肾虚型老年痴呆动物模型的建立

目的探讨通过皮下注射氢化可的松复合侧脑室注射β-淀粉样蛋白(Aβ)建立肾虚型老年痴呆动物模型的方法,为抗痴呆中药新药的研究提供实验模型。方法分别给予动物皮下注射氢化可的松、侧脑室注射β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)、皮下注射氢化可的松复合侧脑室注射Aβ25-35,通过体质量变化、跑步力竭时间、免疫学指标、血清皮质酮水平变化评价是否造成动物肾虚,通过morris水迷宫测试、脑组织病理学变化评价是否造成痴呆。结果与对照组相比,氢化可的松组动物出现体质量增长缓慢,自主活动减少,水迷宫上台潜伏期稍有延长,跑步力竭时间缩短,胸腺和脾指数降低,脾细胞刺激指数降低,血清皮质酮值降低;脑室注射Aβ的动物水迷宫上台潜伏期延长,但不出现前述的一系列肾虚表现;皮下注射氢化可的松复合侧脑室注射Aβ6μg的动物既出现肾虚的表现又出现学习记忆障碍;皮下注射氢化可的松复合侧脑室注射Aβ3μg也造成动物的肾虚表现,但并未造成严重的学习记忆障碍。结论皮下注射氢化可的松造成动物肾虚表现,侧脑室注射Aβ25-356μg可造成动物学习记忆障碍,皮下注射氢化可的松复合侧脑室注射Aβ25-356μg的动物既有肾虚证的表现也有学习记忆障碍,认为造成了肾虚型老年痴呆模型。     

不同滋阴中药对小鼠诱发性肺肿瘤发生及抗肿瘤免疫功能的影响

目的:研究六味地黄丸和二冬膏对乌拉坦诱发性肺肿瘤小鼠的肿瘤发生情况和抗肿瘤免疫功能的影响.方法:雌性昆明种小鼠33只,使用乌拉坦(1 g·kg-1·d-1)注射诱发小鼠肺肿瘤,随机分为对照组、六味地黄丸组(ig 1.56 g·kg-1·d-1)和二冬膏组(ig 0.78 g·kg-1·d-1),连续给药100 d后肉眼及病理切片和苏木精-伊红染色观察药物对小鼠肺肿瘤发生的影响,测定脾指数、胸腺指数、巨噬细胞吞噬功能以及测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果:与对照组比较,六味地黄丸和二冬膏给药组小鼠肺肿瘤诱发率明显降低,诱发率分别是63.6％,18.2％,36.4％.与对照组比较,六味地黄丸和二冬膏给药组小鼠脾指数、巨噬细胞活性明显增高(P ＜0.05或P＜0.01),小鼠血清中TNF-α含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:六味地黄丸和二冬膏均能通过提高小鼠的抗肿瘤免疫功能和减少炎症因子产生来延缓乌拉坦诱发肺肿瘤的发生发展.     

不同剂量六味地黄丸对胰岛素抵抗小鼠糖代谢及体重的影响

目的:探讨不同剂量六味地黄丸对胰岛素抵抗小鼠糖代谢及体重的影响。方法:应用不同剂量六味地黄丸干预高脂饮食诱导的胰岛素抵抗小鼠。药物干预6周后检测小鼠糖耐量。干预8周后检测空腹血糖,留取血清检测空腹胰岛素,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR); 检测未羧化骨钙素(ucOC)、羧化骨钙素(cOC),计算两者之间的比值; 计算药物干预前后小鼠的体重增幅。对HOMA-IR、骨钙素、体重增幅两两之间做相关性分析。结果:与模型组比较,六味地黄丸各剂量组均能够改善胰岛素抵抗小鼠的糖耐量,尤以六味地黄丸小剂量组的作用显著。与模型组比较,六味地黄丸小剂量组和六味地黄丸大剂量组可改善胰岛素抵抗小鼠的HOMA-IR(均P<0.01),且六味地黄丸小剂量组具有更好的改善作用。与模型组比较,六味地黄丸小剂量组治疗前后体重增幅最小,差异有统计学意义(P<0.05)。六味地黄丸中、大剂量组体重增幅与模型组比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。体重增幅与HOMA-IR呈正相关(r=0.711,P<0.01); 体重增幅与ucOC/cOC呈负相关(r=-0.387,P<0.01),但与ucOC无相关性(r=-0.141,P>0.05); HOMA-IR与ucOC/cOC呈负相关(r=-0.358,P<0.05),但与ucOC无相关性(r=-0.156,P>0.05)。结论:六味地黄丸小剂量组可更好改善胰岛素抵抗小鼠糖耐量和胰岛素抵抗,对体重增幅的影响最小,其作用可能与ucOC/cOC有关。     

