肾络通对梗阻性肾病模型大鼠Ang11ACE表达的影响

目的：观察肾络通对梗阻性肾病模型大鼠的影响,为临床应用肾络通提供实验依据。方法：健康雌性sD大鼠40只,随机分为假手术组（SHAM）、模型组（UUO）、缬沙坦治疗组（UUOV）、肾络通治疗组（UUOS）,每组10只。观察各组动物病理形态改变;检测Angll、ACE的表达。结果：肾络通可减轻大鼠肾脏病理形态学的改变;降低AngⅡ、ACE的表达。结论：肾络通可有效减缓肾脏病理损伤,保护肾功能。     

通肾络胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏细胞外基质成分及代谢的影响

目的观察中药通肾络胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠模型肾脏细胞外基质（ECM）成分及代谢的影响,探讨通肾络胶囊对DN大鼠肾脏保护作用机制。方法采用单侧肾脏切除并腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法复制DN大鼠模型,分为假手术、模型、缬沙坦、糖适平及通肾络胶囊组,每组10只。动态检测各组大鼠空腹血糖（FBG）、24h尿微量白蛋白（24hmAlb）,末次给药后测定大鼠血浆糖化血红蛋白（HbAle）、透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构改变,应用免疫组化技术及图像采集分析系统测定各组大鼠肾脏组织中Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、纤维连接蛋白（FN）、层粘连蛋白（LN）的表达,测定影响ECM代谢的基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）及转化生长因子81（TGF-81）的表达。结果通肾络胶囊可降低DN大鼠FBG、HbAlc、24hmAlb的水平（P〈0．05或P〈0．01）,减轻肾小球基底膜增厚程度,减少ECM成分,降低TGF-B1、TIMP-2的表达,升高MMP-2的表达（P〈0．05或P〈0．01）。结论通肾络胶囊可能通过减少ECM成分表达、调节ECM代谢,从而发挥对DN大鼠肾脏的保护作用。     

肾络通煎剂对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化的影响

目的探讨肾络通煎剂对梗阻性肾病大鼠血清醛固酮、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein 1,MCP-1）、α平滑肌激动蛋白（α-smooth muscle protein,α-SMA）、核因子κB（nuclear factor-κB,NF-κB）表达的影响,探讨肾络通煎剂改善肾间质纤维化的初步机制。方法将48只健康Wistar大鼠随机分为假手术组（12只）、造模组（36只）。先采用单侧输尿管结扎（unilateral ureteral obstruction,UUO）手术复制肾间质纤维化模型,再将造模成功大鼠随机分为模型组、西药组和中药组,每组12只。西药组（依普利酮）按照100 mg/（kg·d）剂量加入饲料中,中药组按照26 g/（kg·d）的剂量入水瓶饮用,假手术组和模型组给予等量生理盐水饮用,每天1次。给药10天后摘取梗阻侧肾脏,观察肾脏病理形态学,检测血清醛固酮、MCP-1含量,肾组织MCP-1、α-SMA、NF-κB mRNA或蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠肾组织中大量炎性细胞浸润,胶原沉积显著增加,血清醛固酮及MCP-1含量显著升高（P〈0.01）,MCP-1核酸和蛋白表达水平明显上调（P〈0.01）,α-SMA及NF-κB蛋白表达水平明显升高（P〈0.01）。与模型组比较,西药组及中药组炎性细胞浸润及胶原沉积均减轻,血清MCP-1含量降低,MCP-1 mRNA及蛋白表达水平降低（P〈0.01）,α-SMA及NF-κB蛋白表达水平明显降低（P〈0.01）,同时,中药组血清醛固酮含量减少（P〈0.01）。结论梗阻性肾病模型鼠肾组织炎症损伤可促进肾间质纤维化。肾络通煎剂可通过减少血清醛固酮及MCP-1含量,下调肾组织MCP-1、NF-κB表达,抑制α-SMA表达,减轻肾间质纤维化。     

肾络通对阿霉素肾病大鼠细胞表型转化的影响

目的:肾络通对阿霉素诱导的肾病大鼠细胞表型转化的影响.方法:单侧肾切除加重复阿霉素尾静脉注射制作肾病模型,以α-SMA、FN、LN等为观察指标,采用免疫组化、病理图像分析和流式细胞检测等方法,进行阳性表达细胞定位和半定量及蛋白表达定量分析.结果:阿霉素肾病模型组大鼠肾小管间质有α-SMA明显表达,阳性细胞率和蛋白表达定量分析明显高于假手术组,且伴有FN、LN在肾小管间质和肾小球的大量沉积,肾络通组各项指标较模型组为低.结论:肾络通能抑制肾小管上皮细胞表型转化,减少FN、LN等细胞外基质的沉积.     

