不同体质MRL/lpr狼疮鼠RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白质的表达

目的:观察不同体质MRL/lpr雌性狼疮鼠RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白质的表达情况,证实狼疮鼠体质差异的物质基础。方法:将3月龄狼疮鼠按体质分为常体、热体、寒体,饲养1月后,采用RT-PCT、Western Blot方法检测不同组别狼疮鼠血清ds-DNA,肾脏RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白质的表达。结果:不同体质MRL/lpr雌性狼疮鼠间RORγt mRNA的表达无明显差异,RORγt蛋白质的表达、Foxp3 mRNA及蛋白质的表达存在明显差异。MRL/lpr热体组小鼠RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白水平均偏低。结论:MRL/lpr狼疮鼠体质差异与RORγt、Foxp3基因及蛋白质的表达有关。     

郑小伟运用小青龙汤治疗支气管哮喘医案二则

吾师郑小伟教授临床30余年,学验俱丰,善于运用仲景经方化裁治疗慢性支气管炎、支气管哮喘等肺系疾病。现就郑师运用小青龙汤治疗寒饮伏肺型哮喘病临证经验介绍于下。1小青龙汤方证机理小青龙汤出自仲景《伤寒杂病论》,《伤寒论》第41条有云＂伤寒,心下有水气,咳而微喘＂,又《金匮要略·痰饮咳嗽病脉证并治》云：＂膈上病痰,满喘咳吐,发则寒热,背痛腰疼,目泣自出,其人振振身瞤剧,必有伏饮。＂     

复方芩柏颗粒剂对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中RORγt、Foxp3表达的影响

目的研究复方芩柏颗粒剂对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中RORγt、Foxp3表达的影响。方法复合法(三硝基苯磺酸+乙醇)制备溃疡性结肠炎大鼠模型,大鼠随机分为正常对照组、模型组、美沙拉嗪组(5%)及复方芩柏颗粒剂高、中、低剂量组(6%、12%、24%),灌肠给药3周。然后,评估大鼠饮食量、体质量、结肠组织损伤程度,ELISA法测定血清中TGF-β1、IL-17水平,HE染色观察病理变化,Western blot、RT-PCR法检测结肠组织中RORγt、Foxp3蛋白和mRNA表达。结果与模型组比较,复方芩柏颗粒剂组大鼠饮食量、体质量、TGF-β1及IL-17水平、结肠组织损伤程度显著改善(P0.05,P0.01),同时可调节RORγt/Foxp3失衡,并呈一定量效关系。结论复方芩柏颗粒剂对溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用可能是通过调控RORγt/Foxp3失衡,从而下调IL-17表达来实现。     

小青龙汤对支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠1,25二羟基维生素D_3水平的影响

目的:探讨小青龙汤对支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠的可能作用机制。方法:将52只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、1,25(OH)_2D_3组和小青龙汤组,每组13只。除空白对照组外,其余各组均进行支气管哮喘寒饮蕴肺证模型造模。各组大鼠从第2天起灌胃,每次1.6 m L/100 g,1次/d,持续至第22天实验结束。空白对照组给予生理盐水灌胃,1,25(OH)_2D_3组腹腔注射1,25(OH)_2D_3混合液5×103U/100g,小青龙汤组给予小青龙汤煎剂灌胃。观察大鼠一般行为学及体征变化,检测大鼠血清IL-5和1,25(OH)_2D_3的含量。结果:通过综合评价发现小青龙汤和1,25(OH)_2D_3对大鼠支气管哮喘寒饮蕴肺证的症状和体征改善均发挥一定作用,小青龙汤组最明显,1,25(OH)_2D_3次之;与模型组比较,小青龙汤组IL-5含量有非常显著差异(P<0.01),1,25(OH)_2D_3组IL-5含量有显著差异(P<0.05),以小青龙汤组最显著;模型组与空白对照组大鼠1,25(OH)_2D_3的含量对比有显著性差异(P<0.05),小青龙汤组大鼠1,25(OH)_2D_3的含量与模型组对比有显著性差异(P<0.05),提示小青龙汤能提升大鼠体内1,25(OH)_2D_3的含量。结论:小青龙汤能有效提升支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠体内1,25二羟基维生素D3水平,从而提高多种免疫细胞的活性,增强机体免疫力,抑制支气管哮喘的炎症反应、改善哮喘气道重塑。这可能是其治疗哮喘的作用机制之一。     