六味地黄丸协同雷尼替丁对大鼠乙酸胃溃疡的治疗作用研究

目的 探讨六味地黄丸对乙酸胃溃疡的辅助治疗作用及机制.方法 制备乙酸诱发大鼠胃溃疡模型,大鼠随机分为5组(正常对照组、模型对照组、六味地黄丸组、雷尼替丁组、六味地黄丸加雷尼替丁组),运用单向免疫扩散法检测血清IgA、IgG、IgM含量,ELISA法检测血清白细胞介素-2(IL-2)的变化,并通过形态学方法计算溃疡指数和抑制率. 结果在细胞免疫方面:模型对照组IL-2含量显著低于正常对照组,药物治疗的3组IL-2含量显著升高,IL-2的水平,六味地黄丸加雷尼替丁组高于六味地黄丸组高于雷尼替丁组.在体液免疫方面:模型对照组、正常对照组和雷尼替丁组,血清免疫球蛋白IgA,IgG,IgM含量无显著差异,六味地黄丸明显提高IgA,IgM含量,且IgG升高更为显著;在治疗效果方面:药物治疗的3组,溃疡指数明显下降,且六味地黄丸加雷尼替丁组优于雷尼替丁组优于六味地黄丸组.结论 制酸剂在对胃溃疡的治疗作用优于六味地黄丸,但是六味地黄丸通过提高细胞免疫和体液免疫水平,对大鼠乙酸胃溃疡具有治疗作用,在联合抗酸药物治疗胃溃疡中,对于提高疗效有一定的辅助作用.     

补肾填精法对肾虚阿尔茨海默小鼠海马自噬的干预作用

目的:通过研究六味地黄丸对肾虚阿尔茨海默病(AD)小鼠海马神经元自噬水平的改善作用及部分机制,探讨补肾填精法对AD的部分治疗机制。方法:健康雄性C57-B6小鼠分为正常组,AD组,肾虚AD组,六味地黄丸组(1. 08 g·kg~(-1))。正常组与AD组每日皮下注射生理盐水(15 m L·kg~(-1)),肾虚AD组和六味地黄丸组每日皮下注射氢化可的松注射液(15 m L·kg~(-1)),连续注射20 d。第21天除正常组侧脑室注射无菌生理盐水外,其余3组侧脑室注射β淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35)),6μg/只。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组小鼠血清皮质醇、睾酮水平;透射电镜观察海马神经元细胞形态变化;免疫荧光检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测选择性自噬接头蛋白(p62)的蛋白表达。结果:与正常组比较,AD组和肾虚AD组小鼠的血清皮质醇、睾酮水平显著降低(P 0. 01),小鼠海马LC3表达显著减少(P 0. 01),小鼠海马p62蛋白表达显著增加(P 0. 01);与AD组比较,肾虚AD组小鼠的血清皮质醇、睾酮水平明显降低(P 0. 05,P 0. 01),小鼠海马p62蛋白表达显著增加(P 0. 01);与AD组和肾虚AD组比较,六味地黄丸组小鼠的血清皮质醇、睾酮水平显著升高(P 0. 01),小鼠海马LC3表达显著增多(P 0. 01),p62蛋白表达显著减少(P 0. 01)。正常组和六味地黄丸组小鼠神经元细胞内可见自噬小体,AD组和肾虚AD组小鼠神经元细胞内自噬小体鲜见。结论:补肾填精法能保护海马神经元细胞,增加海马神经元中LC3表达,降低p62表达水平,提高海马神经元自噬水平,对肾虚阿尔茨海默病具有一定的治疗作用。     