络通对不同病程糖尿病大鼠视网膜微血管细胞凋亡的影响

目的:探讨络通对不同病程糖尿病大鼠视网膜微血管细胞凋亡的影响。方法:采用链脲佐菌素65mg/kg经大鼠腹腔一次性注射制备糖尿病模型。成模糖尿病大鼠随机分成模型组、成模后即开始络通干预6个月组(络通干预组)和成模6个月后开始络通治疗3、6个月组(络通治疗1、2组)。分别按期摘取眼球,制备视网膜消化铺片微血管标本,PAS染色及核苷酸末端转移酶介导dUTP缺口翻译法(TUNEL法)特异性标记凋亡细胞,光镜下观察。结果:与同期模型组比较,络通干预组视网膜毛细血管周细胞凋亡现象不明显;络通治疗1组周细胞凋亡比较常见,少数内皮细胞出现凋亡;络通治疗2组治疗6个月内皮细胞凋亡较治疗3个月时有所增多,但明显轻于12个月模型对照组。结论:络通对糖尿病大鼠视网膜微血管病变早中期的周细胞凋亡有较好的抑制作用。     

通肾络胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏蛋白激酶C通路及细胞外基质成分的影响

目的：观察中药通肾络胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠模型肾脏葡萄糖转运蛋白-1（GLUT-1）、蛋白激酶C（PKC）、细胞外基质（ECM）表达的影响,探讨通肾络胶囊对DN大鼠肾脏保护作用的可能机制。方法：采用单侧肾脏切除并腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法复制DN大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、缬沙坦组、糖适平组、通肾络胶囊组。动态检测各组大鼠空腹血糖（FBG）、24h尿微量白蛋白（24h mALB）,末次给药后测定大鼠血浆糖化血红蛋白（HblAc）、透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构改变,应用流式细胞仪技术测定各组大鼠肾脏组织GLUT-1的表达,应用免疫组化技术及图像采集分析系统测定各组大鼠肾脏组织中PKC、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、纤维连接蛋白（FN）、层粘连蛋白（LN）的表达。结果：通肾络胶囊可降低DN大鼠FBG、HblAc、24h mALB（P〈0.05或P〈0.01）的水平,减轻肾小球基底膜（GBM）增厚程度,降低GLUT-1的表达,降低PKC的表达（P〈0.01,P〈0.05）,减少ECM成分的表达（P〈0.05或P〈0.01）。结论：通肾络胶囊可能通过降低GLUT-1的表达,抑制PKC通路激活,减少ECM成分的表达从而发挥对DN大鼠肾脏的保护作用。     

肾络通对梗阻性肾病大鼠炎性介质及血清糖皮质激素诱导蛋白激酶1表达的影响

目的探讨肾络通拮抗肾间质纤维化的可能机制。方法将48只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、依普利酮组和肾络通组,每组12只。除假手术组外,其余各组大鼠结扎左侧输尿管造成梗阻性肾病大鼠模型,依普利酮组每天灌胃依普利酮100mg/kg,肾络通组每天灌胃肾络通26g/kg,治疗10天,假手术组及模型组灌胃等体积生理盐水。观察各组大鼠肾脏组织形态学改变,检测血清醛固酮、肿瘤坏死因子(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白介素-1β(IL-1β)、血清糖皮质激素诱导蛋白激酶1(SGK-1)及其mRNA表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠肾脏胶原沉积显著增加,大量炎性细胞浸润;血清醛固酮、TNF-α、iNOS、IL-1β含量显著升高(P0.05或P0.01);SGK-1 mRNA及蛋白表达明显增强(P0.01)。与模型组比较,肾络通组、依普利酮组胶原沉积及炎性细胞浸润均减轻,血清TNF-α、iNOS、IL-1β含量明显减少(P0.05或P0.01),SGK-1 mRNA及蛋白水平明显下调(P0.01);肾络通组血清醛固酮含量亦减少(P0.01)。结论肾络通能减缓梗阻性肾病模型大鼠肾间质纤维化进程,其可能机制为通过阻断SGK-1信号通路抑制醛固酮活性,从而减轻炎症损伤及炎性介质的表达。     

