癌痛消胶囊调节小鼠荷H22移植性肝癌细胞VEGF表达的实验研究

目的 :通过观察癌痛消胶囊对小鼠荷H22 移植性肝癌细胞血管内皮细胞生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的调节作用 ,探讨该药抑制肿瘤的作用是否与抑制肿瘤血管生成有关。方法 :于昆明种雄性小鼠前肢右腋皮下接种0 2mlH22 肿瘤细胞悬液(浓度为1×107/ml)进行造模。利用造模动物观察瘤块重量 ,计算肿瘤生长抑制率 ,用免疫组化法检测瘤细胞中VEGF的表达程度。结果 :与阴性对照组相比 ,癌痛消胶囊组有明显的抑瘤作用(P<0 05) ,抑瘤率为36 34 % ;病理检测显示 ,造模各组VEGF阳性表达率为100% ,但程度不同 ,癌痛消胶囊组可使肿瘤组织VEGF的表达明显下调 ,与阴性对照组比较 ,差异有显著性意义(P<0 01)。结论 :癌痛消胶囊对小鼠荷H22 移植性肝癌细胞的生长有抑制作用 ,能减少血管生成调控基因VEGF的表达。     

灵芪胶囊对H22荷瘤小鼠p53蛋白表达的影响

目的：通过实验探讨灵芪胶囊对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及其抑瘤作用机理。方法：采用体内实验法,制做肿瘤模型,经口灌胃灵芪胶囊11d后,用免疫组化法检测各组凋亡相关基因突变型p53基因的表达。结果：灵芪胶囊明显抑制肿瘤生长,三个剂量组突变型p53基因的表达均小于模型组。结论：灵芪胶囊对H22荷瘤小鼠有明显抑瘤作用,其机制可能与抑制突变型p53基因表达有关。     

癌痛消诱导大鼠移植性肝癌细胞凋亡的实验研究

目的:研究癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌的抑瘤作用以及对肿瘤细胞凋亡的影响,探讨该药抗肝癌作用的机理。方法:采用walker-256瘤株建立SD大鼠的移植性肝癌的模型,分为癌痛消高、中、低剂量组,5-Fu组,蒸馏水组,连续用药14天。停药24h,处死大鼠,取出瘤块,称重,计算抑瘤率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:癌痛消低、中、高治疗组均有抑瘤作用,抑瘤率分别为12.4%、32.4%、45.7%;癌痛消低、中、高剂量组均可诱导肝癌细胞凋亡,与蒸馏水组比较,癌痛消高、中剂量组差异均具有显著性意义;癌痛消高、中剂量组能改善模型大鼠体重变化。癌痛消各剂量组较蒸馏水组和5-FU组,一般情况较好,症状较轻。结论:癌痛消能改善移植性肝癌大鼠的生存质量,抑制大鼠移植性肝癌细胞生长,其作用机制可能与诱导肝癌细胞凋亡有关,其作用强度可能与剂量呈正相关。     

连黛胶囊对胃肠肿瘤p21ras和突变型p53蛋白表达调节作用的临床研究

目的研究连黛胶囊对胃肠肿瘤p21ras和突变型p53蛋白表达的调节作用.方法选择临床中晚期胃肠肿瘤患者45例,随机分为治疗组和对照组,治疗组30例,在对症支持疗法的基础上口服连黛胶囊,对照组15例仅用对症支持疗法,观察治疗前后血清p21ras和突变型p53蛋白含量变化,同时观察生存质量的变化.结果治疗组治疗后血清p21ras和突变型p53蛋白含量显著降低(P＜0.01,P＜0.05),生存质量评分明显提高(P＜0.05).对照组各指标治疗前后差异无显著性意义.结论连黛胶囊具有调节胃肠肿瘤p21ras和突变型p53蛋白表达的作用.     

