IgA肾病肾阴虚证的血浆蛋白质双向凝胶电泳分析

目的初步观察IgA肾病肾阴虚证患者血浆蛋白质组的变化与表达差异,为进一步探讨肾阴虚证的发生机制奠定基础。方法采用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离IgA肾病肾阴虚证患者、肾阳虚证患者与正常人血浆总蛋白,银染显色;PDQest软件对凝胶图像进行定性定量差异表达分析;从中选取差异表达蛋白质斑点,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析,获取肽质量指纹图谱(PMF);通过Mscot-Wizard软件进行数据库搜索,鉴定蛋白质。结果与正常人和IgA肾病肾阳虚证相比,在IgA肾病肾阴虚证血浆蛋白质双向凝胶电泳图谱中绝对高表达的蛋白质斑点14个,绝对低表达的蛋白质斑点17个;定性差异表达分析发现IgA肾病肾阴虚证血浆蛋白质双向凝胶电泳图谱中特异出现的蛋白质斑点9个,缺失的蛋白质斑点17个。结论同病异证患者血浆中存在差异表达蛋白质,利用蛋白质组学技术有望对中医证候的发生机制进行阐释。     

基于2D-DIGE技术对早期糖尿病肾病肾阴虚证型患者血浆蛋白质组学研究

目的:寻找糖尿病肾病肾阴虚证敏感的血浆分子标志物。方法:对12例早期糖尿病肾病肾阴虚患者的血浆和12例正常血浆进行荧光差异双向电泳(2D-DIGE)分析,选择表达差异大于1.5倍的蛋白斑点进行质谱分析。结果:成功建立糖尿病肾病肾阴虚证和正常血浆的胶内差异双向凝胶电泳图谱,通过分析共鉴定出11种差异蛋白质,包括结合珠蛋白、凝溶胶蛋白、载脂蛋白AI等。结论:荧光差异双向电泳能够客观显示糖尿病肾病肾阴虚证与正常血浆之间的蛋白质表达差异,本研究鉴定的11种蛋白有可能为糖尿病肾病的早期诊断和中医证型研究提供潜在的血浆分子标志物。     

镇肝熄风汤对脑出血肝阳化风证患者外周血单个核细胞蛋白质组学的影响

目的:观察镇肝熄风汤治疗脑出血肝阳化风证(方证相应)前后外周血单个核细胞蛋白质双向凝胶电泳图谱的动态变化,探讨脑出血肝阳化风证的蛋白质表达规律,寻找镇肝熄风汤所作用的蛋白及疗效机制.方法:利用固相梯度双向凝胶电泳技术建立脑出血(10例)肝阳化风证镇肝熄风汤治疗10日前后及健康对照组(10例)外周血单个核细胞蛋白双向凝胶电泳图谱,经PDQuest8.0软件分析,选取差异表达的蛋白质点,应用MALDI-TOF-MS质谱仪获得肽质量指纹图谱.用Mascot软件搜索数据库鉴定部分差异蛋白质.结果:筛选出22个差异表达蛋白质点,其中脑出血肝阳化风证与健康对照组比较有20个差异表达蛋白质点,8个表达下调,7个表达上调,5个缺失;脑出血肝阳化风证经镇肝熄风汤治疗后与健康对照组比较4个表达下调,5个表达上调,2个缺失,9个表达与健康人无明显差异;在挖取的20个蛋白质点中有8个得到鉴定,其中脑出血肝阳化风证与健康对照组比较6个表达下调,1个表达上调,1个缺失;脑出血肝阳化风证经镇肝熄风汤治疗后与健康对照组比较2个表达下调,1个蛋白缺失,5个表达与健康人无明显差异.结论:初步建立了脑出血肝阳化风证外周血单个核细胞蛋白双向凝胶电泳图谱,初步鉴定了部分与脑出血肝阳化风证相关的蛋白及镇肝熄风汤可能的多靶点蛋白调节机制,这些蛋白功能涉及细胞代谢、信号转导、电子传递、细胞骨架等.     