六味地黄丸对老年大鼠学习记忆及脑内M1胆碱受体阳性神经元的影响

目的:观察六味地黄丸对老年大鼠学习记忆及脑内M1胆碱受体(MI-AchR)阳性神经元的影响,探讨滋阴补肾法改善老年大鼠学习记忆能力的可能机制.方法:将雄性SD大鼠分为青年对照组(3月龄)、老年对照组(24月龄)和六味地黄丸组(24月龄).六味地黄丸组大鼠按3 g·kg-1 ig六味地黄丸液,老年对照组ig同体积生理盐水,各30 d;青年对照组ig同体积生理盐水7d.通过Morris水迷宫实验,比较其学习记忆能力,并运用免疫组织化学方法,检测大脑海马和皮质相关区域M1-AchR阳性神经元变化.结果:老年对照组各指标与青年对照组比,有极显著性差异(P＜0.01).六味地黄丸组平均逃避潜伏期自第3天起较老年对照组明显缩短,有极显著性差异(P＜0.01).目标象限游程占全部游程百分比方面,与老年对照组相比,六味地黄丸组有极显著性差异(P＜0.01);六味地黄丸组与老年对照组穿越平台次数相比,有极显著性差异(P＜0.01).与老年对照组相比,六味地黄丸组M1-AchR阳性细胞数目增多,在海马CA3区及第一躯体感觉区(S1Tr)内,有极显著性差异(P＜0.01).结论:六味地黄丸可以改善自然衰老大鼠的空间学习记忆能力,可能与其保护海马CA3区及S1Tr内胆碱能毒蕈碱M1-AchR阳性神经元,增强中枢胆碱能系统功能有关.     

六味地黄丸对甲状腺素诱导阴虚证小鼠肝脏损伤的保护作用

目的探讨六味地黄丸对甲状腺素诱导的阴虚证小鼠肝脏损伤的保护作用。方法 ICR系小鼠30只随机分为正常组、模型组和六味地黄丸组(生药含量1.8 g/kg),除正常组外其他小鼠用皮下注射L-甲状腺素(280μg/kg)方法建立阴虚证模型。1周后,造模同时开始灌胃给予六味地黄丸溶液,连续3周,其间测量小鼠体质量、体温、自主活动次数、痛阈和心率,评价阴虚证模型以及药物的对抗作用。实验结束时检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,以及总蛋白(TP)、总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)含量;剥离肝脏并称重,计算肝脏指数;HPLC法检测肝脏能量物质磷酸肌酸(PCr)、三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和单磷酸腺苷(AMP)含量,计算腺苷酸总含量TAN(ATP+ADP+AMP);检测肝脏环磷腺苷(cAMP)含量。结果模型小鼠体质量、体温、自主活动次数、痛阈和心率等阴虚指标出现异常,六味地黄丸有一定的改善作用。与正常组比较,模型组肝脏指数和血清ALT和AST活性显著升高,血清TC和TP水平显著降低,肝脏组织ATP、ADP、AMP、cAMP、TAN含量显著降低(P0.05,P0.01)。与模型组比较,六味地黄丸组血清ALT和AST活性显著降低,血清TC和TP水平显著升高,肝脏组织ADP、cAMP、TAN含量显著升高(P0.05,P0.01),ATP、AMP含量也有升高趋势。结论六味地黄丸对L-甲状腺素诱导的阴虚证小鼠肝脏损伤具有一定的保护作用,这可能与改善肝脏组织能量代谢紊乱作用有关。     

六味地黄丸对痴呆模型小鼠学习记忆及细胞因子的影响

目的:研究六味地黄丸对痴呆小鼠学习记忆能力及细胞因子IL-2、IL-6的影响,探讨其防治老年性痴呆的机制。方法:以自然快速老化的痴呆模型小鼠SAMP8为动物模型,治疗组予六味地黄丸,以吡拉西坦片为阳性对照组,治疗4周后,用Morris水迷宫检测痴呆小鼠的学习记忆能力,并检测小鼠海马IL-2、IL-6的含量。结果:六味地黄丸可使痴呆小鼠学习记忆能力增强,使海马组织IL-2、IL-6降低,检测指标改善效果强于吡拉西坦片组(P<0.05)。结论:六味地黄丸可以改善痴呆小鼠的学习记忆障碍,降低脑组织中细胞因子IL-2、IL-6是其可能的作用机制。     

