温通针法对血管性痴呆大鼠行为学及脑组织病理变化的影响

目的:观察温通针法对血管性痴呆大鼠脑组织病理形态及学习记忆功能的影响,为临床治疗血管性痴呆提供实验依据。方法:采用反复夹闭双侧颈总动脉-再灌注造成血管性痴呆大鼠模型。将50只健康Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、温通针法组、捻转针法组、药物组,每组10只。温通针法组和捻转针法组分别于“大椎”“百会”“水沟”穴施以温通针法和捻转针法,每穴操作60s,每日1次,共15d。药物组给予尼莫地平悬浊液灌胃。各组大鼠经治疗、跳台试验结束后,断头处死,右侧脑组织切片,HE染色,光镜下观察海马区脑组织细胞病理形态的改变。结果:①行为学测试:模型组跳台试验潜伏期延长,错误次数增多,学习和记忆成绩明显低于空白组(P<0.01);温通针法组、捻转针法组和药物组潜伏期及错误次数明显少于模型组(P<0.01,0.05);药物组和温通针法组之间的差异无显著性统计学意义(P>0.05),温通针法组与捻转针法组比较有显著性统计学差异(P<0.01,0.05)。②形态学结果:空白组可见海马CA1区神经元排列整齐、密集,形态正常,无变性,胶质细胞无增生;模型组可见海马CA1区神经元排列紊乱,出现核固缩,胶质细胞有增生,神经细胞数量减少;药物组海马CA1区有核固缩,但较少,胶质细胞较多,神经细胞数量减少;捻转针法组胶质细胞有增生,但较模型组少,神经细胞数量减少有所改善;温通针法组海马CA1区未见核固缩,胶质细胞数量增生不明显,细胞数量明显增多,CA1区细胞排列较模型组整齐,形态较正常,接近空白组。结论:温通针法能明显减轻脑缺血对大鼠海马CA1区神经元的损伤,改善脑缺血引起的学习记忆障碍。     

补肾祛瘀开窍方对血管性痴呆大鼠脑组织海马CA1区锥体细胞的影响

目的:比较补肾祛瘀开窍方、安理申对血管性痴呆大鼠的治疗作用,观察中药对血管性痴呆大鼠脑组织海马CA1区锥体细胞的影响,探讨中药治疗血管痴呆的机理.方法:采用双例侧颈总动脉永久性结扎造成血管性痴呆大鼠模型,并观察药物对该大鼠模型的学习记忆能力,海马CA1区锥体细胞的形态及数量的影响.结果:补肾祛瘀开窍方可以改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力.明显减轻缺血对海马CA1区锥体细胞损伤的作用.结论:中药补肾祛瘀开窍方为治疗血管性痴呆大鼠的有效方;其治疗血管性痴呆大鼠的机理可能与减轻缺血对海马CA1区椎体细胞的损伤有关.     

消郁安神胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经元形态的影响

目的 观察消郁安神胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经元形态的影响.方法 对抑郁模型大鼠灌胃消郁安神胶囊,然后观察大鼠的空间学习记忆行为和海马神经元形态.结果 慢性应激抑郁模型大鼠空间学习记忆能力明显下降,还能使海马CA1区和CA3区锥体细胞层变薄,细胞排列紊乱、疏松,胞浆尼氏体减少,并且出现大量神经元缺失,药物组动物改善明显.结论 消郁安神胶囊能抵抗抑郁模型大鼠海马神经元的形态改变.     

补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马的保护作用

目的：观察补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马的保护作用。方法：选取健康成年雄性Wistar大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、补肾活血组,制备大鼠血管性痴呆模型。补肾活血组以补肾活血方按临床成人剂量的7倍给药,即0.5 g/kg,按照大鼠体质量以0.01 mL/g的剂量灌胃给药;假手术组和模型组同时予以蒸馏水灌胃,按照大鼠体质量以0.01 mL/g的剂量灌胃。各组大鼠造模结束第2天开始给药,1次/d,连续处理4周。结果：补肾活血组大鼠海马CA1区锥体细胞排列介于模型组与假手术组之间;补肾活血组大鼠的海马CA1区细胞数与假手术组相比没有显著性差异,但是明显高于模型组大鼠的海马CA1区细胞数。结论：补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马CA1区锥体细胞有明显保护作用。     

