家系虚寒证与非家系虚寒证基因表达谱比较研究

目的:探讨家系虚寒证与非家系虚寒证在宏观证候及微观基因表达的异同。方法:利用Array Tools和FatiGO等生物信息学软件挖掘基因表达谱数据,获得差异基因、差异功能类及差异分子通路。结果:家系虚寒证和非家系虚寒证在宏观证候和临床表现上没有显著差别,但基因表达水平上显著不同,家系虚寒证和非家系虚寒证差异表达的基因分别有136条和138条,其中只有2条相同,分别为NM003370、NM005252;家系虚寒证组差异功能分布相对集中,主要和能量代谢密切相关,而非家系虚寒证组差异功能分布比较广泛;家系虚寒证的差异通路有3条,而非家系虚寒证组差异通路有8条,二者没有相同的差异通路。结论:家系虚寒证和非家系虚寒证差异表达的基因种类、在染色体上的分布、影响的功能及通路都不相同。对家系虚寒证的基因表达谱分析只能适用于该家系病因分析,对非家系虚寒证的发生机制还需相关的实验研究。但可借鉴研究家系虚寒证基因表达谱的方法。     

虚寒证肢冷的能量代谢紊乱之机理探讨

目的:研究虚寒证肢冷患者的差异表达基因与能量代谢的关系,为深入研究虚寒证的分子生物学基础作铺垫性工作。方法:分别以经温针治疗的虚寒证肢冷患者治疗前后,及有无肢冷的虚寒证患者为对照,做基因芯片试验。结果:试验的5张基因芯片中共有重复基因共30条,能登陆FatiGO+的有19条,其中与新陈代谢相关基因占21.43%;差异表达基因涉及多条能量通路,重复出现的能量通路为氧化磷酸化Oxidative phosphorylation。讨论:虚寒证肢冷的能量代谢障碍是多方面的,一方面是机体能量产生不足,另一方面是机体不能对能量进行有效储存,即虚寒证肢冷患者的肢体温度降低是由产能不足与储能不足或生物利用度低下两方面的原因造成的,是一种整体的功能失调。     

温针灸对虚寒型膝骨关节炎基因表达通路的影响

目的:探讨温针灸疗法对虚寒型膝骨关节炎的作用机制。方法:选取8例膝骨关节炎辨证为虚寒证的患者,取关元、气海、足三里等穴进行温针灸治疗,选取其中疗效较好的4例患者作治疗前后的基因芯片比较,以ratio<0.5或ratio>2.0选取差异表达基因,将这些差异表达的基因通过http://www.DAVID2006获得差异表达通路(P<0.5,n>3)。结果:临床基本痊愈2例,显效4例,有效1例,无效1例。对基因芯片结果分析:共获得差异表达基因449条,差异表达通路10条,涉及能量代谢通路2条(氧化磷酸化,ATP合成),细胞信号转导通路4条(胰岛素信号途径,Toll样受体信号途径,JAK-STAT信号途径及MAPK信号途径)及细胞凋亡通路等。结论:温针灸是治疗虚寒型膝骨关节炎的有效疗法;其治疗膝骨关节炎的分子机制可能是通过多种信号转导途径调控多条基因表达实现的。     

基因芯片技术研究附子对虚寒证大鼠肝全基因表达谱的影响

目的:采用基因芯片技术研究附子对虚寒证大鼠肝全基因表达谱的影响。方法:使用中药复方生石膏、龙胆草、黄柏、知母建立虚寒证大鼠模型,附子治疗后应用基因芯片检测大鼠肝脏基因表达,筛选差异表达基因,进行基因功能注释,荧光定量PCR验证芯片结果。结果:虚寒治疗组与虚寒模型组比较有212条基因差异表达,主要涉及免疫应答及氧化还原酶活性相关基因。结论:附子能够上调虚寒证大鼠的免疫应答相关基因及氧化还原酶活性相关基因,可能是经典热药附子温阳散寒作用的分子机制。     

基因芯片技术研究虚寒证大鼠肝全基因表达谱

目的:采用基因芯片技术研究虚寒证大鼠肝全基因表达谱的改变。方法:使用中药复方生石膏、龙胆草、黄柏和知母建立虚寒证大鼠模型,应用基因芯片检测各组大鼠肝脏基因表达,筛选差异表达基因,进行基因功能分类注释。荧光定量PCR验证芯片结果。结果:虚寒模型组与空白对照组比较有99条基因差异表达,主要涉及刺激应答功能。结论:虚寒证可能通过多种刺激应答相关基因的下调,导致免疫应答功能、防御应答功能及对其他生物体刺激应答功能的降低。虚寒证的物质基础可能与此类基因的异常表达相关。     