鬼针草醇提物对糖尿病小鼠糖耐量及胸腺、脾脏指数的影响

目的:研究鬼针草提取物对糖尿病小鼠血糖、糖耐量及胸腺、脾脏指数的影响.方法:采用一次性ip四氧嘧啶(185 mg·kg-1)致糖尿病小鼠模型,分别给予格列本脲(25 mg·kg-1·d-1)、鬼针草醇提物高、中、低剂量(585,292,146 mg·kg-1·d -1)及生理盐水ig 14 d,测定各组小鼠空腹血糖值;第14天ig后30 min,给予ig葡萄糖溶液,观察小鼠的糖耐量;并计算小鼠胸、脾指数.结果:与模型组小鼠血糖值( 33.89±12.11)mmol·L-1相比,鬼针草醇提物高、中、低剂量组ig给药14 d后均能降低糖尿病小鼠的血糖,分别为(19.88±9.26),(21.68±6.17),(22.05±11.02) mmol·L-1(P ＜0.01或P＜0.05));鬼针草醇提物高、中、低剂量组在ig葡萄糖后0,0.5,1,2h均可较好改善糖尿病小鼠糖耐量(P＜0.01),并能提高糖尿病小鼠的胸腺指数(2.78 ±0.12),(2.21±0.91),(1.57±0.11) mg·g-1,与模型组胸腺指数(0.87±0.12) mg·g-1比P ＜0.05;脾指数(4.61±0.37),(3.31±0.62),(3.25±0.36)mg·g-1与模型组脾指数(3.04±0.86) mg·g-1比,P＜0.05均显著提高.结论:鬼针草醇提物具有降低糖尿病小鼠血糖、改善小鼠糖耐量及提高糖尿病小鼠胸腺、脾指数的作用.     

柴板合剂对流感小鼠肺保护作用及其对免疫器官影响的实验研究

目的:观察柴板合剂对流感病毒感染小鼠肺组织的保护作用及其对胸腺指数、脾指数的影响.方法:以滴鼻的方式建立流感病毒肺适应株感染小鼠动物模型,实验设6个组,即空白对照组、模型对照组、利巴韦林组、抗病毒颗粒组、柴板合剂低剂量组、柴板合刺高剂量组.给药后观察动物,给药后的第6天分别检测与分析各组肺指数、脾指数和胸腺指数和肺组织的病理变化.结果:与模型组比较,柴板合剂低、高剂量均可改善流感病毒感染小鼠一般行为,并增加其体重、胸腺指数、脾指数,降低肺指数(P<0.05,P<0.01),可改善小鼠肺部病理变化.结论:柴板合剂可保护流感小鼠免疫器官,减轻小鼠肺部炎症.     

六味地黄丸对自发乳腺癌小鼠瘤块中血管内皮生长因子和周期蛋白D3基因表达的影响

目的:探讨六味地黄丸对小鼠自发乳腺癌的影响。方法:以清洁级昆明小鼠雌性种鼠自发乳腺癌为模型,用六味地黄丸治疗直至濒死期,瘤块病理分析用HE染色,血管内皮生长因子(VEGF)和周期蛋白D3(cyclin D3)基因表达的产物用RT-PCR及Western bloting方法。结果:六味地黄丸组的瘤组织分化优于对照组,瘤重明显低于对照组(P0.05),瘤块中VEGF和cyclin D3基因表达产物也明显低于对照组(P0.05)。结论:六味地黄丸抑制乳腺癌的生长,促进细胞分化,可能的机制是抑制VEGF和cyclin D3基因表达。ds     

二至丸、地黄煎影响小鼠免疫功能的比较研究

目的:探讨二至丸、地黄煎的免疫调节作用.方法:采用KM雌性小白鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、香菇多糖(10 mg·kg-1)组、二至丸合地黄煎组(18.2 g·kg-1)、二至丸组(7.8 g·kg-1)和地黄煎(10.4 g·kg-1)组.除了正常对照组外,其余各组均给小鼠ip环磷酰胺建立免疫低下模型,各组分别按设计剂量连续ig给药1周.检测小鼠胸腺指数、脾指数、血清白细胞介素1-α(IL-1α)水平、脾细胞的细胞周期及脾细胞凋亡率.结果:模型组小鼠胸腺指数(1.84±0.46)mg·g-1、脾指数(2.14±0.61)mg·g-1、IL-1α水平(135.21±28.69)ng·L-1均显著性降低,脾细胞增殖周期抑制[S期(2.37±3.08)％],脾细胞凋亡率高达52.86％;而二至丸合地黄煎组、二至丸组、地黄煎组及香菇多糖组均可不同程度地升高胸腺指数(二至丸合地黄煎组:(2.41±0.66) mg·g-1,二至丸组:(2.57±0.62)mg·g-1,地黄煎组:(2.47±0.63)mg·g-1、脾指数(二至丸合地黄煎组(5.17±1.58)mg·g-1,二至丸组:(4.40±0.87)mg·g-1,地黄煎组:(5.03±1.21) mg·g-1、IL-1α水平(二至丸合地黄煎组( 180.72±38.94) mg·g-1,二至丸组(179.51±43.46) mg·g-1,地黄煎组(172.93±40.91)ng·L-1,可不同程度地拮抗环磷酰胺引起的脾细胞增殖抑制,二至丸合地黄煎组( 15.17±2.79)％,二至丸组(9.55±3.73)％,地黄煎组(10.86±4.29)％及凋亡(二至丸合地黄煎组(5.26±7.14)％,二至丸组(8.34±3.68)％,地黄煎组(6.79±4.31)％.结论:二至丸方、地黄煎方及二至丸合地黄煎组方均可提高免疫低下实验小鼠的免疫功能,均具有抗凋亡作用,其中二至丸、地黄煎两方合用效果较单方更好.     