艾灸对克罗恩大鼠结肠RoRγt、Foxp3调节作用研究

目的：观察隔药灸对克罗恩大鼠结肠Th17特异性转录因子维甲酸相关孤核受体γt（RoRγt）和Treg特异性转录因子叉头蛋白P3（Foxp3）的表达调节作用,探讨灸法治疗克罗恩病的可能效应机制。方法：SPF级雄性SD大鼠40只,完全随机分为4组,每组10只：正常组、模型组、隔药灸组和西药组（美沙拉嗪）,采用三硝基苯磺酸（TNBS）溶液灌肠制备大鼠克罗恩疾病模型,隔药灸组取穴：天枢（双）、气海穴,西药组：美沙拉嗪灌胃治疗。治疗干预结束后,采用HE病理染色、免疫组织化学和Real-time PCR方法观察大鼠结肠降部组织病理学变化、Foxp3 mRNA的表达情况。结果：模型大鼠结肠组织出现克罗恩病的典型病理表现：裂隙状溃疡、黏膜层炎症伴肉芽肿,Th17特异性转录因子RoRγt蛋白在模型大鼠结肠黏膜及黏膜下层表达高于正常组大鼠（P<0.01）,隔药灸和美沙拉嗪对RoRγt蛋白具有下调作用（P<0.01）,且美沙拉嗪的调节作用强于隔药灸（P<0.01）;Treg细胞特异性转录因子Foxp3及其mRNA在模型大鼠结肠黏膜及黏膜下层表达均低于正常组大鼠（P<0.01）,隔药灸和美沙拉嗪对Foxp3及其mRNA都具有上调作用（P<0.01）,但两组间比较无统计学差异（P>0.01）。结论：隔药灸可能通过调节克罗恩病模型大鼠结肠黏膜Th17/Treg细胞平衡中特异性转录因子RoRγt、Foxp3的表达来发挥改善结肠组织溃疡,缓解肠道炎症的治疗作用。     

基于cAMP 信号通路探讨小青龙汤对CFTR 离子通道调节哮喘黏液纤毛清除功能的作用机制

目的：观察小青龙汤对哮喘寒饮蕴肺证小鼠环磷酸腺苷（cAMP）、囊性纤维化跨膜转导调节因 子（CFTR）、黏蛋白5AC（MUC5AC） 表达的影响,探讨小青龙汤基于cAMP通路对CFTR离子通道改善黏液纤 毛清除功能的作用机制。方法：常规卵清白蛋白（OVA） 加寒性刺激干预建立小鼠哮喘寒饮蕴肺证模型,于末 次激发后取肺组织进行苏木素-伊红（HE） 及阿尔辛蓝-过碘酸雪夫（AB-PAS） 染色,收集支气管肺泡灌洗液 及肺组织上清液,检测肺泡灌洗液中MUC5AC水平及肺组织上清液中cAMP、CFTR水平。结果：成功构建哮 喘小鼠寒饮蕴肺证模型,小鼠肺泡灌洗液中MUC5AC表达上升,肺组织上清液中cAMP、CFTR表达均下降, 肺组织病理切片见气道周围炎症细胞浸润,气道黏液分泌及杯状细胞增生。与模型组比较,地塞米松组、小青 龙汤组肺泡灌洗液中MUC5AC表达均下降,小青龙汤组肺泡灌洗液中MUC5AC表达下降幅度小于地塞米松组, 差异均有统计学意义（P＜0.05）。与模型组比较,cAMP组、小青龙汤组肺组织上清液中cAMP、CFTR表达均 上升,小青龙汤组肺组织上清液中cAMP、CFTR表达上升幅度均小于cAMP组,差异均有统计学意义（P＜ 0.05）。病理切片见,小青龙汤组支气管周围基本无炎性细胞浸润,支气管管壁及肺泡保持较完整,平滑肌增 生、支气管增厚与cAMP组、地塞米松组相比程度较轻,管腔内未见黏液栓及脱落的肺泡上皮。小青龙汤组支 气管管壁清晰,杯状细胞增生较少,气道内黏液分泌少于cAMP组、地塞米松组。结论：小青龙汤可以减轻哮 喘寒饮蕴肺证小鼠气道黏液高分泌及保障黏液纤毛清除功能运行,作用机制为通过cAMP通路提高CFTR离子 通道。     