运用基因芯片研究骨关节炎虚寒证的基因表达谱述要

目的:研究骨关节炎虚寒证的基因表达谱.方法:临床上选择骨关节炎虚寒证患者8例,同时选择8例正常人,取血、提取mRNA、经标记、杂交、清洗、芯片扫描、图像的采集与数据分析等过程获得差异基因表达谱.结果:获得表达差异大于2.0倍的基因75条.讨论:对75条基因中已知功能的41条基因从病、证、基因多功能等角度进行了初步分析.     

一个家系虚寒证的基因表达谱研究

目的研究虚寒证的差异基因表达谱。方法选择1个家系虚寒证进行基因芯片实验,并通过GO、KEGG、BioCarta等数据库对结果进行信息挖掘。结果获得差异基因表达谱79条,其中GO数据库能登陆的有23条,通过KEGG、BioCarta信息挖掘发现与15条通路相关。结论从家系角度开展中医证候研究具有积极意义,虚寒证以代谢基因表达异常为主体,同时也影响了代谢通路。     

冠心病血瘀证与肌动蛋白相关基因异常表达的相关性

目的 探讨冠心病血瘀证与肌动蛋白相关基因异常表达的相关性.方法 依据病证结合的研究思路,将5例患者样本混合与5名正常人样本混合并杂交制备芯片(即病证结合芯片).根据治疗前后血液黏度测试结果设计瓜蒌薤白半夏汤治疗前后自身对照芯片(以下称"以药测证芯片"),并对差异表达基因进行信号通路分析,筛选出凝血、血液流变学相关差异表达基因及其与肌动蛋白细胞骨架调控相关的通路.结果 在两张芯片中共同表达的凝血、血流变功能方面差异表达的基因有肌动蛋白(ACTA2)、纤维连接蛋白(FN1)、结合珠蛋白(Hp)、骨桥蛋白(SPP).其与细胞通讯、黏着斑、细胞外基质-受体相互作用、肌动蛋白细胞骨架调控、转化生长因子-β信号通路(TGF-β)等5条通路有关.结论 冠心病血瘀证与肌动蛋白基因及其代谢调控相关,介导了凝血、血流变异常基因的5条信号转导通路.     

虚寒证-基因组预选的代谢类基因功能模块

目的 对课题组近年探索虚寒证-基因组的研究进行概述,展示预选的代谢类基因功能模块.方法 在万人流行病学调查与典型虚寒证患者筛选的背景中,通过病证结合、普查辨证、家系分析、温针反证、温肾反证、动物实验等6种研究角度作基因表达谱芯片实验,并对结果进行分析.结果 虚寒证的差异表达基因较为集中地出现于代谢与免疫两类基因,对这一趋势初步总结出虚寒证的代谢类候选基因,即LPL脂蛋白脂肪酶1等35条基因.结论 虚寒证的发生涉及多种基因的异常表达,候选基因只是极其有限的第一步探索,对预选的代谢类基因功能模块的深入研究将有助于揭示寒证的本质.     

虚寒证能量代谢相关基因的异常表达

目的：探讨虚寒证发生的分子机制。方法：以虚采证家系成员为研究对象．应用基因芯片技术筛选差异表达基因谱，用ANOVA方法分析获得89条差异表达基因。结果：按FatiGO功能分类，涉及新陈代谢有16条基因，占70.7％，其中与能量代谢相关基因6争，占新陈代谢基因的37．5％。结论：虚寒证的发生涉及多种基因的异常表达，主要与能量代谢异常相关。     

辨证分型治疗脂肪肝52例疗效观察

目的：观察中药治疗脂肪肝的疗效。方法：对52例脂肪肝患者根据中医辨证分为3型治疗,并与西药易善力软胶囊治疗30例作疗效对比观察。结果：中医辨证分型治疗组总有效率为94．2％,对照组为76．7％,2组差异有显著性意义（P＜0．05）。结论：中医辨证分型治疗脂肪肝具有较好的疗效。     

