续断皂苷VI调控Wnt/β-Catenin通路对骨质疏松的影响机制＊

目的 探讨续断皂苷VI调控Wnt/β-Catenin通路对骨质疏松的影响并分析其作用机制。方法 构建SPF级Wistar大鼠骨质疏松症模型与健康大鼠共同饲养形成对照组，将50只雌性大鼠随机分为4组。依次设置为：续断皂苷VI治疗组，模型对照组，假手术组，空白对照组。使用不同双侧卵巢摘除手术法处理实验组大鼠。除空白对照组外，模型对照组与假手术组以及续断皂苷VI处理组的大鼠均制成骨质疏松症大鼠模型，将续断皂苷VI组的大鼠连续给药12周。使用X线骨密度仪骨密度（BMD， bone mineral density）测定法检测各组大鼠BMD，观察给药前后大鼠BMD变化情况；使用生物力学测定仪测定各组大鼠后肢股骨的最大载荷差异；使用RT-PCR实验和Western Blotting实验以检测不同组Wnt3a、β-catenin、LRP5、Runx2、SOST和Osx转录组与蛋白组表达各自发生的差异。结果 续断皂苷VI治疗12周可显著提高骨质疏松症大鼠模型股骨的BMD，并提高椎体在最大负荷和弹性模量下的生物力学能力，降低了骨质疏松症在骨组织中造成的致病性。对于组织形态学方面的考察发现，续断皂苷VI治疗组在治疗持续12周后，小梁排列整齐，小梁稍变薄，股骨没有明显的轻微骨折。在进行续断皂苷VI治疗处理的情况下，经典Wnt /β-catenin信号通路中涉及的LRP5、β-catenin、Runx2和Osx的表达显著上调，而在该通路中SOST的表达下调（P <0. 05）。结论 续断皂苷VI可显著提高骨质疏松模型大鼠的骨密度，其保护机制与激活Wnt/β-catenin 信号通路，上调骨质疏松大鼠骨中β-catenin、LRP5的mRNA表达有相关。     

Wnt信号通路在糖尿病骨质疏松中的作用及中药干预的研究进展

糖尿病骨质疏松（DOP）是糖尿病引起的一种骨骼并发症,以骨密度降低、骨微结构改变、骨质脆性升高为主要特征。DOP的进程与高糖、胰岛素抵抗、氧化应激等机制关系密切。Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路是介导糖尿病胰岛素抵抗和骨代谢平衡的重要机制,调控Wnt信号转导促进糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）磷酸化表达水平,可改善糖脂代谢。Wnt/β-catenin信号通路是调节骨细胞重塑的重要途径,不仅在成骨细胞和破骨细胞二者平衡中发挥重要调节作用,可以改善骨代谢平衡;并且调控Wnt通路还促进骨桥蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白的表达,改善骨增殖和成骨分化。近年来中医药在DOP的防治中的研究逐渐增多,中药干预Wnt通路转导改善DOP的探索取得了一定的进展。该文搜集国内外近10年来Wnt信号通路在糖代谢、骨代谢和DOP的研究,以及关于中药复方（经典方和其他）、单味中药、中药单体基于Wnt通路干预DOP的相关文献进行整理综述,以期为临床防治DOP新药的开发提供参考和方向。     

miRNA调控Wnt/β-catenin通路与糖尿病骨质疏松的中西医研究进展

糖尿病骨质疏松的发病机制复杂,其分子机制仍有待明确。miRNA对Wnt/β-catenin信号通路具有强大的调控作用,且基于Wnt/β-catenin信号通路探讨骨质疏松的发病机制以及中医药通过该信号通路防治骨质疏松的研究日益增多。通过回顾国内外近年来有关miRNA对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用、Wnt/β-catenin通路与糖尿病骨质疏松的关系以及中医药通过Wnt/β-catenin信号通路防治糖尿病骨质疏松等方面的研究,初步揭示miRNA调控Wnt/β-catenin信号通路介导糖尿病骨质疏松的作用机制及中医药对此通路的干预作用,为今后研究中医药防治糖尿病骨质疏松的作用机制提供新的思路和方法。     