基于RORγt/FoxP3免疫失衡探讨敷胸方对RSV诱导肺炎性损伤幼鼠免疫微环境的影响

目的 研究敷胸方对呼吸道合胞病毒(RSV)诱导肺炎性损伤幼鼠转录因子孤核受体(RORγt)、叉头翼状螺旋转录因子3(FoxP3)及其相关细胞因子等表达的影响,揭示敷胸方治疗RSV诱导肺炎性损伤的作用机制。方法 将18只幼龄SD大鼠随机分为正常组、模型组、敷胸方干预组,每组6只。模型组、敷胸方干预组给予RSV滴鼻法建立RSV诱导幼龄大鼠肺损伤模型。模型成功后给予敷胸方干预组给予敷胸方敷背干预。HE染色观察肺组织损伤程度,RT-PCR、Western blot法检测鼠肺组织中RORγt/FoxP3 mRNA和蛋白表达,Elisa法检测小鼠肺泡灌洗液中细胞转化因子-β(TGF-β)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)的表达。结果 与正常组相比,模型组肺组织病理损伤评分及湿干比明显增高(P<0.05),Th17特有转录因子RORγtmRNA及蛋白表达明显增高(P<0.05),相关细胞因子IL-17、IL-23明显升高(P<0.05),Treg特有转录因子FoxP3 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05),相...     

电针对高血压前期大鼠血压及血管RORγt、Foxp3表达的影响

目的:观察电针对高血压前期大鼠血压及血管RORγt及Foxp3表达的影响。方法:24只4周龄的雄性自发性高血压大鼠(SHRs)分为模型组、阻断剂组及电针组,每组8只,8只相同周龄雄性大鼠WKY(Wistar-kyoto)为正常组。电针组予电针“人迎”“太冲”穴(2/15 Hz,1 mA,15 min,1次/日);阻断剂组予腹腔注入AG490,5μg/g,1次/日;正常组及模型组仅予抓取与固定;干预2周。采用无创鼠尾血压仪测压,采用RT-PCR、Western blot检测大鼠胸主动脉RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白表达的变化。结果:4~6周龄SHRs大鼠的血压明显高于同周龄WKY大鼠(P<0.05);阻断剂组在治疗1周时收缩压及舒张压值均低于模型组(P<0.05);而电针组在治疗2周时收缩压低于模型组(P<0.05)。与正常组相比,模型组中的RORγt mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.05),Foxp3 mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.05);与模型组比,阻断剂组和电针组RORγt mRNA及蛋白表达明显下降(P<0.05)、Foxp3 mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论:电针人迎、太冲穴有延缓高血压前期大鼠血压升高的作用,其机制可能与调节血管RORγt及Foxp3的表达有关。     

加减小青龙汤对老年外寒内饮型支气管哮喘患者的干预作用

目的:分析加减小青龙汤对老年外寒内饮型支气管哮喘患者的干预作用。方法:选取2015年3月至2017年2月海南省中医院收治的老年外寒内饮型支气管患者80例作为研究对象,采用数字随机表法分为对照组和观察组,每组40例,对照组采取西医常规治疗并予以氨茶碱片,观察组在对照组基础上加小青龙汤加减治疗。观察患者治疗前后的临床治疗效果,患者临床症状的积分变化及哮喘控制问卷6(ACQ)评分、哮喘生活治疗问卷(AQLQMAEKS)评分、肺功能等方面指标变化。疗效标准参照《中药新药临床研究指导原则》。结果:观察组总有效率为95. 00%,对照组总有效率为72. 50%,2组临床疗效比较,差异有统计学意义(P 0. 05)。观察组治疗前后中医证候积分及各单项症状积分(咳嗽、咯痰、喘息、哮鸣、气短)的差值明显大于对照组(P 0. 05),治疗后各单项症状积分及中医证候总积分显著下降。观察组经治疗后AQCQ6及AQLQMARKS评分明显低于对照组(P 0. 05)。观察组治疗后第1秒用力呼气量(FEV1)、第1秒用力呼气量占用力肺活量比率(FEV1/FVC)、最大呼气中段平均流速(MMEF)呈上升趋势,且观察组治疗后FEV1、FEV1/FVC、MMEF明显高于对照组(P 0. 05)。结论:加减小青龙汤治疗老年外寒内饮型支气管哮喘患者疗效确切,能显著改善患者中医临床症状及其肺功能。     

