血清药理学方法制备降糖消渴颗粒含药血清及空白血清,以大鼠胰岛瘤细胞INS-1为研究对象,观察降糖消渴颗粒含药血清对INS-1细胞形态的影响,并用流式细胞术检测含药血清对细胞凋亡率的影响,用Western blot的方法检测Bax和Bcl-2蛋白表达水平,初步探讨其抗凋亡机制。结果:与空白血清组比较,降糖消渴颗粒含药血清可保护INS-1细胞形态,并降低细胞凋亡率,同时降糖消渴颗粒含药血清减少了Bax蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达,提高了Bcl-2/Bax蛋白的比值。结论:降糖消渴颗粒含药血清可抑制胰岛瘤细胞的INS-1凋亡,其机制可能与以线粒体为核心的凋亡途径有关。     

苦参碱抑制Akt信号通路诱导结肠癌SW480细胞凋亡

目的:研究苦参碱对人结肠癌SW480细胞的促凋亡作用及其可能的分子机制。方法:噻唑蓝比色法(MTT)测定苦参碱对SW480细胞株增殖的影响;Hoechst33258染色检测苦参碱对SW480细胞凋亡的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测苦参碱对SW480细胞中总蛋白激酶B(Akt),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的干预作用。结果:苦参碱(0.25,0.5,1.0,1.5,2.0 g·L~(-1))能浓度和时间依赖性地抑制SW480细胞增殖。作用24,48,72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为1.72,1.08,0.67 g·L~(-1),Hochest33258染色和流式细胞术结果显示苦参碱能显著诱导细胞凋亡(P0.01),随着药物质量浓度的提高,细胞凋亡率逐渐上升。Western blot检测显示,SW480细胞加入苦参碱后,胞内总Akt的含量无显著变化,但p-Akt的生成被显著抑制,凋亡抑制性蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax表达增高(P0.05)。结论:苦参碱能够诱导SW480细胞凋亡,该药理作用可能与苦参碱对Akt信号通路的抑制有关。     

姜黄素对SW480细胞凋亡的影响及机制研究

目的:通过体外培养结直肠癌SW480细胞株,观察姜黄素对人结直肠癌细胞凋亡的影响,并尝试探讨其诱导凋亡的分子机制,为结直肠癌的临床治疗提供实验依据。方法:体外培养结直肠癌SW480细胞株,给予不同浓度的姜黄素,通过流式细胞分析以及显微观察,分析SW480细胞的凋亡情况;采用ELISA法检测不同时间段SW480细胞培养上清中IL-6的浓度变化;利用Western blot检测SW480细胞株中STAT3蛋白表达水平。结果:给予姜黄素培养的SW480细胞株增殖率显著降低(P0.05),能明显检测到细胞凋亡的发生和形态学的改变,在培养24、48 h后,其细胞凋亡率显著高于空白对照组(P0.05);加入姜黄素培养的SW480细胞培养液上清中的IL-6水平显著低于空白对照组(P0.05);Western blot检测结直肠癌SW480细胞株中STAT3的表达发现,给予姜黄素处理后,细胞中STAT3蛋白表达水平显著低于空白对照组(P0.05或P0.01)。结论:姜黄素能诱导结直肠癌SW480细胞株发生凋亡,其机制可能与下调IL-6因子的表达,从而抑制JAK/STAT3信号通路有关。     

西黄丸浸提液对人乳腺癌癌前病变细胞mTOR与VEGF表达的影响

目的:探讨西黄丸浸提液对人乳腺癌癌前病变细胞株的影响及其作用机制。方法:以人乳腺癌癌前病变细胞为研究对象,MTT法检测不同剂量西黄丸浸提液对乳腺癌癌前病变细胞活性的影响,并用流式细胞术检测西黄丸浸提液引起的细胞周期及凋亡率,用Western blot方法检测mTOR与VEGF蛋白表达水平,初步探讨其作用机制。结果:与空白对照组比较,西黄丸浸提液10%、15%、20%浓度组及他莫昔芬组的细胞生长OD值减少,G_0/G_1期细胞数量比例增高,S期、G_2/M期细胞数量比例减少,细胞凋亡率增加,mTOR与VEGF蛋白表达水平降低(P0.01或P0.05)。结论:西黄丸浸提液可抑制乳腺癌癌前病变细胞活力、诱导细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制信号分子mTOR与VEGF蛋白的表达相关。     

黄连素调控GRP78诱导结肠癌细胞凋亡的研究

目的:考察黄连素是否通过调节GRP78表达而促进SW480细胞凋亡。方法:MTT法检测不同浓度黄连素对结肠癌细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡、Western blot法检测细胞GRP78、Bcl-2、Bax、GRP94的表达。结果:与对照组比较,不同浓度黄连素可呈浓度依赖性抑制SW480和HT-29细胞的增殖,其对SW480细胞的作用较强。黄连素可促进SW480细胞凋亡,抑制其GRP78表达,使Bax表达上调,Bcl-2表达下调。Bi X激活GRP78表达后,受黄连素作用的SW480细胞凋亡率降低,Bax表达下调,Bcl-2表达上调,但不同处理组GRP94表达均无显著变化。结论:黄连素可通过下调GRP78的表达来促进SW480细胞凋亡。