穿山龙总皂苷大孔吸附树脂纯化工艺研究

目的:研究大孔树脂纯化穿山龙总皂苷的最佳工艺。方法:以静态吸附量和解析率为考察指标,确定大孔树脂型号;以总皂苷含量和转移率为考察指标,对最佳树脂纯化工艺进行筛选。结果:D-101型树脂对穿山龙总皂苷的吸附性能和解析效果最好,最佳纯化工艺条件为:上样液为0.25g/m L,以4BV/h的流速进行动态吸附,药材和树脂的重量比为1∶1;上样液p H值为中性,径高比为1∶4,2BV去离子水洗脱除杂,4BV 70%乙醇以2BV/h流速洗脱,收集70%乙醇溶液,浓缩干燥,得总皂苷提取物。结论:经D-101大孔树脂纯化后的穿山龙总皂苷含量达到60%以上,说明该纯化工艺可行。     

蒲公英总多糖的提取、纯化及其体外抗炎活性分析

目的:研究蒲公英总多糖组分及其体外抗炎活性作用,筛选得到蒲公英总多糖的抗炎活性成分。方法:采用水提醇沉法提取得到蒲公英总多糖,通过二乙氨基乙基纤维素52(DEAE-52)柱层析进行纯化,得到蒲公英总多糖的3个洗脱部位(水,0.1 mol·L~(-1)氯化钠和0.2 mol·L~(-1)氯化钠洗脱部位分别记为TMP-0,TMP-1,TMP-2)。在体外以脂多糖诱导的RAW264.7细胞模型对蒲公英总多糖的体外抗炎活性进行研究。结果:蒲公英总多糖能够降低RAW264.7细胞中炎症因子(环氧合酶-2,肿瘤坏死因子-α,白细胞介素-6和白细胞介素-1β)mRNA的表达,且呈一定的剂量依赖性。TMP-0和TMP-1能够抑制上述炎症因子mRNA的表达,具有较好的体外抗炎活性,而TMP-2在中、低剂量下抗炎作用不明显。结论:通过体外细胞模型筛选,发现蒲公英总多糖具有较强的抗炎活性,其活性部位主要为TMP-0和TMP-1,为获得具有抗炎活性的均一多糖类成分提供参考。     

响应面分析法优化回流提取延龄草甾体皂苷工艺研究

目的通过响应面法优化延龄草中3种甾体皂苷的提取工艺。方法采用HPLC法,以延龄草中重楼皂苷Ⅵ(Y2T)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(Y3T)、重楼皂苷Ⅶ(Y4T)得率为评价指标,通过单因素试验,考察了提取时间、提取次数、液料比对3种甾体皂苷提取效果的影响,并采用Box-Behnken设计-响应面法分析,优选最佳提取工艺。结果最佳提取工艺为70%乙醇,提取时间为120 min,提取3次,液料比为15:1。结论响应面法优化的延龄草3种甾体皂苷提取工艺,稳定、可行。     

白英中甾体皂苷纯化工艺的研究

目的采用大孔树脂对白英中甾体皂苷进行纯化,以提高白英提取液中皂苷的纯度。方法通过静态吸附试验确定大孔树脂的型号;采用单因素考察法确定大孔树脂对皂苷的最佳吸附、洗脱条件。结果采用LSA-10型大孔树脂纯化白英中皂苷。最佳吸附条件为:药液浓缩比为1:0.4,吸附流速为2.0mL/min,洗脱剂为50%的乙醇;最佳洗脱条件为:洗脱流速为3mL/min,洗脱剂的用量为100mL。纯化后,浸膏中皂苷含量由1.29%上升至12.48%。结论采用大孔树脂对白英提取液中皂苷进行纯化可显著提高浸膏中皂苷含量。     

甘草总皂苷的提取纯化工艺研究

目的:研究提取纯化甘草总皂苷的工艺条件及参数.方法:以正交试验考察了甘草总皂苷的提取工艺;以甘草总皂苷质量浓度为指标,考察了大孔树脂纯化工艺.结果:甘草总皂苷最佳提取工艺:加水量8倍,煎煮时间2 h,煎煮次数3次;HPD-300型树脂具有较好的吸附性能和解吸效果,纯化工艺为上样液质量浓度为0.2 g生药/mL,上样量5 BV,50%乙醇洗脱6BV.结论:HPD-300树脂对甘草总皂苷的吸附量大,解吸容易,确定的吸附和洗脱条件易操作,可用于工业化生产.     

