基于正/反向效应评价香附四物汤中主要药对的作用特点及对整方的贡献

目的:采用正/反向效应评价相结合的研究思路与方法探讨香附四物汤中主要药对的作用特点及对整方的贡献。方法:采用昆明种小鼠作为实验动物,香附-延胡索药对水提取物组、全方除去香附-延胡索药对水提取物组、全方水提取物组、香附-当归药对水提取物组、全方除去香附-当归药对水提取物组按1.17,3.71,5.46,1.75,3.70 g.kg-1剂量ig给药,空白对照ig生理盐水。以小鼠热板法、醋酸致小鼠扭体反应、小鼠原发性痛经模型和小鼠血虚模型,评价各给药组对不同模型小鼠的影响。结果:在3种疼痛模型中,香附-延胡索药对表现出很强的镇痛效果,当其在香附四物汤组方中被剔除后作用明显减弱或消失,而香附-当归药对的镇痛效果相对较弱,当其在香附四物汤组方中被剔除后作用没有明显减弱,有的甚至有所提高。小鼠血虚实验中,各给药组白细胞数、胸脾腺指数与模型组比较无显著性差异,从红细胞数和血红蛋白数指标变化发现,香附-当归药对具有很强的补血效应,而香附四物汤以及当其在香附四物汤组方中被剔除后,其均未表现出明显的补血作用。同时,香附四物汤能非常显著地升高痛经模型小鼠子宫组织中NO的含量,提高SOD活力,并降低Ca2+水平。结论:在香附四物汤中,香附-当归的补血作用减弱,而香附-延胡索的镇痛作用依然显著,并且香附四物汤抑制原发性痛经的作用机制可能与影响子宫组织中NO,Ca2+水平及提高SOD活力有关;同时通过实验发现采用正/反向效应评价相结合的方法是研究方剂配伍效应的有效途径。     

香附四物汤对原发性痛经(气滞血瘀型)凝血功能的影响

目的:观察香附四物汤对气滞血瘀型原发性痛经患者凝血功能的影响并评价其临床疗效.方法:选取12例气滞血瘀型原发性痛经患者,口服香附四物汤配方颗粒治疗3个月经周期,观察治疗前后临床疗效,并检测治疗前和治疗第2月经周期、第3月经周期月经来潮12小时内凝血功能.结果:经香附四物汤治疗后,12例患者总有效率为83.3%.治疗后凝血功能示APTT时间延长,与治疗前比较,差异有统计学意义(P＜0.05),其余项目治疗前后无明显变化(P＞0.05).结论:香附四物汤对气滞血瘀型原发性痛经患者疗效较好,且能延长APTT,可能为其治疗本病机制之一.     

四物汤组方中相关药对配伍关系研究

<正>四物汤乃治疗妇科疾病的著名方剂,有妇科圣方之誉。对于其功效,传统认为是补血活血[1],一般用于血虚证的治疗。关于四物汤的君药,历史上一直存在争议:一种看法认为四物汤为补血为主的方剂,故以地黄为君,《伤寒绪论》即     

香附四物汤与四物汤对急性血瘀模型大鼠血液流变性 及卵巢功能的影响

目的 :评价香附四物汤与四物汤对急性血瘀SD大鼠模型血液流变性、凝血功能及卵巢功能的影响。 方法 :采用冰水浴及注射肾上腺素的方法造成SD大鼠急性血瘀模型,对其血液流变性、凝血4项及卵巢分泌功能进行测定。 结果 :香附四物汤能有效改善急性血瘀SD大鼠全血黏度、血沉、红细胞压积,延长TT、APTT,降低FIB至正常水平,对卵巢功能也显示一定改善作用;而四物汤对以上各指标影响不明显。 结论 :在对急性血瘀模型大鼠的生物效应评价中,香附四物汤优于四物汤。     

