中药肉苁蓉接种技术的研究

 目的 有效提高管花肉苁蓉和荒漠肉苁蓉的接种率。方法 本实验选用柽柳和梭梭及管花肉苁蓉和荒漠肉苁蓉种子为实验材料,进行了激素浸种处理、不同接种深度、不同浸种时间、生根粉、保水剂和接种装置处理对肉苁蓉接种率影响的实验研究。结果 将肉苁蓉种子用500 mg·L-1的激素A浸泡24 h,用牛皮纸信封作为接种装置,接于40 cm土层深度,并灌溉3 g·L-1生根粉和4 g·L-1保水剂混合溶液2 L。结论 本结果可有效提高中药肉苁蓉接种率。     

管花肉苁蓉产地适宜性之再分析

 目的 对管花肉苁蓉产地适宜区进行分析以指导管花肉苁蓉区划和生产。方法 应用“中药材产地适宜性分析地理信息系统”,以新疆南疆管花肉苁蓉分布区的生态因子为依据,分析管花肉苁蓉在全国适宜产地。结果 管花肉苁蓉最适宜产区只在新疆南疆塔克拉玛干沙漠边缘的27个县市,分布有明显的区域性。结论 管花肉苁蓉与其寄主植物柽柳的分布不同步,管花肉苁蓉在新疆北疆及我国其他省区种植应慎重。     

肉苁蓉种子发芽条件研究

目的：明确氟啶酮预处理浓度、时间、发芽温度和盐分对3种肉苁蓉种子发芽的影响。方法：用培养皿法培养种子,统计发芽率。结果：0.1 mg·L^-1氟啶酮预处理的管花肉苁蓉、荒漠肉苁蓉和盐生肉苁蓉种子发芽率最高,预处理时间为24～29 h。适宜温度为20～30 ℃,低于5 ℃或高于35 ℃,种子不能发芽。盐生肉苁蓉种子耐盐性强,NaCl浓度临界值为0.04 mol·L^-1,管花肉苁蓉和荒漠肉苁蓉种子耐盐性较弱,NaCl浓度临界值为0.02 mol·L^-1。结论：3种肉苁蓉种子发芽率测定方法和条件是：用0.1 mg·L^-1氟啶酮预处理24 h后,温度为20～30 ℃,盐分低于0.02 mol·L^-1。     

管花肉苁蓉人工控制寄生技术研究

目的研究建立名贵中药材肉苁蓉的基源植物管花肉苁蓉Cistanche tubulosa的人工控制寄生技术,加强其资源保护与利用。方法运用人工控制寄生培养的方法,主要对寄主柽柳树龄、寄生接种时间、寄生接种种子量进行筛选;运用高效液相色谱法,对生产的管花肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量进行分析。结果 1年生、2年生、3年生的柽柳植株均能与管花肉苁蓉形成寄生,1年生柽柳植株的成活率和寄生率均最高,分别为97%和91%;在四月上旬、五月上旬、六月上旬、九月上旬进行接种,管花肉苁蓉与1年生柽柳植株均能形成寄生,四月上旬寄生率最高,为93%;接种种子量对管花肉苁蓉寄生率、寄生体数量存在显著影响,0.02 g为最适宜的接种量。人工控制寄生条件下,2年生管花肉苁蓉的松果菊苷和毛蕊花糖苷含量均高于药典标准。结论人工控制寄生技术寄生效率高,生产质量好,可为管花肉苁蓉规范化生产提供有力的技术保障。     

肉苁蓉化学成分研究

 目的 研究肉苁蓉（Cistanche deserticola Y. C. Ma)的化学成分。方法 采用多种色谱方法进行分离,利用光谱数据结合理化分析进行结构鉴定。结果 从肉苁蓉干燥肉质茎70%乙醇提取物中,分离鉴定了17个化合物。分别为毛蕊花糖苷(1)、2′-乙酰基毛蕊花糖苷 (2)、肉苁蓉苷C (3)、肉苁蓉苷D(4)、异毛蕊花糖苷(5)、管花苷B(6)、管花苷E(7)、盐生肉苁蓉苷D(8)、盐生肉苁蓉苷E (9)、plantainoside C (10)、osmanthuside B₆ (Z/E) (11a/b)、松果菊苷(12)、8-表马钱子酸(13) 和京尼平苷(14)、ononin(15)、尿囊素(16)和半乳糖醇(17)。结论 化合物10、11a/b和15为首次从本属植物中分离得到。化合物7~9为首次从本种植物中分离得到。     