参芎化瘀胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马CA_1区超微结构的影响

目的:探讨参芎化瘀胶囊对血管性痴呆大鼠海马CA1区超微结构的影响。方法:采用反复夹闭、再通双侧颈总动脉同时ip硝普钠法制备大鼠血管性痴呆模型。SD大鼠随机分为:假手术组、痴呆模型组(模型组)、喜得镇组和参芎化瘀胶囊治疗组。以Morris水迷宫检测行为学,透射电镜观察各组大鼠海马CA1区神经元超微结构的改变。结果:①模型组与假手术组相比认知能力明显下降(P0.01),喜得镇组、参芎化瘀胶囊组与模型组相比认知能力明显改善(P0.05,P0.01)。②模型组海马CA1区神经元大量固缩,染色质凝集,异染色质边集,线粒体肿胀。喜得镇组海马CA1区神经元有少量染色质凝集,线粒体肿胀。参芎化瘀胶囊组海马CA1区多数神经元细胞核染色质分布比较均匀,胞质内线粒体及其他细胞器基本正常。结论:参芎化瘀胶囊可改善血管性痴呆模型海马CA1区损伤的超微结构,对神经元有保护作用,从而改善血管性痴呆大鼠的认知能力。     

电针井穴对血管性痴呆大鼠海马CA1区ERK表达的影响

目的研究电针井穴(中冲、涌泉)对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力及海马CA1区细胞外调节蛋白激酶(ERK)表达的影响。方法采用4-VO法制备VD大鼠模型。随机分为假手术组、模型组、药物组、电针组,每组各8只,通过跳台试验检测各组大鼠的学习记忆能力,采用免疫组化的方法观察各组大鼠海马CA1区ERK表达的变化。结果模型组大鼠学习记忆能力低于假手术组(P0.01),电针组与药物组学习记忆能力明显优于模型组(P0.01),但不及假手术组(P0.05),电针组和药物组无差异(P0.05);ERK的表达模型组显著低于假手术组(P0.01)结论电针井穴可能通过增加VD大鼠海马CA1区ERK的表达,保护海马神经元,改善大鼠学习记忆能力。     

夏天无胶囊对血管性痴呆模型大鼠学习记忆的影响及机制初探

目的:观察夏天无胶囊对血管性痴呆模型大鼠神经行为学的影响及对其大脑海马区神经元的保护作用,并探讨可能的作用机制。方法:取清洁级2月龄健康雄性SD大鼠,随机分为假手术对照组、模型对照组、脑复康0.3 g/kg组及夏天无胶囊0.2 g/kg、0.4 g/kg、0.8 g/kg组。采用改良双侧颈总动脉结扎(2-VO)法建立血管性痴呆模型,连续灌胃30 d,Morris水迷宫检测大鼠学习和记忆能力,HE染色、尼氏染色观察神经元形态及数量变化,TUNEL进行神经元凋亡检测,免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、转化因子-β(TGF-β)蛋白的表达变化。结果:较假手术对照组,模型对照组平均逃避潜伏期明显增长(P0.05或P0.01),目标象限停留时间及穿越平台次数显著减少(P0.01),海马CA1区锥体细胞排列散乱,均呈不同程度损伤,凋亡明显。GFAP阳性神经元数目显著增多(P0.01),TGF-β蛋白表达显著增强(P0.01)。较模型对照组,各给药组学习记忆能力显著提高,锥体细胞排列较整齐,损伤减少,凋亡率明显降低(P0.05或P0.01),GFAP阳性神经元数量显著减少(P0.01),显著上调脑内TGF-β蛋白阳性表达水平(P0.01)。结论:夏天无胶囊可改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力,其机制可能与其抑制星形胶质细胞过度活化,上调TGF-β蛋白表达,从而增强对神经细胞的保护作用有关。     