五子衍宗丸对大鼠交配功能和肾阳虚模型小鼠的影响

目的:研究五子衍宗丸对大鼠交配功能及肾阳虚小鼠的影响,探讨该药补肾壮阳的药理作用.方法:①选用Wistar种系雄性大鼠,随机分为正常对照组、男宝组(0.35 g·kg-1)、五子衍宗丸高、中、低剂量组(2.0,1.0,0.5 g·kg-1),ig给药28 d,与摘除卵巢14 d的雌鼠合笼观察其交配能力.测定雄鼠扑捉潜伏期、射精潜伏期、扑捉次数及射精次数.取血测定血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)等指标;②选用ICR雄性小鼠,随机分为正常对照组、模型组、男宝组(0.5 g·kg-1)五子衍宗丸高、中、低剂量组(2.4,1.2,0.6 g·kg-1).除正常对照组外,各组均肌注氢化可的松造模(37.5 mg· kg-1),1次/日,连续7d,造成小鼠肾阳虚模型,ig给药7 d.记录各组动物体重、体温、自主活动数及低温游泳存活时间.分别称量脾脏、胸腺及生殖器官质量并计算脏器指数.结果:五子衍宗丸组大鼠的扑捉次数、射精次数及附睾指数明显增加(P＜0.05～P＜0.01),T有升高的趋势、LH显著降低(P ＜0.01 ～P ＜0.001).五子衍宗丸小鼠低温游泳存活时间明显延长(P＜0.01～P＜0.001),体温及自主活动数有升高趋势,脾脏及提肛肌指数有所升高(P＜0.05),睾丸及附睾指数有增加的趋势.结论:提示五子衍宗丸具有补肾壮阳改善男性性功能低下的作用;并具有明显耐寒、抗疲劳,改善肾阳虚证候作用.     

六味地黄丸血中移行成分对氢化可的松致大鼠肾虚动物模型的保护作用

目的:通过研究六味地黄丸血中移行成分对氢化可的松致大鼠肾虚动物模型的保护作用,阐明六味地黄丸补肾的药效物质基础。方法:70只大鼠随机分为空白组、模型组、总组分组、混合组分组、5-羟甲基-2-糠酸(5-HMFA)组、丹皮酚组和六味组共7个实验组,按5 mL/kg体重连续9 d分别灌胃给予蒸馏水、蒸馏水、总组分药液、混合组分药液、5-HMFA药液和丹皮酚药液;第5~9天,除空白组皮下注射生理盐水外,其他各组按5 mL/kg体重每天皮下注射氢化可的松注射液25 mg/kg,于实验的第10天测定体重等10项评价指标。结果:与模型组相比,各给药组动物的检测指标均有明显改善,其中莫诺苷、獐牙菜苷、马钱子苷的混合物组作用最显著。结论:初步确定所分离得到的六味地黄丸的血中移行成分是六味地黄丸补肾的药效物质基础,其中以莫诺苷,獐牙菜苷和马钱子苷的作用最为明显,是补肾的核心成分。     