针刺防治骨质疏松症：基于动物实验机制研究的最新进展＊

目的 基于动物实验模型，总结针刺治疗骨质疏松的研究现状及进展。方法 采用计算机检索近5年中国知网（CNKI）、维普数据库（VIP）、万方数据库（WanFang Data）、中国生物医学文献数据库（CBM）以及PubMed、EMbase、The Cochrane Library等数据库中有关针刺治疗骨质疏松动物模型的研究资料进行评价分析。结果 总结15项实验研究，发现针刺防治骨质疏松的作用机制主要体现在调节成骨和破骨相关的OPG/RANK/RANKL、Wnt/β-catenin、MAPKs信号传导通路，调节肠道钙吸收，上调成骨相关蛋白BMP-2、RUNX2的表达，提高雌激素水平，抑制瘦素释放，调整胰岛功能及协调组蛋白修饰等方面。结论 近5年来，针刺治疗骨质疏松的作用机制研究更加深入，在影响表观遗传、中枢调控和调节肠道物质吸收等方面有新发现。     

萝卜硫素介导Wnt/β-catenin信号通路诱导胃癌细胞凋亡的研究

[目的]探讨萝卜硫素对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及其对Wnt/β-连锁蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路活化的影响。[方法]采用CCK8实验检测10、20、40 μmol/L萝卜硫素对SGC-7901细胞增殖的影响,流式细胞仪分析萝卜硫素对SGC-7901细胞凋亡的影响,荧光素酶报告基因实验检测萝卜硫素对Wnt/β-catenin通路中淋巴增强因子/淋巴腺黏连因子（TCF4/LEF）转录活性的影响,Western Blot方法检测萝卜硫素对SGC-7901细胞中β-catenin、糖原合成激酶3β（GSK-3β）、c-Myc及半光天冬酶3（Caspase3）蛋白表达水平的影响。[结果]与对照组相比,萝卜硫素组SGC-7901细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05）,呈现出时间、剂量依赖性;萝卜硫素组SGC-7901细胞凋亡率相比对照组显著增高（P<0.05）,并且萝卜硫素还能明显抑制TCF4/LEF报告质粒的荧光素酶活性（P<0.05）;萝卜硫素组SGC-7901细胞内β-catenin及c-Myc蛋白表达呈浓度依赖性降低,而GSK-3β及Caspase3蛋白表达呈浓度依赖性增高（P<0.05）。[结论]萝卜硫素能明显抑制SGC-7901细胞增殖,并诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。     

淫羊藿苷通过Wnt/β-catenin信号通路抑制淀粉样蛋白Aβ 25-35所诱导的神经毒性

 目的 研究淫羊藿苷（icariin）对β-淀粉样蛋白（Aβ_25-35）所致的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株（PC12细胞）神经毒性的抑制作用和潜在机制。 方法 将PC12细胞分为正常对照组、Aβ_25-35损伤组、淫羊藿苷与Aβ_25-35共同给药组、淫羊藿苷单独给药组,然后考察淫羊藿苷对PC12细胞损伤的保护作用,以及淫羊藿苷对Wnt/β-catenin信号通路的调节作用。结果 淫羊藿苷可以显著的抑制Aβ_25-35所诱导的PC12细胞神经毒性,提高细胞存活率,此外其还可以降低凋亡相关蛋白caspase-3和PARP的激活。机制研究发现,淫羊藿苷可以激活Wnt/β-catenin信号通路中的关键蛋白β-catenin的活性,抑制其磷酸化,并促进该蛋白向细胞核中的转运。此外,淫羊藿苷还可以通过调节不同的磷酸化位点来抑制GSK-3β信号蛋白的活化。结论 淫羊藿苷可显著抑制Aβ_25-35所致的PC12细胞的毒性作用,其潜在机制可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路来实现的。     

Wnt/β-catenin信号通路在类风湿关节炎中的表达

类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是以滑膜炎为主要病理表现的系统性疾病,目前已有研究证实,Wnt/β-catenin信号通路是类风湿关节炎发生发展的关键环节。一方面Wnt/β-catenin信号通路活化促进成骨细胞增殖分化,促进骨组织修复;另一方面,成纤维样滑膜细胞中Wnt/β-caten in通路上调,促进成纤维样滑膜细胞增殖,加重软组织增生,破坏骨关节。因此如何通过调节Wnt/β-catenin通路抑制成纤维样滑膜细胞增殖的同时促进骨修复对RA治疗具有重要研究意义。     