祛风通窍方可通过改善血管性痴呆大鼠海马区神经元细胞改善记忆力

目的:观察"祛风通窍方"对血管性痴呆大鼠海马及额叶皮层神经元细胞变化的影响及作用机制。方法:用Morris水迷宫筛选符合要求SD大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、阳性组、祛风通窍方高、中、低剂量组每组各10只。手术组采用2-VO法制备模型,造模1月后,阳性组予尼莫地平6.25 mg/(kg·d)灌胃,祛风通窍方高、中、低剂量组分别给予祛风通窍方26.8 g/(kg·d)、13.4 g/(kg·d)、6.7 g/(kg·d)灌胃,假手术组、模型组予等体积蒸馏水灌胃,连续30 d。心脏灌注内固定,取脑组织,观察各组大鼠海马CA1区锥体细胞及额叶皮层神经元线粒体的变化。结果:光镜下海马CA1区锥体细胞变化:与假手术组比较,模型组锥体细胞丢失明显,细胞1~2层,排列散乱;界限不清,大量细胞变形,核固缩碎裂、呈深蓝色、胞浆浓缩;与模型组比较,尼莫地平组及高、中剂量组锥体细胞层次、排列、形态得到了明显改善。电镜观察额叶皮层神经元线粒体变化:与假手术组比较,模型组线粒体明显水肿破裂,线粒体嵴结构不清晰,线粒体部分固缩;与模型组比较,尼莫地平组,祛风通窍方高、中剂量组线粒体受损情况得到了明显改善。结论:"祛风通窍方"可明显改善血管性痴呆大鼠海马CA1区锥体细胞形态及额叶皮层神经元线粒体的超微结构。     

复智胶囊对血管性痴呆大鼠脑组织海马区神经细胞凋亡的影响

目的 观察复智胶囊对血管性痴呆大鼠脑组织海马区神经细胞凋亡的影响,探讨复智胶囊治疗血管性痴呆的疗效和机制.方法 60只SPF大鼠随机分为假手术组、模型组、复智胶囊组、安理申组,每组15只,采用双侧颈总动脉结扎的方法制备血管性痴呆大鼠模型.灌胃4周后进行行为学实验和采用TUNEL染色海马神经元进行细胞凋亡观测.结果 ①行为学实验显示,模型组大鼠学习成绩与记忆成绩下降,各治疗组大鼠的学习成绩与记忆成绩均有提高(P<0.05或P<0.01).②病理形态学显示,复智胶囊组及安理申组均使神经细胞凋亡个数明显减少,复智胶囊组减少更为明显.结论 复智胶囊对血管性痴呆大鼠有明显治疗作用,其作用机理之一是抑制脑神经细胞凋亡,缓解兴奋性毒性损伤,保护大脑神经细胞.     

夏天无对血管性痴呆模型大鼠神经行为学及海马CA1区MVD、VEGF蛋白表达的影响

目的:观察夏天无对血管性痴呆模型大鼠学习记忆及海马CA1区MVD、VEGF蛋白表达的影响。方法:大鼠随机分为假手术组、模型组及夏天无组。血管性痴呆模型建立后连续给药30d。免疫组织化学法检测微血管密度及VEGF蛋白表达的变化。结果:夏天无组较模型组自第3天起平均逃避潜伏期缩短(P 0.05),后2天其平均逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数明显增加(P 0.01);夏天无组海马CA1区血管数量有所增加,VEGF阳性细胞数量有所增加(P 0.05)。结论:夏天无对血管性痴呆学习记忆障碍有一定改善作用,其机制可能是通过增强VEGF表达,一方面对海马CA1区神经元直接起保护作用,另一方面诱导缺血区侧枝新血管形成,改善血液循环,对神经元起间接保护作用。     

姜黄素对血管性痴呆模型大鼠海马神经元凋亡和蛋白表达的影响

目的：观察姜黄素对血管性痴呆（VD）模型大鼠海马CA1区神经元凋亡和Bcl-2及Bax蛋白表达的影响,探讨姜黄素抗脑缺血损伤改善VD的作用机制。方法：取SD大鼠,采用不同时间点分别结扎左、右颈总动脉建立VD模型,将建模成功大鼠随机分为姜黄素组、模型组和假手术组,每组10只,灌胃给予相应药物,1次/d,连续给药4w后,用TUNEL法检测各组海马神经元凋亡,用免疫组织化学法检测其Bcl-2及Bax蛋白表达情况。结果：模型组大鼠海马可见大量凋亡神经元;模型组Bcl-2及Bax蛋白表达明显增加,与假手术组比较差异均有显著意义;而姜黄素组大鼠凋亡神经元和Bcl-2及Bax蛋白表达有明显改善。结论：姜黄素可通过减少海马神经元凋亡,影响Bcl-2及Bax蛋白表达来改善VD模型大鼠学习记忆能力。     

脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠海马CA1区NOS、AchE活性的影响

目的探讨脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠智能障碍的改善效果及作用机理。方法根据Olsson方法,采用永久性阻断双侧颈总动脉复制VaD大鼠模型,随机分为模型组、喜德镇组及脑力苏胶囊大、中、小剂量组,并加假手术组(每组10只),共用药21d。采用酶组化、免疫组化方法对海马CA1区NOS、AchE酶活性及nNOS阳性神经元进行观测。结果大剂量脑力苏胶囊、喜德镇治疗后大鼠海马CA1区NOS酶活性降低,AchE酶活性增加,nNOS阳性神经细胞减少。结论脑力苏胶囊可以改善脑缺血状态,保护脑缺血性损伤,抑制nNOS活性,调节中枢神经系统兴奋性与抑制性的平衡,提高神经细胞对缺氧的耐受性,改善学习记忆能力。     

三七总皂苷伍用淫羊藿苷改善血管性痴呆大鼠空间学习记忆及抗脂质过氧化研究

目的:研究三七总皂苷(PNS)伍用淫羊藿苷(ICA)对血管性痴呆大鼠学习记忆、血液流变学及脑组织脂质过氧化的影响。方法:SD大鼠给药组各10只,阳性药组10只,采用反复夹闭双侧颈总动脉(CCA)再灌注同时腹腔注射硝普钠方法建立血管性痴呆大鼠模型,连续给药21天后,用跳台法判断给药前后大鼠的空间学习和记忆能力,再进行血液流变学和脑组织SOD、MDA的测定。结果 :与假手术组大鼠相比,模型大鼠跳台学习和记忆错误次数明显增加(P<0.05),大鼠造模前后连续口服三七总皂苷伍用淫羊藿苷2.5+20、5+40、10+80 mg/kg各剂量组21d后,大鼠上述行为学指标得到明显改善(P<0.05),全血粘度得到明显改善(P<0.05),脑组织SOD活性提高(P<0.05)和MDA含量降低(P<0.01)。结论:三七总皂苷伍用淫羊藿苷对血管性痴呆大鼠空间学习和记忆障碍有显著的预防和治疗作用,可能与通过改善血管性痴呆大鼠大脑血液供应和自由基代谢有关,从而起到保护大脑的作用。     

参芎化瘀胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马CA1区NF-κB p65表达的影响

目的 探讨参芎化瘀胶囊对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马CA1区NF-κBp65表达的影响.方法 40只SD大鼠随机分为4组:正常组、假手术组、模型组和参芎化瘀胶囊组.采用反复夹闭双侧颈总动脉、同时腹腔注射硝普钠制备血管性痴呆大鼠模型.应用Morris水迷宫检测VD大鼠学习、记忆能力,免疫组化法检测NF-κBp65表达.结果 ①与正常组、假手术组比较,模型组海马CA1区NF-κB p65阳性细胞[(26.67±5.71)个/高倍视野]明显增多(P均＜0.01);②与模型组比较,参芎化瘀胶囊治疗组NF-κB p65阳性细胞[(12.83±6.62)个/高倍视野]减少(P＜0.01).结论 参芎化瘀胶囊可能通过减少VD大鼠脑内NF-κB p65的表达发挥脑保护作用,改善VD大鼠的学习、记忆能力.     