光剥舌苔的差异蛋白质组学研究

目的 利用蛋白质组学方法,识别剥苔差异表达的蛋白质,为进一步探讨病理舌苔产生机制奠定基础.方法 运用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离正常组和剥苔组舌苔组织的总蛋白质、银染显色、凝胶扫描入计算机,ImageMaster 2D Platinum软件分析比较电泳图谱.应用图象分析软件比较分析,识别差异表达的蛋白质:应用质谱仪(mass spectrometry)得到相应的肽质指纹图谱(peptide mass finger print,PMF),搜索数据库鉴定差异蛋白质.结果 建立正常舌苔和剥苔双向凝胶电泳图谱;对四组舌苔组织的蛋白质组进行分离分析,发现凝胶中可检测的蛋白质斑点数分别为1082±105个和1143±140个:较正常组8个蛋白质点表达上调、7个表达下调,鉴定出9种差异表达蛋白质.结论 建立了分辨率和重复性均较好的双向电泳银染图谱;可识别和鉴定出一些与剥苔相关的差异表达蚩白质.     

慢性乙型病毒性肝炎中医虚证的蛋白质组学规律初探

目的 运用蛋白质组学方法,寻找血浆中差异表达的蛋白质,分析其与慢性乙肝中医虚证(肝肾阴虚证、脾肾阳虚证)证候的对应关系,初步探索出慢性乙肝中医虚证的蛋白质组学规律,为中医临床辨识慢性乙肝虚证提供可供参考的客观化指标.方法 通过双向凝胶电泳,获得血浆蛋白质( Two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱,经质谱分析鉴定出差异表达的蛋白质.结果 ①各组血浆蛋白2-DE图谱经ImageMaster 2D Platinum V5.0软件分析,各组均可获得重复性稳定的蛋白点450±100个.②归纳总结图谱发现,慢性乙肝中医二虚证与正常人相比存在明显的规律性差异,表现为蛋白点3、8、9(分别为APO -A2、Haptoglobin HP)表达量均明显下降.经质谱分析鉴定得出:蛋白点3为载脂蛋白A2( Apo-A2),蛋白点8、9为结合珠蛋白.结论 ①成功建立起慢性乙肝血浆蛋白质组2-DE图谱.②归纳总结慢性乙肝中医二虚证APO-A2、HP表达量均明显下降,提示慢性乙肝中医二虚证具有相同的蛋白质变化规律,推测这些相同的蛋白质变化可能与慢性乙肝各中医虚型证型的形成机制有关.     

脑梗死肝阳化风证外周血淋巴细胞相关蛋白质鉴定和分析

目的 应用比较蛋白质组学方法分析并鉴定脑梗死肝阳化风证和阴虚生风证的相关蛋白质,探讨中医肝阳化风证及阴虚生风证的本质内涵.方法 设计选择脑梗死肝阳化风证,阴虚生风证患者及健康人各15例,提取外周静脉血淋巴细胞总蛋白质,经双向凝胶电泳,考马斯亮蓝染色获取凝胶图谱,PDQuest V7.3.1软件比较分析3组双向凝胶电泳图谱并识别差异表达蛋白质,对有意义的蛋白进行质谱分析和数据库检索鉴定.结果 经比较分析,发现肝阳化风证组与阴虚生风证组差异蛋白质点23个,鉴定出22个共15种蛋白质,相同表达蛋白质点8个,鉴定出6个蛋白质点共5种蛋白质.包括代谢酶类、信号传导蛋白、细胞骨架蛋白,抗氧化蛋白等多类蛋白质表达异常.结论 脑梗死肝阳化风证与阴虚生风证具有相同蛋白和差异蛋白,提示二者具有相同的物质基础和不同的本质内涵.     

中医不同证型帕金森病患者外周血单个核细胞蛋白质组学研究

目的研究中医肝阳化风证和血虚生风证帕金森病患者和正常人外周血单个核细胞（PBMC）的比较蛋白质组差异。从蛋白表达水平上探讨中医肝阳化风证和血虚生风证的本质。方法用固相pH梯度双向凝胶电泳分离肝阳化风证和血虚生风证帕金森病患者和正常人PBMC总蛋白质，考马斯亮蓝染色，PDQuest2-DE软件分析，对部分差异蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI—TOF-Ms）测定其胶内酶解后的肽质指纹图谱，用Mascot查询系统查询SWISS—PROT数据库。结果获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳考染图谱，对其中的15个差异蛋白质点分别进行肽质指纹分析，经数据库查询，初步鉴定为一些与细胞骨架、抗氧化应激、蛋白降解、信号转导、细胞周期调控等有关的蛋白质。结论建立了帕金森病肝阳化风证和血虚生风证PBMC的双向凝胶电泳图谱，提示帕金森病肝阳化风证和血虚生风证患者和正常人的PBMC的蛋白质表达具有差异，这种蛋白质组的差异分析有助于为研究肝阳化风证和血虚生风证本质在蛋白质水平上提供物质基础。     