处女膜伞的诊断及治疗探讨

目的 :探讨处女膜伞的诊断标准及治疗。方法 :对处女膜伞患者 68例进行中医辨证分型(分湿热型及肝郁型 )。随机分为两组 ,观察组 ( 48例 )采用手术治疗加中医辨证论治 ,对照组 ( 2 0例 )只用手术治疗。结果 :两组治疗总有效率为 92 .7% ,两组疗效比较有显著性差异 ( P<0 .0 5 ) ;同时 ,湿热型与肝郁型疗效比较有非常显著性差异 ( P<0 .0 1)。结论 :处女膜伞手术治疗的疗效良好 ,术后加用中医辨证治疗可能会提高疗效 ,不同证型疗效亦可能不同     

以药测证绘制肾虚证两大基因网络调控路线图谱

目的 研究肾虚证基因网络调控的路线和规律.方法 选择青年组（4月龄）、老年组（24月龄）、淫羊藿总黄酮（Epimedium Flavonoids,EF）治疗组SD大鼠,取全面反映肾虚的7个组织下丘脑、垂体、肾上腺、淋巴细胞、骨骼、肝脏、肾脏,采用Affymetrix公司的大鼠全基因组芯片再次重复肾虚证基因表达谱差异研究.结果 老年大鼠下丘脑、垂体、肾上腺（HPA轴）显示神经递质γ氨基丁酸（GABA）,促性腺激素释放激素（GnRH）,促甲状腺激素释放激素（TRH）与促甲状腺激素（TSH）,生长激素释放激素受体（GHRH）、胰岛素样生长因子及结合蛋白（IGF、IGFBP）;淋巴细胞显示与细胞生长相关的生长因子相关蛋白（GFRP）,与免疫调节相关的IFNγ、IL-4、IL-6等;骨骼显示甲状旁腺（PTH）、降钙素（calcitonin）与骨基质相关的前胶原、胶原、结缔组织生长因子等;肝脏显示氧化磷酸化相关的细胞色素Cytochrome P450、NADH脱氢酶,与蛋白质代谢相关的谷氨酸脱氢酶（Glutamate dehydrogenase）,与糖代谢相关的葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-Phosphatase）均为低表达.EF作用后,可见老年大鼠7个标本低表达的基因几乎全部上调,此外还有大量与衰老机理相关的基因明显上调.包括HPA轴的神经递质如GABA,激素如GnRH,细胞周期相关基因如CyclinB,免疫调节相关基因如NF-κB105;淋巴细胞与生长调节相关的基因如GFRP,免疫调节相关的基因如IFNγ;骨骼的甲状旁腺、降钙素、IGF、前胶原、胶原、GnRH、Progesterone等;肝脏的大量代谢相关的基因如Cytochrome P450、NADH脱氢酶;肾脏的代谢相关基因及钠、氯通道等基因.结论 通过以药测证,发现肾虚证大鼠模型存在神经-内分泌-免疫以及神经-内分泌-骨代谢两大基因调控路线的紊乱,补肾能纠正该网络功能低下.     

裸花紫珠片治疗热(瘀)毒证的证病结合临床研究

目的:研究裸花紫珠片治疗热(瘀)毒型上呼吸道感染、慢性盆腔炎、痔疮出血的证、病疗效及其相关性,探索以证的疗效指标为主、证病结合的中药新药临床评价模式。方法:选择符合热(瘀)毒证并分别符合上呼吸道感染、慢性盆腔炎、痔疮出血的病例,采用分层随机分组、阳性药物平行对照、双盲双模拟观察方案,疗程结束后评价证、病疗效及其相关性。结果:1)裸花紫珠片对热(瘀)毒证及上呼吸道感染、慢性盆腔炎、痔疮出血证、病疗效与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。该药能明显改善咽/喉疼痛,下腹胀/刺痛、腰骶疼痛,症状便血、肛门肿胀积分,差异有统计学意义(P0.05)。2)裸花紫珠片治疗热(瘀)毒型上呼吸道感染、慢性盆腔炎、痔疮出血的证、病疗效,观察组疗前血WBC异常的热(瘀)毒型的上呼吸道感染受试者的证候积分及主要症状咽/喉疼痛与血WBC计数,慢性盆腔炎受试者的证候积分与血WBC计数,痔疮出血受试者的证候疗效与便血疗效的Spearman相关,差异有统计学意义(P0.05),且疾病疗效与便血疗效的Spearman相关均有统计学意义(P0.05)。结论:1)裸花紫珠片对热(瘀)毒型上呼吸道感染、慢性盆腔炎、痔疮出血具有较好的临床疗效。2)中医证候疗效与疾病综合疗效及能反应西医疾病特征的相关指标疗效具有显著相关性;中医证候积分及中医证候的主要症状评分与能反应疾病本质特征的实验室指标或主要症状具有显著相关性。     