补肾健脾法对氢化可的松诱发的脾肾虚证小鼠肾上腺功能的影响

目的研究补肾健脾法对氢化可的松诱发的脾肾虚证小鼠肾上腺功能的影响。方法将60只ICR小鼠随机分为正常对照组、氢化可的松组、四君子汤组[12.75 g(生药)/kg]、六味地黄汤组[12.5 g(生药)/kg]、桂附地黄汤组[13.5 g(生药)/kg],连续灌胃给药氢化可的松(1.65 mg/kg)14 d建立药源性证候模型;各中药复方组在灌胃氢化可的松的同时及停止氢化可的松灌胃后7 d,每日分别灌胃给药3个中药复方。每日称定小鼠体质量;在第14、21天,运用小鼠辨证论治实验方法学观测小鼠四诊指标;在第15、22天,计算脾脏、胸腺指数,ELISA检测血清皮质酮、促肾上腺皮质激素、肾上腺素和去甲肾上腺素水平,采用实时荧光定量PCR技术检测Star、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1、Cyp11b2、Dbh、Ddc、Pnmt、Th mRNA表达,Western blot检测LDLR、SRBI、Star蛋白表达。结果氢化可的松干预后,小鼠体质量,抓力,尾部最低温度,脾脏、胸腺指数,血清皮质酮、促肾上腺皮质激素水平显著下降(P<0.05,P<0.01);显著抑制相关肾上腺类固醇激素合成酶(Star、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1)mRNA表达(P<0.05,P<0.01),并抑制胆固醇转化为肾上腺类固醇激素过程中相关蛋白(LDLR、SRBI、StAR)表达。与氢化可的松组比较,桂附地黄汤组显著增加小鼠抓力(P<0.01),四君子汤组、六味地黄汤组和桂附地黄汤组显著升高血清皮质酮均水平(P<0.01),四君子汤组、桂附地黄汤组明显抑制Star、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1 mRNA表达(P<0.05,P<0.01),3个复方组能改善LDLR、SRBI、StAR蛋白下降。结论桂附地黄汤对小鼠阳虚证候有所改善,3个中药复方对小鼠阴虚证候疗效不显著。3个中药复方对氢化可的松诱发的肾上腺皮质功能抑制均有缓解作用。     

六味地黄丸含药血清减弱高糖环境下肾系膜细胞的增殖和炎性因子表达

目的:观察六味地黄丸含药血清对高糖环境下培养的大鼠系膜细胞增殖和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:制备不同剂量大鼠六味地黄丸含药血清,并培养高糖诱导的大鼠系膜细胞。分别给予以下分组处理:空白(NG)组,高糖(HG)组,HG+对照血清组(10%对照血清),HG+低剂量组(2.5%六味地黄丸血清+7.5%对照血清),HG+中剂量组(5%六味地黄丸血清+5%对照血清),HG+高剂量组(10%六味地黄丸血清)。六味地黄丸含药血清处理24,48 h后,采用四甲基偶氮唑盐法和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)掺入法观察系膜细胞活性和增殖的变化,使用ELISA检测细胞培养上清液中MCP-1和ICAM-1分泌量,RT-PCR法检测系膜细胞MCP-1和ICAM-1 mRNA表达。结果:与空白组比较,高糖组在培养的24,48 h内系膜细胞的增殖活性、上清液中MCP-1和ICAM-1的含量,MCP-1和ICAM-1 mRNA的表达显著上调(P0.01)。与高糖组比较,5%和10%六味地黄丸含药血清均能逆转上述变化(P0.05),且抑制作用呈一定的时间、剂量依赖关系。结论:高糖可致系膜细胞增殖活性和MCP-1和ICAM-1的表达上调,六味地黄丸可降低增殖活性,减少MCP-1和ICAM-1分泌,下调MCP-1和ICAM-1 mRNA表达,从而有利于延缓糖尿病肾病肾小球硬化的进展。     

六味地黄丸对甲状腺功能亢进肾阴虚型小鼠基础代谢的影响

目的:探讨六味地黄丸对甲状腺功能亢进肾阴虚小鼠基础代谢的影响及其机制。方法:按每只小鼠每天灌胃3 mg四碘甲状腺原氨酸和20 mg利血平制备甲状腺功能亢进肾阴虚动物模型,连续给药21d。于造模当日开始分别灌胃给予不同药物,每日一次,连续给药21d。测给药前后体重、体温、心率和耗氧量。断头采血,取血浆用放射免疫分析法(RIA)测定环磷酸腺苷(cAMP);取血清用RIA测定三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)和游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)含量。结果:10g/kg、20g/kg和30g/kg六味地黄丸对体重、体温和心率均有明显作用;使存活时间延长,耗氧量降低;血浆cAMP水平下降,血清T3、T4、FT3、FT4含量下降。结论:六味地黄丸对甲状腺功能亢进肾阴虚证所致基础代谢增强有一定调节作用,减少机体的耗氧量。     