肉苁蓉寄生对梭梭N、P、K积累和分配的影响

 目的 明确肉苁蓉的寄生对梭梭N、P、K积累及分配的影响。方法 采用凯氏定氮法和电感耦合等离子体原子发射光谱法。结果 肉苁蓉寄生后,梭梭的N、P、K累积量分别降低1.83%,45.92%和31.75%;梭梭9.14%的氮素、64.04%的磷素和14.19的钾素分配到肉苁蓉。结论 肉苁蓉寄生会改变N、P、K在梭梭体内的累积和分配。     

光照、温度和干旱胁迫对藏药川西小黄菊种子萌发的影响

目的 探究光照、温度和干旱胁迫对藏药川西小黄菊Tanacetum tatsienense种子萌发的影响。方法 在5个不同温度（15、20、25、30、35℃）下，设置2个光照条件（光照12 h/黑暗12 h、连续黑暗24 h）和5个聚乙二醇浓度（0、5%、10%、15%、20%）对川西小黄菊种子进行萌发实验，对种子萌发率、平均萌发时间、萌发指数、幼叶长、胚轴长、胚根长等指标进行统计分析。结果 光照、温度和干旱胁迫对川西小黄菊种子萌发具有显著影响（P<0.05）；同一温度下，光照条件下的种子萌发率和萌发指数大于黑暗条件，黑暗环境下平均萌发时间增加；20、25℃下光照对种子的萌发率和平均萌发时间影响不显著；15、30和35℃时，连续黑暗环境显著抑制种子的萌发率（萌发率最低仅为6.0%）和平均萌发时间（P<0.05）；15、20、25℃时随PEG浓度升高，种子萌发率和萌发指数减小、平均萌发时间增加，最短时间仅需3.4 d，最长时间达10.6 d；30、35℃时，低浓度PEG（≤10%）胁迫下萌发率和萌发指数显著大于对照（P<0.05），最高萌发率可达85.5%；幼叶和胚轴长度在所有温度下随PEG浓度的增加而缩短，胚根长度除15℃的所有温度下随PEG浓度增加呈先增长后缩短趋势，15℃时呈缩短趋势；回收后种子最终萌发率在15、20、25℃与对照无显著差异（P>0.05），在30、35℃时显著降低（P<0.05）。结论 温度改变会影响光照和干旱胁迫川西小黄菊种子适应性，是调节种子萌发的主要因素，而光照不是必要条件；另外，川西小黄菊种子PEG干旱胁迫承受阈值为20%，在轻度胁迫（PEG浓度0～10%），温度为20～30℃时种子萌发最好，在20～25℃时幼苗生长较好，可为川西小黄菊人工育苗提供参考。     

阶段降湿对山药热风干燥特性和品质的影响

目的 探索阶段降湿中高湿保持时间及不同降湿工艺对山药热风干燥特性和品质的影响,为提高山药干燥效率和品质及揭示相对湿度的调控依据提供理论基础。方法 研究干燥温度60℃,风速3.0 m/s,相对湿度恒定10%、50%保持不同时间（5、10、20 min）后降为10%、以及相对湿度50%保持10 min后不同降湿干燥工艺（直接降为10%、20%保持20 min后降为10%、30%,20 min,20%,20 min后降为10%、40%,20 min,30%,20 min,20%,20 min后降为10%）,山药片的干燥特性、水分有效扩散系数（D_eff）、色泽、复水比、能耗、多糖含量和微观组织结构。结果 高相对湿度不同保持时间下,相对湿度50%保持10 min相对于恒定10%干燥条件下,干燥时间缩短了20.0%;干燥过程分为升速和降速2个阶段;在10 min时,山药片被充分预热,温度升至45.8℃。不同降湿干燥工艺下,相对湿度50%保持10 min后,阶梯降至10%相对于直接降为10%的干燥条件,干燥时间缩短了25.0%;干燥过程同样分为升速和降速2个阶段;物料温度整体上呈现出缓慢上升的趋势,且均大于其余3者同时期的物料温度;D_eff先慢后快,整个干燥过程平均D_eff最大,为6.77×10^-10 m²/s;此干燥条件下明亮度（L^*）、复水比和多糖含量分别达到其最大值,为（90.76±0.12）、（2.36±0.08）、（57.32±0.21）mg/g,能耗达最低值,为（2.98±0.06）kW·h/kg,且内部形成较明显的水分扩散迁移孔道。结论 高相对湿度有助于强化对物料的传热作用,保持时间应当以物料充分预热为判定依据;阶段降湿干燥过程中,降低相对湿度应当以不降低物料温度为基本约束条件;山药片的恒温阶段降湿干燥过程中,干制后的色泽、复水性、能耗和多糖含量均与干燥时间直接相关;高相对湿度有助于保持和形成物料内部的多孔结构,有助于水分的扩散迁移;依次阶段降湿的干燥方式有助于提高山药片的干燥效率和品质,为山药热风干燥过程中如何调控相对湿度提供理论依据和技术支持。     