东北山梅花根总皂苷提取工艺及抗炎活性研究

目的:探讨东北山梅花根总皂苷最佳提取工艺,研究东北山梅花根总皂苷抗炎活性。方法:通过L9(34)正交实验设计优选东北山梅花根总皂苷最佳提取工艺;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法研究东北山梅花根总皂苷抗炎活性。结果:东北山梅花根总皂苷的最佳提取工艺为70%乙醇回流提取2次,料液比1∶20,提取时间2 h;东北山梅花根总皂苷具有显著抗炎活性。结论:本实验结果将为东北山梅花根总皂苷的进一步研究提供理论依据。     

皂苷抗炎活性研究进展

综述了近年来皂苷抗炎作用的文献,对植物中总皂苷提取物和皂苷化合物抗炎作用及机制进行了阐述.     

楤木单体的结构改造及抗炎活性研究

目的对楤木Aralia elata中的单体成分金盏花苷E进行结构改造,并对其结构改造后的类似物进行体外抗炎活性研究。方法以天然易得的齐墩果酸为起始原料,经苷元28位羧基保护、3位糖苷化、28位羧基脱保护、28位羧基酰胺化、胺基侧链酰胺化、糖基苯甲酰基脱保护、甲叉基脱保护共7步反应制得目标化合物,利用巨噬细胞RAW264.7模型评价化合物的抗炎活性。结果设计并合成了10个金盏花苷E的结构类似物G1~G5和H1~H5,均经谱学技术确证结构。生物活性实验结果表明,10个化合物对RAW264.7细胞呈现不同程度的抗炎活性,其中化合物G1~G4、H1~H3的抗炎活性优于先导物。结论化合物G1~G5和H1~H5均为未见文献报道的新化合物,具有潜在的抗炎活性,值得深入研究。     

蒺藜总皂苷提取工艺研究

目的:确定合理的蒺藜总皂苷的提取纯化的方法.方法:以分光光度法测定蒺藜总皂苷的含量为指标,采用正交试验设计,对蒺藜水提醇沉液用大孔吸附树脂法富集的工艺进行优选.结果:经多种树脂的比较,AB-8树脂对蒺藜总皂苷有较高的吸附容量,同时采用正交试验,确定AB-8树脂的最佳实验条件.结论:采用AB-8树脂分离纯化蒺藜总皂苷方法可行,确定最佳工艺条件为药液浓度0.500g/mL,流速1.44BV/h;径高比1∶40.     

土贝母总皂苷的提取及大孔树脂纯化工艺研究

目的:优选土贝母总皂苷的提取纯化工艺。方法:以总皂苷中含量较高的土贝母苷甲转移率为考察指标,采用正交设计对提取工艺进行优化;采用HPLC法结合薄层显色法考察6种大孔树脂对土贝母总皂苷的分离富集性能,选出最优树脂,确定最佳纯化工艺条件。结果:正交试验表明,以60%的乙醇20倍体积(8∶6∶6),提取3次,每次1.5 h,提取效率最高,苷甲转移率达89.71%。通过对树脂的考察优选出对土贝母皂苷甲吸附率和解吸率都很高的NKA-9树脂,上样浓度为0.2 g/mL,以水洗脱除杂后,用95%乙醇洗脱得到土贝母总皂苷,上样、洗脱流速为3B V/h。结论:以此提取纯化工艺制得3批样品,平均土贝母总皂苷得率3.34%,含量达90.66%,平均苷甲含量30.67%。     

延龄草与吉林延龄草根茎及须根中3种皂苷成分的含量测定

比较延龄草与吉林延龄草药材根茎与须根间主要成分的含量差异,利用HPLC-CAD同时测定了3种主要成分重楼皂苷Ⅶ、偏诺皂苷元-3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-O-β-D-葡萄糖、重楼皂苷Ⅵ的含量。色谱条件:TSK gel ODS(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(43∶57)等度洗脱,流速为1 mL·min~(-1),进样量为20μL。电雾式检测器(CAD):工作气压为35 psi(1 psi=6.895 kPa),雾化器温度为35℃。3种甾体皂苷良好分离,线性关系、稳定性、精密度、重复性、加样回收试验均符合中药质量分析要求。运用IBM SPSS Statistics 20分析软件进行主成分分析,结果显示,头顶一颗珠的来源包含了2种延龄草属植物,且吉林延龄草为主要资源;7批延龄草样品和9批吉林延龄草的根茎之间3种皂苷成分的含量存在不显著差异;但是根茎与须根之间3种皂苷成分的含量存在显著的差异。     