肾白宁对大鼠糖尿病肾病模型细胞凋亡及对Bax,Bcl-2的影响

目的：观察肾白宁对大鼠糖尿病肾病模型细胞凋亡及对Bax,Bcl-2的影响,并探讨其作用机理。方法：大鼠腹腔麻醉下进行左侧肾脏切除术,术后2w按照50mg·kg-1剂量,予以STZ腹腔注射;72h后,尾静脉取血,测定空腹血糖。将空腹血糖≥16.7mmol·L-1者随机分为模型组,中药肾白宁组,洛汀新对照组,每组15只,另取15只为假手术组。采用原位末端标记法检测细胞凋亡,Bax,Bcl-2检测采用免疫组化的方法。结果：12w后光镜下可见模型组肾小球毛细血管球萎缩,球囊腔略增大,肾小球出入球小动脉有轻度内皮细胞增生及纤维化,基底膜略增厚,远曲小管扩张,肾间质充血,水肿,血细胞浸润,并有轻度间质纤维化。模型组,中药组,对照组细胞凋亡阳性表达较假手术组高,有显著性差异（P〈0.01）;中药组,对照组与模型组比较阳性表达低（P〈0.01）;中药组与对照组无明显差异（P〉0.05）。肾小球中Bax,Bcl-2表达各组几乎为阴性,肾小管中Bax,Bcl-2表达假手术组显著低于其他三组（P〈0.01）;中药组,对照组与模型组比较Bax阳性表达低（P〈0.01）;而Bcl-2表达高（P〈0.01）;中药组与对照组比较无明显差异（P〉0.05）。结论：肾白宁通过抑制Bax表达,上调Bcl-2表达而起到了抑制肾组织细胞凋亡的作用,保护了肾功能,延缓了DN的进展。     

通肾络胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏葡萄糖转运蛋白-1、转化生长因子及细胞外基质成分的影响

目的:探讨通肾络胶囊对DN大鼠肾脏保护作用的机制。方法:采用单侧肾脏切除并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制DN大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、缬沙坦组、糖适平组、通肾络胶囊组。动态检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、24h尿微量白蛋白(24hmALB),末次给药后测定大鼠血浆糖化血红蛋白(HblAc)、透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构改变,应用流式细胞仪技术测定各组大鼠肾脏组织葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)的表达,应用免疫组化技术及图像采集分析系统测定各组大鼠肾脏组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)及转化生长因子βⅡ型受体(TβRⅡ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)的表达。结果:通肾络胶囊可降低DN大鼠FBG、HblAc、24hmALB(P<0.05或P<0.01)的水平,减轻肾小球基底膜(GBM)增厚程度,降低GLUT-1的表达,降低TGF-β1、TβRⅡ的表达(P<0.05或P<0.01),减少细胞外基质ECM成分的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:通肾络胶囊可能通过降低GLUT-1、TGF-β1和TβRⅡ的表达,直接和间接地减少了ECM成分的表达从而发挥对DN大鼠肾脏的保护作用。     

通肾络胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏蛋白激酶C通路及细胞外基质成分的影响

目的:观察中药通肾络胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾脏葡萄糖转运蛋白-l(GLUT-l)、蛋白激酶C(PKC)、细胞外基质(ECM)表达的影响,探讨通肾络胶囊对DN大鼠肾脏保护作用的可能机制。方法:采用单侧肾脏切除并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制DN大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、缬沙坦组、糖适平组、通肾络胶囊组。动态检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、24h尿微量白蛋白(24h mALB),末次给药后测定大鼠血浆糖化血红蛋白(Hb lAc)、透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构改变,应用流式细胞仪技术测定各组大鼠肾脏组织GLUT-l的表达,应用免疫组化技术及图像采集分析系统测定各组大鼠肾脏组织中PKC、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)的表达。结果:通肾络胶囊可降低DN大鼠FBG、Hb lAc、24h mALB(P<0.05或P<0.01)的水平,减轻肾小球基底膜(GBM)增厚程度,降低GLUT-l的表达,降低PKC的表达(P<0.01,P<0.05),减少ECM成分的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:通肾络胶囊可能通过降低GLUT-1的表达,抑制PKC通路激活,减少ECM成分的表达从而发挥对DN大鼠肾脏的保护作用。     

论肾络的系统性及肾病从络论治原则

以经络学说为指导,结合现代解剖学,从中医学整体观角度出发,论述肾络的系统性及层次结构。从整体辨证与肾脏本身辨病相结合,阐明。肾络瘀阻与周身血瘀脉阻的关系,提出从络论治肾脏病的临床治疗原则。     

肾络通对阿霉素肾病大鼠肾小管间质增殖细胞核抗原表达的影响

目的:观察中药肾络通对单侧肾切除加重复阿霉素注射所诱导的肾小管间质纤维化大鼠增殖细胞核抗原(PCNA)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响.方法:实验动物分为病理模型组、中药治疗组、西药治疗组和假手术组,采用生化、放免、免疫组化、病理图像分析等方法,检测肾功能、肾小管间质PCNA、TGF-β1的蛋白表达.结果:中药肾络通组24h尿蛋白定量、血肌酐、尿β2-MG、尿NAG明显低于病理模型组,部分优于西药组.结论:肾络通可能是通过抑制PCNA和TGF-β1表达,保护肾功能,延缓肾小管间质纤维化的进展.     