消癥散对荷H22移植性肝癌细胞小鼠VEGF、Cyclin-D1表达的影响

目的观察消癥散对荷H22移植性肝癌细胞小鼠的抑瘤作用及其机制。方法选择昆明种雄性小白鼠120只,造模成功实体瘤小鼠(60只),腹水瘤小鼠(60只),空白组(10只)。随机将实体瘤小鼠和腹水瘤小鼠分为模型组,消癥散低、中、高剂量组,5-氟脲嘧啶(5-Fu)组,5-Fu+消癥散中剂量组各6组,每组10只。接种H22肝癌细胞24h后按体重给药,每日1次,连续给药10天。实体瘤组小鼠停药24h后,称重并处死动物,剥取瘤块称重,计算肿瘤生长抑制率,采用免疫组化学法检测血管内皮生长因子(VEGF)和细胞周期蛋白D1(Cyclin-D1)表达水平。记录腹水瘤组小鼠生存天数,计算生命延长率。结果消癥散对各组实体瘤小鼠有明显的抑瘤作用,与模型组比较,除消癥散低剂量组外,其余各组差异均有统计学意义(P<0.01);消癥散能够降低瘤组织中VEGF、Cyclin-D1的表达水平,与模型组相比,除消癥散低剂量组外,其余各组差异均有统计学意义(P<0.01);消癥散能够延长腹水瘤小鼠的生存期,与模型组相比,消癥散中剂量组差异有统计学意义(P<0.05),5-Fu组和5-Fu+消癥散中剂量组差异有统计学意义(P<0.01)。结论消癥散对荷H22移植性肝癌细胞小鼠有抑瘤和延长生存期的作用,抑制肿瘤生长的机理可能与下调VEGF、Cyclin-D1的表达水平有关。     

抑癌丸抑制小鼠移植性肿瘤肝癌H22生长及对P53表达影响

目的:探讨抑癌丸对小鼠移植性肿瘤肝癌H22的作用机制.方法:抑癌丸是我国大西北干旱沙漠地区特殊环境下生存的植物中提取的特殊成分,依据中华人民共和国药典规定制成的可贵抑癌药物.主治原发性中晚期肝癌.将带有H22小鼠分成四组给药几天后,根据瘤重计算抑瘤率,用免疫组化SP法计算P53、细胞数.结果:以对照组为基数,大剂量组对小鼠移植性肿瘤H22有较明显抑制率(P<0.05)和程度不同的P53蛋白、细胞数的表达均低于对照组.结论:抑癌丸对小鼠移植性肿瘤肝癌H22的生长具有一定的抑制作用,其机制可能与抑制突变型P53蛋白的表达有关.     

癌痛消颗粒对移植性肝癌模型大鼠肝癌及癌旁组织miRNAs的影响

目的观察癌痛消颗粒对移植性肝癌模型大鼠肝癌及癌旁组织微小核糖核酸（miRNAs）表达的调节作用,探讨癌痛消颗粒抗肝癌作用的机制。方法将60只移植性肝癌模型大鼠随机分为5组,即癌痛消颗粒高、中、低剂量组及5-氟尿嘧啶（5-Fu）对照组、蒸馏水对照组,另设10只大鼠为空白对照组,不进行造模及给药。于造模后第8 d对癌痛消颗粒高、中、低剂量及蒸馏水对照组灌胃给药治疗,连续用药14 d后停药;5-Fu对照组腹腔注射给药治疗,共连续注射5次,各组均停药24 h后处死各组大鼠,取出瘤块,用实时定量PCR（PT-PCR）技术观察肝癌及癌旁组织特定miRNAs中miR-199a-3p、miR-199a-5p、miR-18表达水平。结果癌痛消颗粒高、中、低剂量组及5-Fu对照组、蒸馏水对照组肝癌及癌旁组织miR-199a-3p、miR-199a-5p、miR-18表达水平与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;癌痛消颗粒高、中、低剂量组及5-Fu对照组miR-199a-3p、miR-199a-5p、miR-18表达水平与蒸馏水组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,且癌痛消颗粒高、中剂量组与5-Fu对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,癌痛消颗粒低剂量组与5-Fu对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,癌痛消颗粒中剂量组与高剂量组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论癌痛消颗粒对移植性肝癌模型大鼠的肝癌及癌旁组织miRNAs的表达具有调节作用,其抗癌机制可能与降低miR-18的表达,升高miR-199a-3p、miR-199a-5p的表达有关,且癌痛消颗粒的中剂量组的临床效果最好。     