一个寒证家系中发现15个差异表达基因的报告

目的：精选家系切人证候研究，深层次地探讨寒证的分子生物学基础。方法：应用基因芯片技术对同一家系中的4例虚寒证患者与6名正常人进行基因表达谱检测。结果：发现此寒证家系中的虚寒证患者与能量等代谢相关的差异表达基因达15个，占此实验中已知功能基因的52％。结论：利用家系进行证候的基因组研究，可排除大量干扰因素，对于复杂的寒证可有效、集中地筛选目标基因，提示寒证家系患者机体能量异常、代谢减慢有相应的分子生物学基础。     

丹枣口服液治疗冠心病心绞痛的病、证疗效及其相关性研究

目的:研究丹枣口服液治疗气滞血瘀型心绞痛的病、证疗效及心电图疗效及其相关性,探索病证结合的中医药临床评价思路与方法。方法:将115例本病患者随机分为治疗组86例和对照组29例,治疗组予丹枣口服液治疗,对照组予通脉口服液治疗,主要观察指标为气滞血瘀型心绞痛的相关症状征和心电图,应用统计分析方法分析丹枣口服液对冠心病心绞痛病、证疗效及其相关性。结果:丹枣口服液对冠心病心绞痛疗效与对照药物比较差异有统计学意义(P0.05),而证候及心电图疗效无统计学意义(P0.05)。2组冠心病心绞痛疗效与气滞血瘀证疗效、心电图疗效,以及病、证主要症状积分变化均显著相关(P0.05)。结论:丹枣口服液对气滞血瘀型冠心病心绞痛具有较好临床疗效,对冠心病心绞痛病、证的疗效与对心电图的改善显著相关。     

定惊丸联合利培酮治疗痰火上扰型精神分裂症临床观察

目的 :观察定惊丸联合利培酮治疗痰火上扰型精神分裂症的临床疗效。方法 :将100例确诊的痰火上扰型精神分裂症患者按随机双盲原则分为治疗组和对照组各50例,治疗组给予定惊丸联合利培酮治疗,对照组单纯使用利培酮治疗。1周为1个疗程,共治疗8个疗程。比较两组治疗前后阳性与阴性症状量表(PANSS)评分及不良反应情况,判定临床疗效。结果:治疗组总有效率93.9%,对照组总有效率83.7%,两组疗效比较差异有统计学意义(P0.05);治疗后两组PANSS评分较治疗前均显著降低,差异有统计学意义(P0.05),治疗组总分、阳性症状评分及一般情况评分与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);治疗组不良反应发生率低于对照组。结论:定惊丸联合利培酮治疗痰火上扰型精神分裂症疗效确切,不良反应少,易于患者接受。     

论寒证科学基础研究的六个时期及前瞻

寒证本质的研究最早由北京医学院梁月华教授1979年提出,随后历经6个时期,28年。寒证动物模型的建立及5-羟色胺等神经递质研究,寒证量表及万人流行病学调查,寒证-基因组学及代谢基因功能模块研究,寒证分子疗效探索期,寒证生物信息及能量代谢通路研究等。近年来,随着功能基因组学的开展,从全基因网络的角度前瞻寒证科学基础研究。     

中西医结合治疗副流感病毒性支气管炎46例疗效观察

目的:观察中西医结合治疗副流感病毒性支气管炎的临床疗效。方法:对92例副流感病毒性支气管炎患者随机分为2组各46例,对照组采用单纯西药治疗,治疗组在西药治疗的基础上配合中医辨证论治。结果:治愈率、总有效率治疗组分别为60.9％、97.8％,对照组分别为37.0％、76.1％,2组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:中西医结合治疗副流感病毒性支气管炎疗效确切。     

火把花根片加激素治疗肾病综合征的疗效分析

目的 :观察火把花根片加激素对肾病综合征 (NS)的治疗作用。方法 :78例NS患者随机分为 2组 ,治疗组 38例予火把花根片加激素治疗 ,对照组 40例单纯予激素治疗。6个月后观察两组的疗效及血脂、肾功能等相关指标的变化情况。结果 :治疗组总有效率为 92 .11% ,明显高于对照组的72 .5 0 % (P <0 .0 5 )。治疗组在改善血脂代谢及肾功能等方面也明显优于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :火把花根片加激素治疗NS的疗效明显优于单纯的激素治疗