大肠癌虚实证候与蛋白质差异性表达的研究

目的:研究大肠癌虚证(气血亏虚)和实证(湿热蕴结)蛋白质差异性表达,从蛋白质水平上探讨大肠癌虚实证的本质。方法:用双向凝胶电泳分离虚实证大肠癌蛋白质,银染,PDQuest 2-DE软件分析,对部分差异蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定其胶内酶解后的肽质指纹图谱,查询SWISS-PROT、NCBI数据库。结果:获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳图谱,共筛选出23个差异蛋白点,其中有21个差异蛋白质得到鉴定,这些蛋白包括热休克蛋白、细胞骨架蛋白、抗氧化蛋白、信号转导相关蛋白、能量产生相关蛋白、血液蛋白等。结论:初步建立了大肠癌虚实不同证型-蛋白质表达谱,为研究大肠癌虚实不同证型的本质提供了物质基础。     

慢性胃炎脾胃湿热证大鼠胃黏膜蛋白质组与三仁汤治疗的实验研究

目的研究慢性胃炎脾胃湿热证大鼠胃黏膜的蛋白质表达,探讨慢性胃炎脾胃湿热证的相关发病机制,观察三仁汤治疗后慢性胃炎脾胃湿热证大鼠胃黏膜蛋白质的表达差异,探讨三仁汤治疗慢性胃炎脾胃湿热证作用机制。方法将36只SD雄性大鼠适应性喂养3天后,随机分为3组:正常对照组(对照组)、慢性胃炎脾胃湿热证模型组(模型组)、三仁汤治疗组(治疗组),每组12只。采用复合因素复制慢性胃炎脾胃湿热证大鼠模型,运用双向凝胶电泳分离大鼠胃黏膜蛋白,考马斯亮蓝染色,使用PDQuest8.0软件分析差异蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)鉴定仪进行蛋白鉴定。结果在对照组、模型组、治疗组凝胶图谱中检测到蛋白质斑点数分别为(1025±39)、(994±51)、(1087±33)个。经PDquest8.0软件分析,与对照组比较,模型组有差异表达蛋白质点74个,其中上调30个,下调44个;与模型组比较,治疗组有差异表达蛋白质点75个,其中上调49个,下调26个。成功鉴定了5个差异蛋白质点,分别为热休克蛋白72(heat shock protein 72,HSP72)、热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)、蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide-isomerase,PDI)、苹果酸脱氧酶(malate dehydrogenase,MDH)、未命名蛋白(unnamed protein)。结论慢性胃炎脾胃湿热证的发病机制可能与应激反应及能量代谢障碍有关,三仁汤治疗慢性胃炎脾胃湿热证的作用机制可能是调节胃黏膜蛋白质的差异表达。     

应用双向凝胶电泳分析掌叶半夏总蛋白对人卵巢癌SKOV3细胞蛋白质表达谱的影响

目的：分析掌叶半夏总蛋白对人卵巢癌SKOV3细胞蛋白质表达谱的影响。方法：CCK-8法分析确立掌叶半夏总蛋白处理卵巢癌SKOV3细胞的浓度。应用固相 pH梯度 （ immobilized pH gradient, IPG）双向凝胶电泳技术 （ two-dimensional gel electrophoresis, 2-DE）分离掌叶半夏总蛋白处理组和未处理组SKOV3细胞的总蛋白,银染显色,PDQuest7.4.0比较分析掌叶半夏总蛋白处理组和未处理组SKOV3细胞系的双向凝胶电泳图谱并识别差异表达的蛋白质。结果：获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的SKOV3细胞系的双向凝胶电泳图谱,掌叶半夏总蛋白未处理组与处理组蛋白质点数为：964±6和883±20;平均匹配率分别为：99%和 96%。掌叶半夏总蛋白处理组的 3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性。比较分析掌叶半夏总蛋白处理组和未处理组SKOV3细胞的双向凝胶电泳图谱,筛选出差异蛋白质点550个,其中154个表达上调,178个表达下调,96个仅在未处理组表达,122个仅在掌叶半夏总蛋白处理组表达。结论：首次建立了掌叶半夏总蛋白处理和未处理SKOV3细胞的双向凝胶电泳图谱,识别了550个差异表达的蛋白质点,对这些差异蛋白质点的鉴定将为揭示掌叶半夏总蛋白抗卵巢癌作用的机理提供实验依据。     