癌痛消颗粒对移植性肝癌大鼠VEGF-C的影响

目的:观察癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌血管内皮因子C(VEGF-C)表达的影响。方法:将40只大鼠移植性肝癌模型随机分为4组,即癌痛消颗粒高剂量组(A组)、癌痛消颗粒低剂量组(B组)、5-Fu组(C组)、模型组(D组)。于造模后第8天对癌痛消颗粒治疗组灌胃给药,5-Fu组腹腔注射给药,连续用药14天后停药24h,处死大鼠,取出瘤块,用免疫组化法检测瘤块中VEGF-C的表达情况。另设正常对照组(E组)大鼠10只,不进行造模及给药,供实验结束时作空白对照用。结果:造模各组(A、B、C、D组)VEGF-C均高于正常对照组(E组),差异均有统计学意义(均P0.05),其中以D组VEGF-C表达最高。A、B、C组VEGF-C均低于D组,差异均有统计学意义(均P0.05)。A组VEGF-C低于B组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌VEGF-C的表达有干预作用,且以高剂量组作用更为明显。     

养正消积胶囊对胃癌组织PCNA, p53蛋白,VEGF表达的影响

目的:探讨养正消积胶囊对胃癌组织增殖细胞核抗原(PCNA),p53蛋白,血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:治疗组运用养正消积胶囊联合化疗,对照组单纯化疗,用药6个月,治疗前后均以免疫组化S-P法进行PCNA,p53蛋白,VEGF的检测。结果:两组PCNA,p53,VEGF的表达均明显降低(P<0.01),治疗后治疗组PCNA,p53,VEGF分别为(33.16±12.6)%,(41.35±11.4)%,(42.16±13.61)%,对照组PCNA,p53,VEGF分别为(63.20±15.3)%,(59.15±11.9)%,(63.19±12.47)%,两组相比有统计学差异(P<0.01),治疗组改善优于对照组。结论:养正消积胶囊能明显抑制PCNA,p53蛋白,VEGF表达,进一步阻止逆转胃黏膜上皮的恶性表型,起到抗癌作用。     

连黛胶囊对胃肠肿瘤p21~(ras)和突变型p53蛋白表达调节作用的临床研究

目的 :研究连黛胶囊对胃肠肿瘤 p2 1ras和突变型 p5 3蛋白表达的调节作用。 方法 :选择临床中晚期胃肠肿瘤患者 4 5例 ,随机分为治疗组和对照组 ,治疗组 30例 ,在对症支持疗法的基础上口服连黛胶囊 ,对照组 15例仅用对症支持疗法 ,观察治疗前后血清 p2 1ras和突变型 p5 3蛋白含量变化 ,同时观察生存质量的变化。结果 :治疗组治疗后血清p2 1ras和突变型 p5 3蛋白含量显著降低 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,生存质量评分明显提高 (P <0 0 5 )。对照组各指标治疗前后差异无显著性意义。结论 :连黛胶囊具有调节胃肠肿瘤p2 1ras和突变型p5 3蛋白表达的作用。     

大黄(庶虫)虫丸对荷瘤小鼠免疫作用的研究

目的:探讨大黄虫丸对荷瘤小鼠的免疫作用。方法:选择移植性肝癌H22小鼠为模型,观察大黄虫丸的抑瘤作用并检测免疫指标。结果:大黄虫丸对荷瘤小鼠肿瘤无明显的抑制作用,与对照组相比实验组小鼠的NK细胞杀伤活性及T细胞分泌IL-4的能力均显著增高(P<0.005,P<0.001)。结论:大黄虫丸能增强荷瘤小鼠体内NK细胞的杀伤功能及体液免疫功能。     