中医药治疗慢性肾脏疾病矿物质和骨代谢异常相关信号通路研究进展

中医药在治疗慢性肾脏病矿物质和骨代谢异常（CKD-MBD）具有一定优势,近年来出现许多中药复方及中药单体治疗CKD-MBD的研究。通过文献检索发现,中药治疗CKD-MBD相关通路的机制研究中,以中药自拟复方研究为主,作用途径涉及纤维细胞生长因23/Klotho（FGF23/Klotho）信号通路、Wnt/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路、核转录因子-κB受体活化因子/核转录因子-κB受体活化因子配体/骨保护素（RANK/RANKL/OPG）系统等多条信号通路,中药能通过调节此系列信号通路改善钙磷代谢、骨代谢紊乱、调控炎症反应、氧化应激、细胞凋亡和自噬,从而治疗CKD-MBD。该文将对这些信号通路和中药治疗CKD-MBD在作用机制领域取得的研究成果进行介绍,以期为中药治疗CKD-MBD的相关研究提供思路和参考。     

补肾活血方调控Wnt/β-catenin信号通路改善复发性流产小鼠子宫螺旋动脉重铸的机制

目的 观察补肾活血方对复发性流产模型小鼠子宫蜕膜组织Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路及子宫螺旋动脉重铸的影响，探讨其作用机制。方法 以CBA/J×BALB/c小鼠合笼构建正常妊娠小鼠模型，以CBA/J×DBA/2小鼠合笼构建复发性流产小鼠模型，将复发性流产模型小鼠随机分为模型组、地屈孕酮组、中药低剂量组及中药高剂量组，以正常妊娠小鼠作为空白组，每组10只，各组分别给予药物治疗14 d。疗程结束后观察各组小鼠胚胎吸收率，苏木素-伊红（HE）染色观察蜕膜组织病理形态、螺旋动脉生理性转变率，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、血管内皮生长因子（VEGF）及Wnt/β-catenin信号通路的mRNA与蛋白表达水平。结果 与空白组比较，模型组胚胎吸收率明显升高（P<0.05）；子宫螺旋动脉生理性转变率明显降低（P<0.05）；子宫蜕膜组织的细胞水肿变性，排列紊乱；螺旋动脉重铸关键因子MMP-2、MMP-9、VEGF及Wnt/β-catenin信号通路相关因子Wnt2、β-catenin、细胞周期蛋白D₁（Cyclin D₁）、c-Myc的mRNA与蛋白表达明显降低（P<0.05）。与模型组比较，中药低剂量组、中药高剂量组可以明显降低胚胎吸收率（P<0.05）；明显提高螺旋动脉生理性转变率（P<0.05）；改善子宫蜕膜组织的细胞形态、增加蜕膜血管数量；明显上调MMP-2、MMP-9、VEGF及Wnt/β-catenin信号通路相关因子的mRNA与蛋白表达（P<0.05）。结论 复发性流产存在子宫螺旋动脉重铸障碍，补肾活血方可以通过激活Wnt/β-catenin信号通路，增加VEGF、MMP-2及MMP-9的表达，促进子宫螺旋动脉重铸，从而治疗复发性流产。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨槲皮素对自身免疫性葡萄膜炎大鼠的影响机制

目的 探讨槲皮素调控Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路对自身免疫性葡萄膜炎（EAU）的影响机制。方法 运用网络药理学技术对槲皮素与EAU的调控作用关系进行初步判定;通过酶联免疫吸附测定法（ELISA）与临床分级评分对模型进行鉴定,再通过ELISA对信号通路中重要炎性因子白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α进行检测,通过分子对接技术对通路中重要靶点因子进行结合验证,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测信号通路下相关靶点蛋白的表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测信号通路下相关靶点基因的表达水平。结果 通过ELISA与临床分级评分模型制作成功,ELISA检测信号通路中重要炎性因子IL-6、TNF-α,显示模型组、二甲基亚砜（DMSO）组二者表达最高,槲皮素低剂量和槲皮素高剂量组干预后均降低,趋势相同;分子对接显示槲皮素与β-catenin;低密度脂蛋白受体相关蛋白6（LRP6）对接结合能十分理想;Western blot检测β-catenin、LRP6,模型组表达最高,随着不同剂量的槲皮素使用表达降低,二者趋势相同,槲皮素低剂量与槲皮素高剂量组比较差异无统计学意义;Real-time PCR结果显示β-catenin、MYC、AXIN2和TCF均为模型组表达最高,槲皮素高剂量组最低,槲皮素低剂量组降低表达,槲皮素高剂量组和槲皮素低剂量组之间比较差异无统计学意义。结论 槲皮素通过调控Wnt/β-catenin信号通路可降低EAU疾病的炎性表达,减轻患者的病痛。