延龄草根及根茎化学成分研究

目的：对延龄草Trillium tschonoskii Maxim.的化学成分进行研究。方法：采用硅胶柱色谱,大孔树脂,ODS反相柱色谱以及重结晶等方法分离纯化,并通过理化常数和波谱分析鉴定化合物结构。结果：分离并鉴定了10个化合物分别为偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-β-D-葡萄糖苷（1）,偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-葡萄糖苷（2）,偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-葡萄糖苷（3）,豆甾醇（4）,β-谷甾醇（5）,胡萝卜苷（6）,紫云英苷（7）,豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷-６’-十六烷酸酯（8）,豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷（9）,熊果酸（10）。结论：化合物 4,8,9,10 为首次从该属植物中分离得到。     

延龄草无菌培养体系的建立及防褐变措施

目的:对延龄草外植体的筛选及灭菌条件和培养基进行优化,降低污染率和褐变率,建立延龄草根茎无菌组织培养体系。方法:从延龄草子房、叶、茎、地下根茎、根尖5种材料中筛选出最适宜的外植体,考察多种药液交替灭菌和培养基中添加抗生素对降低组培污染率的影响,研究培养基中添加抗坏血酸(V_C),聚乙烯吡咯烷酮(PVP),活性炭对降低褐变率的效果。结果:地下根茎为延龄草组织培养最适宜的外植体,可采用紫外线照射30 min,800倍多菌灵浸泡30 min和0.2%Hg Cl_2处理20 min交替灭菌,培养基中添加100 mg·L~(-1)氨苄青霉素和1.0 g·L~(-1)活性炭可降低根茎组培污染率和褐变率。结论:建立了低污染率和褐变率的延龄草根茎无菌培养体系,为其他根茎类植物组织培养提供参考。     

大孔树脂纯化大蒜总皂苷的工艺优选

目的:优选大蒜总皂苷的大孔树脂纯化工艺.方法:以总皂苷转移率为指标,采用单因素试验考察树脂型号、吸附性能(吸附容量、上样液质量浓度、pH、吸附速度)、洗脱性能(洗脱剂浓度、流速、体积),优选大蒜总皂苷纯化工艺.结果:优选的纯化工艺条件为采用AB-8型大孔树脂,树脂-生药1∶1.3,上样液质量浓度0.8 g·mL-1,pH 7,吸附速度2 BV·h-1,加30％乙醇3 BV除杂,95％乙醇5 BV洗脱,洗脱速度3 BV·h-1,大蒜总皂苷纯度＞65％.结论:AB-8型大孔树脂可用于纯化大蒜提取物中总皂苷,优选的纯化工艺稳定可行.     

大孔树脂法对蒙古黄芪提取物中总皂苷精制工艺优选

目的:优选蒙古黄芪提取物中总皂苷的精制工艺。方法:以蒙古黄芪总皂苷为指标,紫外分光光度法测定其含量,单因素试验考察吸附容量、洗脱溶剂及其用量;选取上样量、吸附时间和洗脱流速为考察因素,采用正交试验法优选其洗脱条件。结果:优选的精制工艺为上柱溶液5 mL加10 mL水混匀,上柱,吸附时间1.0 h,加10倍量水洗脱,5倍量70%乙醇洗脱,收集洗脱液,洗脱流速2 mL.min-1。洗脱液减压回收至干,于105℃干燥后总固体物中总皂苷纯度达到87.63%。结论:该优选工艺简单可行,能较好地纯化蒙古黄芪总皂苷。     