人参-知母-赤芍提取物对血管性痴呆大鼠海马神经元的保护作用及机制

目的:观察人参-知母-赤芍提取物对血管性痴呆大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)的影响,探讨其保护海马神经元的作用机制。方法:60只SPF级雄性SD大鼠,随机分为正常组,假手术组,模型组,人参-知母-赤芍提取物组(0. 20 g·kg-1)和美金刚组(2. 1 mg·kg-1),每组12只。采用双侧颈总动脉反复夹闭合并腹腔注射硝普钠的方法建立血管性痴呆大鼠模型,造模后,正常组,假手术组,模型组给予同等体积生理盐水,每日1次,连续14 d。采用Morris水迷宫评价各组大鼠学习记忆能力;苏木素-伊红(HE)染色观察海马CA1区病理改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马神经元胞膜NMDAR1的蛋白表达水平;免疫组化法(IHC)检测海马NMDAR1的表达情况;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测海马组织中NMDAR1 mRNA的表达水平。结果:与正常组和假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期显著延长(P 0. 01),在平台所在象限停留时间及穿越平台的次数显著减少(P 0. 01),海马CA1区神经细胞层次减少,排列紊乱、出现核固缩、神经元丢失,NMDAR1蛋白及mRNA表达显著升高(P 0. 01);与模型组比较,人参-知母-赤芍提取物组,美金刚组逃避潜伏期明显缩短(P 0. 05,P 0. 01),在平台所在象限停留时间及穿越平台的次数明显增加(P 0. 05,P 0. 01),海马CA1区神经元数目与形态有明显改善,海马神经元NMDAR1蛋白及NMDAR1 mRNA表达明显降低(P 0. 05)。结论:人参-知母-赤芍提取物能够改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力,减轻海马CA1区神经元的损伤,其机制可能与下调海马神经元NMDAR1的表达有关。     

软脉灵口服液对拟血管性痴呆大鼠学习记忆和海马CA1区神经元凋亡的影响

目的观察软脉灵口服液对实验性血管性痴呆（VaD）大鼠空间学习记忆能力和海马CA1区神经元凋亡的影响。方法选用永久性结扎双侧颈总动脉（2VO）制作VaD模型，用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力，HE染色观察大鼠海马CA1区的形态学变化，TUNEI．染色观察大鼠海马CA1区的神经元凋亡情况。结果与模型组比较，软脉灵高剂量组逃避潜伏期缩短（P〈0．001）、1min穿越原平台所在位置次数增加（P〈0．001）；软脉灵高剂量组与低剂量组大鼠海马CA1区的凋亡细胞比模型组减少（P〈0．01）；与软脉灵低剂量组比较．高剂量组大鼠海马CA1区的凋亡细胞更少（P〈0．01）。结论软脉灵口服液能改善拟VaD尢鼠的空间学习记忆能力，减少拟VaD大鼠海马CA1区的凋亡细胞。这些作用呈一定的量效关系。     

复智胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马神经元突触传递长时程增强的影响

目的:观察复智胶囊对血管性痴呆大鼠海马神经元突触传递长时程增强(long-term potentiation,LTP)的影响。方法:SPF级雄性SD大鼠采用双侧颈总动脉永久结扎法(2-VO)制备血管性痴呆大鼠模型。选取造模成功的大鼠,随机分为模型组、多奈哌齐(0.52×10-3g·kg-1·d-1,ig)组、复智胶囊高、低剂量(6.30,3.15 g·kg-1·d-1,ig)组。并设假手术对照组。连续ig 4周后,采用Morris水迷宫检测实验大鼠的学习记忆能力,同时采用LTP诱导法检测大鼠海马齿状回高频刺激诱发的群峰电位(population spike,PS)幅值变化,采用免疫组化检测海马N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)免疫阳性细胞的表达。结果:与假手术组相比,造模术后的大鼠学习记忆能力均有下降,逃避潜伏期和游泳路程明显延长,撤除平台后跨越原平台次数明显减少,高频电刺激后海马神经元齿状回PS增幅明显下降,海马NMDA免疫阳性细胞数明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05);而与模型组相比,复智胶囊高、低剂量组和多奈哌齐组大鼠学习记忆能力均有改善,逃避潜伏期和游泳路程均有缩短,跨越原平台次数明显增多,海马神经元齿状回PS增幅明显升高,海马NMDA免疫阳性细胞数明显增多,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:复智胶囊通过增加海马NMDA阳性细胞表达,提高海马神经元齿状回PS增幅,改善大鼠学习记忆能力,对血管性痴呆模型大鼠海马神经元突触传递长时程增强有明显的改善作用。     

益智饮对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马神经元保护作用的实验研究

目的 :观察中药自拟方益智饮对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力及海马神经元超微结构的影响。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、益智饮组、吡拉西坦组,采用大鼠双侧颈总动脉反复夹闭并再通,同时腹腔注射硝普钠降低血压的方法复制VD模型。用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;电子显微镜观察VD大鼠海马神经元超微结构的变化。结果 :益智饮能明显缩短VD大鼠平台逃避潜伏期,增加VD大鼠平台穿越次数;减轻VD大鼠海马神经元损伤。结论:益智饮能改善VD模型大鼠的学习记忆能力,保护海马神经元。