扶正抑瘤颗粒对小鼠H22肿瘤细胞凋亡及p53和Caspase-3基因表达的影响

目的 研究扶正抑瘤颗粒(FYK)对小鼠H22肿瘤细胞生长的抑制作用,及其对细胞凋亡和p53、Caspase-3基因表达的影响。方法 用体内实验观察FYK对H22瘤株的抑瘤率,流式细胞术测定细胞凋亡率和细胞周期,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定野生型p53(Wtp53)和Caspase-3的mRNA表达情况。结果 12g／kg、24g／kg FYK均能显著抑制小鼠H22肿瘤细胞的生长,最高抑瘤率为51．24％(P<0．01)。流式细胞术检测表明,FYK显著提高H22肿瘤细胞的凋亡率,最高为15．84％(P<0．01);肿瘤细胞阻滞在G0／G1期,S期细胞比率降低;RT-PCR实验表明,FYK可显著上调p53和Caspase-3 mRNA的表达水平。结论 FYK能显著抑制小鼠H22肿瘤细胞生长,其抗肿瘤机制与诱导细胞凋亡,调控细胞周期,促进Wt p53与Caspase-3基因的表达有关。     

参芪化瘀方对H22肝癌细胞p53基因表达的影响

目的：观察参芪化瘀方对荷瘤小鼠肿瘤组织p53基因表达的影响,探讨参芪化瘀方对H22肝癌细胞作用的机制。方法：将H22肝癌荷瘤小鼠60只随机分为6组各10只：参芪化瘀方高剂量组、中剂量组、低剂量组,环磷酰胺注射用粉针剂（CTX）对照组,模型组,阴性对照组。参芪化瘀方高、中、低剂量组予以0．4mL中药（浓度分别为4．16g／mL、2．08g／mL、1．04g／mL）灌胃,CTX对照组予以0．2mL[小鼠给药剂量为20mg／（kg·d）]腹腔注射,模型组予以0．4mL生理盐水灌胃,每天1次,给药14天。免疫组织化学法检测肿瘤组织p53基因的表达,并观察其对脾脏指数、胸腺指数及肿瘤抑制率。结果：高、中、低剂量参芪化瘀方都能降低H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤组织中p53基因的表达水平,且能升高小鼠的脾脏指数、胸腺指数。结论：参芪化瘀方对H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤组织中p53基因的表达具有一定抑制作用,且能保护小鼠的免疫器官。     

鲜壁虎冻干粉抑制H22肿瘤血管生成机理的实验研究

目的 探讨鲜壁虎冻干粉对H22肝细胞癌血管生成的机制。方法 建立移植瘤小鼠H22肝细胞癌模型。将30只小鼠随机分为顺铂治疗组、壁虎治疗组以及对照组,分别给予顺铂腹腔注射（1mg/g）,口服鲜壁虎冻干粉（1．2g/kg）及口服等量生理盐水。给药20次后,用肿瘤组织称重法评价抗肿瘤活性,用TUNEL方法检测细胞凋亡率。采用Weidner方法检测肿瘤组织的微血管密度,S-P免疫组化法检测血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞因子（bFGF）的蛋白表达。结果 鲜壁虎冻干粉可抑制H22小鼠肿瘤生长及诱导肿瘤细胞凋亡,并可降低肿瘤组织VEGF、bFGF蛋白的表达,使肿瘤组织内微血管密度下降。结论 鲜壁虎冻干粉可抑制H22小鼠肿瘤生长及血管生成,其机制可能与下调VEGF、bFGF蛋白的表达有关。     