蕲艾治疗溃疡性结肠炎的活性筛选与作用评价

目的评价蕲艾Artemisia argyi的抗炎活性,筛选其最佳抗炎活性部位,确证其对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用。方法采用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7建立体外炎性细胞模型,给予蕲艾水部位、正丁醇部位、醋酸乙酯部位、石油醚部位进行干预,观察各组细胞形态;采用Griess法测定各组细胞上清液中一氧化氮(nitrite oxide,NO)水平;采用ELISA法检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6)、IL-1β水平;采用qRT-PCR法检测各组细胞TNF-α、IL-6、IL-1β、环氧合酶-2 (cyclooxygenase-2,COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS) 和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白 3 (nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)mRNA 表达情况。利用超高效液相色谱(UPLC)法对最佳抗炎活性部位的主要化学成分进行定量分析。建立2.5%葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的小鼠UC模型,给予蕲艾醋酸乙酯部位和异泽兰黄素,记录各组小鼠体质量、摄食量和饮水量变化,并进行疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分;测量结肠组织长度,并采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组小鼠结肠组织病理变化;采用免疫组化法检测各组小鼠结肠组织紧密连接蛋白-1 (zonula occluden-1,ZO-1)表达情况。结果与模型组比较,10μg/mL蕲艾醋酸乙酯部位能够抑制LPS诱导的RAW264.7细胞的分化程度,显著降低上清液中NO、TNF-α、IL-6和IL-1β水平(P0.01),下调 TNF-α、IL-6、IL-1β、COX-2、iNOS 和 NLRP3 mRNA 表达水平(P0.05、0.01)。异泽兰黄素在蕲艾醋酸乙酯部位中具有最高的质量分数,为该部位中的主要成分。与对照组比较,模型组小鼠体质量明显降低(P0.01),DAI评分升高(P0.01),结肠长度缩短(P0.01),结肠组织中TNF-α、IL-6、IL-1β和COX-2 mRNA表达水平显著升高(P0.01),ZO-1表达减少;给予蕲艾醋酸乙酯部位和异泽兰黄素后,上述指标均得到显著改善(P0.05、0.01)。结论蕲艾醋酸乙酯部位具有最佳的体外抗炎活性,醋酸乙酯部位及其主要成分异泽兰黄素对UC小鼠有较好的治疗作用。     

岗松总黄酮的纯化工艺优选

目的:优选岗松总黄酮的大孔吸附树脂纯化工艺.方法:以总黄酮吸附率和洗脱率为指标,采用UV测定总黄酮含量,筛选最佳大孔吸附树脂,并通过单因素试验考察岗松总黄酮的大孔树脂纯化工艺.结果:采用AB-8型大孔吸附树脂对岗松总黄酮进行纯化,其最佳工艺条件为上样液生药质量浓度0.3 g·mL-1,上样流速1 BV·h-1,上样体积3 BV,加50％乙醇5BV以2 BV·h-1的流速洗脱,总黄酮纯度达52.33％.结论:优选的工艺合理可行,适用于工业化生产.     

泥胡菜总黄酮大孔树脂纯化工艺优化

目的:优选大孔树脂纯化泥胡菜总黄酮的工艺条件.方法:采用静态吸附-洗脱试验筛选大孔树脂型号,动态吸附法优化大孔树脂纯化泥胡菜总黄酮工艺参数.结果:优选的纯化工艺为选用D101型树脂,上样液质量浓度1.5 g·L-1,上样速率3 BV·h-1,上样体积4 BV,上样液pH 5,加50％乙醇5 BV以2 BV·h-1流速洗脱,泥胡菜总黄酮纯度达47.8％.结论:D101型大孔树脂对泥胡菜总黄酮具有良好的纯化效果.     

藤三七总皂苷的大孔树脂纯化工艺优选

目的： 优选藤三七总皂苷的大孔树脂分离纯化工艺。 方法： 采用UV测定总皂苷含量。通过静态吸附-洗脱试验筛选大孔树脂型号;以总皂苷动态吸附量和洗脱率为指标,利用正交试验优选藤三七总皂苷的大孔吸附树脂纯化工艺条件。 结果： 选用D101型大孔吸附树脂分离纯化藤三七总皂苷,最佳工艺条件为上样液质量浓度0.1 g·mL^-1,上样流速1 BV·h^-1,径高比1：10,上样量（药材量-树脂）0.2 g·mL^-1,乙醇体积分数40%,乙醇用量8 BV,洗脱流速2 BV·h^-1;藤三七总皂苷纯度>50%。 结论： 优选的纯化工艺合理可行,可较好地分离纯化藤三七总皂苷。