补阳还五汤与六味地黄丸合方对脑缺血大鼠APP蛋白及突触重构的影响

目的:探讨补阳还五汤、六味地黄丸及合方对脑缺血大鼠学习记忆及海马轴突淀粉样前体蛋白(APP)、生长相关蛋白(GAP-43)和突触素(SYP)表达的影响。方法:采用大脑中动脉永久性缺血模型,雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、补阳还五汤组、六味地黄丸组及合方组。造模后48 h开始灌胃给药,每天1次,补阳还五汤组每天灌胃13 g.kg-1,六味地黄丸组每天灌胃9.1 g.kg-1,合方组每天灌胃22.1 g.kg-1,模型组和假手术组每天灌胃等剂量的生理盐水。每组动物连续给药30 d后进行行为学检测。治疗30 d后,利用Morris水迷宫检测学习记忆功能;Western blot检测轴突淀粉样前体蛋白(APP)及突触分子标志SYN、GAP-43蛋白的表达。结果:脑中动脉永久性缺血30 d后,空间参考记忆明显受损;补阳还五汤、六味地黄丸及合方均能不同程度提高大鼠空间参考记忆,特别是合方组大鼠在定位航行实验第2天的逃避潜伏期较模型组明显减少(P<0.05),补阳还五汤组和合方组大鼠穿环次数较模型组显著性增加(P<0.05);合方组大鼠首次穿越原平台所在位置时间也较模型组明显缩短(P<0.01)。脑缺血大鼠海马APP蛋白表达明显上调,GAP-43、SYN蛋白明显减少,与假手术组差异显著(P<0.01或P<0.05);合方及补阳还五汤治疗可明显下调海马APP蛋白表达,上调海马GAP-43、SYN蛋白,较模型组有统计学差异(P<0.05);六味地黄丸组大鼠海马APP蛋白较模型组没有明显差异,海马GAP-43、SYN蛋白明显上调,差异显著(P<0.05)。结论:补阳还五汤与六味地黄丸合方治疗在减轻缺血脑区轴索损害,降低海马APP蛋白异常积聚的同时,可诱导GAP-43、SYN的合成而促进神经元突起再生,促进学习记忆功能的康复。     

六味地黄丸干预绝经后骨质疏松症患者基因表达谱分析

目的探讨中药六味地黄丸干预绝经后骨质疏松患者的分子机制并分析预测其靶标和药物作用通路。方法检索并下载GEO中与采用六味地黄丸干预绝经后骨质疏松症的微阵列基因表达数据集。通过获取的基因表达数据集,分析六味地黄丸干预前后绝经后骨质疏松症患者血液中差异表达基因变化,并将这部分差异表达基因与在绝经后骨质疏松症患者和正常绝经女性血液中差异表达的基因取交集,获得两对比组中共同差异表达的基因。通过基因本体论数据库(GO)对获得的共同差异表达基因分别从生物过程(BP)、分子功能(MF)和细胞组分(CC)三方面进行功能富集分析;利用京都基因和基因组百科全书数据库(KEGG)进行通路富集分析。利用生物通用交互数据集库(BioGRID)分析获得与共同差异表达基因产物互作的蛋白质,并构建蛋白质-蛋白质互作关系(PPI)网络,采用Cytoscape软件实现蛋白质-蛋白质互作关系网络的可视化。应用中医药数据库(BATMAN-TCM)对六味地黄丸主要中药成分的靶标基因进行预测。结果六味地黄丸干预后,得到1 350个差异表达基因,其中上调表达基因322个,下调表达基因1 027个。58个共同差异表达基因与六味地黄丸干预绝经后骨质疏松的分子机制相关,六味地黄丸干预后43个基因下调,15个基因上调。六味地黄丸主要中药成分的10个共同差异表达基因靶标为ESR1, FGFR2, MED1, PGR, PRKCB, PTGS1, PTGS2, TRIM24, VDR, WNT4。与六味地黄丸干预组差异表达基因对比分析,ATF2, FBXW7以及RDX基因在干预后呈现显著差异表达。结论 ATF2, FBXW7和RDX基因为参与六味地黄丸干预绝经后骨质疏松分子调控机制的关键基因。六味地黄丸主要中药成分的10个共同靶标基因中,ESR1, FGFR2, MED1, WNT4为六味地黄丸干预治疗绝经后骨质疏松等相关内分泌疾病的潜在调控基因。