基于nano LC-LTQ-Orbitrap-MS/MS的香附四物汤干预原发性痛经模型小鼠卵巢组织差异表达蛋白筛选

采用nano LC-LTQ-Orbitrap-MS/MS蛋白质组学方法筛选鉴定香附四物汤干预原发性痛经模型小鼠卵巢组织中的差异表达蛋白,推测香附四物汤治疗原发性痛经的机制。采用雌激素和缩宫素联合造成原发性痛经模型,给药组连续灌胃给予香附四物汤3 d,于末次给药后1 h,取卵巢,经蛋白提取、变性、还原、烷基化、脱盐、酶解后,进行nano LC分离并在线连接电喷雾串联Orbitrap质谱分析,利用Thermo Proteome discoverer 1.4进行数据处理,筛选并鉴定差异表达蛋白,对差异表达蛋白进行生物信息学分析。随后采用Western blot法,将重要差异蛋白进行验证。正常组、模型组、给药组3组共有的差异蛋白106个,参与细胞过程的蛋白所占比例较大,其所参与的黏着连接、黏着斑等信号通路对细胞内各种信号通路均有调节作用。验证的ADRM1蛋白在模型组中,较正常组表达上调;给药后,较模型组表达下调。通过有效的比较分析,得到一些香附四物汤干预原发性痛经的差异表达蛋白,其中ADRM1蛋白有可能是香附四物汤作用的靶点。     

四物汤及衍化方香附四物汤挥发性成分与子宫平滑肌收缩效应相关性分析

目的：探讨四物汤及类方香附四物汤挥发性成分与子宫平滑肌收缩效应之间的相关性。方法：采用GC-MS联用技术对四物汤、香附四物汤及组方中富含挥发性成分药材当归、川芎、香附、木香的挥发油成分进行分析鉴定；采用小鼠离体子宫收缩试验对四物汤、香附四物汤及组方药材挥发性成分的生物效应进行评价；选择相对含量高于1％的挥发性成分（53个）与子宫收缩效应的生物信息建立多变量数学模型，采用主成分分析（PCA）法对其相关性进行分析评价。结果：四物汤、香附四物汤挥发油的GC-MSTIC化学信号主要来源于当归、川芎药材的贡献；香附四物汤中对应于香附、木香的挥发性成分信号数及相对丰度表现均不及两药材挥发油各自的组成及相对含量；PCA分析结果表明21个化学成分对活性贡献率较大，其中对四物汤挥发油活性贡献率较大的成分主要有：（Z）-ligustilide、cis-ocimene、γ-selinene、Spathulenol、3-butylidene phathalide、（E）-ligustilide等；对香附四物汤挥发油活性贡献率较大的成分主要有：Dehydrocostuslactone、Cyperene、β-caryophyllene、γ-selinene、Curcumene、α-elemene、β-cyperone、α-cyperone、（Z）-ligustilide、Squalene等，分析结果支持了本实验结果。结论：香附四物汤中的挥发油部位具有显著的抑制子宫平滑肌收缩效应；香附四物汤挥发油活性优于四物汤及各组方药材挥发油，其中作为行气、止痛、调经常用药材的香附、木香挥发性成分与治疗气滞血瘀型痛经密切相关。同时，本文采用的GC—MS和PCA联用方法可以较客观的评价化学成分对活性的贡献率，分析化学成分与生物效应之间的相关性，故该方法可为方剂复杂效应物质的阐明提供思路和方法的借鉴与参考。     

四物汤及衍化方香附四物汤挥发性成分与子宫平滑肌收缩效应相关性分析

目的:探讨四物汤及类方香附四物汤挥发性成分与子宫平滑肌收缩效应之间的相关性.方法:采用GC-MS联用技术对四物汤、香附四物汤及组方中富含挥发性成分药材当归、川芎、香附、木香的挥发油成分进行分析鉴定;采用小鼠离体子宫收缩试验对四物汤、香附四物汤及组方药材挥发性成分的生物效应进行评价;选择相对含量高于1%的挥发性成分(53个)与子宫收缩效应的生物信息建立多变量数学模型,采用主成分分析(PCA)法对其相关性进行分析评价.结果:四物汤、香附四物汤挥发油的GC-MSTIC化学信号主要来源于当归、川芎药材的贡献;香附四物汤中对应于香附、木香的挥发性成分信号数及相对丰度表现均不及两药材挥发油各自的组成及相对含量;PCA分析结果表明21个化学成分对活性贡献率较大,其中对四物汤挥发油活性贡献率较大的成分主要有:(Z)-ligustilide、 cis-ocimene、γ-selinene、 Spathulenol、 3-butylidene phathalide、 (E)-ligustilide等;对香附四物汤挥发油活性贡献率较大的成分主要有:Dehydrocostuslactone、 Cyperene、β-caryophyllene、γ-selinene、 Curcumene、α-elemene、β-cyperone、α-cyperone、 (Z)-ligustilide、 Squalene等,分析结果支持了本实验结果.结论:香附四物汤中的挥发油部位具有显著的抑制子宫平滑肌收缩效应;香附四物汤挥发油活性优于四物汤及各组方药材挥发油,其中作为行气、止痛、调经常用药材的香附、木香挥发性成分与治疗气滞血瘀型痛经密切相关.同时,本文采用的GC-MS和PCA联用方法可以较客观的评价化学成分对活性的贡献率,分析化学成分与生物效应之间的相关性,故该方法可为方剂复杂效应物质的阐明提供思路和方法的借鉴与参考.     