老年股骨颈骨折术后的护理

股骨颈骨折是发生于老年人的常见骨科病，以女性多见。因老年人骨质疏松，有机质少，应变力差，所以只需较小扭转暴力就能引起骨折。骨折后，由于骨折部位血供差，骨折不愈合的可能性大，加之患者年老体弱、长期卧床，易发生危及生命的并发症，因此恰当的护理非常重要，现将护理体会介绍如下。     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

耳鸣(肾精亏损型)临床资料研究

[目的]对2007年11月至2008年11月就诊的主观性耳鸣患者246例,排除其他中医证型,主要研究肾精亏损型耳鸣患者耳鸣的临床特征,变化规律及耳鸣产生的影响等.[方法]选择肾精亏损型耳鸣患者,记录临床症状及体征,采用电测听及耳鸣匹配、听觉脑干诱发电位(ABR)等方法检查,并将资料进行统计分析.[结果]患者年龄以51～60岁最多见,其次为61～70岁.耳鸣响度的自我评分与响度匹配值之间无关联.大多数病例的耳鸣病程在一年之内.大部分患者受耳鸣困扰的程度在中度以下.ABR测试结果听力正常者占25%,右侧和左侧听神经传导至脑干功能障碍患者分别占13%和19%,双侧听神经传导功能障碍占16%.[结论]临床耳鸣患者多数为肾精亏损型,年龄以51～60岁最多见,男女比例相当,大部分患者听神经传导障碍和脑干功能障碍,高音调耳鸣患者居多.     

名老中医经验传承方法概况

目前名老中医学术思想及经验传承方法主要有：跟师随诊．借助于临床科研观察．在已发表的文献基础上总结，运用计算机与统计技术等。上述方法对中医学的传承及推广应用作出了巨大贡献．但在应用时必须遵循“临床采集——挖掘提取——应用验证——机理研究——指导临床”的模式，使得名老中医经验能从实践中来，到实践中去，广泛地转化成社会生产力，为人类造福。     

Evaluation of estrogenic activity of alcoholic extract of rhizomes of Curculigo orchioides

The rhizomes of Curculigo orchioides Gaertn. (Amaryllidacea) is an important Ayurvedic as well as Unani drug. It is present in several drug formulations used in the treatment of menorrhagia and other gynecological problems. In this study, we conducted a comparative study of estrogenic activity of alcoholic extract of Curculigo orchioides with diethylstilbestrol in bilaterally ovariectomized young albino rats. Bilaterally ovariectomized albino rats were divided into five groups (n=9) receiving different treatments, consisting of vehicle (0.6% w/v sodium carboxy methyl cellulose), ethanolic extract of rhizomes of Curculigo orchioides at three different doses (viz., 300, 600, 1200 mg/kg body weight) and standard drug diethylstilbestrol (DES) at a dose of 2 mg/kg body weight. All these were administered orally daily for 7 days. Estrogenic activity was assessed by taking percentage vaginal cornification, uterine wet weight, uterine glycogen content and uterine histology as parameters of assessment. Alcoholic extract of Curculigo orchioides showed a significant increase in percentage vaginal cornification, uterine wet weight (P<0.001), uterine glycogen content (P<0.001) and a proliferative changes in uterine endometrium compared to the control.     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论,分析了中药产业竞争力提升的环境与条件,提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

肝硬化顽固性腹水治疗进展

肝硬化顽固性腹水(refractory ascites)目前临床上多在休息、限钠、限水以及保肝、抗感染、纠正电解质紊乱等基础上进一步治疗.     

毛细管气相色谱法测定榄香烯乳剂中β-榄香烯的含量

目的：建立毛细管气相色谱法测定榄香烯乳剂中β－榄香烯含量的方法。方法：采用PEG－20M弹性石英毛细管柱为分离柱,正十四烷为内标物,正己烷为萃取和定容剂,结果：该方法平均回收率为98．4％,变异系数小于6．32％,结论：该方法操作简便,分析速度快,结果准确可靠。ββ     

辨证与辨病相结合辨治乳腺增生病

探讨乳腺增生病中医辨证分型的客观依据，泌免疫变化与中医辨证分型的相关性进行了总结和研究，医药辨治乳腺增生病的新思路。对乳腺增生病的红外光扫描诊断、病理分类、内分以期能够使微观医学与宏观辨证相结合，以开拓中医药辨治乳腺增生病的新思路。