清肺抗敏合剂下调RORγt及SOCS1/3表达改善哮喘小鼠炎症反应机制研究

目的:研究清肺抗敏合剂下调维甲酸孤儿核受体γt(RORγt)及信号传导抑制因子1/3(SOCS1/3)表达改善呼吸道合胞病毒(RSV)诱发哮喘小鼠炎症反应的影响。方法:将BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组和清肺抗敏合剂低、中、高剂量组。通过RSV诱发、白蛋白致敏建立哮喘小鼠模型。末次激发后24 h,吸入乙酰胆碱(Mch)测定气道的相对阻力;制备肺泡灌洗液(BALF),用酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中CD31、免疫球蛋白E(IgE)、白介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用比色法测定髓过氧化物酶(MPO)含量;计数炎症细胞。采用RT-PCR法检测肺组织中RORγt mRNA水平。采用qPCR法测定肺组织中SOCS1/3 mRNA表达水平。结果:地塞米松组及清肺抗敏合剂不同剂量组小鼠吸入梯度浓度的Mch后气道阻力与模型组比较显著降低(均P<0.05);地塞米松和不同剂量清肺抗敏合剂均可以改善小鼠肺组织的病理学损伤,缓解炎性细胞浸润。地塞米松组及清肺抗敏合剂不同剂量组小鼠病理半定量评分显著低于模型组(均P<0.05),且随着剂量...     

喘可治注射液诱导哮喘小鼠Foxp3~+调节性T细胞的免疫机制探讨

目的探讨喘可治注射液诱导Foxp3+调节性T细胞(Foxp3+Tr)在防治变应性哮喘的免疫调节机制。方法将Balb/C小鼠分为对照组、哮喘组、喘可治(CKZ)组三组,采取以OVA经腹腔注射致敏加滴鼻激发复制变应性哮喘模型,CKZ组给予喘可治注射液腹腔注射治疗,对照组与哮喘组给予生理盐水腹腔注射。分别观察各组小鼠的肺部病理改变,流式细胞术检测CD4、CD25、Foxp3的百分比,RT-PCR检测Foxp3、TGF-β、IL-10mRNA表达情况。结果①哮喘组较对照组表现出明显炎症反应,CKZ组较哮喘组气道炎症减轻;②哮喘组下调脾脏CD4+T、CD4+CD25+Tr、Foxp3+CD4+CD25+Tr比例;CKZ组上调CD4+T、CD4+CD25+Tr、Foxp3+CD4+CD25+Tr比例;哮喘组上调肺组织Foxp3、IL-10、TGF-βmRNA;CKZ组下调Foxp3、IL-10、TGF-βmRNA。结论哮喘小鼠表现出免疫异常的状态,喘可治注射液能够通过诱导Foxp3+调节性T细胞的生成,调整机体紊乱的免疫状态,使机体的免疫系统恢复平衡状态,从而发挥抑制炎症的免疫治疗作用。     

悬灸对哮喘大鼠转录因子ROR-γt、GATA-3及T-bet的影响

目的:探讨ROR-γt与中性粒细胞哮喘、GATA-3和T-bet与嗜酸粒细胞哮喘的相关性及悬灸对他们的影响。方法:将75只SD雄性大鼠按随机数字表法分为5组各15只,包括A组(正常组)、B组(中性粒模型组)、C组(中性粒悬灸组)、D组(嗜酸粒模型组)、E组(嗜酸粒悬灸组),免疫组化法及RT-PCR法检测ROR-γt、GATA-3、T-bet蛋白及基因的表达。结果:中性粒模型组以高表达ROR-γt(显著高于嗜酸粒模型组),而嗜酸粒模型组以高表达GATA-3和T-bet(显著高于中性粒模型组);悬灸后悬灸组与相对应模型组比较各转录因子表达皆有非常显著性降低。结论:中性粒细胞哮喘以ROR-γt转录因子的高表达为主,而嗜酸粒细胞哮喘以GATA-3、T-bet的高表达为主,而悬灸可以调节ROR-γt、GATA-3、T-bet的表达,从而降低哮喘气道炎症反应。     