微透析-HPLC-ECD联用技术用于香附四物汤对大鼠脑内5-HIAA动态变化的评价(英文)

原发性痛经被认为是与性激素紊乱伴随月经前的孕酮减少有关。下丘脑的单胺和其代谢产物可能参与了这个病理过程。用微透析结合HPLC-ECD快速鉴定正常和原发性痛经模型大鼠下丘脑中的5-HIAA。微透析样品中5-HIAA的检测限和定量限分别是1.5ng/mL和5.0ng/mL。校准曲线在10-250ng/mL的浓度范围内为线性。痛经模型大鼠的5-HIAA的含量和正常对照组相比有显著的增加,表明原发性痛经导致5-HIAA的增加。经过香附四物汤的治疗,5-HIAA的含量降低,显示香附四物汤通过降低下丘脑的5-羟色胺的代谢率从而减轻原发性痛经的疼痛综合症。     

四物汤抗痛经作用的组方配比研究

目的：探讨四物汤抗痛经作用的最佳组方。方法：用四因素三水平的正交试验以小鼠痛经模型为指标,评价抗痛经作用。结果：在四物汤中,当归抗小鼠痛经作用的药效水平3（12 g）显著高于水平1（3 g）和2（6 g）,川芎水平3（9 g）与水平1（3 g）和2（6 g）相比有增强趋势;熟地黄、白芍的3个水平的药效几乎在同一水平。结论：四物汤抗痛经组方的最佳配比选为当归12 g,川芎9 g,白芍6 g和熟地黄9 g。     

香附四物汤对小鼠脾淋巴细胞增殖转化影响的效应物质基础研究

目的:评价香附四物汤及各分离化学部位对小鼠脾淋巴细胞增殖转化的影响。方法:采用小鼠脾淋巴细胞增殖与转化实验方法,对香附四物汤及各分离化学部位进行免疫相关的生物效应评价;采用HPLC对效应显著部位的化学成分进行定性定量分析。结果:香附四物汤、醇沉上清液部位及其经大孔吸附树脂吸附后30%乙醇洗脱部位具有明显促进小鼠脾淋巴细胞增殖与转化作用,其中,30%乙醇洗脱部位的生物效应显著;对30%效应部位进行定性定量分析表明其主要组成及其含量分别为芍药内酯苷5.973%,芍药苷5.902%,阿魏酸1.374%,洋川芎内酯I 0.014%。结论:香附四物汤对小鼠脾淋巴细胞增殖转化影响的主要效应物质基础是含有芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸和洋川芎内酯I等的30%乙醇洗脱部位。     

香附四物汤对气滞血瘀证雌性大鼠神经-内分泌-免疫网络的调控与影响

目的： 评价香附四物汤对气滞血瘀证雌性大鼠血液、神经-内分泌-免疫（NEI）系统部分指标的调控与影响。 方法： 选用SD雌性大鼠,随机分为正常组、模型组、阳性药组、香附四物汤组,采用14 d皮下注射盐酸肾上腺素（Adr）0.9 mg·kg^-1·d^-1附加慢性不可预见性刺激复制气滞血瘀证模型,给药组给予香附四物汤干预,酶联免疫法及免疫组化法测定模型大鼠给药前后血浆中白介素-6（IL-6）、白三烯B₄（LTB₄）、雌二醇（E₂）、孕酮（P）、前列腺素E₂（PGE₂）、一氧化氮（NO）等因子含量及下丘脑组织中β-内啡肽水平。PLS-DA法对测定因子统计分析。 结果： 与正常组相比,模型组血液流变学指标显著升高（P<0.05,P<0.01）,血浆凝血酶时间（TT）及活化部分凝血活酶（APTT）时间显著缩短（P<0.01）,凝血酶原时间（PT）及纤维蛋白原无显著改变;血浆中IL-6,P含量显著升高,E₂,PGE₂,NO含量显著降低（P<0.01）,LTB₄含量无显著变化;下丘脑组织β-内啡肽蛋白表达显著降低（P<0.01）;香附四物汤给药组对气滞血瘀证模型有明显改善作用（P<0.01,P<0.05）。PLS-DA统计分析结果表明,血液指标：全血黏度（30 s^-1）、血浆黏度、凝血酶时间;神经系统指标：水平运动次数、β-内啡肽表达荧光面积、垂直运动次数、β-内啡肽表达荧光强度、中心格停留时间;内分泌指标：雌二醇、孕酮;免疫指标：前列腺素E₂为主要差异指标。 结论： 香附四物汤对气滞血瘀证雌性大鼠的血液、神经、内分泌、免疫系统相关生物学指标具有明确的调控作用,该作用与调控内环境稳态有关。     