西黄滴丸成型工艺优选

目的： 优选西黄滴丸的成型工艺。方法： 以滴丸的溶散时限、外观质量及丸重差异为综合评价指标,在单因素试验基础上,选取药物与基质的配比、滴制温度、冷却剂温度、滴距为考察因素,采用正交试验优选西黄滴丸的成型工艺。结果： 最佳成型工艺条件为以PEG8000-PEG10000（1:1）为基质,药物-基质（1:1.5）,冷却剂为二甲基硅油100,药液温度75℃,冷却剂温度采用梯度冷却方式（上部温度30℃,下部温度0~5℃）,滴速20~25滴/min,滴距4 cm。结论： 优选的西黄滴丸成型工艺合理、稳定可行,为西黄滴丸的临床推广提供参考。     

黄河三角洲野生柽柳接种管花肉苁蓉研究

目的:研究黄河三角洲地区种植管花肉苁蓉的可行性。方法:用挖沟接种方法,在黄河三角洲盐碱地引种管花肉苁蓉,调查管花肉苁蓉接种率和生长状况;收获种子,用氟啶酮预处理,测定种子萌发率;利用色谱法分析黄河三角洲所产的管花肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量。结果:管花肉苁蓉能在黄河三角洲地区正常生长、开花、结实,完成生活史。黄河三角洲野生柽柳接种管花肉苁蓉的接种率为81.9%,管花肉苁蓉生长状况良好,能正常开花结果;收获种子的萌发率在46~63%之间;肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量之和为22.1%,符合药典规定。结论:在黄河三角洲盐碱地引种管花肉苁蓉获得成功,生产的管花肉苁蓉指标成分符合药典要求。     

管花肉苁蓉种子萌发和寄生过程的形态学研究

目的:了解管花肉苁蓉寄生过程。方法:变档体视显微镜观察管花肉苁蓉种子萌发和寄生过程的形态结构。结果:①管花肉苁蓉种子不接触寄主柽柳根,可独立萌发。②种子萌发首先从种孔长出芽管,其顶端与寄主根接触并膨大为吸器,吸器侵入寄主根,使寄主根维管束内充满褐色物质。③管花肉苁蓉幼体撑破芽管而出,其上可见6~7个鳞叶突起的;断裂的芽管、胚乳细胞残留体及种皮脱落。④近茎端的根明显膨大变粗;远茎端的寄主根则逐渐萎缩。结论:寄生过程遵循种子萌发长出芽管,接触寄主根形成吸器并侵入寄主根,管花肉苁蓉幼体出现3个阶段。     

药用肉苁蓉的遗传多样性RAPD分析

目的 :荒漠肉苁蓉Cistanche deserticola和管花肉苁蓉Cistanche tubulosa群体遗传多样性的研究。方法 :对荒漠肉苁蓉 2个野生居群和管花肉苁蓉 4个野生居群进行RAPD分析 ,利用POPGENE1.31版软件分析群体的遗传多样性。结果 :荒漠肉苁蓉平均多态位点百分率 47.37% ,2个居群多态位点分别为 39.4 7%和 35.53% ,平均Nei’s基因多样性为 0 .135 8,Shannon’s多态性信息指数为 0.2072 ,基因分化系数Gst=0.2546。管花肉苁蓉平均多态位点百分率 27.5 9% ,各居群多态位点百分率从 19.54 %到 25.29% ,其中安迪尔居群的最高 25.29% ,平均Nei’s基因多样性为 0.0823,Shannon’s多态性信息指数为 0.1258,基因分化系数Gst=0.1755。结论 :荒漠肉苁蓉和管花肉苁蓉在居群间均有一定的分化 ,荒漠肉苁蓉的遗传多样性明显高于管花肉苁蓉 ,并已明显分化成 2个生态型。     

管花肉苁蓉田间接种技术的研究

目的:通过对管花肉苁蓉接种技术的研究,提高管花肉苁蓉的田间接种率。方法:用根管接种法,比较分析了不同大小种子、接种介质和接种时间等对管花肉苁蓉接种率的影响。结果与结论:选择宽度大于0.7mm的种子,粗砂为接种介质,于5月份接种,可使管花肉苁蓉的接种率达到92.5%。     