Th17/Treg细胞在健脾方防治克罗恩大鼠中的作用机制

目的:观察Th17/Treg细胞平衡在健脾方防治TNBS诱导的克罗恩大鼠中的作用机制;方法:24只清洁级雄性SD大鼠随机分为:1)正常对照组NG(n=8):从造模第2周起双蒸水灌胃,1次/d,灌胃量按1 mL/100 g,共3周;2)TNBS模型组MG(n=8):从第1周开始TNBS灌肠,灌肠剂量(m L)=体重(g)×0.003 m L/g,1次/周,造模持续共4周;3)模型+健脾方防治组JP(n=8):从造模第2周开始,在TNBS灌肠后的第2天新增中药健脾方灌胃治疗,灌胃量按1 m L/100 g,1次/d,灌胃持续3周;采用ELISA、免疫组织化学、real-time PCR等技术观察各组大鼠血液、结肠黏膜中与Th17、Treg分化和功能密切相关的IFN-γ、IL-17、RORγt、FoxP3蛋白与基因的表达差异;结果:健脾方能通过下调Th1细胞释放的IFN-γ,进而来调节Th1/Th2的平衡,同时也能通过下调Th17细胞分泌IL-17、RORγt炎性反应因子的分泌和促进Treg细胞分泌的抗炎因子FoxP3来调节Th17/Treg的平衡,进而达到防治TNBS诱导的大鼠克罗恩病的作用。结论:健脾方能够通过调节Th17/Treg细胞平衡中多个关键细胞因子和转录因子的方式,达到预防和治疗TNBS诱导的大鼠克罗恩病炎性反应程度之目的。     

IFN-γ/IL-4失衡在支气管哮喘发病中的作用治疗新进展

关于哮喘的发病机制及防治的研究一直是中西医学者研究的热点，且已取得了重大进展。细胞因子是由免疫细胞或非免疫细胞活化合成并分泌的具有调节和介导免疫反应、炎症反应的一组小分子多肽和糖蛋白，在哮喘发病机制中起着非常重要的作用。细胞因子网络失衡可能是哮喘发病的分子生物学基础之一。最后，分别由TH1和TH2细胞分泌     

基于PI3K信号通路探讨肺“俞募配穴”艾炷灸对哮喘小鼠RORγt/Foxp3表达的影响

目的:观察肺"俞募配穴"艾炷灸对哮喘小鼠血清及肺泡灌洗液(BALF)中相关炎性因子含量及对肺组织中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、叉头/翼状螺旋转录因子3(Foxp3)表达的影响,并探讨其机制。方法:将60只雄性Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、LY剂组、电针组、艾炷灸组,每组12只。采用卵蛋白(OVA)致敏法复制哮喘小鼠模型。LY剂组予尾静脉注射PI3K抑制剂LY294002;电针组、艾炷灸组分别予电针、艾炷灸"肺俞""中府",1次/d,连续2周。ELISA法检测小鼠血清和BALF中免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)含量,荧光定量PCR法及免疫组织化学法检测肺组织中PI3K、RORγt、Foxp3的mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清和BALF中IgE及IL-4含量、肺组织中PI3K及RORγt mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01),血清和BALF中IFN-γ含量、肺组织中Foxp3 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,LY剂组、电针组及艾...     

清肺通络敷胸方调控RORγt/Foxp3+干预呼吸道合胞病毒肺炎幼鼠炎性损伤的机制

目的 探讨清肺通络敷胸方调控转录因子维甲酸相关孤儿受体(RORγt)/叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3+)干预呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎幼鼠炎性损伤的机制。方法 将36只SD幼鼠按随机数表法分为正常组、RSV肺炎组、清肺通络敷胸方组,每组12只。RSV肺炎组、清肺通络敷胸方组采用病毒液滴鼻法建立RSV感染模型,正常组给予不含病毒的生理盐水滴鼻,连续3 d。第3天滴鼻后,清肺通络敷胸方组给予清肺通络敷胸膏外敷幼鼠背部,1次/d,连续7 d。每组分别于干预第3天和干预第7天各处死6只幼鼠,HE染色观察肺组织病理学形态,Western blot法检测肺组织中RORγt、Foxp3+蛋白表达情况,RT-PCR法检测肺组织中RORγt、Foxp3+mRNA表达情况,ELISA法检测肺泡灌洗液中白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-10(IL-10)含量。结果 与正常组比较,RSV肺炎组干预第3天和干预第7天幼鼠肺间质增宽,淋巴细胞、浆细胞、嗜酸性细胞浸润;肺组织中RORγt蛋白及mRNA相对表达量和肺泡灌洗液中IL-17含量均明显升高(P均<0.05),肺组织中Foxp3+蛋白及...     