桃红四物汤及配伍药对桃仁-红花与四物汤用于原发性痛经作用的比较研究

目的:基本方四物汤(SW)、衍化方桃红四物汤(THSW)及配伍药物对桃仁-红花(TH)用于妇科血瘀证原发性痛经的作用比较研究,以阐明方剂的配伍规律。方法:采用冰水浴及注射肾上腺素(0.8 ml/kg)的方法复制大鼠急性血瘀模型,灌胃给予5倍的临床剂量,对其血液流变性、凝血4项指标进行测定,HE染色光镜观察子宫、卵巢组织形态学变化;采用乙酰苯肼(10 mg/kg)及环磷酰胺(50 mg/kg)联合复制大鼠血虚模型,灌胃给予等效的临床剂量,对其外周血象、脏器指数进行测定及观察脾脏的形态学变化;采用小鼠注射苯甲酸雌二醇(0.01mg/g)和催产素(0.01ml/g)复制痛经模型,灌胃给予等效的临床剂量,观察并记录给催产素后30 min内小鼠扭体反应发生的次数及对子宫组织匀浆中Ca2+和NO含量进行测定。结果:在大鼠急性血瘀模型中,5倍临床剂量的桃红四物汤(22.95 g生药/kg)可以显著降低低切变率时全血黏度,延长凝血时间;5倍临床剂量的桃仁-红花(6.75 g生药/kg)可以降低全血黏度、血浆黏度、血沉和红细胞压积,延长凝血时间、凝血酶原时间和部分活化凝血活酶时间及降低纤维蛋白原含量;5倍临床剂量四物汤的(16.2 g生药/kg)对血液流变各项指标影响不明显;5倍临床剂量的四物汤、桃红四物汤和TH对子宫、卵巢均有一定的保护作用。在大鼠血虚模型中,等效临床剂量的四物汤(3.24 g生药/kg)和桃红四物汤(4.59 g生药/kg)可以显著升高红细胞的数量,显著降低红细胞平均体积,对肝脏指数的恢复有显著的效果;等效临床剂量的SW对脾脏有一定的保护作用。等效临床剂量的桃仁-红花(1.35 g生药/kg)可以显著升高白细胞和血小板的数量。在小鼠痛经模型中,等效临床剂量的桃红四物汤(0.665 g生药/kg)可显著降低扭体次数,这可能与其显著降低子宫组织匀浆中Ca2+含量和显著增加NO含量有关;等效临床剂量的桃仁-红花(0.195 g生药/kg)可显著降低扭体次数,但机制不明。结论:本实验研究结果表明衍化方桃红四物汤配伍桃仁-红花后与基本方四物汤比较,保留了基本方的基本功效,并且有不同程度的增强趋势。     