安心颗粒对心衰大鼠氧化应激和心肌细胞凋亡的影响

目的:观察安心颗粒对慢性心力衰竭模型大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平及心肌细胞凋亡的影响。方法:将50只雌性SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、卡托普利组(C组)、安心颗粒低剂量组(D组)、安心颗粒高剂量组(E组),每组10只。采用阿霉素ip造模,每周1次,连续6周。造模同时,C～E组分别按6.25 mg.kg-1.d-1,0.8,1.6 g.kg-1.d-1剂量ig给药。造模结束后,分别测定各组血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,左室重量指数(LVMI)及心肌细胞凋亡指数(AI)。结果:模型组血清MDA水平、LVMI及AI均显著性升高(P<0.01),血清SOD活性显著下降(P<0.01);安心颗粒低、高剂量组均可显著性降低模型大鼠血清MDA水平、LVMI及AI(P<0.05或P<0.01),提高血清SOD活性(P<0.01)。结论:安心颗粒可通过调控氧化应激、抑制心肌细胞凋亡,延缓心肌重构,防治心力衰竭。     

壮通饮干预糖尿病肾病大鼠氧化应激机制的实验研究

目的:观察壮通饮对糖尿病肾病(DN)大鼠氧化应激的影响。方法:采用左肾切除合STZ腹腔注射方法复制DN模型,随机分成空白对照组,假手术组,模型组,西药组,壮通饮低、中、高剂量组7组。按壮通饮用药剂量为27.2,13.6,6.8 g·kg-1·d-1灌胃给药,以卡托普利(1 g·kg-1·d-1)作为阳性对照。6周干预期后,分别检测各组相关指标:124 h尿蛋白量、血糖(BG)、尿素氮(BUN)、内生肌酐清除率(Ccr)。2血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:与空白组、假手术组相比较,模型组、西药组和壮通饮低、中、高剂量组24 h尿蛋白量、BG、BUN、Ccr升高(P0.05),血清SOD、CAT、GSH降低,MDA升高(P0.05);壮通饮各剂量组与模型组相比较,上述指标均显著改善(P0.05);与西药组比较均无显著性差异(P0.05)。结论:壮通饮对DN大鼠有降低血糖、改善肾功能、抗氧化的作用。     

毒损肾络与糖尿病肾病

糖尿病肾病(DN)是导致肾功能衰竭的重要病因之一,其病理变化和预后可归属于中医之"消渴""虚劳""水肿"等范畴。该文从"毒损肾络"理论出发,探讨糖尿病肾病的发病机制,以期为糖尿病肾病的临床治疗提供理论依据。     

毒损肾络是糖尿病肾病的病理基础

随着人们生活水平的提高和饮食结构的改变，糖尿病患病率的增加，糖尿病三大并发症之一的糖尿病肾病的发病率也正在升高，为了更加合理的分析其病因病机，根据临床常见症状，从毒、络病论糖尿病肾病的发生、发展，并且更加完善毒损肾络理论。同时结合现代医学研究，探索直观化、量化的依据来丰富中医理论的临床指导作用。尽可能早的控制血糖以防止更多的蛋白糖基化转变为AGEs，并阻止或减少ECM过多沉积对防治糖尿病肾小球硬化有重要意义。     

络病学说在糖尿病肾病中的运用

糖尿病肾病的主要病机为肾络瘀阻,故可从肾络辨证治疗,依据"络以通为用"的原则,确立化瘀通络为主,扶正祛邪并用的治疗方法,以期达到气血调和、肾络通畅的目的,恢复肾络正常的渗灌濡养、津血互换、营养代谢的功能.     

肾络通对大鼠系膜细胞外基质分泌及转化生长因子β1表达的影响

目的: 探讨肾络通药物血清对大鼠系膜细胞外基质不同成分的抑制作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)表达的调节作用.方法:以体外培养大鼠肾小球系膜细胞及血清药理学方法为基础,采用酶联免疫吸附试验检测细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的含量;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA的表达.结果:细胞外基质FN,ColⅣ的含量与TGF-β1 mRNA的表达呈正相关关系,肾络通对二者均有抑制作用.结论:肾络通能够减少细胞外基质的积聚,抑制TGF-β1的分泌与表达,从而进一步明确了其防治多种肾小球疾病,延缓肾小球硬化的作用机制.     

肾络通对大鼠系膜细胞外基质分泌及转化生长因子β1表达的影响

目的:探讨肾络通药物血清对大鼠系膜细胞外基质(ECM)不同成分的抑制作用及对转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的调节作用.方法:以体外培养大鼠肾小球系膜细胞(MCs)及血清药理学方法为基础,采用酶联免疫吸附试验(ELAIS)检测细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的含量;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA的表达.结果:细胞外基质FN、ColⅣ的含量与TGF-β1 mRNA的表达呈正相关关系,肾络通对二者均有抑制作用.结论:肾络通能够减少细胞外基质的积聚,抑制TGF-β1的分泌与表达,从而进一步明确其防治多种肾小球疾病,延缓肾小球硬化的作用机制.