NF-κB与PI3K-Akt-mTOR信号通路在支气管哮喘病理机制中的研究进展

<正>支气管哮喘是以气道炎症、可逆性气道阻塞、气道重塑和气道高反应性为主要特征的,由多种因素引起的气道慢性炎症性疾病,据研究推算到2025年,全球哮喘病患者将有可能达到4亿人[1]。随着气道炎症的迁延,气道结构发生了重塑,导致了气道不可逆性的气流阻塞,这便是支气管哮喘发病过程中最为重要的病理学基础之一[2]。而在支气管哮喘发病机制的研究过程中,NF-κB信号通路和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(PKB,Akt)-雷帕霉素靶体蛋白(mTOR)信号通路(以下简称PI3K信号通路)都起到了举足轻重的作用。     

14-3-3在支气管哮喘PKC信号途径中的作用初探

目的:通过14-3-3、PKC在支气管哮喘患者T细胞活化过程中信号传导途径的研究,探讨哮喘Th1/Th2失衡和T细胞异常活化的关键因素.方法:现察20例哮喘患儿及相同数量同龄对照组.分离外周血T细胞,空白对照组、加入PMA组、加入抗14-3-3单克隆抗体组培养后,流式细胞仪检测Th1/Th2、Ca抖、14-3-3、Stat6;ELISA试验检测细胞上清液中IL-4、IL-5.结果:急性发作期哮喘患儿Th1细胞比例显著下降、Th2细胞显著增高(P＜0.01);PKC激动剂(PMA)活化后Th1/Th2失衡更加明显.加入14-3-3单抗后Th1/Th2失衡明显缓解.结论:影响Th细胞分化的调控机制极为复杂,本文从正性调节(14-3-3/PKC)的调节途径,探讨了哮喘Th1/Th2失衡的调节机制,发现哮喘患儿Th2过度活化14-3-3/PKC途径可能是其中重要的因素.     

基于GC-MS代谢组学姜炮制-配伍治疗寒饮伏肺哮喘大鼠的作用机制研究

目的从代谢组学角度对姜炮制-配伍机制进行初步探索。方法采用卵清白蛋白(OVA)+冰水浴法建立寒饮伏肺哮喘大鼠模型,随机分为对照组、模型组、苓甘五味(生/干/炮)姜辛汤组(SJF/GJF/PJF)及阳性药桂龙咳喘宁组(PC),给药后进行大鼠肺组织HE染色、肺泡灌洗液(BALF)炎性细胞计数,测定血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)水平;同时采用GC-MS代谢组学技术进行非靶向代谢组学研究,寻找寒饮伏肺哮喘大鼠血清、尿液相关差异性代谢物,MetaboAnalyst构建相关代谢通路。结果苓甘五味(生/干/炮)姜辛汤可改善大鼠肺组织病理变化,显著降低大鼠BALF炎性细胞计数及血清中IgE、IL-4水平,升高血清中IFN-γ水平;与对照组相比,寒饮伏肺哮喘大鼠体内共筛选出37种差异性代谢物(血清中15个、尿液中22个),MetaboAnalysis通路分析发现7条代谢通路可能与寒饮伏肺哮喘有关,涉及能量代谢、氧化应激等。苓甘五味(生/干/炮)姜辛汤干预后大鼠整体代谢轮廓趋向正常水平;且苓甘五味(干)姜辛汤治疗寒饮伏肺哮喘作用优于苓甘五味(生/炮)姜辛汤。结论苓甘五味姜辛汤方中姜炮制成干姜入药治疗寒饮伏肺哮喘更为合理,其机制可能通过调节能量代谢、氧化应激等发挥作用。     

益气温阳护卫汤含药血清对体外Th17/Treg细胞失衡与RORγ、Foxp3的影响

目的：研究益气温阳护卫汤含药血清对体外辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞失衡与维甲酸相关孤核受体γ(RORγ)、特异性叉头状转录因子3(Foxp3)的影响。方法：制备益气温阳护卫汤含药血清,CD₄⁺T细胞进行原代分离、培养、鉴定。构建体外Th17/Treg细胞失衡模型：将细胞分为对照组、模型组、益气温阳护卫组、地塞米松组,除对照组外,其余组中分别加入等量转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6、IL-23溶液,诱导CD₄⁺T细胞向Th17细胞分化。给予相应的含药血清干预处理48 h后,采用流式细胞术检测各组Th17和Treg细胞比例。RT-PCR、Western Blot分别检测RORγ、Foxp3 mRNA和蛋白表达水平。结果：与对照组比较,模型组Th17细胞比例、Th17/Treg比例均显著上升(P<0.01),Treg细胞比例显著下降(P<0.01);与模型组比较,益气温阳护卫组及地塞米松组Th17细胞比例、Th17/Treg比例均显著降低...