桃红四物汤治疗子宫腺肌症痛经的临床疗效观察

目的:探究桃红四物汤治疗子宫腺肌症痛经患者的临床疗效。方法:选取2013年4月至2015年10月海口市中医医院门诊治疗的65例子宫腺肌症患者,根据入院时间先后将患者随机分为观察组33例和对照组32例,对照组患者采用常规西药治疗,观察组患者采用桃红四物汤治疗,观察并记录2组患者临床疗效,治疗前后视觉模拟评分、血清Ca125值变化情况,分析比较。结果:观察组接受治疗后,痊愈患者12例,总有效率87.88%;对照组治愈患者仅1例,总有效率只有53.13%,2组比较有统计学意义(P0.05)。2组患者VAS评分在接受治疗后均有明显降低,与治疗前比较差异有统计学意义(P0.05);观察组患者治疗后VAS评分平均:(2.27±1.54)分,对照组仍较高,平均为(4.82±2.19)分,2组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗前2组患者血清Ca125值差异无统计学意义(P0.05);治疗后2组患者血清Ca125水平均有明显下降,且观察组较低,2组比较差异有统计学意义(P0.05)。对照组有总不良反应发生率为9.37%,观察组无任何不良反应出现,2组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:桃红四物汤治疗子宫腺肌症痛经患者临床疗效好,多数患者疼痛减轻,月经不调现象消失,子宫大小恢复正常,且无任何不良反应,安全性高,值得广泛推荐使用于临床当中。     

应用复合磷脂脂质体人工皮肤膜表征香附四物汤活性部位生物药剂学性质

目的评价应用复合磷脂脂质体人工皮肤膜(CPLASM)测定参数表征香附四物汤(XSD)活性部位透皮吸收生物药剂学性质的可行性。方法建立HPLC方法同时测定XSD活性部位中活性成分(阿魏酸、四氢非洲防己碱、延胡索乙素、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H)的质量分数并测定其油水分配系数。制备CPLASM,用其测定XSD活性部位的体外透皮吸收参数,并与猪耳皮测得的透皮吸收参数进行比较。结果 XSD活性部位(pH 5.5)中阿魏酸、四氢非洲防己碱、延胡索乙素、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H的油水分配系数分别为1.220±0.280、0.670±0.085、0.920±0.110、1.040±0.092、1.030±0.093(n=3)。应用CPLASM和猪耳皮测得的各成分透皮吸收参数显著相关,相关系数均高于0.9。与经典的油水分配系数相比,5种活性成分透过CPLASM 6 h的累积透过率可以有效表征其透过猪耳皮的渗透系数。结论应用CPLASM测定中药活性成分体外透皮吸收参数能够有效表征中药活性部位的生物药剂学性质。     

香附四物汤效应部位体外透皮吸收性质的研究

目的考察香附四物汤效应部位体外透皮吸收性质。方法建立UPLC-MS/MS方法测定香附四物汤效应部位(BW)以及透皮接收液中6个主要活性成分(阿魏酸、芍药苷、芍药苷内酯、四氢非洲防己碱、普鲁托品、延胡索乙素)的量;将这6个活性成分按照BW中的比例混合制备活性组分群;采用改良Franz扩散池以及离体大鼠腹部皮肤进行体外透皮吸收实验。结果 UPLC-MS/MS方法专属性良好,各成分均有良好的线性关系(r0.997)、精密度(RSD≤2.66%)、重复性(RSD≤2.98%)、稳定性(RSD≤3.99%)和准确性[平均加样回收率(95.22±5.48)%~(103.68±2.90)%]。活性组分群和BW中活性成分的累积透过率顺序相同:阿魏酸四氢非洲防己碱延胡索乙素普鲁托品芍药苷≈芍药内酯苷,且供给液的p H值显著影响活性成分的体外透皮吸收。结论活性组分群与BW体外透皮吸收行为具有一致性,p H值能够改变活性成分的体外透皮吸收行为。     

桃红四物汤的药理作用研究进展

桃红四物汤又称“加味四物汤”,其配方是在熟地黄、白芍、当归、川芎配伍成四物汤的基础上,加入桃仁、红花两味药而成.从功效主治和药理作用方面来看,四物汤和桃红四物汤的临床应用存在着一定的差异性,但随着研究的进步,桃红四物汤的实验研究和临床应用都有了新的跨越.因此本文在总结桃红四物汤已经证实的药理作用的基础上,运用拆方分析法...     

四物汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂有效成分比较

目的比较四物汤传统饮片汤剂与其配方颗粒汤剂有效成分的含有量差异。方法四物汤传统饮片汤剂与其配方颗粒汤剂溶液的分析采用依利特SinoChrom ODB-BP柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;体积流量0.8 mL/min;检测波长215 nm(没食子酸),230 nm(芍药苷),330 nm(绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、毛蕊花糖苷);柱温30℃。结果 6种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 6),平均加样回收率96.81%～99.01%,RSD 0.81%～1.58%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于四物汤的质量控制。