从PI3K/Akt/p53通路探讨藤茶总黄酮抗肝癌的作用机制

目的:研究藤茶总黄酮(TF)对肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用,预测其作用机制可能与调控细胞凋亡肌醇磷脂-3-激酶/蛋白激酶B/p53(PI3K/Akt/p53)通路的相关因子有关。方法:建立BEL-7404肝癌裸鼠移植瘤模型,实验分为模型组,5-氟尿嘧啶(5-FU,1.0 g·L~(-1))组及TF高、中、低质量浓度(30,15,7.5 g·L~(-1))组,给药干预2周后处死裸鼠,剥离出瘤组织,根据瘤重和瘤体积计算抑瘤率(IR)及相对肿瘤增殖率(T/C);采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PI3K/Akt/p53中相关基因胞内PI3K,Akt1,p53,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达;采用免疫组化检测相关蛋白PI3K,Akt1,p53,Caspase-3,Bcl-2,Bax蛋白的表达。结果:TF高、中、低质量浓度组IR分别为53.26%,35.94%,26.74%,T/C分别为59.74%,69.66%,84.82%;逆转录聚合本科链式反应(RT-PCR)表明,与模型组比较,TF 30 g·L~(-1)能明显下调PI3K,Akt1,Bcl-2 mRNA表达,显著上调抑癌基因p53,Capsase-3,Bax mRNA表达;免疫组化表明,与模型组比较,TF 30,15 g·L~(-1)均明显下调PI3K,Akt1,Bcl-2蛋白的表达,显著上调p53,Capsase-3,Bax蛋白的表达。结论:TF有明显的体内抗肝癌活性,其机制可能与上调p53,Caspase-3的表达,激活细胞凋亡PI3K/Akt/p53通路,从而抑制Bcl-2,提高Bax的表达,促进肝癌细胞凋亡有关。     

扶正消癥方（含药血清）对H_（22）肝癌荷瘤小鼠IL-8及VEGF的影响

目的：研究扶正消癥方（含药血清）对H22肝癌荷瘤小鼠血清中IL-8和VEGF的影响及对肿瘤生长、增殖的抑制作用。方法：采用肿瘤双植入模型技术制作H22荷瘤小鼠模型及中药含药血清的制备。40只6周龄昆明种小鼠随机均分为4组：正常组,模型组,顺铂组,扶正消癥方组（含药血清）。造模成功后连续3d把已制备好的含药血清分别注入对应组小鼠的右侧接种肿瘤,共给药3次。观测21d,第21天处死小鼠收集血清,检测血清中IL-8和VEGF的含量。结果：与正常组比较,模型组小鼠血清中IL-8和VEGF表达水平明显升高（P〈0.01）,扶正消癥方（含药血清）组及顺铂组可降低小鼠血清中IL-8和VEGF表达水平。与模型组相比,顺铂组和扶正消癥方（含药血清）组均可降低小鼠血清中IL-8和VEGF表达水平,顺铂组（P〈0.01）,扶正消癥方（含药血清）组（P〈0.05）。结论：扶正消癥方（含药血清）对H22荷瘤小鼠具有提高免疫作用,降低血清中IL-8和VEGF的表达水平,具有进一步研究的价值。     

益脑康对动脉粥样硬化性急性脑缺血大鼠血清NO、VEGF及PDGF-BB含量的影响

目的:观察中药益脑康胶囊对动脉粥样硬化(AS)基础上急性脑缺血(ACI)SD大鼠血清一氧化氮(NO)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍化生长因子-BB(PDGF-BB)含量的影响,以探讨益脑康胶囊防治缺血性中风的可能机制。方法:将体质量(180±20)g SD雄性大鼠随机分为A、B、C、D、E、F(即正常对照组、益脑康预防组、AS模型组、AS+ACI模型组、益脑康治疗组和立普妥治疗组)6组,采用腹腔注射VD3+高脂喂养复制AS模型,内皮素-1在大脑中动脉附近注射法复制ACI模型。B组在造模同时给予益脑康灌胃治疗,其余各组大鼠在模型成功后分别予0.9%氯化钠溶液、益脑康和立普妥灌胃治疗1周,在治疗前后分别测定血清NO、VEGF、PDGF-BB的含量。结果:B组、F组大鼠血清NO含量较D组明显增高(P0.01,P0.05)。B组、E组、F组与D组比较,血清VEGF、PDGF-BB水平均明显下降(P0.01,P0.05)。结论:益脑康胶囊可通过提高血清NO含量,降低VEGF、PDGF-BB含量发挥防治动脉粥样硬化性急性缺血中风的作用。