外界条件的改变对红花离体培养的影响

目的 研究外界培养条件的变化对红花离体培养过程中不同发育阶段培养物的影响.方法 以红花种子诱导的无菌苗子叶为外植体,分别接种至含有不同碳氮源、不同PH值、不同温度、不同湿度和不同光照的培养基中,观察其生长情况.结果 通过实验筛选出蔗糖浓度为3%,KNO_3浓度为MS培养基中KNO_3浓度的2倍,最佳pH为6.2,红花离体培养体系在24℃,30%的相对湿度,16 h光照,8 h黑暗交替培养的条件下,最利于红花的分化.结论 3%的蔗糖作为碳源,最适合愈伤组织的生长;2倍于MS培养基中的KNO_3含量有利于愈伤组织的生长和不定芽的分化;pH值为6.2时,最适宜红花不同阶段培养物的生长;24℃为红花离体培养的最适温度,生根时的温度为21℃较好;湿度为50%时,适于愈伤组织鲜重积累,30%的湿度适于不定芽分化和生根;黑暗培养利于鲜重积累,16 h光照,8 h黑暗交替培养有利于不定芽的分化,8 h光照,16 h黑暗交替培养有利于生根.     

管花肉苁蓉花中查耳酮合酶的基因克隆、功能鉴定与表达分析

目的 研究管花肉苁蓉Cistanche tubulosa花中查耳酮合酶（chalcone synthase）Ct CHS蛋白的功能和Ct CHS基因在白、红、紫3种颜色花中的表达模式。方法 利用RT-PCR克隆Ct CHS基因并进行生物信息学分析。将p ET-28a-CtCHS质粒转入大肠杆菌通过IPTG诱导蛋白表达。将Ct CHS重组蛋白与底物4-香豆酰辅酶A、丙二酰辅酶A孵育并利用HPLC和MS检测产物。将p CAMBIA1300-35S-GFP-CtCHS质粒转入拟南芥原生质体观察CtCHS蛋白亚细胞定位。利用q RT-PCR检测Ct CHS基因在3种颜色管花肉苁蓉花中的表达模式。结果 克隆出1条Ct CHS基因，开放阅读框（open reading frame,ORF）长度为1173 bp，编码390个氨基酸，蛋白相对分子质量为42 800，具有查耳酮合酶保守的催化残基Cys164、His303、Asn336。利用大肠杆菌外源表达Ct CHS蛋白并纯化获得重组蛋白。Ct CHS蛋白能够催化4-香豆酰辅酶A与丙二酰辅酶A生成柚皮素查耳酮。Ct CHS蛋白主要定位于细胞质。Ct C...     

柴胡种子萌发的环境因素研究

目的　探讨柴胡种子萌发的适宜环境。方法　将柴胡种子于 4 0℃温水中浸泡 4 8h后分别置于不同温度、空气湿度和沙层之下 ,观察其萌芽所需要的时间、发芽率及种根生长的速度。结果　柴胡种子在空气相对湿度 10 0 %、温度 2 0℃、覆盖沙层厚度 0 .5 cm的条件下萌发需 4 0 d左右 ,其发芽率可达 5 0 .7%。结论　柴胡种子萌发主要决定于种子质量和成熟度 ,严格控制种子萌发的环境条件可提高发芽率     

豆豉纤溶酶的分离纯化及部分酶学性质研究

 目的 从豆豉中分离出具有强纤溶活性的菌株，从该菌株的发酵液中纯化出纤溶酶并对此纤溶酶的部分酶学性质进行研究。方法 利用硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换色谱和Sephadex G-75凝胶过滤色谱等方法进行纯化；利用N-末端氨基酸序列测定及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对此酶进行鉴定。结果 从发酵液中获得了纤溶酶单一组分，表观相对分子质量为30×10³。该纤溶酶在50 ℃以下和pH 7.0~9.0之间保持稳定，最适温度为35 ℃；最适pH为8.6。N-末端氨基酸序列及飞行时间质谱测定结果都表明该酶与纳豆激酶氨基酸序列有着极高的相似性。结论 获得了纤溶酶单一组分，为纤溶酶发酵产品的大规模纯化和进一步研制开发新的溶栓药物提供重要理论依据。     

气相色谱法测定布格呋喃的含量及有关物质

 目的建立气相色谱法测定布格呋喃(AF-5)原料药的含量及有关物质。方法采用HP-5毛细管色谱柱(0.32 mm×30 m,0.25μm);柱温:程序升温,初始温度120℃,保持1 min,以10℃·min^-1升温至230℃,保持15min;进样器温度:200℃;检测器(FID)温度:250℃;载气:氮气;流速:1.0 mL·min^-1;分流比:20∶1。结果布格呋喃与有关物质的分离良好,方法的线性范围为0.01～1.0 g·L^-1(r=0.999 4),RSD<2.0%(n=3),检测限为0.3ng。结论本法专属性强、简便、准确,易操作,适用于布格呋喃原料药的含量及有关物质的测定。